YYZL-液相色谱与质谱-液相色谱-HPLC-U3000-液相色谱仪操作注意事项

液相色谱仪注意事项
液相色谱仪是一种常见的分析仪器，在使用过程中需要注意以下几点：
1. 样品的准备：样品的制备要求高质量，样品应该尽可能的纯净。

在制备样品的过程中，需要避免有任何的污染物质进入其中，否则会影响分析结果。

2. 仪器的操作：在操作液相色谱仪时需要认真仔细，正确操作仪器的每一个部分。

特别是在设置检测条件时，需要根据实际样品情况进行调整，以确保获得准确的分析结果。

3. 注射器的使用：注射器是液相色谱仪的重要组成部分之一，使用不当会影响数据质量。

在使用注射器时，需要注意注射量和注射速度的控制，以及避免注射器污染。

4. 流动相的选择：流动相的选择对于分析结果有很大的影响。

在选择流动相时，需要考虑样品的性质，并进行适当的优化调整，以获得更好的分离效果。

5. 仪器的维护：液相色谱仪是一种高精度的仪器，需要经常进行维护和保养，以确保仪器的稳定性和准确性。

如定期更换柱子等。

总之，液相色谱仪是一种高精度的分析仪器，在使用前需要认真准备，操作时要仔细认真，严格遵守操作规程和安全操作规范，以获得更好的分析结果。

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Thermo U-3000 HPLC操作规程聊城市药品检验所文件编号:ZY-Y?Z-27标准操作规程第1版Ultimate 3000 HPLC 生效日期:2013年01月16日一、开机:1、打开电源，打开仪器接线板电源开关;2、打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源(POWER)，启动电脑;3、依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源;4、选择开始,程序,Chromeleon,Sever Monitor或双击屏幕右下角快捷图标,出现对话界面后点击,tart启动,等Dongle序号出来以后(表示Sever Monitor程序运行正常)可以点击Close来关闭界面。

5、打开“开始”/“程序”/“Chromel”/“Chromeleon”或双击在桌面上的Chromeleon图标(工作站主程序)打开 HPLC软件系统主界面。

二、系统设置1、点击快捷方式见“默认面板”进入面板的设置。

2、进入泵的面板:2.1点击“连接”;在流动相A、B、C、D选择将要做的(比如要用A相，就把它设置成100%)2.2将仪器的“Purge”阀拧开，点击软件上的“purge”进行排气泡(若没进行更换流动相，可以不用排气泡)，大约4分钟后;再次点击“purge”停止排气泡，(purge设置3.00ml/min)将仪器的“Purge”阀拧紧即可;2.3将流速设置1.00ml/min(根据实际需要自己设置相应的流速)，将压力的下限值设在8个左右，上限值设置280左右;打开泵的流速。

3、进入自动进样器的面板3.1点击连接，在“温箱控制”设置实际所需要的稳定值3.2若注射器内有气泡，点击“灌注针”进行气泡的排除;若针需要清洗，点击“清洗针” 3.3若要进行满环进样(20uL)，点击“更多选项”，在“进样模式”选择“FullLoop”否则选择“Partial”;4、进入紫外检测器的面板4.1点击“连接”4.2点击“紫外灯”将氘灯打开(若需要可见光，请点“可见灯”)4.3在“波长”栏设置实际所需要的波长5、采集波长在灯打开3分钟后，点击快捷方式键蓝色的圆点，在弹出的窗口选择紫外“UV”，点击确定，即开始采集基线。

