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提取物生物碱检测方法我折腾了好久提取物生物碱检测方法，总算找到点门道。
说实话，刚开始的时候我真的是瞎摸索。
我最先想到的就是酸碱滴定法。
就想象这个过程像是一场小小的化学战争，生物碱是我们要征服的小怪兽，酸碱滴定就像是我们的武器。
我以为很简单，按照课本上的步骤来，先把提取物准备好，像是精心准备战场一样，然后加入合适的酸或者碱。
但是呢，这里就出问题了。
我总是掌握不好加入试剂的量，要么太多要么太少，就像厨师做菜时调料放多放少一样，整个结果就是乱七八糟的。
后来啊，我试过光谱法。
这个方法听起来就很高级对不对？我当时觉得这下肯定行了。
我把提取物小心翼翼地放到仪器里，就像把宝贝放进保险箱一样。
可这个时候又有了新的挫折。
这个仪器的参数设置我完全是懵的。
我就按照前一个实验者留下来的记录设置，结果发现根本不一样。
因为不同的提取物可能需要完全不一样的参数啊，我这才恍然大悟，原来不能这么偷懒。
再然后，我又开始尝试用沉淀法。
这就好比是从沙子里挑金子，想把生物碱给沉淀出来单独检测。
我加了各种试剂，想让生物碱乖乖沉淀，可杂质也跟着捣乱，一起跟着沉淀了。
这就像在一群人中挑出特定的一个人，结果把长得像的都挑出来了一样，根本分不开。
现在我觉得比较靠谱的一个方法是薄层层析法。
这个方法就有点像在墙上贴比拼图。
先把提取物点在薄板上，然后通过不同的溶剂让它们爬行。
生物碱因为自身的特性，在薄板上会到达特定的位置。
不过这个方法也有难点，薄板要选择合适的，就像选拼图的板子一样重要。
而且溶剂的比例也得反复去试，我试过很多次不同比例的混合溶剂，就像在试不同味道的调料混合，最后才找到比较适合的比例。
在这些尝试里，我最大的心得就是一定要细心。
每一个小的细节，从试剂的纯度，到操作环境的温度湿度，都可能影响结果。
实验嘛，真的是一次又一次的试错过程，希望我的这些经历能给你一点启发。
天然药物中生物碱的提取分离及检测刘琳【期刊名称】《黑龙江医药》【年(卷),期】2014(000)002【摘要】本文对天然药物中生物碱的提取、分离及检测方法作一综述，天然药物中生物碱的存在形式为盐和游离生物碱，所以通常选用无机酸水进行生物碱提取，将有机酸盐生物碱置换成无机酸盐生物碱，进而增加生物碱的溶解度；游离生物碱或其盐均可溶于甲醇、乙醇，可用醇回流加热提取或超声波醇提法；而且很多生物碱尤其是游离型生物碱都是亲脂性的，故可用CH3Cl、C6H6及CH2Cl2等有机溶剂加热回流提取游离生物碱。
提取得到的多是各生物碱的混合物，根据生物碱类别、碱性强弱、溶解度差异、生物碱特殊官能团等对生物碱混合物进行分离。
然后对分离出的单体进行检识。
%In this paper, the natural medicine extraction, separation and determination method of alkaloidsin a story, the alkaloids in natural medicine in the form of the salt and the free, so can choose inorganic acidwater extraction, so that the alkaloids organic acid salt replacement into inorganic acid salt, increasingsolubility; Free alkaloids or its salt soluble in methanol, ethanol, alcohol available heating reflux extraction or ultrasonic alcohol formulation; And most free alkaloids are lipophilic, also can use chloroform, benzene, ether and dichloromethane solvent free heating reflux extraction of alkaloids. Extraction is more is the mixture of alkaloids, according to the alkaloids category, basic strength,the difference of solubility, alkaloids special functional group on the alkaloid mixture separation. And then to isolate monomer for inspection.【总页数】5页(P462-466)【作者】刘琳【作者单位】哈尔滨商业大学生命科学与环境科学研究中心黑龙江哈尔滨150076【正文语种】中文【中图分类】R284.2【相关文献】1.“一线两面三平台”实验教学模式在天然药物成分提取分离技术教学中的应用[J], 吴方评;杨勇;杨宏健;金苹2.HPLC分离化学发光检测药物中的马钱子碱、士的宁和麻黄类生物碱 [J], 朱龙3.大孔吸附树脂在天然药物有效成分提取分离中的应用进展 [J], 马盼香;金华;李雅玲4.分子印迹技术在天然药物有效成分提取分离中的应用 [J], 冯喜文;杜平;张利5.项目教学法在高职天然药物提取分离技术教学中的应用 [J], 李磊;于秋玲;赖菁华因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
