万泰第四代HIV抗原抗体诊断试剂盒

第四代与第三代 HIV ELISA试剂在 HIV筛查工作中的应用[摘要] 目的对比第四代与第三代HIV ELISA试剂在HIV筛查工作中的应用效果。

方法将西城区2018-2020年236005筛查标本用两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂进行HIV检测,2018-2020西城区筛查HIV样本，双试剂阳性率为0.03%，四代试剂初测阳性率为0.09%，三代试剂初测阳性率为0.04%，四代试剂重试阳性率57.1%，三代试剂重试阳性率83.2%，四代试剂确证反应阳性率为24.9%，三代试剂阳性反应阳性率49.1%。

结论使用灵敏度更高的四代HIV试剂盒可以缩短HIV检测的窗口期,诊断早期感染、避免遗漏具有一定意义。

[关键词] 四代HIV试剂 HIV检测引言获得性免疫缺陷病是由免疫缺陷病毒 (HIV)感染所导致的致命性疾病[1]，近年来HIV感染率不断提高，防控形势异常严峻，因此抗体检测尤为重要[2]，其中HIV检测晚是导致患者死亡及传播的主要因素[3]，众多的HIV筛查检测方法中，酶联免疫吸附试验（enzyme linked immunosorbentassay，ELISA）是常用方法，高特异性、高灵敏度、可重复性等优势，操作方便，适用大规模筛查[4]，第四代抗原抗体检测试剂盒广泛使用，同时检测 HIV 抗原和抗体，比使用第3代 HIV试剂缩短几天到2周[5]，研究将西城区2018-2020年236005筛查标本用两种酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂进行HIV检测,现将结果报道如下;一.资料与方法1 资料选取2018-2020年西城区各HIV筛查单位中同时使用第四代与第三代HIV试剂盒进行筛查数据，共236005份。

2试剂四代试剂盒使用北京万泰生物HIV抗原抗体试剂盒，三代试剂盒使用丽珠HIV检测试剂盒。

3仪器设备酶标仪，洗板机，恒温水浴箱。

4 实验方法（1)四代试剂盒检测方法：按试剂盒内说明书进行操作。

2种不同方法检测HIV抗体结果比较作者：朱子平来源：《中外医疗》 2011年第34期朱子平(娄底市中心医院湖南娄底 417000)【摘要】目的研究使用不同检测方法对HIV抗体进行初筛检测,结果有无显著性差异。

方法通过使用酶联免疫法和化学发光法对2794份相同的艾滋病高危人群人员的血清样品进行HIV抗体初筛检测,对2种检测方法的检测结果进行比较。

结果酶联免疫法检测结果为阳性47份,阴性2747份,阳性率为1.682％,化学发光法检测结果为阳性55份,阴性2739份,阳性率为1.968％,酶联免疫法检测结果阳性而化学发光法检测结果阴性的样品有11份,酶联免疫法检测结果阴性而化学发光法检测结果阳性的样品有19份,经配对c2检验,酶联免疫法和化学发光法初筛检测HIV抗体的阳性率无显著性差异。

酶联免疫法和化学发光法2种检测方法初筛检测结果共同阳性有36份,共同阴性有2728份,总符合率为98.93％。

结论提示初筛检测HIV抗体时,酶联免疫法和化学发光法可互相参考,也可互相替代。

【关键词】初筛检测 HIV抗体酶联免疫法化学发光法【中图分类号】 R446.6 【文献标识码】 A 【文章编号】 1674-0742(2011)12(a)-0003-02检测血清中HIV抗体,使用不同方法和不同生产厂家的试剂,结果可能有一定的差异,检测过程受到酶标板包被的抗原种类和数量、酶标板材料、检测人员、仪器、环境条件的不同影响时,会产生不同的检测结果;受标本溶血、污染、感染了与HIV抗原决定簇有交叉反应的传染病病原体等的影响,可能会产生假阳性结果[1]。

为研究酶联免疫法与化学发光法对HIV抗体的初筛检测结果是否有差异性,通过对2794份相同的艾滋病高危人群人员的血清样品进行HIV抗体初筛检测比较,结果如下。

1 对象与方法1．1 对象随机抽查艾滋病高危人群人员血样2794份,抽血后离心,吸取血清。

1．2 试剂使用北京万泰生物药业股份有限公司生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(双抗原夹心酶联免疫法)和美国雅培公司配套生产的人类免疫缺陷病毒抗体诊断试剂盒(化学发光法)。

艾滋病实验诊断进展联合国艾滋病规划署和世界卫生组织联合发布报告指出，2006年全球艾滋病病毒携带者人数为3 950万，2006年新增艾滋病感染者430万，其中40％为15~24岁的年轻人，2006年全球有290万人死于艾滋病。