U-3000操作手册1．操作条件：电压：220V, 温度：10-40℃，湿度：10%-85%。

2．注意事项：密封圈清洗溶液为1：9甲醇/水，每次使用前更换，样品必须经过0.45μm 的滤膜过滤，流动相也必须经过0.45μm过滤（色谱纯除外）并脱气。

3．若流动相含有无机盐或酸，每天仪器使用完后，要用5%：95%的甲醇/水清洗系统至少30min后再用100%甲醇冲30min关机。

开机则用5%：95%的甲醇/水冲10min，换流动相。

先开仪器电源，再开电脑，待电脑右下角的服务器监测器由黄色变为灰色，双击面上的图标，进入工作站，如图为工作站根目录，点击快捷栏内的“default panel tabset”出现以下界面，点开“”My Computer”前加号：选择“Chromeleon Server”,“OK”，出现下面的控制界面，分别在“Pump”下设置比例和流速如果流路内有气泡，拧松泵混合器上的“Purge”阀，点上图内的“Purge off”前的按钮，快速排气泡，待气泡排完后，上图内的“Purge off”前的按钮停止，拧紧“Purge”阀，在“Col．Comp”下设置柱温，在“VWD”下开氘灯，设置波长。

系统开始平衡，点快捷栏内的兰色圆点“”采集基线，待基线稳定后，点“”停止采集基线，准备测样。

新建文件夹（第一次使用必须）点快捷栏内“”，回到根目录，右键点击根目录，，点“New Directory”，输入文件夹名称，“OK”。

建立程序文件点“File”下“New”，“OK”，“下一步”，设置温度，“下一步”，设置流速和各通道比例，“下一步”，设置取样和推样速度，“下一步”，设置采集时间，选择采集信号，“下一步”，“下一步”，“下一步”，设置波长，“下一步”，“完成”，如需要，可更改一些参数后，点右键，选“Check”，“确定”，点快捷栏内的“”，选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。

新建方法文件点“File”下“New”，点“File”下“Save As”选择保存路径，输入名称后“Save”，关闭窗口。

液相色谱仪操作规程液相色谱仪操作规程一、安全操作要求1. 液相色谱仪为高压设备，请严格按照操作规程进行操作，避免发生安全事故；2. 操作过程中，严禁将手指或其他物体放入色谱仪中，以免发生伤害；3. 操作人员需穿戴实验服装，并戴上防护眼镜和手套，以确保实验安全；4. 在操作设备之前，必须先了解设备的构造和使用方法，熟悉仪器的功能和原理，避免误操作。

二、仪器准备1. 检查色谱仪是否适宜工作，各部件是否接好；2. 检查色谱柱是否完好，废止已过期的色谱柱；3. 检查试剂、溶剂是否充足，必要时补充；4. 检查移液器、压力表、紫外可见光谱检测器等是否正常运行；5. 检查液氮容器是否充足，如不足应及时补充。

三、操作步骤1. 打开色谱仪电源，等待仪器启动，加载系统软件；2. 在样品管中加入待测样品，以确保测定结果准确；3. 打开移液器，吸取样品，然后将样品注入色谱柱；4. 打开液氮气源，调节液氮气流速，保持液氮温度稳定；5. 打开溶剂泵，调节流速，使溶剂流经色谱柱；6. 打开紫外可见光谱检测器，选择适当的检测波长；7. 调节检测器灵敏度，并记录基线数值；8. 记录样品在色谱图上的峰值时间和峰面积，并进行结果分析；9. 关闭液氮气源，停止溶剂泵；10. 关闭仪器电源，彻底停止运行。

四、仪器维护1. 每次使用后，清洗液相色谱仪的各部件，确保清洁；2. 经常检查仪器的运行状态，及时发现并排除故障；3. 定期更换色谱柱，以确保分析结果的准确性；4. 保持液相色谱仪所在环境的整洁和干燥，避免灰尘和异物对仪器造成损害；5. 仪器长期不使用时，须进行维护保养，包括清洗仪器、润滑部件等。

五、事故处理1. 如发生仪器故障或液氮泄漏等紧急情况，应立即停止操作，关闭电源，并及时报告相关人员；2. 如出现样品泄漏，应立即进行封堵，将有关人员撤离，采取相应的紧急处置措施。

六、操作记录和数据处理1. 所有操作过程和结果应记录在操作日志中，包括样品名称、浓度、样品编号、色谱柱使用情况等；2. 将数据导出并进行统计和分析，得出相应的结论和建议。

