高效液相色谱仪(Agilent 1100型)操作步骤
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Agilent1100series安捷伦⾼效液相⾊谱仪操作规程Agilent1100⾼效液相⾊谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100⾼效液相⾊谱系统主要由⼯作站、在线脱⽓机、柱温箱、输液泵、⾃动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及⼯作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进⼊待机状态,指⽰灯为黄⾊或⽆⾊。
1.2.2打开HP ChemStations,进⼊Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进⼊⼯作站的操作页⾯。
该页⾯主要由以下⼏部分组成:最上⽅为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下⽅为快捷操作图标,由多个样品连续进⾏分析、单个样品进样分析、调⽤⽂件、保存⽂件等;左边为样品信息栏;中部为⼯作站各部件的⼯作流程⽰意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为⾊谱⼯作参数:进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等。
2.⾊谱条件的设定(⾊谱条件的设定可以通过下列⼏种⽅法实现2.1直接设定在操作页⾯的右下部⼀⾊谱⼯作参数中设定。
将⿏标移移⾄要设定的参数如进样体积、流速、分析停⽌时间、流动相⽐例、柱温、检测波长等,单击⼀下,即可显⽰该参数的设置页⾯,键⼊设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调⽤已设置好的⽂件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定⽂件名,单击“OK”,此时,⼯作站即调⽤所选⽤⽂件中设定的参数。
如欲进⾏修改,则可同2.1项下,在⾊谱⼯作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页⾯中键⼊设定值,单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新⽂件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页⾯中键⼊设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新⽂件命名,单击“OK”。
Agilent 1100型HPLC操作指南一、实验准备1、样品和流动相过滤(通常过0.2μm滤膜)、超声脱气5min。
2、更换四元泵流动相,泵头清洗溶剂(10%的异丙醇)。
二、启动液相色谱仪1、自上而下依次打开真空脱气机、四元泵、柱温箱(根据需要)、检测器电源,等待系统自检通过,黄灯表示闲置、绿灯表示运行、红灯表示出错。
2、打开电脑,双击电脑桌面的“仪器联机”打开操作安捷伦化学工作站,软件会自动检测到开启的所有硬件设备。
3、更换流动相存储瓶,旋松“排气阀(purge阀)”,将所换的溶剂瓶的流量设至高流速5mL/min,进行清洗和排放气泡,至管线中无气泡时关闭排气阀。
4、使用的流动相中含有缓冲盐时,需打开泵头清洗溶剂,使其逐滴流出,防止缓冲盐在柱子和泵头结晶析出,影响系统压力。
5、安装色谱柱:依次安装在线过滤器、预柱、色谱柱(注意方向,箭头指向检测器)。
设置溶剂比例,1mL/min流速,平衡色谱柱。
三、样品测试及数据分析1、编辑方法。
选择编辑完整方法,依次设定流动相比例和流速、柱温箱温度、检测器扫描波长等参数,保存方法。
2、运行方法,监测基线至稳定走平。
3、手动单针进样:设定样品名、数据文件存储位置,点击运行方法;将手动进样器扳至“Load”上样,上样完扳至“Inject”,工作站开始记录信号。
4、测试完毕,点击桌面的“仪器脱机”打开工作站,进行数据处理,积分,定量分析方法建立、报告输出等。
四、实验结束、关机。
1、实验结束,冲洗系统、色谱柱。