天然产物研究与开发！"2018 ,30:404(11,500文章编号：1001(880(2018)3(404(9基于H P L C指纹图谱的亳白芍不同炮制品标准汤剂7个成分含量测定赵园园\梁德勤\金传山1!，魏庆红2,张伟#，许凤清#，王林11安徽中医药大学药学院，合肥230012;2安徽协和成药业饮片有限公司，亳州236800摘要:建立亳白芍不同炮制品标准汤剂HPLC指纹图谱，其中生白芍、炒白芍和酒白芍标准汤剂分别标定16、14和13个共有峰，同时测定亳白芍不同炮制品标准汤剂中7种化学成分(没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1，2,3,4，6-五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷）含量，经炒制后标准汤剂中芍药内酯苷和苯甲酸含量升高，氧化芍药苷、芍药苷含量降低，酒白芍标准汤剂中芍药苷含量升高，苯甲酸含量降低，并对含量测定结果进行聚类分析，同一批亳白芍及其炮制品可聚为一类，但聚类距离缩小后生品和炮制品各聚为一类。
建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法具有良好的重现性，且简便快速，二者结合可直观反映出亳白芍炒制、酒制后的变化差异。
关键词：亳白芍;炮制品;标准汤剂;指纹图谱;含量测定中图分类号：R283.1 文献标识码：A DOI ： 10. 16333/j. 1001 -6880.2018. 3. 010Determination of 7Components in Standard Decoction of DifferentProcessed Products of Paeoniae Alba Radix inBozhou Based on HPLC Fingerprint AnalysisZHAOYuan-yuan1 ’LIANGDe-qin1，JIN Chuan-shan1*，WEI Qin-hong^ZHANGW ei1 ’XUFeng-qing1，WANG Lin1 1School of Pharmacy，Anhui University of Chinese Medicine，Hefei 230012，China；2Anhui Xiehecheng Chinese Herb Limited Corporation，Bozhou 236800，ChinaAbstract:To establish the HPLC fingerprint of standard decoction of different processed products (PAR) in B ozhou. The standard decoction of PAR had 16 common peaks，fired PAR had 14 common peak，and PARwith wine had 13 common peak. The seven different chemical composition (including gallic acid，oxypaeoniflorin，alibi-florin，paeoniflorin，benzoic acid，1，2，3，4，6-pentagalloylglucose，benzoylj3aeoniflorin) were measured. The content of al-ibiflorin and benzoic acid increased in the standard decoction 2ter fired，meanwhile oxypaeoniflorinduced. In the standard decoction of PAR witli wine，the content of paeoniflorin increased and thedecreased. The results were analyzed by cluster analysis (C A)，the same PAR and processed products can get togetherfor a class，but the different processed products of PARwere clustered into one category after clustering distance was reduced. The HPLCfingerprint and c ontent determination methods had a good reproducibility and was simple as well asfast. The combination of the two methods can reflect the difference of the changes of differen in Bozhou.Key words:Paeoniae Alba Radix in Bozhou;processed products;standard decoction;fingerprint;content determination白苟为毛莫科植物苟药（P a e n i Ic V lfa Pall.)干燥根，收载于2015版《中华人民共和国药典》，具有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗的功效[1]。
