高三生物基础实验(人教版(下))：实验4 低温诱导染色体加倍 含解析

高中生物实验：低温诱导染色体加倍方法步骤：洋葱长出约1cm左右的不定根时，放入冰箱的低温室内(4℃)，诱导培养36h。

剪取诱导处理的根尖约0.5~1cm，放入卡诺氏液中浸泡0.5~1 h，以固定细胞的形态，然后用体积分数为95%的酒精冲洗2次。

制作装片：解离→漂洗→染色→制片(过程同观察细胞的有丝分裂的制片方法一样)观察，比较:视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目发生改变的细胞.讨论：秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，这两种方法在原理上有什么相似之处?脱色剂“探究叶绿体在光照下合成淀粉实验”中，将处理过的天竺葵叶片放入盛有酒精的小烧杯里，隔水加热，使叶片褪色(破坏和溶解叶片中所含的色素).这样就可在滴加碘液后，避免对观察叶片颜色变化的干扰。

漂洗剂酒精是良好的有机漂洗剂.“脂肪的鉴定实验”中，用苏丹Ⅲ染液对脂肪组织进行染色后，可用体积分数为50%的酒精来冲洗浮色，以免干扰对细胞内脂肪颗粒的观察。

提取剂和层析剂绿叶中色素的提取和分离实验”中，可以用纯酒精作为提取色素的试剂和层析剂.在“DNA的粗提取与鉴定实验”中，采用酒精沉淀法，利用DNA不溶于酒精，而蛋白质、脂肪及磷脂等能溶解其中，可以进一步提出含杂质较少的DNA丝状物。

固定剂在“观察植物细胞有丝分裂实验”中，一般采用质量分数为15%的盐酸和体积分数为95%的酒精按体积比1：1混合而成的药液作为解离试剂。

盐酸能够使洋葱细胞的细胞壁软化，并使细胞间的中胶层物质溶解，从而达到分离细胞的目的。

酒精的作用是固定蛋白质，使细胞的原生质凝固，不发生变化，固定细胞的分裂相，以尽可能保持原来的结构供观察。

酒精也可与其它试剂混合成复合固定剂，如“低温诱导染色体加倍”中的卡诺固定液就是由无水酒精3份：冰醋酸1份配制而成，适用于一般植物组织和细胞的固定，常用于根尖、花药压片及子房石蜡切片等。

消毒剂所有的70％的酒精都是消毒剂。

70％～75％浓度杀菌作用最强，此浓度的酒精与细菌的渗透压近似，在细菌表面蛋白未变性前能不断地向菌体内部渗入，使细菌所有蛋白脱水、变性凝固，最终杀死细菌，以达到消毒杀菌的目的。

一、实验目的1. 了解低温诱导植物染色体加倍实验的原理和方法。

2. 观察低温诱导植物染色体加倍实验的现象，加深对细胞分裂和染色体加倍过程的理解。

3. 学会运用实验方法，提高实验操作技能。

二、实验原理低温诱导染色体加倍实验是通过低温处理植物分生组织细胞，抑制纺锤体的形成，使染色体不能被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，从而引起植物细胞染色体数目加倍。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：洋葱根尖、卡诺氏液、解离液、改良苯酚品红染液、清水、冰箱、显微镜等。

2. 实验仪器：载玻片、盖玻片、镊子、剪刀、滴管、酒精灯、显微镜等。

四、实验步骤1. 洋葱根尖的培养：选取若干个度过休眠期、底盘较大的洋葱进行生根。

剥去洋葱外层老皮，用刀削去老根（从底盘中央向四周削），注意不要削掉四周的根芽；将洋葱放在广口瓶上，瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。

