实验7 用生长谱法测定微生物的营养

2022年信阳师范学院生物技术专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、放线菌既可以以______繁殖，也可以以______繁殖，______繁殖是放线菌的主要繁殖方式。

2、病毒的非增殖性感染有______、______和______3种类型。

3、在豆血红蛋白分子中，其蛋白质部分由______所触发，再由______ 的基因进行编码和合成；而血红素部分则由______所触发，再由______ 基因进行编码和合成。

4、化能有机营养型微生物的能源是______，氢供体是______，基本碳源是______，其代表性微生物是______和______等。

5、真菌菌丝具有的功能是______和______。

6、人类对微生物的发现和认识，比对动、植物晚得多，其原因是微生物具有______、______、______和______四个特点。

7、巴氏消毒法的具体方法很多，主要可分为两类，即______和______。

8、微生物生态学是生态学的一个分支，它的研究对象是______与其周围的______和______环境条件间的相互作用规律。

9、艾姆斯试验中用的菌种是______的营养缺陷型______，通过回复突变可以测定待测样品中______的存在。

10、病原菌主要通过______、______和______等的作用在宿主体内繁殖与扩散。

二、判断题11、细菌的鞭毛是通过其顶端生长而非基部生长而伸长的。

（）12、被动扩散是微生物细胞吸收营养物质的主要方式。

（）13、反硝化作用是化能自养微生物以硝酸或亚硝酸盐为电子受体进行的无氧呼吸。

（）14、TMV衣壳是由许多衣壳粒所构成，衣壳粒是以逆时针方向螺旋排列在核心外围的。

（）15、伞菌的担子是一个细胞，而木耳的担子由三个横隔分成四个细胞。

（）16、菌物界是指广义的真菌界，包括黏菌门、假菌门和真菌门（狭义的真菌）3部分。

（）17、可采用高压灭菌对抗体进行灭菌。

（）18、微生物与其他生物之间的关系只有互利或互害的关系。

微生物生长的测定方法作者：刘华来源：《神州·下旬刊》2013年第02期摘要：微生物生长情况可以通过测定单位时间里微生物数量或生物量（biomass）的变化来评价。

通过微生物生长的测定可以客观地评价培养条件、营养物质等对微生物生长的影响，或评价不同的抗菌物质对微生物产生抑制（或杀死）作用的效果，或客观地反映微生物生长的规律。

因此微生物生长的测量在理论上和实践上有着重要的意义。

关键词：微生物测定方法计数法生理指标法微生物生长的测定有计数、重量和生理指标等方法。

1、计数法此法通常用来测定样品中所含细菌、孢子、酵母菌等单细胞微生物的数量。

计数法又分为直接计数和间接计数两类。

⑴直接计数这类方法是利用特定的细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积里样品中微生物的数量。

此法的缺点不能区分死菌与活菌。

计数板是一块特制的载玻片，上面有一个特定的面积l mm2和高0.1mm的计数室，在1mm2的面积里又被刻划成25个（或16个）中格，每个中格进—步划分成16个（或25个）小格，但计数室都是由400个小格组成。

将稀释的样品滴在计数板上，盖上盖玻片，然后在显微镜下计算4-5个中格的细菌数，并求出每个小格所含细菌的平均数，再按下面公式求出每毫升样品所含的细菌数。

每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数×400×l000×稀释倍数⑵间接计数法此法又称活菌计数法，其原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可以通过生长形成菌落。

将待测样品经一系列10倍稀释，然后选择三个稀释度的菌液，分别取0.2ml 故人无菌平皿，再倒人适量的已熔化并冷至45℃左右的培养基，与菌液混匀，冷却、待凝固后，放人适宜温度的培养箱或温室培养，长出菌落后，计数，按下面公式计算出原菌液的含菌数：每毫升原菌液活菌数=同一稀释度三个以上重复平皿菌落平均数×稀释倍数×5此法可因操作不熟练造成污染，或因培养基温度过高损伤细胞等原因造成结果不稳定。

2022年四川大学生物科学专业《微生物学》期末试卷A(有答案）一、填空题1、E.coli的肽聚糖单体结构与Staphylococcus aureus的基本相同，所不同的是前者① ______，② ______。

