紫外分光光度法测定药物含量

紫外分光光度法测定维生素B1片的含量一、实验目的1、掌握紫外分光光度法的测定原理；2、了解维生素B1片的含量测定方法；3、掌握溶液制备、仪器操作及数据处理方法。

二、实验原理维生素B1 （Thiamine）是维生素B群中十分重要的一种，对人体神经系统、消化系统、心脏以及肝脏的功能有着重要的影响。

现代医学认为缺乏维生素B1易引起多种神经系统和消化系统疾病，如多发性神经炎、骨骼肌炎、胆汁淤积等。

因此，测定维生素B1 的含量对维生素B1 的药品质量控制及医学研究具有重要的意义。

紫外分光光度法是一种比较常用的药物质量控制方法。

维生素B1 的主要吸收峰位于紫外波长区域，适合进行紫外分光光度法测定。

维生素B1 的紫外吸收峰位于约265nm处（ε=7.5×10^3～7.9×10^3L·mol^-1·cm^-1），故以此为测定波长。

按维生素B1的相对分子质量和吸光系数计算，摩尔吸光系数ε较小，因此，采用长程比对测定法可以有效地提高测定的精度和准确性。

三、实验步骤(一) 试样的制备称取维生素B1片约0.15g（准确称量），将其放在25mL量瓶中，用0.1mol/L的盐酸溶液溶解，摇均并用0.1mol/L盐酸溶液定容至刻度。

(二) 光度计的操作开启UV-2550型紫外分光光度计的电源，按照使用说明将紫外探测器调至265nm，并进行光谱校验。

进入光度计工作界面，将石英比色皿放入样品室，调节光程，读取空白吸光度。

取紫外分光光度计检测轨道上的纯水作为空白，用0.1mol/L盐酸溶液调整到约pH1.5。

(三) 具体测定操作1、测定工作会进行自动计算，记录吸光度A1。

2、再取一组相同体积的样品溶液，重复第1步操作，记录吸光度A2。

3、若A1、A2之间差异大于0.1，则须重采样求数值，并重复第1、2步操作。

4、根据空白吸光度及上述测定步骤所得的吸光度，计算维生素B1 的含量。

四、实验结果及分析按照上述实验操作，测得A1=0.83，A2=0.85，需进行差异校正，先计算中和点pH：Kb=1.20×10^-6pKb=5.92pH=pKb-log([B]+[BH+])[OH-]=[B][OH-]^2/(C-B)=Kb代入数值得[B]=0.026 mol/LpOH=pKa+log([BH+]/[B])pH=14-pOH从而可得pH=1.5+4.72=6.22校正值：K=（εdA/dl）/X式中X系维生素B1 的摩尔质量，则需要通过水合物计算出来，其分子量为328.81。

紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量项⽬五紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量（2学时）⼀实验⽬的1 掌握紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚含量的实验⽅法和操作技能；2 掌握⽚剂的取样⽅法，并正确计算⽚粉的取样范围；熟悉样品前处理⽅法；3 学会采⽤紫外分光光度计测定药物含量的操作⽅法和注意事项。

⼆实验原理维⽣素B1分⼦中具有共轭双键结构，在紫外光区有特征吸收。

在pH2时，最⼤吸收在246nm处,据此，可⽤紫外分光光度法测定维⽣素B1⽚的含量。

三材料与仪器盐酸溶液（9→1000）、电⼦天平、紫外分光光度计、研钵、维⽣素B1⽚四实验内容取本品20⽚，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于维⽣素B125mg），置100ml 量瓶中，加盐酸溶液（9→1000）约7ml，振摇15分钟使维⽣素B1溶解，加盐酸溶液（9→1000）稀释⾄刻度，摇匀，⽤⼲燥滤纸滤过，精密量取续滤液5ml，置另⼀100ml量瓶中，再加盐酸溶液（9→1000）稀释⾄刻度，摇匀，照紫外-可见分光光度法（附录Ⅳ A）。