亳芍总生物碱提取及抑菌活性的研究陈乃东;朱旺生;杨小东【摘要】为了探讨亳芍总生物碱提取条件及其抑菌活性,在前期研究基础上,通过单因素和正交实验对亳芍总生物碱的提取条件进行了研究.采用滤纸片法对亳芍总生物碱提取物对大肠杆菌、金色葡萄球菌酵母菌及黑曲霉菌的体外抑菌活性进行初步测定.结果表明,亳芍总生物碱最佳提取条件为:乙醇浓度为60％,提取时间为3h,提取温度为60℃,料液比为1∶20.此条件下,测得亳芍总生物碱的含量为0.58‰,提取的总生物碱对大肠杆菌、金色葡萄球菌及酵母菌、黑曲霉菌均有抑制作用,但抑菌效果不同,抑菌作用顺序为:金色葡萄球＞酵母菌＞黑曲霉菌菌＞大肠杆菌.【期刊名称】《天然产物研究与开发》【年(卷),期】2015(027)005【总页数】5页(P827-831)【关键词】亳芍;生物碱;抑菌活性【作者】陈乃东;朱旺生;杨小东【作者单位】皖西学院生物与制药工程学院,六安237012;皖西中药与天然药物工程技术研究中心,六安237012;安徽医科大学药学院,合肥230032;皖西学院生物与制药工程学院,六安237012;皖西学院生物与制药工程学院,六安237012【正文语种】中文【中图分类】R284.2亳芍(Bozhou Peony Paeonia lactiflora)，即亳白芍，主产安徽省亳州地区，为安徽道地药材之一，是芍药科植物芍药(Paeonia lactiflora)或其变种毛果芍药(Paeonia trichocarpa)栽培品的根，夏秋季采挖其根部，去净泥土和支根，沸水浸或略煮至受热均匀，再经晒干等处理后即炮制成中药亳芍，具有抗炎、免疫调节、抗病毒、抗氧化、抗惊厥、护肝等作用，对胃肠道疾病和心血管疾病也有一定的疗效［1-3］。
植物化学研究表明，白芍主要含有单萜［4］、倍半萜及三萜［5］、单宁［6］、挥发油［7］、黄酮［8］、多酚类［9］、多糖［10］等活性成分。
在我们的前期研究中发现，亳芍中含有微量生物碱［11］。
中药及其制剂的含量测定方法汇总1.总生物碱含量测定总生物碱含量是中药中常见的一个参数，常用的测定方法是滴定法和酸碱滴定法。
滴定法是将适当加量的酸作用于中药样品中的生物碱，再用酸碱指示剂滴定至终点，通过计算滴定的酸量，计算出总生物碱含量。
而酸碱滴定法则是先将中药样品中的生物碱与酸反应生成盐，再进行滴定，计算出总碱量。
2.总多糖含量测定总多糖含量是中药中常见的活性成分之一，常用的测定方法是酸水解法和酚硫酸法。
酸水解法是将中药样品加入酸溶液中进行水解，然后用酚硫酸试剂加热反应，再用后硫酸染色，并利用分光光度计测定多糖含量。
而酚硫酸法则是将中药样品用酚硫酸试剂加热反应形成紫色复合物，然后用分光光度计测定复合物的吸光度，从而测定总多糖含量。
3.总黄酮含量测定总黄酮含量是中药中的重要指标之一，常用的测定方法是铝盐比色法和斯奈普斯方法。
铝盐比色法是将中药样品与铝盐反应形成结合物，然后测定结合物的吸光度，从而计算出总黄酮含量。
斯奈普斯方法则是将中药样品与氧化氢酶反应生成发色物，再利用分光光度计测定发色物的吸光度，从而测定总黄酮含量。
4.总皂苷含量测定总皂苷含量是中药中常见的一个指标，常用的测定方法是荧光法和高效液相色谱法。
荧光法是将中药样品与荧光试剂反应发生荧光化学反应，然后利用荧光分光光度计测定荧光强度，通过标准曲线计算出皂苷含量。
高效液相色谱法则是将中药样品中的皂苷通过色谱柱进行分离，再利用紫外光检测器进行检测，从而得到皂苷的含量。
5.总生育酚含量测定总生育酚含量是中药中重要的抗氧化成分，常用的测定方法是巴氏法和分光光度法。
巴氏法是将中药样品与酸反应形成络合物，然后利用巴氏试剂滴定至红色终点，从滴定量计算出总生育酚含量。
分光光度法则是将中药样品与化学试剂反应形成发色物，然后利用分光光度计测定发色物的吸光度，从而计算出总生育酚含量。
综上所述，中药及其制剂的含量测定方法多种多样，根据不同的中药成分，选择合适的测定方法可以确保测定结果的准确性和可靠性。
植物生物碱含量测定方法我折腾了好久植物生物碱含量测定方法，总算找到点门道。
说实话，最开始我完全是瞎摸索。
我一开始就想到用化学滴定法，就感觉跟中学时测酸碱性啥的应该差不多呗。
那时候我就特别天真地觉得，不就是找到一种能和生物碱反应的试剂，然后看反应到啥程度就知道含量了嘛。
可是呢，我发现没有我想的那么简单。
不同的植物含的生物碱种类复杂着呢，一种试剂很难准确测定。
就像你想在一堆混合颜色的珠子里挑出一种颜色的珠子，光用一种工具根本不顶用。
后来我又试了比色法。
这个方法就是根据生物碱会和某些试剂反应生成有颜色的产物，然后通过颜色深浅对比标准曲线来测含量。
我就开始磨植物的样品，想把生物碱都提取出来。
我当时就顾着按照书上说的步骤做，没太注意研磨的力度和时间，结果提取出来的生物碱可能不完全，比出来的颜色就跟标准的对不上，数据乱得一塌糊涂，那次算是惨败。