卫生部通报我国艾滋病的流行现状，截至2006年10月31日，全国历年累计报道艾滋病感染者183 733例，其中艾滋病病人40 667例，死亡12 464例。

艾滋病的流行造成对健康的巨大危害和社会经济的破坏。

我国非常重视艾滋病的防治工作，寻求更加灵敏、特异、准确的检测方法。

自1985年第一个艾滋病诊断试剂盒问世以来，艾滋病实验诊断技术有了很大的进步，下面就艾滋病实验诊断的进展作一综述。

1 艾滋病病原简介艾滋病的病原微生物是艾滋病病毒(HIV)，为带有包膜的RNA逆转录病毒，在分类上属于逆转录病毒科慢病毒属。

HIV呈球形或卵形，直径100～130 nm，由包膜和核心两个部分组成。

包膜蛋白包括外膜糖蛋白（gp120）和跨膜糖蛋白（gp41），核心部分由核壳蛋白、两个相同拷贝的核酸基因组－RNA和酶类组成。

CD4是HIV最重要的靶细胞，在CD4淋巴细胞内逆转录酶将RNA逆转录成前病毒DNA，接着整合到宿主细胞基因组DNA中，而后和细胞一起复制。

2 免疫学抗体抗原检测2.1 抗体检测：HIV抗体一般在感染4周后逐渐出现，可延至终生，是人类重要的检测指标，相比近年来逐步发展的用免疫技术测定其感染因子，检测HIV 特异性抗体仍是诊断艾滋病的重要依据[1]。

2.1.1 HIV抗体检测初筛实验：（1）酶联免疫吸附实验(ELISA)：ELISA法敏感性好且操作简便。

目前酶免法测HIV抗体试剂已发展到第四代，市售试剂有荷兰生物梅里埃HIV-1/2抗体检测试剂、美国的雅培、上海科华、北京万泰等其敏感度几乎100%，特异在98.10%~99.80%之间，并且适用于批量操作，缺点是有一定假阳性。

（2）免疫荧光法(IFA)：借助抗体反应进行荧光染色的诊断技术，由于非特异荧光较难去除等缺点，因而仅用于HIV抗体初筛，阳性结果需经确证实验证实，该法操作简便、敏感性高、特异性比ELISA法高。

探讨乳糜血液对第四代HIV试剂检测结果的影响及检验对策摘要：目的：研究分析脂肪血标本对第四代HIV酶联免疫吸附试验（ELISA）检测HIV抗原/抗体的影响及检验对策。

方法：选择在2012年1～12月间收集正常标本、轻度、中度、重度乳糜样本各20例作为研究对象，在不同程度的乳糜血浆中加入一定浓度的HIV阳性血清，按保存时间顺序，从不同血浆位置取样检测，对检测灵敏度和OD值进行比较。

结果：不同程度的乳糜血液随放置时间的延长，不同位置的检测结果有明显差异，轻度乳糜血液上层标本在立即检测时，就与正常标本检测结果有显著差异（P<0.05），中、重度乳糜标本上层血液在立即检测时，与正常标本有极显著差异（P<0.01）；轻度乳糜血液中、下层标本在立即检测和1d时，与正常标本检测结果无差异，从第3d时，与正常标本检测结果出现显著差异（P<0.05）；中、重度乳糜标本中、下层血液在立即检测时，与正常标本无明显差异，从第1d起，分别出现显著和极显著差异。

结论：乳糜标本的乳糜程度对ELISA法4代HIV试剂有明显影响，检测乳糜血液时，加样应避开乳糜层，尽量从血浆中下部分取样，且轻度乳糜血液检测时间不超过3 d，中度检测时间不超过1d，重度的必须立即检测。

关键词：乳糜；ELISA；HIV人类免疫缺陷病毒（Human Immunodeficiency Virus，HIV），反转录病毒科，慢病毒属（Lentivirus）。

该病毒主要破坏人体的免疫能力，导致免疫系统失去抵抗力，而导致各种疾病及癌症并得以在人体内生存，发展到最后，导致艾滋病（获得性免疫缺陷综合症），主要经输血，针刺，吸毒等传播。

因敏感、特异、操作简便、重复性好等优点，已在疾病诊断、科研等医学领域中得到广泛应用[1]。

ELISA方法检测对标本的要求是：空腹抽血，标本不能乳糜。

但是在血站日常工作中，无偿献血一般都在餐后进行，所以经常会遇到乳糜的标本，为了了解乳糜标本对第四代国产HIV检测试剂的影响，我们对新型HIV试剂进行了乳糜因素对试剂检测结果影响的评估，并针对乳糜标本的特点，提出一种检验对策，现将结果报告如下：1材料与方法1.1 一般资料临床收集2012年1～12月我单位检测的无偿献血者标本，以淡黄色透明血浆标准管进行清晰度比较，与标准管清晰度一致的稀释倍数为该血浆的乳糜指数，乳糜指数≤2为轻度乳糜血液，3～5为中度乳糜血液，>5为重度乳糜血液[3-5]。