液相色谱-质谱联用仪检定注意事项
1. 在进行液相色谱-质谱联用仪检定前，应确保设备的稳定性
和正确性，包括保证色谱流动系统的稳定性和质谱的解析能力。

2. 使用标准溶液进行校准和校验，确保色谱和质谱的准确性和灵敏度。

3. 在进行样品检测前，必须进行仪器的装载，包括正确选择色谱柱、质谱离子源、离子检测器等，并进行参数设置。

4. 清洗样品容器和仪器中的管道，以防止样品之间的污染和交叉污染。

5. 使用合适的流动相和离子源流动相，以保证色谱谱图和质谱谱图的准确性和分辨率。

6. 在检定过程中，要定期监测仪器的噪声背景和系统稳定性，以确保结果的可靠性。

7. 在检定前，应进行仪器的校准和线性范围测试，以确保仪器的准确性和灵敏度。

8. 注意保持样品处理的无菌条件，以避免样品受到细菌污染。

9. 定期维护和保养仪器，包括清洗色谱柱、质谱离子源、离子检测器等，以保证仪器的正常运行和长期稳定性。

10. 在检定过程中，要注意记录每个步骤的操作和结果，以备
后续分析和质量控制的参考。

省产品质量监督检验检验研究院仪器设备操作规程（cg———2016）设备编号（）仪器名称U3000 液相色谱仪操作规程编制审核批准2016 年月日U3000高效液相色谱仪操作规程一基本原理U3000高效液相色谱系统由：①输液泵②自动进样器、③色谱柱温箱、④检测器、⑤数据处理系统组成。

使用高效液相色谱时，液体待检测物由流动相带入色谱柱，通过压力在色谱柱中移动，由于试样中各组分在色谱柱固定相与流动相间分配或吸附特性的差异，不同的物质组分顺序离开色谱柱，经检测器检测得到不同的色谱峰信号，依据组分的保留时间和响应值（峰面积或峰高）进行定性和定量分析。

二操作前准备1.1流动相的配制：1.1.1根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相。

1.1.2根据流动相的性质确定采用有机膜（0.45um）还是水相膜(0.45um)对流动相进行过滤。

1.1.3将过滤后的流动相进行超声脱气10~15分钟。

1.2对照品供试品处理：1.2.1称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），使其浓度为0.1~1mg/mL（根据检测结果再适当调节溶液的浓度）。

1.2.2根据对照品或供试品的性质确定采用有机针头滤膜（0.45um）还是水相针头滤膜(0.45um)进行过滤。

1.3色谱柱的选择：根据样品的性质选择适当的色谱柱。

三操作顺序1.开机2.1打开UPS（不间断电源）电源，打开仪器接线板电源开关；2.2打开电脑显示器电源，打开电脑主机电源（POWER），启动电脑；2.3依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；2.4双击屏幕右下角“服务管理器”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器”启动,等显示“本地仪器控制器运行空闲”,可以关闭界面。

2.5双击在桌面上的Chromeleon 7图标（工作站主程序）。

2.6在左下方点击仪器，则在右边会自动显示该仪器控制面板。

液相色谱仪操作注意事项流动相：1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水，酸碱液及缓冲液需经过滤后使用，过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围；2、水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质；3、使用双泵时，A、B、C、D四相中，若所用流动相中有含盐流动相，则A、D（进液口位于混合器下方）放置含盐流动相，B、C（进液口位于混合器上方）放置不含盐流动相；A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶，用于存放水相流动相。

样品：1、采用过滤或离心方法处理样品，确保样品中不含固体颗粒；2、用流动相或比流动相弱（若为反相柱，则极性比流动相大；若为正相柱，则极性比流动相小）的溶剂制备样品溶液，尽量用流动相制备样品液；3.手动进样时，进样量尽量小，使用定量管定量时，进样体积应为定量管的3～5倍；色谱柱：1、使用前仔细阅读色谱柱附带的说明书，注意适用范围，如pH值范围、流动相类型等；2、使用符合要求的流动相；3、使用保护柱；4、如所用流动相为含盐流动相，反相色谱柱使用后，先用水或低浓度甲醇水（如5％甲醇水溶液），再用甲醇冲洗。