再后来我就学聪明了。
做重量法的时候，我对每个步骤都特别小心。
重量法简单来说就是想办法把生物碱提取出来，然后让它变成固体，再称这个固体的重量，从而算出生物碱在植物里的含量。
我先把植物材料处理好，这个步骤就像是给植物做个‘全身清洁’，把杂质啥的都去掉就留下我们想要的生物碱相关的东西。
我把样品研磨得特别细，细到像面粉一样，这样能确保生物碱尽可能多地被提取。
然后经过一连串的化学处理，让生物碱变沉淀。
但是这时候我又差点犯错，干燥沉淀的时候，温度控制不好就会影响结果。
我反复试了好几次才找到合适的干燥温度。
不确定我现在的方法是不是最完美的，但这的确是我一点一点摸索出来的。
还有高效液相色谱法，这个方法很先进，不过仪器设备贵而且操作复杂。
我也在学习这个方法，感觉就像开一架超级复杂的飞机，每个参数都得调得特别精准。
总之呢，想要测定植物生物碱含量，你就得多试试不同的方法，每个步骤都要小心翼翼，就这么慢慢摸索，总能找到适合你的那一套测定方法。
AAS法测定亳白芍水提液中微量元素的含量田园;陈婵;韩天云;王治宝;郭春燕【期刊名称】《神经药理学报》【年(卷),期】2009(026)001【摘要】目的:探讨AAS法测定亳白芍水提液中Fe、Mn、Zn元素含量的可行性及准确性.方法:采用索氏提取法处理样品,用火焰原子吸收光谱法测定亳白芍水提液中Fe、Mn、Zn元素的含量.结果:亳白芍水提液中含有Fe、Mn、Zn等微量元素,线性范围(μg·mL-1):Fe 1.000～9.000,Zn 0.500～4.000,Mn 0.400～4.000;平均回收率:Fe 101.4%,Zn 101.4%,Mn 107.5%;相对标准偏差(RSD):Fe 4.31%,Zn5.22%,Mn 2.79%.结论:亳白芍中含有丰富的对人体有益的微量元素.该测定方法简便,精密度及重复性均较好.【总页数】2页(P37-38)【作者】田园;陈婵;韩天云;王治宝;郭春燕【作者单位】河北北方学院医学院药学系2006级;河北北方学院医学院药学系2006级;班,河北,张家口,075000;河北北方学院医学院化学教研室,河北,张家口,075000;河北北方学院医学院化学教研室,河北,张家口,075000【正文语种】中文【中图分类】R931【相关文献】1.LC-UV法测定亳白芍及其炮制品中芍药苷的含量 [J], 秦亚东;李飞;周宙;黄丽萍2.高效液相色谱法测定不同品系亳白芍中4种化学成分含量 [J], 张腾腾;张梦娇;王婉婷;居正;姬雨思;朱蝶3.高效液相色谱法测定不同品系亳白芍中4种化学成分含量 [J], 张腾腾;张梦娇;王婉婷;居正;姬雨思;朱蝶4.杭白芍和亳白芍中苯甲酸的含量测定 [J], 陈科敏;吴巧凤5.杭白芍和亳白芍中苯甲酸的含量测定 [J], 吴巧凤因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
生物碱含量测定方法嘿，你知道生物碱不？这玩意儿可神奇了呢！生物碱在很多植物里都有，就像一个个小小的魔法分子。
今天呀，我就来和你唠唠生物碱含量测定的方法，这可是个很有趣的事儿呢。
我有个朋友叫小李，他在一家制药公司工作。
有一次，他们公司接到一个项目，就是要测定一种植物提取物里生物碱的含量。
小李当时就头大了，跑来问我。
我就跟他说，这生物碱含量测定方法可不少呢。
最常见的一种方法就是酸碱滴定法。
想象一下，生物碱就像一个个调皮的小娃娃，酸碱滴定法就像是一场给小娃娃们排队的游戏。
我们可以利用生物碱的碱性，用酸来和它反应。
酸就像一个严厉的管理员，一个一个地把生物碱小娃娃都管起来。
通过精确测量酸的用量，就能算出生物碱的含量啦。
不过，这方法也有它的小麻烦。
有时候，植物提取物里可能会有其他干扰物质，就像调皮捣蛋的小鬼，混在生物碱小娃娃中间，让这个排队游戏变得有点混乱。
还有一种方法叫比色法。
这比色法啊，就像是一场选美比赛。
生物碱和特定的试剂反应后会产生颜色变化。
就好比生物碱穿上了漂亮的衣服，然后我们根据颜色的深浅来判断它的含量。
颜色越深，就说明生物碱越多，就像穿的衣服越华丽，就越受关注一样。
我记得小李听我说到这儿的时候，眼睛都亮了。
他说：“哎呀，这听起来还挺好玩的呢！”我就笑着跟他说：“好玩是好玩，但是也得小心哦。
这个颜色变化有时候很细微，就像女孩子化的淡妆，得仔细看才能看出来呢。
而且不同的生物碱可能会产生相似的颜色，这就需要更精准的鉴别了。
”高效液相色谱法（HPLC）也是测定生物碱含量的一个得力助手。
这就好比是一条超级高速公路，不同的生物碱就像不同型号的汽车在这条公路上行驶。
通过特殊的柱子和流动相，生物碱按照各自的速度在这条高速公路上跑。
最后，检测器就像交警一样，记录下每个生物碱汽车通过的情况，从而确定它们的含量。
我跟小李说：“这个方法虽然很准确，但是设备可昂贵了呢，就像买一辆超级豪华跑车，不是谁都能轻易拥有的。
”小李听了直点头，说他们公司得好好考虑成本问题。
