毛细管电泳扫描伏安电化学法分离检测肾上腺素、氯丙嗪和异丙嗪

毛细管电泳法分离检测三种肾上腺素类化合物余丽双;褚克丹;许惠凤【摘要】采用毛细管电泳法对去甲肾上腺素、去氧肾上腺素和异丙肾上腺素三种肾上腺素类化合物进行分离检测.在电泳运行缓冲液为100mmol/L NaH2PO4（pH=5.2）中,当分离电压为22kV时,三种肾上腺素类化合物在12min内达到基线分离.在最优的条件下,各组分的峰面积与待测物浓度在0.02-50μg/mL范围内呈良好的线性关系,检测限均为0.01μg/mL.将该方法用于加标尿样中上述三种分析物的测定,回收率为94.89%-105.9%.%A method based on capillary electrophoresis was developed for separation and determination of epineph rine′s analogs namely norepinephrine,phenylephrine and isoprenaline.Under the following conditions： running buffer of 100 mmol/L NaH2PO4（pH=5.2） and separated voltage of 22 kV,the analytes were well separated in 12 min.Excellent linearity was observed in the range from 0.02 to 50 μg/mL for these three analytes,and the detection limits were all 0.01 μg/mL.The recoveries of three analytes in spiked human urine were 94.85%-105.9%.【期刊名称】《聊城大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2011(024)003【总页数】3页(P15-17)【关键词】去甲肾上腺素;去氧肾上腺素;异丙肾上腺素;毛细管电泳【作者】余丽双;褚克丹;许惠凤【作者单位】福建中医药大学药学院,福建福州350108;福建中医药大学药学院,福建福州350108;福建中医药大学药学院,福建福州350108【正文语种】中文【中图分类】O657.80 前言去甲肾上腺素（NOR）、去氧肾上腺素（PHE）及异丙肾上腺素（ISO）三者均属于拟肾上腺素药物，能引起类似肾上腺素能神经兴奋的效果.肾上腺素和拟肾上腺素与人和动物机体的各种应激状态及许多疾病有关，它们不仅直接参与活动如运动、记忆等，而且参与血压、血管扩张和心率呼吸等植物神经功能的调控，还与一些功能性疾病如精神分裂症等有关［1，2］.因此，对肾上腺素类化合物的测定在临床医学、生理机能等方面均具有重要的现实意义.目前肾上腺素类化合物的测定方法有分光光度法［3］、高效液相色谱法［4，5］和毛细管电泳法［6，7］等.但毛细管电泳法用于同时分离检测NOR、PHE和ISO三种肾上腺素类化合物的报道尚未见到.本文利用毛细管电泳法同时分离检测NOR、PHE和ISO，并将该方法用于加标尿样中上述三种肾上腺素类化合物的测定，回收率为94.89%-105.9%，结果令人满意.1 实验部分1.1 试剂与仪器NOR、PHE和ISO为中国药品生物制品检定所产品；其他试剂均为分析纯；实验用水为超纯水.准确称取一定量NOR、PHE和ISO溶解在醋酸－水溶液（体积比1：25）中，配制成500μg／m L储备液，保存于冰箱中.使用时均用一定浓度的运行缓冲液稀释到所需浓度.CAPEL 105型毛细管电泳仪（俄罗斯刘梅克斯公司）；828型精密酸度计（美国奥立龙公司）；KQ-250B型超声波清洗器（昆山市超声波仪器有限公司）.1.2 实验方法1.2.1 样品制备.人尿样品中添加三种肾上腺素类化合物至50μg／m L.随后，将加标人尿样品置于离心机中，转速2 000 rpm，时间10 min.离心后，收集上清液过滤后直接进样.1.2.2 电泳条件.运行缓冲液100 mmol／L Na H2 PO4（p H＝5.2）；分离电压22 k V；压力进样30 mbar（9 s）；紫外检测波长280 nm.2 结果与讨论2.1 检测波长的选择将NOR、PHE和ISO三种分析物进行紫外扫描，三种分析物在280 nm附近均有最大吸收值，本实验选择280 nm为最佳检测波长.2.2 缓冲液类型、p H和浓度的选择试验了硼酸、柠檬酸钠、磷酸二氢钠和磷酸氢二钠缓冲液等几种缓冲溶液对分析物分离效果的影响，结果表明在磷酸二氢钠溶液中三种分析物才能基线分离，且峰形最佳，所以选择磷酸二氢钠缓冲液为运行缓冲液.