检测耐药基因突变的金标准

绪论单元测试1【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术学科建立在分子生物学学科之前。

A.对B.错2【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术是从分子水平研究解决临床诊断与治疗问题。

A.对B.错3【多选题】(20分)现代临床医学的发展方向：（）A.预测医学B.预防医学C.个体化医学D.中西医结合4【多选题】(20分)下列技术为临床分子生物学检验常用检测技术的是（）A.基因测序B.SouthernblotC.分子杂交D.其余均不对5【判断题】(20分)临床分子生物学检验技术学科发展第一阶段的代表性技术为分子杂交技术。

A.错B.对第一章测试1【单选题】(20分)在人类基因组DNA序列中，DNA甲基化主要发生在（）A.鸟嘌呤的N-7位B.鸟嘌呤的C-5位C.胞嘧啶的C-5位D.胞嘧啶的N-4位E.腺嘌呤的N-6位2【单选题】(20分)下列DNA序列中的胞嘧啶（）易发生甲基化修饰的是。

A.5'-CGCGCG-3'B.5'-GGGGCC-3'C.5'-CCCCCT-3'D.5'-GCACAC-3'E.5'-CTCTCCC-3'3【单选题】(20分)某基因位点正常时表达为精氨酸，突变后为组氨酸，这种突变方式为（）A.移码突变B.动态突变C.无义突变D.同义突变E.错义突变4【单选题】(20分)由于突变使编码密码子形成终止密码，此突变为（）A.无义突变B.移码突变C.终止密码突变D.同义突变E.错义突变5【单选题】(20分)下列叙述哪项是的（）A.原核生物基因组具有操纵子结构B.原核生物结构基因是断裂基因C.原核生物结构基因的转录产物为多顺反子型mRNAD.原核生物基因组中含有插入序列E.原核生物基因组中含有重复顺序第二章测试1【单选题】(20分)DNA链的Tm值主要取决于核酸分子的（）A.T－G含量B.A－G含量C.A－C含量D.A－T含量E.G－C含量2【单选题】(20分)Southern杂交通常是指（）A.DNA和RNA杂交B.DNA和蛋白质杂交C.蛋白质和蛋白质杂交D.RNA和RNA杂交E.DNA和DNA杂交3【单选题】(20分)下列哪些不是影响DNA复性的因素（）A.碱基组成B.DNA浓度C.温度D.DNA的分子量E.DNA的来源4【单选题】(20分)探针基因芯片技术的本质就是（）A.基因重组技术B.蛋白质分子杂交技术C.酶切技术D.聚合酶链反应技术E.核酸分子杂交技术5【单选题】(20分)DNA探针的长度通常为（）A.1000～2000个碱基B.400～500个碱基C.<100个碱基D.500～1000个碱基E.100～400个碱基第三章测试1【单选题】(20分)以mRNA为模板合成cDNA的酶是()A.DNA酶B.逆转录酶C.RNA酶D.限制性内切酶E.TaqDNA聚合酶2【单选题】(20分)有关PCR的描述下列不正确的是（）A.引物决定了扩增的特异性B.由变性、退火、延伸组成一个循环C.循环次数越多产物量就越大，可增加循环次数提高产物量D.是一种酶促反应E.扩增的对象是DNA序列3【单选题】(20分)下列关于TaqDNA聚合酶的描述，的是（）A.扩增的DNA片段越长，碱基错配率越低B.催化形成3´,5´-磷酸二酯键C.不具有3´5´外切酶活性D.使DNA链沿5´→3´方向延伸E.以dNTPs为原料4【单选题】(20分)PCR反应过程中，退火温度通常比引物的Tm值（）A.低15℃B.高5℃C.低5℃D.相等E.高15℃5【单选题】(20分)PCR反应中延伸的时间取决于（）A.待扩增片段的长度B.模板的含量C.模板的纯度D.TaqDNA聚合酶的量E.引物长度第四章测试1【单选题】(20分)关于TaqMan探针技术的描述，不正确的是（）A.解决了荧光染料技术非特异的缺点B.R基团与Q基团相距较远，淬灭不彻底，本底较高C.易受到TaqDNA聚合酶5′-3′核酸外切酶活性的影响D.无需进行寡核苷酸熔解曲线分析，减少了实验时间E.操作亦比较简单2【单选题】(20分)以下为比较Ct法的相对定量的描述，不正确的是（）。

大学分子生物学考试练习题及答案31.[单选题]在哺乳动物线粒体中,参与组成核糖体小亚基的RNA是()A)5S rRNAB)12S rRNAC)16S rRNAD)18S rRNA答案:B解析:2.[单选题]关于质粒，正确的是A)为细菌生命活动所必需B)可在细菌间转移或自行消失C)细菌的耐药性与F质粒有关D)为双股未闭合的DNA答案:B解析:3.[单选题]若大肠杆菌生长在没有乳糖的培养基中,则 ( )A)参与乳糖分解代谢的二种酶都只有很少量的表达。