不同栽培年限亳芍多糖与微量元素动态积累规律研究姚厚军;陈乃东;陈乃富;郭旭;刘路静;司华阳【摘要】对采自安徽亳州地区人工栽培1~7年亳芍样品,水提醇沉法提取多糖,蒽酮-硫酸法和原子吸收光谱法(FAAS)分别测定样品中多糖及微量元素含量,探讨多糖、微量元素在亳芍中的动态积累规律,为亳芍采收、品质评价与规范化栽培提供依据.结果表明,栽培年限对亳芍多糖和微量元素的积累有显著影响:株龄1~7年的亳芍,多糖的含量分别为(2.06±0.12)%、(3.59±0.17)%、(4.66±0.26)%、(3.14±0.19)%、(2.44±0.03)%、(2.49±0.12)%和(2.32±0.20)%;株龄1~7年的亳芍铜元素、铅元素、铬元素、镁元素、钙元素、钠元素、锌元素和钡元素的平均质量分数分别为(3.28±0.63)、(3.16±0.63)、(1.69±0.09)、(300.17±13.64)、(1476.66±57.49)、(71.88±2.26)、(8.58±0.56)和(369.51±26.68)mg/kg(DW);3种有害微量元素含量未超过5.0 mg/kg(DW)限量指标,均在规定限度范围内.上述结果显示,株龄3年亳芍多糖含量最高,亳芍中含丰富的人体必需微量元素,重金属限量指标整体上是安全的,微量元素的含量与多糖的含量存在相关性.%The contents of the total polysaccharide and the 8 trace elements of 1-7 years-old Bozhou Peony were detected by anthra-cenone-concentrated-sulfuric-acid colorimetry and AAS, respectively, to explore the dynamic accumulation of polysaccharides and 8 trace elements in Bozhou Peony Paeonia lactiflora, and to provide scientific basis for the optimum harvesting age, quality evaluation and standardized cultivation of Bozhou Peony. The results indicated that cultivating ages would significantly impact the accumulation of polysaccharide and trace elements. The average contents of polysaccharides of Bozhou Peony ( from 1 to 7 years ) were:( 2. 06 ± 0.12)%, (3. 59 ± 0. 17)%, (4. 66 ± 0. 26)%, (3. 14 ± 0. 19)%, (2. 44 ± 0. 03)%, (2.49 ± 0. 12)% and (2.94 ± 0. 20)%;the mass fractions of Cu, Pb, Cr ,Mg, Ca, Na, Zn and Ba were (4. 14 ± 0. 39), (5. 02 ± 0. 87), (1. 69 ± 0. 07), (300. 17 ± 13. 64), (1476. 66 ±57. 49), (71. 88 ± 2. 26), (8. 58 ± 0. 56) and (369. 51 ± 26.68) mg/kg(DW), respectively, and all the mental elements were in limits except Pd content in the samples exceeded the standard limit 0. 89 mgkg( DW) . Our experimental sug-gested that the Bozhou Peony cultivated for 3 years obtained the highest polysaccharide. There were rich essential mental elements in Bozhou Peony and the contents of heavy mental elements were lower than the limited. There might exist correlation between the trace el-ements contents and the accumulation of polysaccharide in Bozhou Peony.【期刊名称】《生物学杂志》【年(卷),期】2017(034)005【总页数】4页(P66-69)【关键词】亳芍;多糖;微量元素;规范化栽培【作者】姚厚军;陈乃东;陈乃富;郭旭;刘路静;司华阳【作者单位】皖西学院生物与制药工程学院,六安 237012;皖西中药与天然药物工程技术研究中心,六安 237012;皖西学院生物与制药工程学院,六安 237012;皖西中药与天然药物工程技术研究中心,六安 237012;安徽医科大学药学院,合肥 230032;皖西学院生物与制药工程学院,六安 237012;皖西中药与天然药物工程技术研究中心,六安 237012;中国人民解放军陆军军医大学士官学校,石家庄 050081;皖西学院生物与制药工程学院,六安 237012;皖西学院生物与制药工程学院,六安 237012【正文语种】中文【中图分类】Q949.95;R284.1;R282Abstract The contents of