2、烈性噬菌体生活史可分五个阶段，即______、______、______、______和______。

3、TCA循环是指丙酮酸经过一系列的循环式反应而彻底氧化、脱羧、形成______、______和______的过程。

4、用培养平板进行微生物纯培养分离的方法包括：______、______和______。

5、核糖体的功能是______，它由存在于表层的______和位于内层的______两种成分组成；在真核生物细胞质中的核糖体的沉降系数一般为______，而在线粒体中则为______，原核生物的一般为______。

6、由科赫提出的确证某病原体为某传染病病因的学说称为______，它的主要内容有：①______，② ______，③ ______，④ ______。

7、化学治疗剂包括______、______、______和______等。

8、微生物寄生于其他微生物的例子如______、______；微生物寄生于植物的例子如______；微生物寄生于动物的例子如______。

9、普遍转导与局限转导主要区别在于：①普遍转导噬菌体是______噬菌体，而局限转导噬菌体是______噬菌体，②普遍转导噬菌体能转移供体菌的______基因，而局限转导噬菌体只能转移供体菌的______基因。

10、抗原物质呈现其免疫原性的物质基础有三点，即______、______和______。

二、判断题11、细菌和真菌的鞭毛都是以旋转方式来推动细胞运动的。

（）12、微生物有极广的碳源谱，它不论对整个微生物界整体或对个别微生物种来说，都是一致的。

（）13、酿酒酵母只进行同型酒精发酵，而绝不存在异型酒精发酵。

（）14、E.coli T偶数噬菌体的核心是由线状双链DNA构成的。

大肠杆菌营养缺陷型菌株的诱变和筛选生命科学学院09级生物技术1班余振洋200900140156指导老师：林建群同组者：潘红芳摘要营养缺陷型菌株是微生物遗传学研究中重要的选择标记和育种的重要手段，在发酵工业上有广泛用途。

本实验以大肠杆菌原养型菌株为材料，计划通过诱变得到并筛选出营养缺陷型，从而了解细菌营养缺陷性的获得步骤并掌握氨基酸营养缺陷型的筛选方法和鉴别过程。

关键词营养缺陷，诱变，生长谱测定，大肠杆菌（E.coli）1．引言1.1 营养缺陷型营养缺陷型是指缺乏合成某种对自身生长繁殖所必须的营养物质（氨基酸、维生素、碱基等）的能力的突变型，只能从周围环境或培养基中获得这些物质或其前体物才能正常生长。

由于营养缺陷型不能合成某种末端产物，解除了合成代谢的反馈抑制作用，限量添加所需生长因子克服生长障碍后，可选择性大量合成积累所需的中间代谢产物。

因此，营养缺陷型在工业上有重要的应用价值。

营养缺陷型是由野生型突变产生，营养缺陷型经回复突变恢复野生表型得原养型。

1.2 紫外线诱变紫外线是一种短波光，波长介于100-400nm之间。

紫外线是一种非电离辐射诱变剂，照射物体时可使原子的内层电子能级提高，但不能使原子失去电子。

紫外线是微生物育种中最常用的诱变剂之一。

由于碱基间电子的相互作用，DNA分子在260nm处有最大的紫外吸收峰，因此决定了紫外线诱导细胞发生突变的有效波长为260nm。

15W紫外灯产生的紫外线中，80%集中在260nm左右，诱变效应良好。

低剂量紫外线可诱变获得较多的正突变，高剂量紫外线则易产生大量负突变，但可获得特性明显改变的突变菌株。

紫外线诱发突变的原理是使DNA同一链上的两相邻胸腺嘧啶之间发生交联，形成胸腺嘧啶二聚体。

在DNA复制时，相应核苷酸无法与胸腺嘧啶二聚体配对形成碱基对，DNA复制中断，引起突变。

当细胞中的DNA分子含有大量胸腺嘧啶二聚体时，SOS修复机制被激活，DNA被修复，但包含大量错配的碱基对，从而导致基因突变。

第1篇一、实验目的1. 了解生长谱法的基本原理和操作步骤；2. 掌握利用生长谱法研究植物生长发育规律的方法；3. 通过实验，验证不同生长条件对植物生长发育的影响。

二、实验原理生长谱法是一种研究植物生长发育规律的方法，通过改变植物的生长条件（如光照、温度、水分等），观察植物的生长发育变化，从而了解植物在不同生长条件下的生长发育规律。