B)参与乳糖分解代谢的三种酶都不表达C)只有β-半乳糖苷酶表达。

D)只有答案:A解析:4.[单选题]核糖体的E位点是（）。

A)真核mRNA加工位点B)tRNA离开原核生物核糖体的位点C)核糖体中受EcoRI限制的位点D)电化学电势驱动转运的位答案:B解析:5.[单选题]通常将含有1个复制起始区的独立复制单位称为( )A)基因B)顺反子C)复制子D)复制叉6.[单选题]与原核细胞基因组相比,真核细胞基因组的编码方式与其不同,主要体现在()A)以单顺反子的形式进行转录B)以多顺反子的形式转录C)存在大量的重复序列D)结构基因所占比例较小答案:A解析:7.[单选题]NER中专 i ]用来修复DNA复制中产生的错配碱基对的是( )A)碱基切除修复B)重组修复C)错配修复D)SOS修复答案:C解析:8.[单选题]H.ershey等 人在噬菌体实验中用来标记噬菌体外壳的物质是A)35sB)32pC)14ND)2H答案:A解析:9.[单选题]原核生物RNA聚合酶与调节蛋白和增强子/沉默子相互作用的亚基是A)αfactorB)N-terminal of a-subunitC)C-terminat of a-subunitD)ω subunit答案:C解析:10.[单选题]转录的反义链(antisense strand)是指A)是不能转录出RNA的DNA双链中的那条单链B)是转录生成tRNA和rRNA的模板C)DNA单链中同一片段可作为有意义链和反义链D)能转录生成mRNA的模板答案:D解析:A)半衰期短B)存在多顺反子的形式C)5’端有帽子结构D)3’端没有或只有较短的多聚A结构答案:C解析:12.[单选题]下列有关端粒和端粒酶描述错误的是A)端粒是染色体末端短的串联重复序列B)端粒酶是一种引物酶,来维持端粒的长度C)端粒酶在肿瘤细胞和生殖细胞中活性很高D)端粒每复制一次,缩短一次,所以端粒和衰老有一定的关系答案:B解析:13.[单选题]有关原核生物结构基因的转录,叙述正确的是 ()A)产物多为多顺反子RNAB)产物多为单顺反子RNAC)不连续转录D)逆转录答案:A解析:14.[单选题]外显子可（ ）A)促进DNA复制B)启动基因转录C)调节基因转录D)编码蛋白质答案:D解析:真核生物的基因为断裂基因，即外显子被内含子隔开，外显子即编码序列，内含子则在转录后加工过程中被切除。

基因突变检测方法
基因突变检测主要有三种检测方法，即FISH检测、Ventana-D5F3 IHC检测和NGS检测。

基因突变检测方法的特点主要体现在以下几方面：
1、FISH：也称为荧光原位杂交技术，其检测的特异性和敏感性都比较高，也是ALK融合基因检测的金标准，因为FISH检测的技术要求比较高，所以也存在有自身问题，如在检测过程中，如果标本固定时间较长、烤片温度较高、变异性温度差异、蛋白消化不当等，就会引起荧光信号的减弱，或者没有信号，容易出现基因突变的假阴性或假阳性；
2、IHC：是一种免疫组化的检测方法，此方法操作比较简单、检测比较快速、经济成本较低，灵敏度较高。

因为对标本需求量较低、IHC检测高灵敏度、高特异性等优点，ALK检测共识中已经推荐优先应用；
3、NGS：也称为二代测序、高通量测序技术，这项检测在ALK基因检测中的地位越来越高，NGS检测能区分ALK突变的所有亚型以及ALK基因本身可能存在的点突变，在临床上可以指导医生后续用药，但是检测费用较贵，临床上主要推荐用于ALK靶向药物耐药的患者检测。

淋球菌耐药检测方法金标准概述说明以及解释1. 引言1.1 概述淋球菌（Neisseria gonorrhoeae）是一种常见的性传播疾病病原体，全球范围内都存在广泛传播。