the total polysaccharide and the 8 trace elements of 1-7 years-old Bozhou Peony were detected by anthracenone-concentrated-sulfuric-acid colorimetry and AAS, respectively, to explore the dynamic accumulation of polysaccharides and 8 trace elements in Bozhou Peony Paeonia lactiflora, and to provide scientific basis for the optimum harvesting age, quality evaluation and standardized cultivation of Bozhou Peony. The results indicated that cultivating ages would significantly impact the accumulation of polysaccharide and trace elements. The average contents of polysaccharides of Bozhou Peony (from 1 to 7 years) were:(2.06±0.12)%, (3.59±0.17)%, (4.66±0.26)%, (3.14±0.19)%, (2.44±0.03)%, (2.49±0.12)% and (2.94±0.20)%; the mass fractions of Cu, Pb, Cr ,Mg, Ca, Na, Zn and Ba were (4.14±0.39), (5.02±0.87), (1.69±0.07), (300.17±13.64), (1476.66±57.49), (71.88±2.26), (8.58±0.56) and(369.51±26.68) mg/kg(DW), respectively, and all the mental elements were in limits except Pd content in the samples exceeded the standard limit 0.89 mg kg(DW). Our experimental suggested that the Bozhou Peony cultivated for 3 years obtained the highest polysaccharide. There were rich essential mental elements in Bozhou Peony and the contents of heavy mental elements were lower than the limited. There might exist correlationbetween the trace elements contents and the accumulation of polysaccharide in Bozhou Peony.Keywords Bozhou Peony Paeonia lactiflora; polysaccharides; trace element; standardized cultivation亳芍(Bozhou Peony Paeonia lactiflora)，即亳州白芍，是芍药科植物芍药(Paeonia lactiflora)的根，作为安徽道地药材之一，主产安徽省亳州地区。
植物天然产物中的生物碱物质提取和鉴定植物天然产物自古以来就被人们广泛应用于食品、药品、化妆品等行业，其中包括了众多的生物碱物质。
生物碱是指一类含有氮杂环的含氮有机化合物，广泛存在于动植物中，其中以植物产生的生物碱最为丰富。
植物生物碱具有多样的生物学活性，如具有镇静、镇痛、抑菌、抗病毒、抗癌等多种作用。
因此，掌握植物天然产物中生物碱物质的提取和鉴定技术对于实现植物生物碱在不同领域的应用具有重要意义。
一、植物生物碱物质提取技术植物生物碱物质提取技术多样，如麻黄碱的提取，有沸水浸提法、超声波辅助浸提法、微波辅助浸提法、离子流动萃取法等。
而莨菪碱则采用有机溶剂提取法、加压萃取法、超声波辅助提取法、改良乙腈碘钾法等方法。
当然，不同物种的生物碱提取方法也有所不同。
无论是哪种提取方法，都要注意提取温度、提取时间、提取剂量等细节问题，从而获得高品质的生物碱物质。
二、植物生物碱物质鉴定技术植物生物碱物质鉴定是指对生物碱之间的成分进行定性、定量等检测分析的过程。
鉴定过程主要涉及分离制备、色谱分析、波谱技术等，其中常用的鉴定技术包括气相色谱-质谱联用技术、高效液相色谱技术、红外线光谱、核磁共振技术等。
鉴定过程中还需要考虑样品制备方式、不同生物碱物质之间的选择性分析问题等，以保证鉴定结果的准确性。
三、植物生物碱物质应用植物生物碱物质的应用随着科技的发展而不断扩展。
在医药领域，吗啡、阿托品、血栓通等药品中就含有大量的生物碱物质，用于镇痛、止泻、扩张血管等治疗功能。
此外，植物生物碱也广泛应用于植物保护领域，如尼古丁生物碱可用于杀虫，滴滴涕生物碱可用于防藤蔓。