冲洗原则(以反相C18为例):先用90%水,10%乙腈(或其它有机相)冲洗水溶性物质;30min后改为50%水,50%乙腈;再过30min 后,改为100%乙腈,再冲洗30min后结束。
2、实验结束,停止泵,关闭化学工作站,关闭电脑,关闭仪器的四部分电源。
3、卸下色谱柱,清理流动相,将各个抽滤头浸泡在有机相中,整理桌面、地面杂物。
注意事项:1、挥发性有毒有机相(甲醇、乙腈、正己烷等)需尽量包严实。
简述安捷伦高效液相色谱仪的操作流程和注意事项
安捷伦高效液相色谱仪(Agilent HPLC)是一种常用的分析仪器,广泛应用于化学、生物、环境等领域。
其操作流程和注意事项如下:
操作流程:
1. 准备样品溶液:根据分析目的选择适当的溶剂,将样品溶解或稀释至所需浓度。
2. 准备色谱柱:根据分析需求选择合适的色谱柱,并按照柱床规定的要求进行预处理,如洗涤、调pH等。
3. 连接系统:将色谱柱安装在仪器上,连接好进样器、泵、检测器和废液收集器等组件,确保连接紧密无漏。
4. 设置方法参数:根据分析需求,设置泵的流速、进样器的进样量、检测器的波长和灵敏度等方法参数。
5. 系统平衡:启动泵和检测器,运行空白试验,确保色谱柱和系统内部达到平衡状态。
6. 样品进样:将样品进样器插入样品瓶中,抽取足够的样品并注入进样器,按下进样按钮进行进样。
7. 进行分离:启动泵,使流动相通过柱床,样品分离过程中不断采集检测器的信号。
8. 数据处理:分析和处理检测器输出的信号,得出对应的峰面积、峰高度等结果,进行数据分析和解释。
注意事项:
- 严格按照使用手册和方法要求操作仪器,遵循操作规程,避免误操作和事故发生。
- 确保色谱柱、进样器及连接部分的密封性良好,防止泄漏和污染。
- 选择适当的溶剂和流动相,避免与柱材和样品相互作用,影响分析结果。
- 定期检查和维护仪器,如泵的排气、封头的更换、泄漏点的处理等,确保仪器正常运行。
- 样品处理过程中,注意避免光线、温度和湿度的影响,尽量保持稳定的分析环境。
- 使用仪器前,需提前熟悉相关方法和仪器操作,做好实验前的准备工作。
一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须过0.45um的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶:为水相;B瓶:为有机相。
2、打开电脑,选Win 2000,进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标,放大CAG Boodp server小图标,出现窗口, 5min内打开液相各部件电源开关,等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标,仪器自检,进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法:从“Method”菜单中选择“New method”,出现DEF-LC.M,从“Method”菜单中选择“Edit entire method”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击OK,进入下一画面。
2、方法信息:在“Method Comments”中加入方法的信息,如方法的用途等。
单击OK,进入下一画面。
3、泵参数设定:进入“Setup pump”画面,在“Flow” 处输入流量,如1ml/min;在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert 一行“Timetable”,编辑梯度;输入保留时间;在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
Agilent1100高效液相色谱仪操作规程1.仪器组成及开机1.1仪器组成:Agilent1100高效液相色谱系统主要由工作站、在线脱气机、柱温箱、输液泵、自动进样器、检测器等部件组成。
1.2开机:1.2.1接通电源,打开计算机及工作站其它各部件开关,约30秒钟后,各部件进入待机状态,指示灯为黄色或无色。
1.2.2打开HP ChemStations,进入Instrument 1 online状态,约30秒钟后,计算机进入工作站的操作页面。