5、色谱柱在不使用时，应用甲醇冲洗，取下后紧密封闭两端保存；6、不要高压冲洗柱子；7、不要在高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱；使用过程中注意轻拿轻放。

操作过程：1、开机操作：（1）、打开电源，用Harb相连接时，注意Harb电源，打开计算机，打开Bootp Server（一般启动时已打开）；（2）、自上而下打开个组件电源，Bootp Server里显示有信号时（有六行字符），打开工作站（先打开On line）；（3）、打开冲洗泵头的10％异丙醇溶液的开关（需用针捅抽），控制流量大小，以能流出的最小流量为准；（4）、注意各流动相所剩溶液的容积设定，若设定的容积低于最低限会自动停泵，注意洗泵溶液的体积，及时加液；（5）、使用过程中要经常观察仪器工作状态，及时正确处理各种突发事件。

2、先以所用流动相冲洗系统一定时间（如所用流动相为含盐流动相，必须先用水冲洗20分钟以上再换上含盐流动相），正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命；3、建立色谱操作方法，注意保存为自己命名的Method，勿覆盖或删除他人的方法及实验结果；4、使用手动进样器进样时，在进样前和进样后都需用洗针液洗净进样针筒，洗针液一般选择与样品液一致的溶剂，进样前必须用样品液清洗进样针筒3遍以上，并排除针筒中的气泡；5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎，在更换流动相时注意保护，当发现过滤头变脏或长菌时，不可用超声洗涤，可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤；6、实验结束后，一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上，再用甲醇冲洗。

文件类型：Work Instruction 部门: China Service T&A UltiMate 3000 Autosampler Operating InstructionsUltiMate 3000 Variable Wavelength Detectors Operating InstructionsUltiMate 3000 Diode Array Detectors Operating InstructionsU3000液相色谱仪操作注意事项1.目的规范U3000液相色谱仪开关机注意事项，正确使用仪器，保证检测工作顺利进行、操作人员人身安全和设备安全。

2.适用范围适用于U3000液相色谱仪(仪器配置:Pump+WPS+TCC+VWD/DAD+CM7.2)的使用操作。

3.职责3.1 U3000液相色谱仪操作人员应严格按照本规程进行仪器的开关机，对仪器进行正确地日常维护，并填好使用记录。

3.2 U3000液相色谱仪保管人员负责监督仪器操作是否符合规程，对仪器进行正确地开关机、定期维护、保养。

3.3 室主任负责仪器综合管理。

4．开关机操作程序4.1 开机注意事项4.1.1流动相的配制：根据所供试品的性质、相关的文献资料、工作经验等按比例配制流动相；根据流动相的性质确定采用有机膜还是水相膜对流动相进行过滤；将过滤后的流动相进行超声脱气5分钟。

4.1.2样品的处理：称取或量取适量的对照品或供试品，用适当的溶剂（最好采用流动相或流动相的主成分）进行充分溶解（也可借助超声波进行超声溶解），根据检测结果再适当调节溶液的浓度;样品尽量过滤（有机膜或者水膜）。

4.1.3请确认：清洗泵头密封圈的10%异丙醇或甲醇水溶液没有走空，洗针的D通道或者洗针液瓶没有走空。

4.1.4依次打开泵、自动进样器、柱温箱、检测器的电源；4.1.5双击电脑右下角“服务管理器/Chromeleon Service Manager”快捷图标,出现对话界面后点击“启动仪器控制器/Start Instrument Controller”,等显示“本地仪器控制器运行空闲/The local Instrument Controller is running idle ”,可以关闭界面。

文件名: U3000液相色谱仪简明操作贴士文件号: CNSVC-TAS-WI-CMD308(1)文件类型：Work Instruction 部门: China Service T&A 参考文件: U3000液相色谱仪开关机及日常维护注意事项201512U3000 液相色谱仪简明操作贴示适用范围适用于U3000 液相色谱仪。