在 246nm的波长处测定吸光度，按C12H17ClN4OS·HCl的吸收系数（E1cm1%）为421计算，即得。

本品含维⽣素B1应为标⽰量的90.0%~110.0%。

五注意事项1 ⽚剂取样量的计算：取样量=（1±10%）×主药规定量×平均⽚重/每⽚标⽰量2 结果计算式中 A-------供试品溶液的吸光度；E 1cm 1%-------供试品溶液的百分吸收系数；标⽰量（%）=W×100%标⽰量A ×1%×D ×VE1cm 1%×L×WL--------吸收池的厚度；D--------供试品的稀释倍数；V--------供试品溶液的体积；W--------供试品的取样量；W--------⽚剂的平均⽚重。

2 ⽚剂中不溶性辅料对测定有⼲扰，需滤过消除辅料的⼲扰；3 本法采⽤吸收系数法定量，所⽤的分光光度计应经过严格检定，特别是波长准确度和吸光度精度要进⾏校正。

对乙酰氨基酚含量测定的紫外分光光度法以对乙酰氨基酚含量测定的紫外分光光度法为标题引言：对乙酰氨基酚（Paracetamol）是一种常用的非处方药物，具有镇痛和退热的作用。

在医药和化工工业中，对乙酰氨基酚的含量测定对于产品质量的控制至关重要。

本文将介绍一种常用的测定对乙酰氨基酚含量的方法——紫外分光光度法。

一、原理紫外分光光度法是一种常用的分析方法，通过测量样品在紫外光区域的吸收特性来确定其浓度。

对乙酰氨基酚在紫外光区域（约200-400nm）具有吸收峰，根据比比尔-朗伯定律，物质的吸光度与其浓度成正比。

因此，可以通过测量对乙酰氨基酚溶液的吸光度来确定其浓度。

二、仪器和试剂1. 紫外分光光度计：用于测量样品的吸光度。

2. 对乙酰氨基酚标准溶液：已知浓度的对乙酰氨基酚溶液，用于建立标准曲线。

3. 乙酰氨基酚样品：待测样品。

三、操作步骤1. 准备标准曲线：取一系列对乙酰氨基酚标准溶液，分别用紫外分光光度计测量其吸光度，并记录下吸光度与浓度的对应关系。

2. 测量样品：取待测样品，将其溶解于适量的溶剂中，使其浓度在标准曲线范围内。

用紫外分光光度计测量样品的吸光度，并据此确定其浓度。

3. 计算结果：根据标准曲线的关系，将样品吸光度转化为对乙酰氨基酚的浓度。

四、优点和注意事项1. 紫外分光光度法简单、快速、准确，对乙酰氨基酚含量测定的结果可靠。

2. 在进行测定时，应注意选择合适的溶剂，以确保样品的溶解度和吸光度符合要求。

3. 标准曲线的制备需要多次测量和稀释，确保结果的准确性。

4. 实验操作过程中要注意安全，避免接触皮肤和吸入对乙酰氨基酚溶液的蒸汽。

结论：紫外分光光度法是一种常用的测定对乙酰氨基酚含量的方法，通过测量样品在紫外光区域的吸光度来确定其浓度。

该方法简单、快速、准确，适用于对乙酰氨基酚含量的质量控制和检测。

在实际应用中，需要注意选择合适的溶剂和稀释倍数，以及进行多次测量和稀释，以保证结果的准确性。

紫外-可见分光光度法紫外分光光度：紫外光区特定波长内的吸收度，被测物质或杂质的定性和定量紫外-可见分光光度计的工作波长：190-900nm近紫外区（氘灯）200-400nm 可见光区（碘钨灯）400-850nm定量分析:①最大吸收波长处测出吸收度②对照品或百分吸收系数算出被测物或杂质的含量双光束光栅型紫外-可见分光光度计波长准确度误差±0.5nm一、样品测定：⑴吸收系数测定:①按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试液②在规定的波长测定其吸收度③计算吸收系数，应符合规定范围⑵鉴别与检查：按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定测定供试品在有关波长处的最大或最小吸收，或最大吸收峰值或最大或最小吸收的比值，应符合规定⑶含量测定：①对照品比较法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法分别配制对照品和供试品溶液注：对照品中所测成分的