把这个装置放在温暖的地方培养，每天换水1-2次。

2. 低温诱导：待洋葱长出约1cm长的不定根时，将整个装置放入冰箱冷藏室内（4℃）诱导培养36小时。

3. 染色：取出洋葱根尖，放入卡诺氏液中固定，然后放入解离液中解离。

将解离后的洋葱根尖放入改良苯酚品红染液中染色。

4. 制片：将染色后的洋葱根尖滴在载玻片上，盖上盖玻片，用镊子轻轻压扁，制成临时装片。

5. 观察：在显微镜下观察洋葱根尖细胞染色体数目变化，记录结果。

五、实验结果与分析1. 观察到洋葱根尖细胞染色体数目在低温诱导后明显增多，部分细胞染色体数目为原来的两倍。

2. 低温诱导后，部分细胞仍处于有丝分裂前期，染色体数目未发生变化；部分细胞染色体数目加倍，处于有丝分裂后期。

3. 低温诱导实验结果表明，低温处理能够抑制纺锤体的形成，导致染色体不能被拉向两极，细胞也不能分裂成两个子细胞，从而引起植物细胞染色体数目加倍。

六、实验结论通过低温诱导实验，观察到洋葱根尖细胞染色体数目在低温诱导后明显增多，部分细胞染色体数目为原来的两倍。

低温诱导染色体数目加倍的实验流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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低温诱导植物染色体数目的变化1．实验原理用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制细胞分裂时纺锤体的形成，使染色体不能被拉向两极，以致细胞不能分裂成两个子细胞，染色体的数目发生变化。

提示着丝点分裂与纺锤体无关，没有纺锤体的牵引，着丝点也能正常分裂。

2．实验步骤与现象（1）(2)现象：视野中既有正常的二倍体细胞，也有染色体数目发生改变的细胞。

3．注意事项(1)在显微镜下观察到的细胞已经死亡，不能持续观察到细胞中染色体的数目变化。

(2)选材只能是分生区细胞，不能进行细胞分裂的细胞不会出现染色体数目的变化。

4．低温诱导植物染色体数目变化的实验中的试剂及其作用5．低温诱导染色体数目变化的实验与观察细胞有丝分裂实验的比较考点一：实验的基本原理和操作步骤例1．用质量分数为2%的秋水仙素处理植物分生组织5～6 h，能够诱导细胞内染色体加倍。

某生物小组为了探究用一定时间的低温(如 4 ℃)处理水培的洋葱根尖是否也能诱导细胞内染色体加倍进行了相关实验设计。

下列关于该实验的叙述中，错误的是()A．本实验的假设是用一定时间的低温处理水培的洋葱根尖能够诱导细胞内染色体加倍B．本实验可以在显微镜下观察和比较经过不同处理后根尖细胞内的染色体数目C．本实验需要制作根尖细胞的临时装片，制作步骤是解离→漂洗→染色→制片D．本实验可以看到一个细胞完整的染色体数目加倍的过程例2．将洋葱(2n＝16)放在装满清水的广口瓶上，让洋葱底部接触水面。

待洋葱长出约1 cm左右的不定根时，再将整个装置放入4 ℃环境下继续培养36 h，然后取根尖制作成临时装片在显微镜下观察。

下列与此相关的叙述中，正确的是()A．卡诺氏液的作用是使洋葱根尖的组织细胞相互分离开来B．显微镜视野中可以观察到16、32或64条染色体的细胞C．显微镜视野中可以观察到四分体和同源染色体分离现象D．4 ℃的低温通过抑制着丝点的分裂而使细胞染色体数目加倍考点二实验的拓展和应用例1．以下材料选自某同学所做实验的部分记录。