三、实验材料1. 植物材料：小麦种子；2. 实验器具：生长箱、温度计、湿度计、光照计、显微镜、电子天平、剪刀、培养皿等；3. 试剂：蒸馏水、植物生长调节剂等。

四、实验方法1. 实验分组：将小麦种子分为若干组，每组设置不同的生长条件，如温度、光照、水分等；2. 种子处理：将小麦种子浸泡24小时，然后用蒸馏水洗净，均匀播种于培养皿中；3. 生长条件设置：根据实验设计，调整生长箱中的温度、光照、水分等条件；4. 观察与记录：定期观察植物的生长发育情况，包括植株高度、叶片数量、叶面积等；5. 数据处理：将观察数据记录于表格中，并进行统计分析。

五、实验步骤1. 种子浸泡：将小麦种子浸泡24小时，然后用蒸馏水洗净；2. 播种：将处理好的小麦种子均匀播种于培养皿中；3. 设置生长条件：根据实验设计，调整生长箱中的温度、光照、水分等条件；4. 观察与记录：定期观察植物的生长发育情况，包括植株高度、叶片数量、叶面积等；5. 数据记录：将观察数据记录于表格中；6. 数据处理：对观察数据进行统计分析。

六、实验结果与分析1. 不同温度对小麦生长的影响：观察不同温度条件下小麦的生长发育情况，分析温度对小麦植株高度、叶片数量、叶面积等指标的影响；2. 不同光照对小麦生长的影响：观察不同光照条件下小麦的生长发育情况，分析光照对小麦植株高度、叶片数量、叶面积等指标的影响；3. 不同水分对小麦生长的影响：观察不同水分条件下小麦的生长发育情况，分析水分对小麦植株高度、叶片数量、叶面积等指标的影响；4. 统计分析：对实验数据进行统计分析，得出不同生长条件下小麦生长发育的规律。

2024年高考生物模拟试卷注意事项：1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。

2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。

回答非选择题时，将答案写在答题卡上，写在本试卷上无效。

3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。

一、选择题：（共6小题，每小题6分，共36分。

每小题只有一个选项符合题目要求）1．下列关于生物组织中还原糖、脂肪和蛋白质鉴定实验的叙述，正确的是A．可溶性还原糖、蛋白质的鉴定，可用酒精灯直接加热B．脂肪鉴定的操作步骤依次是切片→制片→染色→洗去浮色→观察C．苏丹Ⅲ染液可将脂肪颗粒染成橘黄色D．常用番茄、苹果等作为鉴定植物组织内还原糖的实验材料2．下列有关生物变异和进化的叙述，错误的是（）A．隔离是物种形成的必要条件B．杂合子Aa自交后代出现性状分离、是基因重组的结果C．无论是自然选择还是人工选择作用，都能使种群基因频率发生定向改变D．二倍体西瓜经一定浓度秋水仙素诱导，可得到四倍体西瓜，从而产生新物种3．在家兔动脉血压正常波动过程中，当血压升高时，其血管壁上的压力感受器感受到刺激可以反射性地引起心跳减慢和小血管舒张，从而使血压降低，仅由此调节过程判断，这一调节属于（）A．神经调节，负反馈调节B．神经调节，免疫调节C．体液调节，负反馈调节D．体液调节，免疫调节4．一对表现型正常的夫妇生了一个患某种单基因遗传病的男孩（不考虑突变和染色体交叉互换）。

下列分析合理的是（）A．可以断定控制此病的基因位于X染色体上B．可以排除控制此病的基因位于Y染色体上C．可以断定该男孩的母亲是杂合体D．若这对夫妇再生一个男孩，该男孩正常的概率是1/25．下列关于原核细胞、真核细胞和病毒的叙述正确的是（）A．原核细胞生命系统的边界是细胞的最外层结构B．高等动物体内的大多数细胞不会形成纺锤体C．含叶绿体的细胞内色素均存在于原生质层内D．用含32P的培养基可直接标记新冠病毒的遗传物质6．下列关于真核细胞结构和功能的叙述，正确的是A．组成细胞生物膜的基本支架都是磷脂双分子层B．高尔基体是细胞内蛋白质合成、加工和运输的场所C．细胞利用核孔实现核内外大分子物质的自由转运D．在mRNA合成的同时都会有多个核糖体结合到mRNA上二、综合题：本大题共4小题7．（9分）图甲是某学习小组同学“探究影响植物光合速率因素”的实验装置，灯为冷光源。