在p H 4.3-5.8考察了缓冲液p H 值对分离分析的影响，结果表明，在p H 4.3-5.2范围内，三种分析物均可基线分离，但随着p H值的增大其分析时间减少，分离度亦随之减小.当p H值大于5.2时，NOR和PHE不能达到基线分离.综合考虑分离度和分析时间本实验选择缓冲溶液的最佳p H值为5.2.通常随着缓冲液浓度增加，迁移时间增加，分离度和分离因子得到改善.但过高浓度的缓冲液会产生大量的焦耳热，导致峰展宽产生拖尾现象.综合考虑分离度、分析时间和峰型，本实验选择100 mmol／L Na H 2 PO4（p H＝5.2）为最佳运行液浓度.2.3 分离电压和进样时间的影响实验了不同分离电压18 k V、20 k V、22 k V和25 k V对分离的影响，实验结果表明，分离电压越大，迁移时间越短，但NOR和PHE的分离度变小，当分离电压为25 k V，两者不能达到基线分离；而分离电压较低时，分析时间较长，且峰展宽.故选择22 k V为分离电压.考察进样时间在5-20 s（30 mbar）对峰面积影响.随着进样时间的增加，峰面积增大，当进样时间超过9 s，峰形展宽，分离效率下降，故以9 s（30 mbar）为最佳进样时间.在最佳条件下三种分析物标准混合液的电泳图见图1，三种物质在12 min内达到基线分离.2.4 重现性、线性范围和检出限在最优化的条件下，对三种肾上腺素类化合物混合标准液重复进样分析，考察方法的重现性.5次测得NOR、PHE和ISO的迁移时间和峰面积的相对标准偏差（RSDs）分别为1.28%、1.33%、2.28%和2.18%、3.29%、2.22%.图1 混合标准品的毛细管电泳分离图1.去甲肾上腺素；2.去氧肾上腺素；3.异丙肾上腺素在选定的最优化条件下，对一系列标准混合液进行分析测定.以电泳谱图的峰面积分别对其浓度进行回归分析，所得到两者的线性回归方程、线性相关系数及检出限如表1所示.2.5 加标样品的测定按照2.2的处理方法，在最佳分离分析条件下，对加标尿样中的NOR、PHE和ISO进行分离检测.对加标尿样进行回收率实验，测得回收率分别为94.89%、95.84%和105.9%，说明本方法是准确、可靠的.表1 回归方程、线性范围和检出限分析物回归方程相关系数线性范围检测限Y ＝a＋bX（Y：m AU；X：μg／m L） R2 （μg／mL）（μg／m L）去甲肾上腺素 Y＝61 985 X＋0.134 7 0.999 1 0.02-50 0.01去氧肾上腺素 Y＝53 038 X＋0.173 3 0.999 7 0.02-50 0.01异丙肾上腺素 Y＝32 935 X ＋0.445 2 0.997 0 0.02-50 0.013 结论本文建立了NOR、PHE和ISO三种肾上腺素类化合物同时分离检测的毛细管电泳检测方法，具有选择性好、操作成本低、分析时间短、重现性好等优点.对于背景复杂的尿样，该方法较前处理简单，干扰少，分析的准确性和重现性等令人满意，适合用于尿样的分析，有望进一步用于三种肾上腺素类化合物药物代谢动力学的研究.参考文献【相关文献】［1］ Burtis C A，A shwood E R.Tietz Testbook of Clinical Chemistry［M］.Philadelphia：Saunders W B，1998.［2］江兴权.拟肾上腺素药物对不同鱼离体心脏活动的影响［J］.湛江海洋大学学报，1989，7（5）：454.［3］孟召辉，王素红.可见分光光度法测定肾上腺素的含量［J］.南阳师范学院学报，2002，28（6）：39-40.［4］张璐璐，冯芳，叶小敏，等.高效液相色谱－荧光法测定小鼠脑组织中单胺递质及其相关物质［J］.中国药科大学学报，2010，41（4）：367-371.［5］陈福南，张迎雪，章竹君，等.高效液相色谱化学发光检测人体血清及尿样中的盐酸肾上腺素［J］.分析化学，2005，33（12）：1 771.［6］刘彦明，曹俊涛，郑艳丽.毛细管电泳间接电致化学发光灵敏检测去甲肾上腺素及其在尿样分析中的应用［J］.高等学校化学学报，2008，29（1）：81.［7］黄颖，张晓丽，占春荣，等.毛细管电泳－安培检测法测定3种拟肾上腺素药物［J］.色谱，2010，28（11）：1 084-1 088.。

