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AKTA层析系统参数1. 介绍AKTA层析系统是一种高效且可靠的分离技术，用于生物分子的层析纯化。
层析系统参数是指在使用AKTA层析系统时需要设定的一系列参数，包括流速、洗脱梯度、柱温等。
正确设置这些参数能够保证分离效果和纯化纯度。
在本文中，我们将详细探讨AKTA层析系统参数的选择和优化，帮助您合理使用该系统并取得最佳的分离效果。
2. 流速参数流速是指液相在层析柱中的通过速率。
流速参数的选择对于分离效果和纯化纯度有很大的影响。
2.1 比线速度比线速度是流速参数的常用表示方法，其定义为单位时间内液相通过层析柱截面积的体积。
一般来说，比线速度越大，分离效果越好，但可能会降低纯化纯度。
建议在初始实验阶段采用较低的比线速度，然后根据样品的性质和分离需求逐步调整。
2.2 线速度线速度是流速参数的另一种表示方法，其定义为单位时间内液相通过层析柱的线性距离。
线速度与比线速度之间存在线性关系，可以相互转换。
3. 洗脱梯度参数洗脱梯度是指在层析过程中逐渐改变洗脱缓冲液的成分，以实现分离目标。
洗脱梯度参数的选择对分离效果和纯化纯度起着至关重要的作用。
3.1 起始缓冲液起始缓冲液是指开始层析时的溶液组成。
一般来说，起始缓冲液的性质应与待纯化物质相似，以提高分离效果。
如果待纯化物质溶解在缓冲液中，可以选择与之相同或类似的缓冲溶液。
3.2 洗脱缓冲液洗脱缓冲液是指在层析过程中使用的溶液，通过改变洗脱缓冲液的成分来实现分离目标。
选择合适的洗脱缓冲液需要考虑待纯化物质的亲和性和纯化纯度要求。
3.3 洗脱梯度洗脱梯度是指在层析过程中逐渐改变洗脱缓冲液的组成。
一般来说，采用线性梯度或者非线性梯度都可以实现分离效果。
线性梯度容易操作，但纯化纯度可能相对较低；非线性梯度可以提高纯化纯度，但操作难度较大。
根据实验要求和待纯化物质的特性选择合适的洗脱梯度。
4. 柱温参数柱温是指在层析过程中控制的柱子温度。
柱温参数的选择对于柱子的稳定性和分离效果有一定影响。
AＫＴA蛋白纯化系统操作ＡKＴA蛋白纯化系统是当前蛋白纯化工作经常用到的一组设备，自动化程度很高。
AKTA系统依据不同的配置，可以分为AKTA EXPLＯREＲ、AKTA PＩLＯT、AKTA PＵRIFIER等多种型号的设备.以下以AKTA ＥＸPLORER 为例简单介绍AＫTＡ蛋白纯化系统的一般操作。
1、认识AＫTA.AKTA explorer 是为方法开拓及研究应用而设计的全自动液相色谱系统。
该色谱系统的分离装置有三个主要组件,在底部平台的左侧整齐堆起(Fig １).它们是:FIG 1、ＡＫTＡＥXＰLORＥR主机•Pump—900 为双通道高效梯度泵系列.在AKTAexpｌorer １00,流速范围０.0１-1０0 mｌ/ｍin,压力高达１0 Mpａ（泵名为Ｐ-901).在AＫTA eｘplｏre10，流速范围0。
０0１-10 ml/min，压力高达２5Mpa（泵名为P—903)。
• Moｎitor ＵＶ—900，同时监控１90－70０ nm 范围内高达 3 个波长的多波长紫外—可见（UV-Vis）监测器。
（针对部分ＡＫTＡPURＩＦＩER机型,尚有UPＣ-900监测器可供选择,光源为汞灯光源,一次可以监控一个波长，安装滤光片后,可以在选择的波长范围内进行切换。
)• Ｍoniｔor pH/C－９00,在线电导和pH 监测的组合监测器。
Ｆｉｇ２、AKTA EXPLORER硬件模式图AKTＡ EXＰLＯREＲ系统的主要组成部件可以用模式图表示（Fig ２)。
组成部件，如混合器、柱及不同的阀安装在右边部分。
打开装阀的门可全部看到。
柱被挂在装阀的门的外侧。
分离装置由ＵNIＣORN 软件控制。
软件安装于一独立的电脑主机之中,在电脑与色谱系统之间的通信由数据采集装置CU9５０进行控制。
２、一般操作2。
1 开机按位于底部平台前左侧的ＯＮ／OＦF 按钮，打开色谱系统,然后打开电脑电源。
待仪器自检完毕(CU950上面的3个指示灯完全点亮并不闪烁)。