微生物生长的几种检测方法关于微生物生长的几种检测方法一、生长量测定法1.1体积测量法：又称测菌丝浓度法。

通过测定一定体积培养液中所含菌丝的量来反映微生物的生长状况。

方法是，取一定量的待测培养液（如10毫升）放在有刻度的离心管中，设定一定的离心时间（如5分钟）和转速（如5000rpm），离心后，倒出上清夜，测出上清夜体积为v，则菌丝浓度为（10-v）/10。

菌丝浓度测定法是大规模工业发酵生产上微生物生长的一个重要监测指标。

这种方法比较粗放，简便，快速，但需要设定一致的处理条件，否则偏差很大，由于离心沉淀物中夹杂有一些固体营养物，结果会有一定偏差。

1.2称干重法：可用离心或过滤法测定。

一般干重为湿重的10-20%。

在离心法中，将一定体积待测培养液倒入离心管中，设定一定的离心时间和转速，进行离心，并用清水离心洗涤1-5次，进行干燥。

干燥可用烘箱在105℃或100℃下烘干，或采用红外线烘干，也可在80℃或40℃下真空干燥，干燥后称重。

如用过滤法，丝状真菌可用滤纸过滤，细菌可用醋酸纤维膜等滤膜过滤，过滤后用少量水洗涤，在40℃下进行真空干燥。

称干重发法较为烦琐，通常获取的微生物产品为菌体时，常采用这种方法，如活性干酵母（activitydryyeast,ADY）,一些以微生物菌体为活性物质的饲料和肥料。

1.3比浊法：微生物的生长引起培养物混浊度的增高。

通过紫外分光光度计测定一定波长下的吸光值，判断微生物的生长状况。

对某一培养物内的菌体生长作定时跟踪时，可采用一种特制的有侧臂的三角烧瓶。

将侧臂插入光电比色计的比色座孔中，即可随时测定其生长情况，而不必取菌液。

该法主要用于发酵工业菌体生长监测。

如我所使用UNICO公司的紫外-可见分光光度计，在波长600nm处用比色管定时测定发酵液的吸光光度值OD600，以此监控E.Coli的生长及诱导时间。

1.4菌丝长度测量法：对于丝状真菌和一些放线菌，可以在培养基上测定一定时间内菌丝生长的长度，或是利用一只一端开口并带有刻度的细玻璃管，到入合适的培养基，卧放，在开口的一端接种微生物，一段时间后记录其菌丝生长长度，借此衡量丝状微生物的生长二、微生物计数法2.1血球计数板法:血球计数板是一种有特别结构刻度和厚度的厚玻璃片，玻片上有四条沟和两条嵴，中央有一短横沟和两个平台，两嵴的表比两平台的表面高0.1mm，每个平台上刻有不同规格的格网，中央0.1mm2面积上刻有400个小方格。

第八章微生物遗传变异与菌种选育习题及答案第八章《微生物遗传与菌种选育》习题及参考答案一、名词解释1．点突变：DNA链上的一对或少数几对碱基发生改变，称为点突变。

2．感受态：受体菌最易接受到外源DNA片段并实现转化的生理状态。

3．基因工程：又称重组DNA技术，它是根据人们的需要在体外将供体生物控制某种遗传性状的一段生物大分子-----DNA切割后，同载体连接，然后导入受体生物细胞中进行复制、表达，从而获得新物种的一种崭新的育种技术。

4．接合：遗传物质通过细胞间的直接接触从一个细胞转入到另一细胞而表达的过程称为接合。

5．F'菌株：当Hfr菌株内的F因子不正常切割而脱离其染色体时，可形成游离的但携带一小段染色体基因的F因子，含有这种F因子的菌株称为F'菌株。

6．诱变育种：使用各种物理或化学因子处理微生物细胞，提高突变率，从中挑选出少数符合育种目的的突变株。

7．营养缺陷型：由于基因突变引起菌株在一些营养物质（如氨基酸、维生素和碱基）的合成能力上出现缺陷，而必须在基本培养基中添加相应的物质才能正常生长的突变型。

野生型：指从自然界分离到的任何微生物在其发生人为营养缺陷突变前的原始菌株。

原养型：一般指营养缺陷型突变株经回复突变或重组后产生的菌株。

9．重组DNA技术：是指对遗传信息的分子操作和施工，即把分离到的或合成的基因经过改造，插入载体中，导入宿主细胞内，使其扩增和表达，从而获得大量基因产物或新物种的一种崭新的育种技术。