该页面主要由以下几部分组成:最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrument等;命令栏下方为快捷操作图标,由多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件、保存文件等;左边为样品信息栏;中部为工作站各部件的工作流程示意图,依次为进样器→输液泵→柱温箱→检测器→数据处理→报告;中下部为动态监测信号;右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
2.色谱条件的设定(色谱条件的设定可以通过下列几种方法实现2.1直接设定在操作页面的右下部一色谱工作参数中设定。
将鼠标移移至要设定的参数如进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等,单击一下,即可显示该参数的设置页面,键入设定值后,单击“OK”,即完成。
2.2 调用已设置好的文件在命令栏“Method”下,选择“Load Method”,或直接单击快捷键操作的“Load Method”图标,选定文件名,单击“OK”,此时,工作站即调用所选用文件中设定的参数。
如欲进行修改,则可同2.1项下,在色谱工作参数中作修改;亦可在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,单击“OK”。
即完成。
2.3 编辑新文件先在命令栏“Method”下,选择“New Method”, 之后再在命令栏“Method”下,选择“Edit Entire Method”,在每个页面中键入设定值,完成后,Save Method”, 先在命令栏“Method”下选择“Save Method”,给新文件命名,单击“OK”。
安捷伦1100高效液相色谱仪操作规程1、操作前的准备流动相的配制,流动相应用0.22μm或0.45μm的滤膜过滤,超声。
2、仪器的操作2.1接通电源,打开电脑,双击桌面上的“仪器1联机”,进入工作站;单击菜单栏中的“运行控制”选择“样品信息”输入“操作者姓名”或者单击菜单栏中的“序列”选择“序列参数”中输入“操作者姓名”;将A、B、C、D四个通道的溶剂量设置好。
2.2排气逆时针旋松排空阀,将流速设为5ml/min,四个通道逐个进行排液,排液至整个管路没有气泡为止。
2.3首选项的设置单击菜单栏中的“视图”选择“全部菜单”,再单击菜单栏中的“视图”选择“首选项”,在“路径”选项卡中分别设定“序列路径”、“数据路径”、“方法路径”,(具体操作时只要单击“添加”后选择相应的路径即可)单击“确定”。
2.4编辑仪器方法2.4.1单击“方法”选择“编辑完整方法”,根据需要钩选项目,“方法信息”,“仪器/采集”,“数据分析”,“运行时选项表”,单击“确定”。
2.4.2 出现“方法信息”窗口,如有需要输入方法信息(方法用途等),单击“确定”。
2.4.3出现“设置泵”窗口,根据方法需要设置“流速”、“停止时间”、“流动相比例”,将压力上限设为400bar,单击“确定”。
2.4.4出现“设置进样器”窗口,根据需要选择进样方法“标准进样”、“洗针进样”、“使用进样程序进样”(一般选择“标准进样”),输入相应的“进样量”,单击“确定”。
2.4.5出现“柱温箱温控方法”,输入“柱温”或“不控制”,单击“确定”。
2.4.6出现“VWD信号”窗口,输入所要的检测波长,单击“确定”。
2.4.7出现“信号细节”窗口,单击“确定”。
2.4.8出现“编辑积分事件”窗口,单击“确定”。
2.4.9出现“报告设定”窗口,选择所需的“报告格式”,“信号选项”中设定好图谱的量程,单击“确定”。
2.4.10出现“仪器曲线”窗口,单击“确定”。
2.4.11出现“运行时选项表”,根据需要设定相关的参数,一般在设定方法时,只要单击“确定”即可。
1.适用范围本标准操作规程规定了Agilent LC-1100型高效液相色谱仪的操作要求,是进行标准操作的依据。
本标准操作规程适用于公司内对Agilent LC-1100型高效液相色谱仪的操作。
2.技术参数:2.1波长 190~900 nm2.2温度 -5~80℃2.3流速 0.000~100 ml/min;压力 0~400bar2.4电压 1~10v3.操作3.1仪器组成四元输液泵、蒸发光散射检测器、自动进样器、柱温箱、脱气机、微机和打印机。