而对于口腔保健、护肤、美容等行业，茶碱、辣椒素、多巴胺等天然植物生物碱也被广泛应用。
总的来说，植物天然产物中的生物碱物质由于其强大的生物学活性，成为了物种之间竞争、适应环境的重要因素之一。
随着科技的不断发展，各种生物碱物质提取和鉴定技术也正在不断地创新和完善，为生物碱物质的应用开发提供了有力的技术支持。
亳芍生物碱提取及含量测定作者周飞指导教师陈乃东摘要：用95%乙醇提取亳芍干粉，总提物回收乙醇后以盐酸酸化，继以二氯甲烷萃取，水相加氨水至pH ﹥8.0后以氯仿萃取，回收氯仿获粗提物。
对该粗提物的TLC检测表明，亳芍中含有生物碱，且可能是乌头碱类生物碱。
酸碱滴定法初步测定的生物碱含量，以乌头碱计，亳芍中总生物碱含量约为0.07%。
关键词：亳芍生物碱显色反应酸碱滴定The primary research of the extracting and assaying of the alkaloidsfrom Baishao Paeoniae Radix AlbaBachelor candidator Fei ZhouAdviser Nai-Dong ChengAbstract：Total extract was extracted from Root of herbaceous peony's dry powder by using95%alcohol.We recover alcohol from the total extract,then join hydrochloric acid,then usingmethylene chloride to extract.We join ammonia to pH﹥8.0in aqueous phase,then using chloroform to extract. We recover chloroform to get rough extract.TLC testing indicated that Baishao Radix Paeoniae Alba contains alkaloids,and the alkaloids may be aconitine class.Acid-base titration rough determination showed that Baishao Paeoniae Radix Alba content about0.07%total alkaloid with the aconitine represented.Key words：Baishao Paeoniae Radix Alba Alkaloids Color reaction Acid-base titration亳芍(Radix Paeoniae Alba)，即亳白芍，主产安徽省亳州地区，为安徽道地药材之一，是芍药科植物芍药(Paeonia lactiflora)或其变种毛果芍药(Paeonia trichocarpa)栽培品的根。
芍药为多年生草本植物，夏秋季采挖其根部，去净泥土和支根，沸水浸或略煮至受热均匀，再经晒干等处理后即炮制成中药亳芍，加工后的亳芍呈粉白色或白色。
亳芍具有抗炎、免疫调节、抗病毒、抗氧化、抗惊厥、护肝等作用，对胃肠道疾病和心血管疾病也有一定的疗效[1]。
已有的研究表明，亳芍主要含有单萜[2-7]、倍半萜及三萜[7,8]、单宁[9]、挥发油[10]、黄酮[8,11]、多酚类[13,14]、多糖[15,16]等活性成分，其中，芍药苷（一种单萜类化合物）是亳芍的主要活性成分[5,17-19]。
为了进一步揭示亳芍的药效物质基础，为开发利用亳芍资源、繁荣当地经济提供参考依据，我们对亳芍的化学成分进行了一次深入研究。
初步的定性鉴定研究结果表明，亳芍中含有生物碱。
到目前为止尚未有亳芍中含有生物碱的研究报道，为此，本文对亳芍生物碱的提取、定性鉴定以及亳芍生物碱含量的初步测定等进行了研究，为后续的亳芍生物碱的分离鉴定奠定基础。
1材料仪器试剂1.1材料实验材料亳芍购于安徽省亳州市，品种经安徽中医学院黄和平博士鉴定。
1.2仪器GJ14-DGF3006型电热恒温干燥箱（金坛市荣华仪器制造有限公司），HH-4型数显恒温水浴锅（金坛市国华电器有限公司），LX-02型利祥100g手提式粉粹机（上海江信科技有限公司），RE-52D型旋转蒸发器(上海浦沪仪器厂)，FA-1004型电子天平（上海精科天平厂），WD-9402E型紫外检测器（北京市六一仪器厂），TDL-5Z台式多管架自动平衡离心机（湖南星科科学仪器有限公司），冷凝管，漏斗，分液漏斗，碱式滴定管，250mL锥形瓶2个，150mL 锥形瓶5个，25mL量筒1个，50mL量筒1个，1mL移液管1个，5mL移液管1个，10mL移液管1个，250mL烧杯1个，50mL烧杯3个，100mL容量瓶1个1.3试剂无水乙醇(扬州沪宝化学试剂有限公司），氨水(扬州沪宝化学试剂有限公司），无水乙醚（扬州沪宝化学试剂有限公司），氯仿(西陇化工股份有限公司），二氯甲烷(西陇化工股份有限公司），乙酸乙酯(西陇化工股份有限公司），甲醇（河北四友卓越科技有限公司），冰醋酸（国药集团化学试剂有限公司），甲醛（无锡市展望化工试剂有限公司），浓硫酸(汕头市西陇化工厂有限公司），次硝酸铋，碘化钾（蚌埠化学试剂厂），浓盐酸(汕头市西陇化工厂有限公司），茚三酮，甲基红，溴甲酚绿，硫酸，氢氧化钠以上试剂药品均为国产分析纯。