低温诱导染色体加倍实验步骤1. 引言：为何低温诱导？说到低温诱导染色体加倍，很多人可能会觉得这听起来有点高深莫测，但其实它就像是在为植物“施魔法”。

咱们知道，植物的生长和繁殖都跟它的基因有很大关系，而染色体就是基因的载体。

简单来说，染色体越多，潜力越大，这就好比给你的小店铺增加了更多的货品，生意自然也会火爆！那么，怎样利用低温来让这些染色体加倍呢？下面就来聊聊具体的实验步骤。

2. 实验准备2.1 材料准备首先，我们得准备好一些必需的材料。

没错，实验就像做菜，得有好食材。

你需要选择一个生长迅速的植物，比如洋葱或豌豆。

它们的染色体结构比较清晰，很适合我们这个实验。

接着，还要准备一些低温环境设备，比如冰箱或冷藏箱。

最后，别忘了显微镜，这可是观察染色体的“秘密武器”哦。

2.2 工具与设备此外，别小看实验工具。

我们需要一些基本的实验器材，比如试管、培养皿，还有一些化学试剂，比如秋水仙碱。

这种药物能帮助抑制细胞分裂，保持细胞在特定阶段，从而便于我们观察到染色体的加倍状态。

再加上实验手套和防护眼镜，安全第一，毕竟咱们要是做了实验出点意外，那可真是得不偿失了！3. 实验步骤3.1 低温处理接下来，正式进入实验环节。

首先，把你选好的植物根尖剪下来，别担心，这并不会对植物造成大伤害。

然后，把这些根尖放在冰箱里，通常需要冷藏24小时。

低温环境就像给植物一个小休息，调调它的状态。

你可以想象，植物在冰箱里缩着小身子，心里想着：“我又要变得厉害了！”3.2 染色体观察一天后，拿出根尖，接下来得进行染色处理。

把根尖放入秋水仙碱的溶液中，浸泡大约2到4小时。

这样做的目的是让细胞停留在分裂的某个阶段，方便我们后续观察。

然后，把根尖取出，切成小段，放到显微镜下观察。

此时，你会看到一幅幅美丽的染色体图案，真是让人感叹大自然的神奇！这就像揭开了植物的“秘密”，每一条染色体都在告诉你，它的基因故事。

3.3 记录与分析观察完之后，别忘了做记录。

低温诱导植物染色体数目的变化一、实验目的：1．学习低温诱导植物染色体数目变化的方法2．理解低温诱导植物细胞染色体数目变化的作用机制二、实验原理：进行正常有丝分裂的植物分生组织细胞，在有丝分裂后期,染色体的着丝点分裂,子染色体在纺锤丝的作用下，分别移向两极，最终被平均分配到两个子细胞中去。

用低温处理植物分生组织细胞，能够抑制纺锤体的形成，以致影响染色体被拉向两极，使细胞也不能分裂成两个子细胞.结果，植物细胞染色体数目发生变化。

三、材料用具:洋葱或大葱、蒜均为二倍体，体细胞中染色体数为16,培养皿、滤纸、纱布、烧杯、镊子、剪刀、显微镜，载玻片、盖玻片、冰箱，卡诺氏液，改良苯酚品红染液，体积分数为15％的盐酸溶液，体积分数为95％的酒精溶液四、实验步骤:试剂及用途：（1）卡诺氏液:固定细胞形态.（2）95％酒精：冲洗附着在根尖表面的卡诺氏液。

（3)解离液:(质量分数为15%HCI和体积分数为95%酒精1:1混合）使组织中的细胞分离开（4）清水：洗去解离液，防止解离过度，便于染色。

（5）改良苯酚品红染液：使染色体着色。

五、注意事项:造成看不到染色体数加倍且无仿锤体的细胞原因较多，常见原因有：1）没有培养出分生区或没有剪取到分生区2)低温诱导时间不足3)解离不充分或漂洗不干净造成染色不足4)染色时间控制不当,看不清染色体5）没有低倍镜寻找过程六、实验结论：_________________________________________________________________________如没有观察到染色体加倍，分析可能原因。

七、秋水仙素与低温都能诱导染色体数目加倍，两者在原理上有什么相似之处？八、课后作业导与练课后作业，P116,9九、作业拓展—-—--—实验能力考查例题考试说明要求的实验与探究能力(1）能独立完成“生物知识内容表”所列实验。

包括实验目的、原理、方法和操作步骤，掌握有关的操作技能，并能将这些实验涉及的方法和技能进行综合的运用。

低温诱导植物染色体加倍实验的探究与改进分析论文低温诱导植物染色体加倍实验的探究与改进分析论文随着中学生物实施课程改革，从2009年按开始，内蒙古自治区高中生物教材从以前选用人教版全日制普通高中生物教材改为选用人教版新课程标准实验教科用书。