10．基因重组：或称遗传重组，两个独立基因组内的遗传基因，通过一定的途径转移到一起，形成新的稳定基因组的过程。

11．基因突变（genemutation）和移码突变：基因突变（genemutation）：一个基因内部遗传结构或DNA序列的任何改变，而导致的遗传变化就称基因突变。

移码突变：指诱变剂会使DNA分子中的一个或少数几个核苷酸的增添或缺失，从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。

生长谱法鉴定营养缺陷型
生长谱法主要用于鉴定微生物的哪种特性？
A. 抗生素敏感性
B. 营养需求
C. 酸碱耐受性
D. 温度适应性
在进行生长谱法鉴定时，通常需要使用哪种培养基作为基础？
A. 复杂培养基
B. 最小培养基
C. 选择培养基
D. 鉴别培养基
如果某种微生物在添加了特定氨基酸的最小培养基上能够生长，而在未添加该氨基酸的培养基上不能生长，这表明该微生物是哪种类型的营养缺陷型？
A. 原型
B. 渗漏型
C. 条件型
D. 绝对需要型
生长谱法鉴定营养缺陷型时，通常不需要考虑以下哪个因素？
A. 培养基的pH值
B. 培养基的渗透压
C. 培养温度和时间
D. 微生物的接种量
下列哪种微生物的营养缺陷型不能通过生长谱法进行有效鉴定？
A. 细菌
B. 酵母菌
C. 霉菌
D. 病毒
在生长谱法鉴定中，如果发现某种微生物在所有测试的最小培养基上都不能生长，这可能表明什么？
A. 该微生物是多重营养缺陷型
B. 该微生物对培养基中的某些成分敏感
C. 该微生物需要特殊的生长因子
D. 该微生物已经死亡或失活
生长谱法鉴定营养缺陷型时，通常选择哪种对照来验证实验结果的有效性？
A. 野生型微生物
B. 已知营养缺陷型的微生物
C. 不同种类的微生物
D. 不含任何微生物的培养基
下列关于生长谱法鉴定营养缺陷型的描述中，哪一项是不正确的？
A. 可以确定微生物对哪些营养物质有需求
B. 可以用于筛选营养缺陷型突变体
C. 可以直接测定微生物的生长速率
D. 可以为微生物的营养需求和代谢途径研究提供线索。

微生物纯培养与生长量测定一、微生物纯培养技术微生物在自然界中不仅分布广，而且种类多，并多是混杂地生活在一起。

要想研究或利用某一微生物，必须把混杂的微生物类群分离开来，以得到只含一种微生物的纯培养。

微生物学中将在实验室条件下由一个细胞或一种细胞群繁殖得到的后代称为微生物的纯培养。

纯培养技术包括两个基本步骤：① 从自然环境中分离培养对象。

② 在以培养对象为唯一生物种类的隔离环境中培养、增殖，获得这一生物种类的细胞群体。

针对不同微生物的特点，有许多分离方法。

应用最广的是平板法分离纯培养。

（一）、用固体培养基分离纯培养单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞生长群体，称为菌落（colony）。

当固体培养基表面众多菌落连成一片时，便成为菌苔（lawn）。

不同微生物在特定培养基上生长形成的菌落或菌苔一般都具有稳定的特征，可以成为对该微生物进行分类、鉴定的重要依据。

大多数细菌、酵母菌、以及许多真菌和单细胞藻类能在固体培养基上形成孤立的菌落，采用适宜的平板分离法很容易得到纯培养。

所谓平板，即培养平板（culture plate）的简称，它是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。

这方法包括将单个微生物分离和固定在固体培养基表面或里面。

固体培养基用琼脂或其它凝胶物质固化的培养基，每个孤立的活微生物体生长、繁殖形成菌落，形成的菌落便于移植。

最常用的分离、培养微生物的固体培养基是琼脂固体培养基平板。

这种由Kock建立的采用平板分离微生物纯培养的技术简便易行，100多年来一直是各种菌种分离的最常用手段。

1. 稀释倒平板法（pour plate method）先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释（如1:10、1:100、1:1,000、1:10,000......），然后分别取不同稀释液少许，与已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基混合，摇匀后，倾入灭过菌的培养皿中，待琼脂凝固后，制成可能含菌的琼脂平板，保温培养一定时间即可出现菌落。