然而，近年来淋球菌感染的耐药问题日益严重，已成为公共卫生领域面临的严重挑战之一。

因此，有效、准确地检测淋球菌耐药性以及对其治疗方案进行个体化调整变得极为重要。

本文将就淋球菌耐药检测方法金标准进行概述，并详细说明及解释该金标准的应用和意义。

1.2 文章结构本文分为五个部分：引言、淋球菌耐药检测方法金标准概述、淋球菌耐药检测方法金标准说明、淋球菌耐药检测方法金标准解释以及结论。

以下将依次介绍每个部分内容。

1.3 目的本文旨在对淋球菌耐药检测方法的金标准进行概述、说明和解释，进一步加深对该领域的理解与认识。

同时，通过全面了解淋球菌耐药问题背景、现有检测方法以及金标准的应用，促进淋球菌耐药性的科学研究和临床实践，为未来的研究和应用提供借鉴和指导。

2. 淋球菌耐药检测方法金标准概述2.1 淋球菌耐药问题背景淋球菌是一种通过性接触传播且引起生殖系统感染的细菌，被认为是全球最常见的细菌性性病之一。

然而，在过去的几十年里，对于淋球菌抗药性的报告和研究逐渐增加，表明淋球菌感染出现抗药性严重的趋势，给治疗带来了巨大挑战。

2.2 现有淋球菌耐药检测方法目前常用的淋球菌耐药检测方法包括传统培养法、分子生物学方法和基于PCR 技术的检测方法等。

然而，这些方法在可靠性、效率和灵敏度方面存在着局限，并且不能提供具体的耐药信息。

因此，寻找一个可靠、快速并且有效评估淋球菌耐药性的金标准成为了迫切需求。

2.3 金标准的重要性和定义金标准是指在特定领域或问题中被普遍接受并视为最可靠和准确的参考标准或方法。

在淋球菌耐药检测中，金标准应该能够准确、可靠地确定淋球菌是否对特定药物具有耐药性，并提供详细的耐药信息。

金标准的制定将有助于统一淋球菌耐药检测方法，促进不同实验室和研究机构之间的结果比较和交流。

等位基因特异性PCR法快速检测结核分枝杆菌常见耐药突变基因彭婉婵;刘文恩;谭耀驹;胡可;蔡杏珊;胡族琼;李艳冰【摘要】目的建立一套同步检测结核分枝杆菌(MTB)常见耐药突变基因的等位基因特异性PCR (AS-PCR)检测体系,以间接判断对利福平(RFP)与异烟肼(INH)的耐药性.方法用AS-PCR技术同步检测58株MTB临床分离株rpoB基因516位、526位和531位,katG基因315位及inhA基因-15位密码子突变,并与DNA测序结果进行比对.结果 AS-PCR法对RFP耐药株检出率为95.1％ (39/41),其中rpoB 基因531位、526位、516位点突变分别检出28株、10株、2株,包括531位与526位联合点突变1株；未检出突变的2株RFP耐药株经测序验证1株未发生突变、1株发生533位点突变；RFP敏感株均未检测到突变.AS-PCR法对INH耐药株检出率为86.5％(45/52),其中katG基因315位点突变43株、inhA基因-15位点突变2株,未检出突变的7株INH耐药株经测序验证未见突变；INH敏感株均未检测到突变.结论等位基因特异性PCR能够快速检测MTB常见突变基因,具有较高的敏感性与特异性,快速经济、操作简便.【期刊名称】《临床检验杂志》【年(卷),期】2013(031)004【总页数】4页(P249-252)【关键词】结核分枝杆菌;rpoB基因;katG基因;inhA基因;等位基因特异性扩增【作者】彭婉婵;刘文恩;谭耀驹;胡可;蔡杏珊;胡族琼;李艳冰【作者单位】中南大学湘雅医院检验科,长沙410008;中南大学湘雅医院检验科,长沙410008;广州市胸科医院检验科,广州510095;中南大学湘雅医院检验科,长沙410008;广州市胸科医院检验科,广州510095;广州市胸科医院检验科,广州510095;中南大学湘雅医院检验科,长沙410008【正文语种】中文【中图分类】R378.91+1;Q503传统药敏试验(绝对浓度法和比例法)是结核分枝杆菌(Mycobacterium tuberculosis, MTB)耐药性检测的金标准，方法成熟可靠，但繁琐、耗时，难以满足临床对耐药结核病诊治的需求。