《高中生物课程标准》。

尊重学生多样化发展的新需求，更贴近实际和生活经验，更重视发展学生的实践能力。

《新课标》中明确指出要倡导探究性学习，要让学生勤于动手。

与过去的教材相比《新课标》中生物实验的比重明显增加，有些实验是以前教材不要求的，低温诱导染色体加倍实验便是其中之一。

实验教学属于必需亲自操作后才能有深刻体会的教学内容，有的实验如果单单照搬教科书上的过程，在实际操作中会遇到许多问题，会对教学效果产生不利影响。

因此，对于《新课标》中涉及的实验内容，实验教师要提前感受为好。

面对中学生物《新课标》实施的现实，大学实验课程教学中要有适当的体现，要使生物教育专业的本科毕业生所获得的实践技能能够贴近《新课标》的要求。

目前，我校生物教育专业的本科实验教学内容中还没有低温诱导染色体加倍实验的项目，为了促进教学改革，为今后实验项目设计提供帮助，特开展了本实验的'研究，以期找到能体现最佳实验效果的方法。

1材料与方法1. 1实验材料实验中分别选择了洋葱、大蒜做为实验材料。

大蒜生根前放入4℃冰箱以打破体眠期，提高出根率。

试验时选取健壮的大蒜瓣，剥去蒜皮，共20枚，每5枚大蒜为一组用细木棍穿起来放入盛有清水的容器中进行室温培养。

水以浸没根部为宜，每两天换一次水，根尖3d长到约lcm长，此时将装置转入4℃的冰箱里进行低温诱导。

洋葱的培养方法为选取健壮洋葱放入盛有清水容器中，水以没过洋葱根部为宜，每两天换一次水，室温培养。

1.2材料处理与方法1.2. 1实验材料的固定固定是借助于物理方法或化学药物的作用，迅速渗入组织和细胞将之杀死，使其形态结构和内含物尽可能地保持生活时的真实状态，本实验用的固定液是卡诺氏液(无水酒精:冰醋酸=3:1)。

低温诱导植物细胞染色体数目加倍一、实验目的1．了解人工诱导植物多倍体的原理、方法及其在植物育种中的作用。

2．应用植物染色体制片技术，鉴别诱导后染色体数目变化。

3．学会探究性实验的设计方法。

二、实验原理通过低温阻碍细胞内酶促反映的进行，从而导致细胞分裂时形成纺锤体所需ATP的供应途径受阻，使细胞分裂过程中完成染色体加倍而细胞不能分裂，达到染色体数目加倍。

从理论上讲，观察染色体数目的最佳时期是分列中期，可当纺锤体的行成受到抑制时，细胞分裂就停止在了前期，不再出现中期、后期，只有当细胞分裂进入到第二周期的中期时，才能确保低温诱导染色体数目变化的成功。

因此，低温处理的时间至少要有一个半周期的时间。

低温抑制了纺锤体的形成，同时也降低了酶的活性，细胞分裂的速度减慢，细胞周期会延长。

三、实验仪器与试剂1.材料：蚕豆2.试剂：秋水仙素3.仪器：超低温冰箱四、实验步骤与方法（1）培养根尖蚕豆种子于 30℃～ 40℃水浴中浸种 3 ～ 4h 后，取出放入带有湿润纱布的培养皿中于10℃培养，每 2d 换一次水。

注意水要浸过蚕豆种子体积的 1/3。

(2)低温诱导处理待实验材料长出约 1cm 左右根时，将实验材料平均分两组: 实验组于2℃的冰箱中进行低温诱导培养 36h 后( 换水时注意用 2℃的水，减小实验的误差) ，于15℃～20℃恢复常温培养 10 ～12h( 即小于实验材料一个细胞周期的时间) 。

对照组于15℃～ 20℃常温进行培养，注意经常换水。

(3)取材、固定、解离、漂洗与染色常规“植物细胞有丝分裂”制片方法［1］。

(4)显微观察与数据统计分析随机观察并统计10 个视野中分裂期和非分裂期细胞，计算分裂指数( mitotic index，MI) 。

细胞分裂指数 = 分裂期细胞数/全部细胞数×100%。

统计数据进行卡方检验。

五、实验记录( 1) 培养根尖蚕豆种子于 30℃～ 40℃水浴中浸种 3 ～ 4h 后，取出放入带有湿润纱布的培养皿中于10℃培养，每 2d 换一次水。