Waters 2414示差检测器中文说明书

WatersHPLC SystemBasic Teaching MaterialFor 2414 Refractive Index Detector 沃特斯高效能液相層析系統-2414折射率偵測器基礎操作指引Content一、儀器介紹與功能說明 (3)1. 儀器外觀 (3)2. 螢幕說明 (3)二、開機方法 (4)三、操作畫面說明 (4)四、溫度設定 (6)五、IEEE 位址( IEEE Address ) 設定 (7)六、液晶螢幕明暗度設定 (8)七、關機方法: (8)一、儀器介紹與功能說明1.儀器外觀2.螢幕說明a.RIU Modeb.410 Mode液晶顯示幕操作面板二、開機方法a.將2414 RI Detector的電源開關打開至ON(1)的位置，機器開始作自我檢查。

b.待儀器自我測試完畢後，即出現以下畫面，此乃表示開機測試正常。

三、操作畫面說明液晶顯示幕四、溫度設定a.按溫度設定鍵。

液晶顯示幕b.進入溫度設定畫面。

c.按<▲>/<▼>至Detector(Det)或Column(Col) 溫度設定位置(Set)。

d.輸入預設定之溫度大小。

e.按<HOME>鍵回復至初始畫面。

五、IEEE 位址( IEEE ADDRESS ) 設定a.按<HOME>鍵回復至初始畫面。

液晶顯示b.按<Shift>及<CONFIGURE>鍵，至系統設定功能。

c.將游標移動至IEEE位址設定位置，輸入適當之位址編號。

( 位址編號不能與其他儀器/設備相同)d.設定完畢後，按<HOME>鍵回復至初始畫面。

六、液晶螢幕明暗度設定a.按<HOME>鍵回復至初始畫面。

液晶顯示b.按<Shift>及<Contrast>鍵，至螢幕明按度設定功能。

c.按<▲>/<▼>調整螢幕適合之明暗度。

2414示差折光检测器技术参数
2414示差折光检测器技术参数包括以下几个方面：
1. 光源：该检测器使用发光二极管作为光源。

2. 折光指数（RI）范围：该检测器的RI范围为 RIU。

3. 测量范围：该检测器的测量范围为5x10-4 RIU～7x10-9 RIU。

4. 流速：该检测器支持的流速为/min。

5. 噪声：在RIU模式下，该检测器的噪声为± RIU（1ml/min水，23-25℃，±2℃/h）；在410模式下，该检测器的噪声为±3x10-9 RIU（1ml/min水，23-25℃，±2℃/h）。

6. 漂移：该检测器的漂移为1x10-7 RIU/hr。

7. 响应时间：该检测器的响应时间为、1、3、10秒。

8. 温度控制：该检测器具有内部温箱，温度控制在30～55℃±℃；同时，
它还具有外部柱加热器，温度可达室温上150℃。

9. 流通池：该检测器的流通池体积为10uL，耐压为100psi。

10. 操作面板：该检测器具有操作面板，可以独立设定工作参数和显示运行
状态。

此外，该检测器还具有可实现内外控温、可与waters色谱泵连用等特点，
以实现凝胶色谱分析测定分子量分布。

以上参数仅供参考，如需更准确的信息，建议咨询专业人士。

液相色谱仪操作规程仪器名称：液相色谱仪Waters2695型（带光电二极管阵列PDA 2998、蒸发光散射ELS 2424检测器）光电二极管阵列一般可用5mg/L来试条件。