开机过程1. 首先开启氮气压力到0.6MPa，确保持续供气（如未配置CAD/VEO 检测器，请忽略此步骤）；2. 打开泵的电源；3. 打开自动进样器电源；4. 打开柱温箱电源；5. 打开检测器电源；6. 打开电脑，启动变色龙仪器控制器；7. 双击桌面变色龙软件Chromeleon 7 图标进入软件；8. 打开GAS ON，设定雾化器温度；（如未配置CAD/VEO 检测器，请忽略此步骤）9. 泵排气泡（打开排空阀，每个通道单独排气泡）；10. 设置流动相的比例及流速后，点击“马达/Motor”开泵，平衡系统；11. 清洗自动进样器：依次清洗注射器、缓冲环、外部清洗针；12. 设置进样盘温度（4-45℃）（仅适用于WPS 带T 的型号）；13. 设置柱温箱温度控制；14. 如使用VWD/DAD 检测器，打开氘灯或钨灯，设置检测用波长，采集频率与时间常数；15. 如使用ECD 检测器，进入控制界面，点击自动归零，设置电位、数据采集频率。

16. 如使用FLD-3000 检测器，设置池温，激发波长，发射波长；17. 如使用RefractorMax521 检测器，设置池温，设置极性。

关机过程1.冲洗色谱柱；2.如使用VWD/DAD 检测器，软件中关闭UV 的氘灯或钨灯；3.如使用ECD 检测器，关闭池子电位；4.如使用RefractorMax521 或FLD-3000 检测器，关闭池温；5.关闭柱温箱温度控制；6.关闭Pump 的泵马达；7.停泵后保持CAD 通气状态，半小时后关闭GAS 开关到OFF，关闭雾化器温度；（如未配置CAD/VEO 检测器，请忽略此步骤）；8.断开仪器连接，关闭工作站软件，停止仪器控制器；9.依次关闭检测器、柱温箱、自动进样器、泵的电源；10.关闭钢瓶减压阀。

U3000戴安液相色谱仪操作规程1.5接通电源，检查插座上各插孔的指示灯是否显示正常。

1.6准备好超声过的流动相和流路冲洗溶剂。

2开机2.1撤下设备停用卡，换上设备运行卡。

2.2换上A、B、C、D管路的溶剂：A、B、D管路为溶剂管路，可以放置流动相，C管路为洗进样针管路。

一般A路放甲醇，B路为纯化水，C路放5%甲醇水，D路放流动相。

C管路在运行样品时用5%甲醇水清洗进样针，做完样品用纯甲醇灌满，C管路中软管为冲洗泵头管路，并随仪器开机工作。

2.3运行检查：从上至下打开仪器各部件开关，待机器自检，核实无异常。

2.4开启仪器工作站：打开电脑，双击电脑桌面上仪器图标，显示工作站主界面；2.5脱气操作：在工作站主界面上，点击泵：XPG-3X00(RS,SD)，将旁通阀开关逆时针旋转一圈（自动进样器上），冲洗顺序为B→C→D→A，每个管路冲洗5分钟，每个管路脱气前，需先设参数为100%，再依次点击冲洗→忽略警告执行，每个管路冲洗时间均在自动进样器显示屏上显示（注意：D管路冲洗完成后，需将D管路设置为0，点击开始冲洗，方可冲洗A管路）。

冲洗排气完成后关闭旁通阀。

2.6清洗进样器在WPS-3000 SL项下启动栏中依次点灌注注射器、清洗缓冲环、外部清洗针。

注意：外部清洗针运行完毕后，点击进样阀栏中到进样位置。

2.7升流速：在XPG-3X00(RS,SD)界面，在流速/压力栏中填写所需的流速（注意：流速设定要0.2个单位逐步到所设定的流速，待柱压稳定后，再增加流量）。

2.8设柱温箱温度在TCC-3x00项下温度控制栏中设所需温度，点击回车。

2.9点紫外灯在VWD-3x00（RS）项下信号栏中输入所需波长，在命令栏中点击紫外灯（切记点一下）注意：待温度稳定5～10分钟后再开灯以上各项必须点击各项下的模块连接栏中连接才能执行命令。

待紫外灯点亮后可在xPG-3x00（RS，SD）项下流速/压力栏中输入所需流速开始平衡，平衡时间约30分钟。