高效毛细管电泳法测定肾上腺素和去甲肾上腺素
于遐;罗振
【期刊名称】《山东医科大学学报》
【年(卷),期】1994(32)4
【摘要】探讨了用高效毛细管电泳法（ＨＰＣＥ）测定肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）的最佳分离条件，即以ｐＨ６．０的硼酸溶液加入０．１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ和２０％丙二醇为载体缓冲液，ＮＥ与Ｅ的浓度在０．０１～０．０５μｇ／ｍｌ内与峰面积之间有良好的线性关系（ｒＮＥ＝０．９９９０，ｒＥ＝０．９９８７），重现性结果为日内ＲＳＤＮＥ＝３．５２％，ＲＳＤＥ＝４．８１％；日间ＲＳＤＮＥ＝６．４２％；ＲＳＤＥ＝７．２７％。

【总页数】3页(P347-349)
【作者】于遐;罗振
【作者单位】不详;不详
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
【相关文献】
1.高效毛细管电泳法分离肾上腺素和去甲肾上腺素 [J], 闫滨;张秋红;张惠云
2.示波极谱滴定法测定盐酸肾上腺素和重酒石酸去甲肾上腺素 [J], 孟昭仁;奚洪民
3.导数-同步荧光光谱法测定尿液肾上腺素和去甲肾上腺素 [J], 吴惠毅
4.液相色谱-串联质谱法测定血浆中甲氧基肾上腺素和甲氧基去甲肾上腺素 [J], 李艳;许舒欣;刘海培;张远清;胡玮;李小强;程文播
5.高压液相电化学法测定血浆肾上腺素和去甲肾上腺素 [J], 胥达;吴淑庆;王新兴;冷雪;杨发青;钱令嘉
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

手性药物对映体的毛细管电泳/电化学分离检测许迪明谢天尧*中山大学化学与化学工程学院，广州，510275摘要本文报道了以未涂层融硅石英毛细管(50ｃｍ×75μｍ)为分离柱，以8mmol/L的柠檬酸＋5mmol/L 的NaOH＋8mmol/L -CD溶液为电泳运行液，分离电压＋12.5ｋＶ，检测电压0.80Ｖ，建立了手性药物去甲肾上腺素对映体的毛细管电泳/电化学分离检测方法，对缓冲溶液的种类、浓度、ｐＨ、分离电压对拆分效果的影响进行了讨论。

关键词毛细管电泳去甲肾上腺素对映体电化学检测前言手性对映体在生理过程中的不同作用越来越被人们认识，许多手性药物的有效成分只是其两个对映体中的一种，而另外那种对映体是无效或者有毒的。

20世纪60年代,镇静药肽胺哌啶酮(反应停)当时以消旋体用作缓解妊娠反应药物,但后来在欧洲发现曾服用此药的孕妇产下四肢呈海豚状的畸形儿,成为震惊国际医药界的悲惨事件。

后来研究表明,该药的两个对映体中只有Ｒ构型对映体具有镇静作用,Ｓ构型对映体则是一种强致畸剂[1]。

因此手性药物的研究具有重要的意义。

对手性药物的分离检测是手性药物研究中关键环节，建立快速、简便、高效的手性药物分离检测方法是目前分析化学研究的一个热点和难点。

目前手性对映体的分析方法包括：薄层色谱、气相色谱、高效液相色谱和超临界色谱[2]。

毛细管电泳(Capillary electrophoresis)是近十年发展起来的一项技术，与上述方法相比，它具有分离效能高、又可进行多种分离模式的选择、试剂和样品用量少、环境友好和相对较低的操作成本等优点，是极具潜力和发展前景的手性药物分离检测新途径新方法[3]。