第一步：准备工作（1）把水和有机相分别加入各瓶中。

(纯水一周一换，换溶剂时需小心，不要用手触摸管道)。

有机相必须为进口色谱级纯度。

（2）开机顺序：电脑→泵→检测器→工作站1）泵的开启，在2695主机界面上直接操作。

待仪器自检完毕，显示Idle后，选择Menu status进行各项操作：a.仪器长久不用，管路干了，应使用Dry prime功能。

b.每次开机，都要用Wet prime功能，将要用的各个通道冲洗一遍（A为甲醇，C为乙腈，D为纯水），排除气泡。

此过程流动相不通过柱子。

具体操作为：用方向键选择一个通道，比例调成100%，其余通道为0%，在direct function 中选择wet prime，按默认值进行。

冲洗完成后，进行下一个通道的冲洗，直到完成。

仪器使用过程中，如果哪个通道更换或增加了溶剂，都要用Wet prime将此通道冲洗一遍。

c.温度设置：直接将柱温设置成所需温度，一般为30℃。

d.Purge injection：在direct function中选择Purge injection，按默认值进行。

e.Equilibrium：将流量从0调至1mL/min，如果长久不用，不能直接调，而应逐渐将流速调至1mL/min。

将通道比例调成所需比例，注意此过程流动相通过柱子，所以切记不能出现纯水通道100%的情况，纯水比例最大为95%。

在direct function中选择Equilibrium，按默认值进行。

注意：每一步操作都应在仪器显示Idle状态后再进行。

2）检测器的开启绿灯状态为自检；灯为黄色、不闪并听见提示音，为启动完成。

3）工作站的开启Empower登陆：用户名为system，密码为manager窗口左边选择项目，窗口右边选择系统（检测器）。

1Waters 2410Differential Refractometer 中文操作说明书2n d F u n c 键 E n t e r 键一. 键盘说明: % Full Scale 显示检测器之输出讯号电压，单位为微伏特(mV),数字之代 表意义为10mV 之百分比; 例如: 显示0001时,代表讯号电 压为0.1mV, 显示0100为10mV,依此类推.Sens设定检测器之感度，连续按压此键可从1-1024以2的次方数来设定,最灵敏为1024,最不灵敏为1,设定完毕后再按Enter键.Scale Factor设定检测器之感度(Sens)的百分比，此设定只对10mV(Rec)输出端子之传统记录器有作用,对1V(Int)输出端子之积分器或以IEEE-488讯号输出者，并无作用.Enter输入值确认键.Clear 清除错误的输入值.2nd Func转换键盘至第二操作功能.2nd 功能键:Ext 1 ℃显示第一号外接式分离管柱加热装置之温度数值(可设定温度范围为室温至150℃),若出现”245.7”,即表示无连接加热装置Ext 2 ℃显示第二号外接式分离管柱加热装置之温度数值(可设定温度范围为室温至150℃),若出现”245.7”,即表示无连接加热装置Int ℃显示检测器内部侦测槽加热装置之温度数值(可设定温度范围为30℃至150℃).Remote当检测器处于被控制状态(例如以IEEE-488联机),此指示灯会亮起.Set ℃设定所有加热装置之温度数值，建议最少设定值须高于室温5℃,以求稳定.Filter设定时间常数(Time Constant)以改善基在线之噪声,连续按压此键可设定值为0.2 ,1.0 ,3.0 ,10.0 秒.Auto Zero设定检测器讯号自动归零.Mark在层析图谱上作记号，但只对10mV输出之传统记录器有作用, 并不影响积分器或软件计算机之输出信号.+/-改变检测器输出讯号之正负方向,内设在正向之位置.Purge以移动相冲洗参考液槽使与样品液槽之溶剂组成一致，当设定冲洗状态时，屏幕会出现”PgE”字样; 再按一次此键，即解除冲洗状态.23Waters 2410 Refractometer Fluidic Paths二. 操作说明1. 打开电源开关至ON(1)的位置，机器开始作自我检查，注意是否有任何故障讯息出现.2. LED 屏幕上出现之数字意义是代表相对于下方键盘周围红色小灯号所亮起之功能键数值.3. 设定内部侦测槽温控: 按一下2nd Func 键⇒再按3键,屏幕会出现目前之 温度数值; 按一下2nd Func 键⇒再按4键⇒紧接着输入温度数值⇒Enter. 通常此温度数值须设定比室温高5℃(约35℃).4. 设定外接式分离管柱加热装置温控: 按一下2nd Func 键⇒再按1键,屏幕会出现目前之温度数值; 按一下2nd Func 键⇒再按4键⇒紧接着输入温度数值⇒Enter.建议温度: THF (40℃) Toluene (75℃)D M F (85℃) W a t e r (40℃)5. 设定Sens 至4或8之感度，有必要的话再提升感度.6. 按一下% Full Scale 键,使屏幕显示检测器输出讯号电压.7. 等HPLC 或GPC 系统平衡稳定后，按一下2nd Func 键⇒再按9键,以移动相冲洗参考液槽,冲洗约10分钟后，按一下2nd Func 键⇒再按9键,以解除冲洗状态,等待约1至2分钟后,看屏幕讯号数值是否已固定不变; 若讯号数值仍跳动不稳，则继续做Purge.8. 若基线讯号稳定，于注入检体前，按一下2nd Func 键⇒再按6键,使检测器自动归零,再开始进样.9.每次更换移动相后，等HPLC或GPC系统平衡稳定后，请重复7至8步骤,再开始做分析检测.※注意事项:<1>. 建议于做分析检测前，至少有让检测器热机达24小时以上; 因此平常待机时，无须关机，只要降低Pump流速至0.1ml/min,使其继续保持平衡稳定即可.<2>. 当使用水性塩类移动相后，需以超纯水冲洗，再以甲醇冲洗.<3>. RI检测器之样品侦测槽最高耐压值为100psi,请注意流速与出口管路所造成之逆压不得超过此上限值,否则将造成侦测槽破损.<4>. 若此检测器是以IEEE-488联机做计算机控制时，以上之操作条件参数必须在Millennium 32计算机软件操作方法内加以储存设定,才得以作有效之控制.三. 关机方法:1.直接关闭电源开关至OFF(0)的位置即可.2.所有的输入设定值将被保持至下次开机时.4。