HIV抗体检测确证试验结果分析马永娟;王红;周迪【摘要】目的:对本艾滋病确证实验室2007～2015年检测的我市507例HIV抗体待确证样品的WB试验的阳性、阴性、不确定结果分析,了解我市艾滋病流行现状HIV感染者人群分布,分析艾滋病病毒(-HIV)抗体不确定结果的特点提出更加合理的处理方法,对阴性结果分析查找造成筛查假阳性的原因.方法:对初筛阳性血清用双ELISA或ELISA和胶体金试验复检,任一复检试验阳性的血清再用WB试验确证,对确证试验结果不确定者进行随访复检.结果:507例样本经WB确证397份HIV-1抗体阳性,不确定45份,阴性65份.397例确证试验阳性标本经流行病学调查79.8％(317/397)是经男男性行为传播.45例WB不确定样本中要集中在孕产妇占33.3％(15/45)献血员占22.2％(10/45) VCT占20％ (9/45),在随访的25例被检测中有3例明确高危行为者随访4复检进展为WB确证阳性,其余均为阴性.在WB结果阴性的65的样本,采用ELISA+胶体金或双ELISA复检73.8％ (48/65)结果为一阴一阳,并且ELISA的S/CO值在1～6之间.结论:性接触传播尤其是男男性接触者(MSM)是我市报告HⅣ/AIDS的主要传播途径;不确定样品主要集中在孕妇及献血员及VCT人群多是非特异性免疫反应,在低流行人群尤其孕产妇HIV抗体不确定样本最终以阴性转归为主;胶体金和ELISA复检可排除大部分初筛假阳性,但两种复检试验均存在一定的假阳性,初筛实验室应严格进行质量控制选用敏感性和特异性高、质量稳定的试剂.【期刊名称】《黑龙江医药科学》【年(卷),期】2016(039)004【总页数】3页(P79-80,82)【关键词】HIV抗体;确证试验(WB);不确定;筛查试验假阳性【作者】马永娟;王红;周迪【作者单位】佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002;佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002;佳木斯市疾病预防控制中心,黑龙江佳木斯154002【正文语种】中文【中图分类】R512.91HIV抗体检测是诊断HIV感染及艾滋病病人(AIDS)的重要依据, HIV抗体检测的流程是对初筛试验呈阳性反应的样品需要进一步做复检试验和确证试验，复检试验应使用原有试剂和另外一种不同原理(或厂家)的试剂，或另外两种不同原理或不同厂家的试剂进行复检试验[1]。

我国第四代HIV血液筛查试剂的质量评价宋爱京 许四宏 李秀华 聂建辉 赵晨燕 刘强 黄维金* 王佑春*中国食品药品检定研究院艾滋病性病病毒疫苗室卫生部生物技术产品检定方法及其标准化重点实验室，北京100050【摘要】目的 评价我国第四代HIV血液筛查试剂的质量 方法 利用HIV-1 p24抗原国家参考品和HIV抗体国家参考品，对2012年3月至2013年3月间7个厂家生产的33批第四代HIV抗原抗体联合检测试剂进行评价，分析其对高、中、低浓度样品检测的批间变异系数和低浓度样品S/CO值变化趋势，计算比较不同试剂的最低检出量理论值。

结果 各试剂均符合国家参考品的要求，除A(进口)和C试剂外均有非特异阳性出现。

高、中、低浓度样品的批间变异系数均不高于25%，A(进口)试剂的批间精密性优于国产同类试剂。

趋势分析表明国内外试剂检测结果均较稳定，未见超过±3SD的异常情况。

进口试剂的批间变异系数和最低检出量理论值均优于国产试剂（P<0.01）。

70%（23/33）的试剂优于HIV抗体最低检出量国家标准要求；p24抗原参考品最低检出量均值为3.2IU/ml，82%（27/33）试剂优于国家标准要求。

结论 2012年3月-2013年3月期间我国第四代HIV酶联免疫检测试剂均符合国家现行标准，但与进口试剂相比国产第四代HIV酶免试剂在最低检出量和批间精密性上尚有提高的空间。