去甲肾上腺素是一种急救药，具有很强的血管收缩作用，使全身小动脉与小静脉都收缩(但冠状血管扩张)，外周阻力增高，血压上升。

临床上主要利用它的升压作用，静滴用于各种休克(但出血性休克禁用)，以提高血压，保证对重要器官(如脑)的血液供应。

氯丙嗪的检测原理氯丙嗪，化学名为4-（2-氯苯基）-1- [2-（二甲氨基）乙基]哌嗪，是一种典型的兴奋剂类药物，常见的商品名为“氯丙嗪”。

它是一种可通过药典标准测定的药物，有较为简单、经济、有效的检测方法。

氯丙嗪的检测原理主要基于其分子结构和性质的特点，下面将详细介绍。

氯丙嗪分子结构中的苯环和哌嗪环含有较多的芳香环结构，这些结构对一些试剂具有很好的吸附作用。

在氯丙嗪的检测过程中，通常采用的试剂是费林试剂（Fluorescamine），它是一种具有高度灵敏性的荧光试剂。

氯丙嗪的检测可以分为两个步骤：样品预处理和检测步骤。

首先是样品预处理。

样品预处理的目的是提取出原生态中的氯丙嗪分子，并去除潜在的干扰物质。

常用的方法有液液萃取、固相萃取等。

例如，当样品为生物体组织时，可以通过离心及细胞破壁等方法将氯丙嗪从生物体组织中提取出来。

当样品为尿液或血液等液体时，可以通过液液萃取来提取出氯丙嗪。

其次是检测步骤。

在检测过程中，常见的方法是荧光法和高效液相色谱法（HPLC）。

这里我们重点介绍荧光法。

荧光法是目前较常用的检测氯丙嗪的方法。

其基本步骤如下：1. 取一定量的样品并加入费林试剂。

费林试剂与氯丙嗪分子之间有较强的化学反应，形成产物。

2. 将反应体系进行混合和搅拌，使其充分反应。

3. 利用荧光光谱仪检测产物的荧光强度。

氯丙嗪的荧光强度与其浓度呈正相关，因此可以根据荧光强度来确定氯丙嗪的含量。

在荧光法中，需要注意的是费林试剂的选择、试剂的浓度、反应时间等因素，这些因素对于提高检测的灵敏度和准确性有重要作用。

此外，样品预处理过程中的提取效果和样品的保存条件等也会对检测结果有影响，因此在实际操作中需要仔细把握这些细节。

总结起来，氯丙嗪的检测原理主要基于其分子结构和性质的特点，利用荧光试剂与其发生特定的化学反应，通过检测反应产物的荧光强度来确定氯丙嗪的含量。

检测中需要注意样品预处理和试剂选择等因素，以提高检测的灵敏度和准确性。

镇静剂类药残留测定方法（一）(1)毛细管电泳法(capillary electrophoresis， CE) 毛细管电泳分别技术辨别率高、分别效率高、样品用量小、分别速度快，在残留分析中有一定的应用，但其精确性和敏捷度不如高效液相色谱(HPLC)，同时必需带电荷的物质才可以用毛细管电泳测定，存在一定的限制性。

巴比妥类、苯二氮卓类、吩噻嗪类和丁酰苯类，都具有酸碱性，理论上都可以用毛细管电泳分析。

岳美娥等采纳毛细管区带电泳同时测定尿液中苯巴比妥、、、、、丁巴比妥、异戊巴比妥、环已烯乙烯基巴比妥酸和N-甲基苯乙烯基巴比妥酸等9种巴比妥类药物。

以含4 mg/mL β-环糊精、2 mg/mL a-环糊精的20 mmol/L(pH 10)为基础电解质，分别电压为25kV，操作温度为25℃，200nm波长下紫外检测。

讨论发觉，在高pH下，酸性分析物解离程度增大，负电荷增多，表观电泳迁移率降低，出峰时光延伸； pH 9.5时分析物在较短时光内取得基线分别。

综合考虑迁移时光和分别度，挑选pH 10.0。

办法LOD为0.8～3.5 μg/mL，各巴比安类药物回收率在86.8%～101.4%之间。

Wang等测定尿液中巴比妥类药物，60 mmol/L pH 11.0甘氨酸NaOH为基础电解质，10 mmol/L pH 5.5甘氨酸-HCl为上样缓冲液，司可巴比妥为内标，分别电压12.5kV，进样条件：1.4psi、 10s；毛细管长60.2cm，直径75um，检测波长214nm。