部门分发目的：规范Waters2410型高效液相色谱仪操作规程，确保仪器的正常操作和检测结果的可靠性。

范围： Waters2410型型高效液相色谱仪职责人：操作员规程：1 仪器的组成Waters 2410是由输液泵、手动进样器、色谱柱、2410示差检测器、柱温箱和色谱数据处理系统组成。

2 操作前的准备2. 1准备好流动相，换上色谱柱用Peek接头拧紧。

2.3 操作2.3.1 开启电脑，打开HS2000色谱数据工作站（通用版），打开通道B。

2.3.2按打开仪器各部件电源开关（515泵、柱温箱、2410示差检测器）。

2.3.3泵排气2.3.3.1 排液阀逆时针180度，在515泵LCD面板按▼选择到PURGE出现，按【Run/Stop】，开始排气泡，5分钟后自动停止，排液阀顺时针180度拧紧，在LCD面板按▲选择到FLOW。

2.3.4 设置流速按【Edit/Enter】至光标出现在需改动的数字位置上，用“▼”或“▲”键增加或减少数字，流速设定后按【Menu】，存贮设定值2.3.5 设置温度在示差检测器的LCD面板上，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换到温度界面（面板左上角指示灯亮），按【2nd/Func】和【Set℃/4】，然后输入设定温度，按【Enter】确定。

2.3.6 运行按【Run/Sotp】，则泵开始运行, 在示差检测器的LCD面板上，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换P9E（即参比池），运行3h左右，按【2nd/Func】和【Purge/9】切换部门分发温度界面（即流通池），按【Remote/%Full scale】（面板右上角指示灯亮）运行平衡即可进行实验操作。

2.3.7 数据处理点击【文件】选择【打开】选择需要处理的图谱，处理完毕，按【文件】下拉菜单的【打印】，即打印图谱。

2.4 冲洗和关机2.4.1、流动相如果有缓冲盐，先用20%甲醇水冲洗以1mol/min流速冲洗60分钟，然后再用有机溶剂如甲醇或乙睛，用1.0ml/min流速冲洗60分钟，如无缓冲盐则直接用有机溶剂冲洗。

WATERS 2695/2487/2414/2998高效液相色谱仪操作规程1. 目的：为使对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用规范化，特制定本规程。

2. 范围：涉及对WATERS 2695/2487/2414高效液相色谱仪的使用。

3. 职责：QC检验员应严格遵守本规程。

4. 内容：4.1开机4.1.1接通电源，打开电脑主机、显示器的开关，进入Windows画面。

4.1.2 打开Alliance 2695系统的电源，仪器进行自检，“Idle”状态表示开机测试正常。

4.1.3 Wet Prime冲洗：少量气泡，执行Wet Prime。

A利用方向键将光标移至“composition”字段，将欲Wet Prime的溶剂输入100%。

B按“Direct Function”功能键，选择Wet Prime，按“OK”。

C选择流速和冲洗时间，按“OK”。

D重复上述步骤直至所有溶剂做完Wet Prime。

4.1.4 Dry Prime冲洗：大量气泡或者通道走空，执行Dry Prime。

A按“Direct Function”功能键，选择Dry Prime，按Enter。

B利用方向键将光标移至各通道，选择待Dry Prime的通道。

B同时打开阀门，用注射器帮助排液D重复上述步骤直至所有溶剂做完Dry Prime。

4.1.5设定溶剂：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“composition”字段，将所需溶剂输入适当的百分比。

