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医学微生物中粪便标本肠道致病菌的鉴别流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
文档下载后可定制随意修改，请根据实际需要进行相应的调整和使用，谢谢!并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Download tips: This document is carefully compiled by theeditor. I hope that after you download them,they can help yousolve practical problems. The document can be customized andmodified after downloading,please adjust and use it according toactual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types ofpractical materials,such as educational essays, diaryappreciation,sentence excerpts,ancient poems,classic articles,topic composition,work summary,word parsing,copyexcerpts,other materials and so on,want to know different data formats andwriting methods,please pay attention!医学微生物中粪便标本肠道致病菌的鉴别流程一、准备工作阶段。
肠道致病菌的分离与鉴定一、实验目的(1)掌握肠道致病菌的分离、鉴定的主要步骤(2)掌握平板划线分离法(3)掌握玻片凝集试验的操作方法以及实际意义二、实验材料(1)实验仪器：试管、玻片、酒精灯、接种针、接种环、试管架、(2)实验试剂：生理盐水、细菌培养基、伤寒诊断血清、伊红美蓝培养基(EMB、克氏双糖铁培养基(KIA)、葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、甘露醇发酵管、尿素培养基、蛋白胨水、半固体培养基三、实验流程(1)肠道致病菌的分离①待测标本的制作：把接种环放置于点燃的酒精灯火焰处对其进行灭菌，用已灭菌的接种环在细菌培养基中取少量待测细菌于盛有5ml生理盐水的试管中，混匀。
②细菌的分离接种：用接种环取适量配置好的细菌悬液，在酒精灯附近进行划线分离法接种细菌于EMBt养基。
将培养基置于37C培养18~24小时。
(2)肠道致病菌的纯化①单菌落接种：从已培养待测细菌的EMB培养基上用已灭菌的接种针挑取某单个菌落接种到KIA培养基上，一部分直接深入培养基中底部，一部分直接涂抹于斜面处，置于37 C培养18~24小时。
②待测细菌的初步判断：取出已纯化培养待测细菌的KIA培养基，观察现象，初步断定该细菌是致病菌或是非致病菌。
（3）肠道致病菌的鉴定①生化鉴定：分别取葡萄糖、乳糖、甘露醇发酵管各一只（注意管内的小倒管则应充满液体，不含气泡），用已灭菌的接种针取已培养的KIA 培养基上的培养物接种于各发酵管，将各发酵管于37 C培养18~24小时。
取出并观察记录现象。
（注意每次使用接种针前都应用酒精灯火焰进行灭菌）②动力检查：用已灭菌的接种针取KIA培养基上的培养物分别接种于蛋白胨水、尿素培养基、半固体培养基中，将各个培养基于37 C 培养18~24小时。
取出后将靛基质（吲哚）加入到蛋白胨水培养基中，并观察记录现象。
（注意每次使用接种针前都应用酒精灯火焰进行灭菌）③血清学鉴定：取洁净玻片一张，将其用蜡笔分为两格，两边各取生理盐水一滴，再用已灭菌的接种环分别取KIA培养基上的培养物加入两格中，与生理盐水混匀不摊开。
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化脓性球菌、粪便标本肠道致病菌的鉴定流程下载温馨提示：该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。
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并且，本店铺为大家提供各种各样类型的实用资料，如教育随笔、日记赏析、句子摘抄、古诗大全、经典美文、话题作文、工作总结、词语解析、文案摘录、其他资料等等，如想了解不同资料格式和写法，敬请关注!Downloaded tips: This document is carefully compiled by the editor. I hope that after you download them, they can help you solve practical problems. The documents can be customized and modified after downloading, please adjust and use it according to actual needs, thank you!In addition, our shop provides you with various types of practical materials, such as educational essays, diary appreciation, sentence excerpts, ancient poems, classic articles, topic composition, work summary, word parsing, copy excerpts, other materials and so on, want to know different data formats and writing methods, please pay attention!细菌性感染是一种非常普遍的疾病,可以影响人体的各个部位。
一、实验目的1. 掌握肠道细菌分离和鉴定的基本原理和方法。
2. 了解肠道细菌的生理生化特性，提高对常见肠道细菌的识别能力。
3. 通过实验，提高无菌操作和实验技能。
二、实验原理肠道细菌是人体肠道内的一类微生物，主要包括厌氧菌和需氧菌。
本实验采用平板划线法和稀释涂布平板法分离纯化肠道细菌，通过观察菌落特征和进行生理生化实验，对分离得到的细菌进行鉴定。
三、实验材料1. 实验动物粪便样本2. 肠道细菌通用培养基3. 血琼脂平板4. 琼脂平板5. 肉汤培养基6. 生理盐水7. 稀释液8. 接种环、接种针、酒精灯、培养皿、试管、试管架等四、实验步骤1. 样品制备：取粪便样本，用生理盐水进行稀释，制成10^-1、10^-2、10^-3、10^-4等不同浓度的稀释液。
2. 平板划线法分离：取血琼脂平板，用无菌接种环蘸取稀释液，在平板上划线，重复划线直至获得单菌落。
3. 纯化：将单菌落挑取至新的血琼脂平板上，重复划线直至得到纯化的菌落。
4. 菌落特征观察：观察菌落的形态、颜色、大小、边缘、表面等特征。
5. 生理生化实验：a. 观察细菌的革兰氏染色结果。
b. 进行糖发酵实验，观察细菌对葡萄糖、乳糖、蔗糖等糖类的发酵情况。
c. 进行吲哚实验，观察细菌是否能产生吲哚。
d. 进行甲基红实验，观察细菌发酵糖类后产酸情况。
e. 进行V-P实验，观察细菌是否能进行丙酮酸发酵。
6. 鉴定：根据菌落特征和生理生化实验结果，对分离得到的细菌进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 菌落特征观察：实验共分离得到5种菌落，其中3种为圆形、红色、光滑、湿润的菌落，2种为圆形、无色、不透明、干燥的菌落。
2. 生理生化实验结果：a. 革兰氏染色：3种菌落为革兰氏阳性菌，2种菌落为革兰氏阴性菌。
b. 糖发酵实验：3种菌落能发酵葡萄糖，2种菌落不能发酵葡萄糖。
c. 吲哚实验：3种菌落产生吲哚，2种菌落不产生吲哚。
d. 甲基红实验：3种菌落发酵葡萄糖后产生有机酸，使培养基变红，2种菌落发酵葡萄糖后不产生有机酸。
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