2方法2.1工艺流程图本实验中亳芍总生物碱的提取工艺流程如下：2.2亳芍总生物碱的提取2.2.1干燥亳芍先剪成薄片状，然后粉粹，干燥箱中干燥至恒重。
2.2.2提取称取25g干燥至恒重的亳芍粉末，以95%乙醇、料液比1:4(g:mL)、85℃冷凝回流提取三次，每次提取4小时。
过滤，合并滤液，减压浓缩回收乙醇至提取液无醇味，浓缩液备用。
2.2.3纯化将在2.2.2中所获生物碱浓缩液加水适当稀释、定容，缓缓加入浓盐酸，使溶液中浓盐酸含量达5%（V/V），摇匀，待充分反应后4000转/min离心5分钟，弃去沉淀，上清液加等体积二氯甲烷萃取萃三次取除杂，水相备用。
2.2.4萃取向2.2.3所获水相中缓慢滴加氨水至溶液显碱性p H≧8.5（精密pH试纸测定），加入等体积氯仿萃取三次，合并氯仿相，减压回收氯仿，得亳芍总生物碱，加氯仿定容至100mL，平均分成2份，备用。
2.3亳芍生物碱的鉴定2.3.1薄层层析取一份总生物碱适当浓缩，在五块G254硅胶薄层板上分别点样，以乙酸乙酯：氯仿：甲醇：氨水=8:2:3:2系统为展开剂薄层层析。
2.3.2显色剂的配制(1)碘化铋钾显色剂的配制：0.85g次硝酸铋溶于10ml冰醋酸，加水40ml，8g碘化钾溶于20ml水，混匀后使用。
(2)甲醛浓硫酸显色剂的配制：30%甲醛溶液0.2mL与10mL浓硫酸混合均匀后使用。
(3)浓硫酸显色剂的配制：直接使用浓硫酸即可。
(4)浓硝酸显色剂的配制：直接使用浓硝酸即可。
(5)茚三酮显色剂的配制：1.5g茚三酮+100mL正丁醇+3.0mL醋酸，溶解混匀即可。
2.3.3紫外检测取出薄层板，吹干薄层板上的展开剂，分别在254nm和365nm紫外灯下照射，记录现象。
2.4亳芍生物碱的含量测定亳芍生物碱的测定，主要参照杨云[20]的方法改进而来。
取另一份亳芍总生物碱，用于测定含量。
亳芍总生物碱的含量测定的计算公式为：－V NaOH）×M×100%÷1000W生物碱总含量=C×(V空白在公式中：C是滴定用NaOH浓度，在本实验中C=0.02mol/L；V NaOH是滴定加入过量硫酸的生物碱所用NaOH体积；V空白是滴定相同浓度相同体积硫酸所用NaOH体积；M是代表生物碱的相对生物分子量，在本实验中选择乌头碱的分子量。
M=654.74为代表计算亳芍总生物碱的含量。
W是样品的质量，在本实验中W=25.8545g2.4.1指示剂的配制取0.1%甲基红的乙醇溶液20mL，加入0.2%溴甲酚绿的乙醇溶液30mL，摇匀，备用。
2.4.2有机试剂溶解精确吸取配制的亳芍总生物碱溶液液10mL，置水浴锅上蒸干，残渣加无水乙醇3mL，再加乙醚5mL，使之溶解.2.4.3滴定精密加入0.01mol/L硫酸10mL，摇匀，置水浴锅上加热，使之充分反应，放置冷却，加蒸馏水15mL和甲基红-溴甲酚绿指示剂2滴，用0.02mol/LNaOH溶液滴定至淡绿色即得，记录数据。
2.4.4空白对照在锥形瓶中精密加入相同浓度相同体积的硫酸溶液（0.01mol/L硫酸10mL），加蒸馏水15mL和甲基红-溴甲酚绿指示剂2滴，用0.02mol/LNaOH溶液滴定至淡绿色即得，记录数据。
3.结果3.1亳芍生物碱的显色鉴定结果亳芍生物碱的显色鉴定结果见表1及图1~7。
表.1亳芍生物碱总提物TLC检测结果[21]Table.1The identifications of alkaloids in Baishao Paeoniae Radix Alba by TLC显色剂检测依据检测结果结论碘化铋钾遇生物碱显橙红色4个橙红色斑点含有生物碱浓硫酸遇乌头碱显紫色2个紫红色斑点可能含有乌头碱类甲醛浓硫酸遇吗啡显橙色至紫色4个紫黑色斑点可能含有生物碱浓硝酸遇秋水碱显蓝色，遇咖啡碱不显色未见显色斑不含秋水仙碱茚三酮遇所有氨基酸及具有游离α-氨基的肽都会产生显色反应产生蓝紫色或（亮）黄色物质未见显色斑不含氨基酸、短肽等254nm紫外可观测到显色斑2个暗斑可能含有生物碱365nm紫外可观测到显色斑2个蓝色荧斑可能含有生物碱图1碘化铋钾显色图2浓硫酸显色图3甲醛浓硫酸显色图4浓硝酸显色Fig.1Colored by Fig.2Colored by Fig.2Colored by Fig.4Colored by Potassium DOVAP formaldehyde/DOVAP nitric acid Heptaiodobismuthate图5茚三酮显色图6254nm紫外下检测图7365nm紫外下检测Fig.5Colored by Fig.6Colored by UV254nm Fig.7Colored by UV365nmninhydrin3.2含量测定结果滴定样品消耗的NaOH的体积V NaOH=9.40mL，滴定空白对照消耗NaOH的体积V空白=9.55mL。
将相关数据代入公式计算亳芍总生物碱总含量=0.02mol/L×(9.55mL−9.40mL)×654.74g/mol÷(1000×25.8545g)×100%×10=7.5972×10-44讨论4.1亳芍生物碱的鉴定碘化铋钾是鉴定生物碱最常用的显色剂，如遇生物碱显橙红色。
在我们的实验条件下，采用碘化铋钾显色，亳芍总生物碱检测到四个明显的橙红色显色斑（图1），说明亳芍中含有生物碱。
但是一些含氮非生物碱物质如氨基酸等遇到碘化铋钾也会显色。