4.1.6设定流速：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Flow”字段，输入所需流速。

4.1.7脱气：在Status(1)画面，利用方向键将光标移至“Degasser”位置，按Enter，利用上下键选择所需要的模式（On:除气装置开启；Off：除气装置关闭）4.1.8置入转盘A打开样品转盘舱门，屏幕会显示A、B、C、D、E五个转盘，按A可取出A盘（每个转盘上可放置24个样品瓶，共计120个）。

凝胶渗透色谱法测定共聚酰胺热熔胶分子质量及其分布以相对分子质量为7 500～122 500的聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）为标准物质，六氟异丙醇（HFIP）为溶剂，分别配制质量分数为0.1%的标准样品，采用凝胶渗透色谱仪，示差检测器，硅胶色谱柱，六氟异丙醇为流动相，流速 1.0 mL/min，柱温25℃的色谱条件对上述标准样品进行逐一分析，获得分子质量-洗脱体积标准工作曲线（LogM-V）；称取适量的共聚酰胺热熔胶样品，用六氟异丙醇溶解至质量分数0.1%的溶液，根据上述色谱条件分析，测定共聚酰胺热熔胶分子质量及其分布，并用光散射法对所得结果进行验证，结果表明该方法可用来测定相对分子质量为10 000～100 000的共聚酰胺热熔胶，所得重均分子质量Mw与光散射法测定值之间的平均误差为1.61%。

标签：凝胶渗透色谱；共聚酰胺；热熔胶；分子质量；分布共聚酰胺热熔胶是一种具有较高综合性能的热熔胶产品，已广泛应用于服装衬布、汽车工业、家具和制鞋等各个领域。

聚合物的分子质量分布与高分子材料的加工特性及材料性能紧密相关，但由于共聚酰胺热熔胶一般不溶解于四氢呋喃、N，N-二甲基甲酰胺、氯仿等溶剂，故很难分析其分子质量及其分布，往往采用黏数[1]去代替，不利于人们对聚合机理的认识，从而影响新产品的研发。

为此，有必要建立一种凝胶渗透色谱法（GPC）测定共聚酰胺热熔胶分子质量及其分布的方法，而其关键在于选择一种合适的物质作为流动相和试样的溶剂。

间甲酚等酚类物质虽能溶解共聚酰胺热熔胶，但由于其气味特殊，黏度高等缺陷，分析时往往要通过升高温度来降低色谱柱的背压，不易操作。

而六氟异丙醇能在室温下溶解共聚酰胺热熔胶，且黏度明显小于酚类物质，在室温条件下即可进行分析。

本文以聚甲基丙烯酸甲酯（PMMA）为标准物质，六氟异丙醇（HFIP）为溶剂，采用凝胶渗透色谱仪，获得分子质量-洗脱体积标准工作曲线（LogM-V），在此基础上建立一种凝胶渗透色谱仪测定共聚酰胺热熔胶分子质量及其分布的方法，并用光散射法对测试结果进行验证。