办法LOD为0.26～0.27μg/mL，LOQ为0.87～0.92μg/mL；巴比妥回收率为90.27%～106.36%，苯巴比妥回收率为93.05%～113.60%。

Bechet等建立了一-种检测苯二氮卓类药物的毛细管胶束电动色谱法。

分别缓冲液包括甘氨酸和三乙醇胺水溶液(pH9.0)，SDS、甲醇、、的浓度对于迁移时光和辨别率的影响也得到讨论。

毛细管区带电泳拆分肾上腺素类药物
刘长海;孙青龑;李翔;张国庆;王彬;柴逸峰
【期刊名称】《分析试验室》
【年(卷),期】2007(26)7
【摘要】考察各种因素对β-环糊精及其衍生物分离肾上腺素类药物的影响。

采用毛细管区带电泳法(CZE)对去甲肾上腺素、肾上腺素和异丙肾上腺素的手性分离进行研究。

未涂渍熔融石英毛细管50μm×58.5 cm(有效长度50 cm);温度20℃,操作电压30 kV,正极进样50 mbar×3 s,检测波长204 nm。

β-环糊精(-βCD)及其两种衍生物作为手性选择剂。

异丙肾上腺素得到了基线分离,肾上腺素和去甲肾上腺素未分离。

【总页数】3页(P64-66)
【关键词】毛细管区带电泳;β-环糊精;去甲肾上腺素;肾上腺素;异丙肾上腺素;手性拆分
【作者】刘长海;孙青龑;李翔;张国庆;王彬;柴逸峰
【作者单位】第二军医大学药学院;第二军医大学东方肝胆外科医院
【正文语种】中文
【中图分类】O657.8
【相关文献】
1.毛细管区带电泳分离测定肾上腺素和去甲肾上腺素 [J], 王京芳;刘小花;汪振辉
2.毛细管区带电泳法拆分异丙肾上腺素对映体 [J], 林秀丽;主沉浮
3.肾上腺素对映体的毛细管区带电泳法拆分 [J], 吴俊森;林秀丽;林振涛
4.红霉素作为毛细管区带电泳手性选择剂拆分两种联苯双酯类药物 [J], 侯经国;何天稀;刘慧玲;邓华陵;毛学峰;杜新贞;高锦章
5.毛细管区带电泳法研究肾上腺素类药物的手性分离 [J], 王洪;胡汉芳;丁天惠因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

毛细管电泳法测定胺类手性药物结合常数
金瑛芝;王园朝
【期刊名称】《杭州师范大学学报（自然科学版）》
【年(卷),期】2008(007)004
【摘要】采用毛细管区带电泳法,在20℃温度下,选择含不同浓度高磺化-β-环糊精(HS-β-CD)磷酸盐缓冲溶液(磷酸盐浓度50 mmol/L,pH2.50),分别试验了HS-β-CD与伯胺、仲胺和叔胺三种胺类手性药物萘乙胺、盐酸异丙肾上腺素和扑尔敏的分离情况.采用双倒数法求解结合常数,结果表明HS-β-CD与叔胺类药物扑尔敏的结合常数最大,并对实验结果进行了讨论.
【总页数】3页(P284-286)
【作者】金瑛芝;王园朝
【作者单位】杭州师范大学,材料与化学化工学院,有机硅化学与材料技术教育部重点实验室,浙江,杭州,310036;杭州师范大学,材料与化学化工学院,有机硅化学与材料技术教育部重点实验室,浙江,杭州,310036
【正文语种】中文
【中图分类】TQ460.7+2
【相关文献】
1.毛细管电泳电化学淌度移动法测定利尿剂和牛血清白蛋白结合常数 [J], 郑丽辉;郑新宇;童萍;陈国南;张兰
2.亲和毛细管电泳法测定牛血清白蛋白和加替沙星的结合常数 [J], 姚之;张浩波;武
艺;郭怀忠
3.毛细管电泳法测定结合常数的研究进展 [J], 赵艳芳;傅崇岗;刘爱林
4.亲和毛细管电泳法测定3种黄酮类化合物与人血清白蛋白的结合常数 [J], 周新;汪子明;邹明强;郑静;宋大千;郑健;王璐;张寒琦
5.亲和毛细管电泳法测定茶碱人血清白蛋白的结合常数 [J], 周大炜;王怀锋;李发美因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。