淋球菌耐药检测方法金标准全文共四篇示例，供读者参考第一篇示例：淋球菌是一种性传播疾病，感染者可能会出现尿道分泌物增多，尿道或阴道痒感、尿痛、排尿困难等症状。

越来越多的淋球菌感染病例被报告，这也引起了人们对淋球菌耐药性的关注。

淋球菌的耐药性意味着治疗可能面临更大的挑战，因此及早做好耐药性检测至关重要。

淋球菌耐药性检测方法的金标准是一个被广泛认可的标准方法，可以帮助医生准确判断感染者的淋球菌对抗生素的耐药情况，从而选择最有效的治疗方案。

以下将介绍一种被认为是淋球菌耐药检测方法金标准的方法。

首先，淋球菌耐药性检测通常会选择使用培养法。

培养法是一种通过将分离的微生物菌株在适宜的培养基上培养并观察其生长情况来判断其对抗生素的敏感性的方法。

对于淋球菌来说，培养法是最常用的检测方法之一，因为淋球菌在人体内的繁殖速度相对较慢，需要在适宜的培养条件下进行培养才能准确检测其对抗生素的耐药情况。

其次，淋球菌耐药性检测方法金标准还包括了分子生物学方法。

分子生物学方法是一种通过检测微生物的基因组来判断其对抗生素的耐药情况的方法。

通过PCR技术可以快速、准确地检测淋球菌的基因组，并判断其对抗生素的耐药性。

分子生物学方法在淋球菌耐药性检测中起到了至关重要的作用，可以帮助医生更快速、更准确地做出治疗决策。

最后，淋球菌耐药性检测方法金标准还需要考虑到药物敏感性测试。

药物敏感性测试是通过将淋球菌菌株与不同抗生素的药物敏感性进行实验观察，以确定淋球菌对抗生素的耐药情况。

不同的淋球菌品系可能对同一种抗生素表现出不同的耐药性，因此药物敏感性测试是淋球菌耐药性检测方法金标准中必不可少的一环。

总的来说，淋球菌耐药性检测方法金标准是一种综合性的检测方法，结合了培养法、分子生物学方法和药物敏感性测试等多种技术手段，可以帮助医生准确判断淋球菌对抗生素的耐药情况，选择最适合的治疗方案。

只有通过这样的金标准检测方法，才能更好地应对淋球菌耐药性的挑战，保障患者的健康。

靶向药物耐药标准靶向药物在肿瘤治疗中发挥着越来越重要的作用，然而耐药性的出现是制约其疗效的关键问题。

为了评估靶向药物的耐药性，我们制定了以下标准，以便及时发现和处理耐药情况。

1.肿瘤体积增大：这是耐药性最直接的评估指标。

若在接受靶向药物治疗后，肿瘤体积逐渐增大，则提示可能出现了耐药性。

2.疾病进展：若在靶向药物治疗过程中，病情出现恶化或新的症状出现，这可能表明肿瘤对药物产生了耐药性。

3.血清肿瘤标志物增加：某些肿瘤标志物（如CEA、AFP等）的血清水平可以反映肿瘤的生长和扩散情况。

若在接受靶向药物治疗后，这些标志物水平升高，可能提示耐药性的出现。

4.新的转移灶出现：在靶向药物治疗期间，若发现新的转移灶，这通常表明肿瘤对药物产生了耐药性。

5.症状恶化：若患者在接受靶向药物治疗后，症状逐渐加重或新症状出现，这也是耐药性的一种表现。

6.基因突变：基因突变可以导致肿瘤细胞对靶向药物敏感性降低或丧失，从而引起耐药性的发生。

7.免疫组织化学染色阳性：某些免疫标志物的表达情况可以反映肿瘤细胞的生物学行为，若在接受靶向药物治疗后，这些标志物表达增加，可能提示耐药性的出现。

8.药物代谢酶增多：肿瘤细胞可以通过增加药物代谢酶的合成来降低药物浓度，从而产生耐药性。

因此，检测药物代谢酶的表达水平也是评估耐药性的一个重要指标。

9.药物摄取减少：肿瘤细胞可以通过降低药物摄取量来降低药物作用效果，从而产生耐药性。

因此，检测药物摄取情况也是评估耐药性的一个重要指标。

10.药物外排增加：肿瘤细胞可以通过增加药物外排量来降低药物在细胞内的浓度，从而产生耐药性。

因此，检测药物外排情况也是评估耐药性的一个重要指标。

在实际临床实践中，这些标准可以根据具体情况进行选择和组合使用，以便全面、准确地评估靶向药物的耐药性。

若出现耐药性，应及时调整治疗方案，采取有效措施来克服耐药性问题，以最大限度地提高患者的生存期和生活质量。

检测耐药基因突变的金标准
检测耐药基因突变的方法可以根据疾病和基因突变的特定情况而有所不同。

以下是一些常见的方法和标准：
1. 基因测序（DNA测序）：通过对患者样本中与耐药相关的基因进行测序，可以检测到具体的基因突变。

这种方法可以准确地确认特定基因的突变，但耗时较长且费用较高。

2. 蛋白质测序（蛋白质质谱分析）：通过测量患者样本中耐药相关蛋白质的水平和结构变化，可以间接地推断是否存在耐药基因突变。

这种方法通常用于确定蛋白质相关的耐药机制。

3. 定量PCR（qPCR）：通过量化耐药相关基因的拷贝数来推断耐药基因突变的存在。

这种方法可以快速、灵敏地检测到基因拷贝数的变化，但无法准确地确定具体的基因突变。

4. 组织培养和药敏试验：通过将患者样本中的微生物培养起来，并测试其对不同抗生素的敏感性，可以确定具体的耐药基因突变。

这种方法通常用于细菌等微生物的耐药检测。