Waters 1515-2414 凝胶渗透色谱（GPC）操作规程一、溶剂和样品准备1. 选择溶剂：尝试和选择对聚合物具有良好溶解性的THF或者DMF 作为溶剂；2. 溶剂处理：采用溶剂过滤系统（真空抽滤）对色谱纯溶剂进行过滤和脱气处理；3. 样品配制：选用处理后的溶剂配置待测样品溶液，样品体积≥4mL；样品浓度根据估算的分子量确定（Mw＝103～104，浓度为1.5～2mg/mL；Mw＝104～105，浓度为1～1.5mg/mL；Mw＝105～5 x 105，浓度为0.5～1mg/mL；Mw ＝5 x 105～106，浓度为0.1～0.5mg/mL；Mw＞106，浓度为0.05～0.1mg/mL）；4. 样品溶解：提供足够时间使聚合物完全溶解（一般在室温下静止过夜）；注：可轻微摇动样品以促进溶解但不可剧烈摇动；5. 样品过滤：样品溶解后，采用一次性微孔滤膜（孔径0.22μm）对样品溶液进行过滤，保存滤液待用；注意：每个样品需要准备两个样品瓶（分别用于溶解样品和放置过滤后的溶液）和两个注射器（分别用于过滤和进样）二、仪器启动1. 将经过真空抽滤的溶剂倒入溶剂存贮瓶中；2. 依次打开稳压电源－计算机－泵－柱温箱－示差折光检测器开关；3. 启动Breeze软件，输入用户名Breeze；选择1515-2414系统，确定；4. 在Breeze软件系统中点击运行样品－点击流量图标设置泵流速0.2mL/min，注意：设置变化时间为2min，即以0.1mL/min缓慢增加流速，使色谱柱所受压力缓慢变化；5. 在示差折光检测器面板上，点击Temp ºC设置温度40 ºC（set/control）；再点击Home－Shift 1－显示Purge图标；此时示差检测器为Purge流路，冲洗示差检测器的样品池及参比池；点击平衡系统/监视基线图标－调用PS-purge方法－点击平衡/监视器，监控基线；Purge时间为10h；6. 10h后（此时基线已稳定），在运行样品界面点击设置泵流速1mL/min（设置变化时间8min，以0.1mL/min缓慢增加流速），平衡0.5h；7. 在示差折光检测器面板上，点击Shift 1，取消Purge（回到正常测样流路），平衡3～5min；再依次点击Diag－Optimize LED(16~17正常) －Enter－Home；三、样品测试1. 点击Breeze软件系统中的单进样图标－输入待测样品名－选择功能（宽分布进样）－选择方法组PS－输入进样体积（20μL）及样品测试时间（45min）－点击单进样，准备进样；此时窗口显示等待进样；2. 选用1mL注射器，安装色谱专用平头针头，采用过滤后样品溶液润洗进样注射器后，再抽取过滤后的样品溶液；将针口朝上排出气泡（注意针头不要有液珠，否则会污染进样口，必要时用镜头纸擦拭）；将进样阀门拨到Inject位置（即垂直状态），将进样注射器插入进样器内并插到底（不用过于用劲），进样；进样结束后迅速将进样阀门拨到Load位置；此时窗口显示进样正在运行；注意：进样结束后，使用抽滤后的溶剂及时清洗针头；3. 到设定的运行时间后，仪器自动停止数据采集，此时窗口显示单进样结束；20min后，按步骤1和2进下一个样品；注意：实验过程中及时观察溶剂存贮瓶中溶剂量；如需补加，必须在仪器停止数据采集时（最好在泵流速为0时）添加溶剂，且砂滤头必须在液面下。

Breeze2现场培训教材Waters®Breeze 2现场培训教材登录Breeze 21.双击桌面上的Breeze快捷方式，或选择“开始”>“所有程序”>“Breeze 2”>“Breeze 2”。

2.在“登录”对话框中，输入为Breeze 2系统配置的“用户名”，然后单击“确定”。

注意：缺省用户名为Breeze。

图1- Breeze 2登录对话框3.在“选择项目和系统”对话框中，选择所需的项目和色谱系统，然后单击“确定”。

图2-选择项目和系统对话框创建仪器方法和方法组1.单击命令栏里的“查看方法”，然后单击“仪器”。

2.单击“PCM/15xx”泵按钮（或其他泵按钮）。

a.选择“流量”选项卡。

b.根据需要选择泵模式，可选“等度”泵模式和“梯度”泵模式两种，然后根据需要在“设定的流量”表中输入“等度”或“梯度”参数。

图3–泵流量选项卡，设定的流量表注意：流速C栏内不要填写流速，请保持为0.0。

梯度表：请根据实际操作的流动相的比例以及流速设置。

梯度曲线设置请参考下图，如果采用的是线性梯度或无法确定梯度曲线的类型，请选择“6”号梯度曲线。

梯度组成时间3.随后单击“W2489”按钮（其他检测器见后续步骤）。

a.选择“通道A”选项卡。

b.选择“单波长”或“双波长”模式，并输入所需的波长。

注意：在“双波长”模式下，应在“通道A”选项卡中输入第一个波长，并在“通道B”选项卡中输入第二个波长。

c.设置“采样速率”，以便在感兴趣的最小峰上获得大约15至30个数据点。

图4– 2489紫外/可见光检测器通道A选项卡d.选择“事件”选项卡，并在“事件”表中可选地输入“波长切换”、“自动复零”或“灯关闭”事件。

注意：如果预计检测器的使用时间不会超过12小时，请使用“灯关闭”。

图5– 2489紫外/可见光检测器事件选项卡4.如果安装的是2475荧光检测器，请单击“W2475”按钮。

首先选择“2D”或“3D”模式。