量应在供试品中所测成分标示量的(100±100)%以内㈡用同一溶剂，在规定的波长处测定供试品和对照品的吸收度②吸收系数法㈠按食品药品监督管理局标准的该药品项下规定的方法配制供试品溶液㈡在规定波长（±1nm）处测定其吸收度㈢按食品药品监督管理局标准的该药品在规定的条件下给出的吸收系数计算含量具体过程对照品比较法①调节波长测吸光度（吸光度最大波长应在该品种项下规定的波长±2nm以内）②A样品的吸光度:A对照品的吸光度= C样品:C对照品(C为浓度，mg/ml)C样品=A样品的吸光度×C对照品/A对照品的吸光度C样品×A对照品的吸光度= A样品的吸光度×C对照品P﹪（所含物质占标示量的百分比）= C供试品-稀释后的对照品×A对照品的吸光度/ A 样品的吸光度×C对照品×供试品的标示含量例1奥硝唑含量（紫外分光光度计）：⑴对照品①取0.0113g奥硝唑溶于100ml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③再用蒸馏水稀释至50 ml在319nm处测得对照品A（吸光度）=0.465⑵供试品①取5ml供试品于100lml的容量瓶中稀释至100ml②从容量瓶中取出5ml③用蒸馏水稀释至25ml319nm处供试品A1=0.413 供试品A2=0.417⑶①P﹪（所含物质占标示量的百分比）=0.413供试品的吸光度ⅹ(0.0113g/100ml)对照品浓度ⅹ(5/50) / 0.465对照品的吸光度ⅹ(5ml/100ml) ⅹ(1/25ml)ⅹ0.5g﹪ml标示含量供试品浓度ⅹ 100﹪=100.36﹪注：0.5﹪（供试品的标示含量）表示100ml 0.5g②P﹪= P1﹪+ P2﹪ /2。

紫外可见分光光度法测定药物含量的计算实例药物A的含量可以通过紫外可见分光光度法来测定。

下面是一种计算实例，以帮助理解该方法的操作流程以及计算原理。

假设我们有一批药物A的试样，需要测定其中药物A的含量。

我们首先需要准备一定浓度的标准品溶液，用于构建工作曲线。

标准品溶液的浓度可以根据药物A的理论含量来确定。

操作步骤如下：1. 首先，我们准备标准品溶液。

假设药物A的理论含量为100mg/mL，我们可以准备一系列含量递增的标准品溶液，如10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL等等。

可以根据需求自行决定浓度的范围和递增量。

2.准备工作曲线。

我们将取一定量的每个标准品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定吸光度值。

通常选择药物A在紫外可见光谱范围内的最大吸收波长（波峰）进行测定。

得到一系列标准品溶液浓度与吸光度值的对应关系。

通过得到的数据，我们可以得到一个工作曲线，在浓度与吸光度之间建立线性关系。

3.测定药物A的样品。

我们将取一定量的待测样品溶液，利用紫外可见分光光度计进行测定，测定样品的吸光度值。

4.根据工作曲线，将样品的吸光度值代入，同时参考工作曲线上对应吸光度值的浓度，可求得样品的浓度。

通过浓度和待测样品溶液的体积，可以计算出药物A的含量。

标准品溶液浓度：10mg/mL，20mg/mL，30mg/mL，40mg/mL，50mg/mL对应的吸光度值：0.5，1.0，1.5，2.0，2.5待测样品溶液吸光度值：1.8根据工作曲线，将待测样品溶液吸光度值代入，找到对应的浓度。

从工作曲线可以看出，吸光度值1.8对应的浓度在30mg/mL和40mg/mL之间，我们可以利用线性插值法来估算浓度。

(1.8-1.5)/(2.0-1.5)=(C-30)/(40-30)C=((1.8-1.5)/(2.0-1.5))*(40-30)+30C = 36mg/mL假设我们测量的样品溶液体积为10mL，根据浓度和体积计算，可得到样品中药物A的含量为 36mg/mL * 10mL = 360mg通过以上计算，我们得到样品中药物A的含量为360mg。