【关键词】人类免疫缺陷病毒；抗体；抗原；酶联免疫试剂Analysis on Quality of the Fourth Generation of HIV Screening Reagents in ChinaSONG Ai-jing*, XU Si-hong, LI Xiu-hua et al （*National Institute for the Food and Drug Control, Beijing 100050, China）【Abstract】Objective To analyze the fourth generation of HIV screening reagents from March 2012 to March 2013 in China Methods 33 batches of the fourth generation reagents used for screening HIV in blood samples from March 2012 to March 2013 in China were analyzed by using national reference panels of HIV antibody and HIV p24 antigen. Results All reagents were consistent with the requirements of the national reference. Non-specific positive reactions were found in all manufacturers’ reagents except two reagents. The interassay coefficient of variation was no more than 25%. Interassay coefficient of variation of A imported reagent was lower than the similar domestic reagents. Trend analysis suggested that the results of both domestic and imported reagents were relatively stable with no abnormal results more than ± 3SD. 70% (23/33) reagents, whose detection limit of HIV antibody were higher than the acceptable criteria of national reference panel. The基金项目: “艾滋病和病毒性肝炎等重大传染病防治”国家科技重大专项(2012ZX10004701-001)作者单位：中国食品药品检定研究院，卫生部生物技术产品检定及标准化重点实验室，北京，100050通讯作者：黄维金，E-mail：*********************.cn,王佑春，E-mail：****************.cnaverage detection limit of detecting p24 antigen was 3.2IU/ml, and 82%（27/33）reagents were higher than the acceptable criteria of national reference panel. Conclusion The quality of reagents for screening HIV in blood samples from March 2012 to March 2013 in China met the current national requirements. However, the inter-variation coefficient and detection limit of the fourth domestic generation HIV ELISA should be further improved compared with the imported reagent.【Key words】HIV; Antibody; Antigen; ELISA艾滋病于1981年被首次发现，现已成为重大公共卫生问题。

北京万泰试剂ELISA两步法一、原理：本试剂盒采用双抗原夹心两步法（酶联免疫法）检测人血清或血浆中的HIV(1+2)型抗体。

在微孔板预包被基因重组HIV(1+2)型抗原，试剂组成中有酶标记的基因工程HIV(1+2)型抗原，反应后形成“固相HIV抗原-HIV抗体-酶标记HIV抗原”免疫复合物，加入底物后形成显色反应，定性检测人血清或血浆中的HIV-1/HIV-2抗体。

二、操作步骤：1、平衡：试剂盒取出平衡至室温（18-25℃），微孔板开封后，余者即时以自封袋封存。

2、配液：浓缩洗涤液配置前充分摇匀（如有晶体应充分溶解），将浓缩洗涤液和蒸馏水或去离子水按1：19稀释后使用。

3、编号：取所需数量微孔条固定于支架，按序编号。

4、加样：按顺序分别在相应孔中加入100ul待测样本及阴、阳性对照。

5、温育：覆上封板膜，置37℃温育60分钟。

6、洗涤：用洗涤液充分洗涤5次，洗涤后扣干（每次保持30-60秒的浸泡时间）。

7、加酶：分别在美孔中加入酶标抗原100ul。

8、温育：覆上封板膜，置37℃温育30分钟。

3、样品的OD值S/C.O＜1者为HIV抗体反应初筛阴性。

4、阴性对照OD均值>0.1或阳性对照值≤0.6时实验无效，应重新测试。

若阴性对照值小于0.05以0.05计算。

5、初次血样阳性者应重新取样进行双孔复试，按《全国艾滋病检测工作规范》的要求，须将血样或重新采血送HIV确认实验室做确认试验。

四、注意事项：1、HIV检测过程必须符合《全国艾滋病检测工作规范》，严格防止交叉感染。

操作时必须戴手套、穿工作服，严格健全和执行消毒隔离制度。

2、HIV-1/HIV-2抗体测定结果的判定必须以酶标仪读数为准。

4代21天排除真的吗
标题：4代21天排除真的吗？
引言概述：
在疾病诊断领域，4代21天排除法是一种常见的诊断方法。

然而，人们对于这种方法的准确性和可靠性存在一定的疑问。

本文将从多个角度对4代21天排除法进行详细阐述，以期更好地理解其真实性。

正文内容：
1. 4代21天排除法的原理
1.1 什么是4代21天排除法
1.2 原理基础：抗体和抗原的相互作用
1.3 为什么选择21天作为观察期
2. 4代21天排除法的可靠性
2.1 抗体产生的时间差异
2.2 抗原检测的灵敏度和准确性
2.3 不同疾病的潜伏期差异
3. 4代21天排除法的限制
3.1 无法排除早期感染
3.2 不适用于某些疾病
3.3 个体差异的影响
4. 4代21天排除法的应用场景
4.1 HIV感染的诊断
4.2 病毒性疾病的筛查
4.3 血液传染病的检测
5. 4代21天排除法的发展前景
5.1 新技术的应用
5.2 临床实践的改进
5.3 多种方法的综合应用
总结：
通过对4代21天排除法的详细阐述，我们可以得出以下结论：4代21天排除法在某些疾病的诊断中具有一定的可靠性，但也存在一些限制。

未来，随着新技术的应用和临床实践的改进，4代21天排除法有望在疾病诊断领域发挥更大的作用。

然而，我们仍需持续关注其准确性和可靠性，并与其他方法进行综合应用，以提高诊断的准确性和效率。