3.2开机(电源)顺序:脱气机→输液泵→柱温箱→检测器→微机3.3准备工作3.3.1打开微机→双击联机→显示工作界面3.3.2打开脱气阀,点击泵图标,选择设置泵,进入泵编辑画面,设置泵流量5ml/min,点击确定。
点击泵图标,选择控制,点击泵开,系统开始排气,使泵运行大约5分钟,直至所有要用的通道无气泡为止。
3.3.4点击泵图标,选择设置泵,设置流速为1ml/min。
3.3.5在方法菜单中选择编辑完整方法,在全部四项前选“√”,单击“OK”;键入方法注释内容,单击“OK”;在此对话框中,在流速处输入所需要的流速,选择设置四个通道的溶剂及相应的比例,也可以选择编辑梯度。
在最大柱压处输入柱子的最高耐压。
全部设置结束点击确定。
3.3.6在出现的新对话框中选择自动进样方式,“标准进样”只能输入进样体积,没有洗针功能,“洗针进样”此方式在输入样品后,会在洗瓶中洗针,“使用进样器程序”,点击“编辑”进行进样程序的编辑。
选择好进样方式后,点击确定。
3.3.7在出现的柱温箱对话框中,输入要控制的温度,点击“更多”按钮,选择“与左侧一致”选项,点击确定进入下一界面。
3.3.8DAD参数设定:在方法菜单中,选择“保存为…”,在弹出的菜单中键入新方法名。
如果选择“保存”,此选项将覆盖当前方法。
3.3.6点击Control→点击Single Run→输入样品批号或对照品, 完毕点击Start准备进样。
高效液相色谱仪操作步骤1.准备工作:a.检查设备是否正常运转,所有零件是否安装和连接正确。
b.检查每个必需的溶液和试剂是否充足并且符合规定的质量标准。
c.检查色谱柱是否装配完好,并根据要进行的分析校准适当的流量和压力范围。
d.打开色谱软件,并设置所需的分析方法和参数。
e.开始预热色谱柱直到达到所需的温度。
2.样品制备:a.准备待检测样品的溶液或提取物,并进行必要的预处理步骤,例如固相萃取、浓缩、稀释或离心等。
b.将样品溶液通过0.22微米滤膜过滤,以去除杂质、微粒和可能堵塞色谱柱的颗粒。
3.样品进样:a.打开进样器,并选择合适的样品进样模式(如定量进样或自动进样)。
b.使用微量注射器或自动进样器将样品注入进样器,并确定进样量符合分析方法的要求。
4.色谱柱选择:a.根据样品特性和分析目的选择合适的色谱柱类型(如反相、离子交换、大小排阻等),尺寸(长度和内径)和填充材料等。
b.根据样品的pH值调节移动相的酸碱度,以满足分析要求和保护色谱柱。
5.色谱条件设置:a.设置流量速率,根据色谱柱的额定最大流速和样品的分离要求来确定。
一般来说,较高的流速可提高分离速度,但也会降低分离效果。
b.设置柱温,并确保温度稳定在所需的分析条件下。
c.设置检测器的参数,如波长、增益、灵敏度等,以适应待测试样品的检测需求。
6.分析运行:a.开始进样和运行色谱,确保流量和压力稳定。
b.监测色谱峰形的变化和信号强度,以评估分离速度和效果。
c.记录每个样品的保留时间和峰高(面积),并进行相应的数据处理和分析。
7.数据处理:a.使用色谱软件导出和处理分析数据,如生成色谱图、峰面积测定、峰高度测定、定量计算等。
b.根据实验目的和要求,对分析数据进行统计学分析、校正和解释。
c.对数据进行结果汇总、报告撰写和存档。
8.后期维护:a.定期检查和维护仪器,如清洁色谱柱、更换零件、校准仪器、更换溶液等,以确保仪器的正常运行和结果的准确性。
b.对废液和废品进行妥善处理,符合环境保护要求。
基本操作:1.开机:先打开电脑电源,然后开启液相各组件电源,boopt sever显示电脑与仪器联接的情况。
(注:电脑与液相之间通过DAD上接口联接;若未连接上,在boopt sever打开的情况下,仅关开一次DAD 即可联接成功),然后再打开“仪器1 联机”。
2.脱气:拧松purge阀(逆时针旋开2圈),在溶剂瓶中加入足够量的流动相,开泵,流速设为5ml/min约5分钟。
(注:脱气时需单个进行,如脱A则设置A为100%,脱B则设B为100%;所需用到的流动相都须脱气)3.溶剂过渡:以0.8ml/min 的流速用10%甲醇水,拧紧purge阀,跑至压力恒定不变,约10min。
(过渡的作用是冲稀流路内的有机溶剂,使水的比例占搞使缓冲盐不易析出堵塞系统损坏色谱柱,当使用Na、K、磷酸盐等在有机溶剂中溶解度低的缓冲盐时,此步十分重要)(先将流速调低再拧紧purge阀)4.跑基线:调用分析样品的方法跑基线,然后拧紧purge阀,以平衡柱子,约30min左右。
(为延长检测器灯的寿命,可在跑基线20min后再开检测器电源,直接点开开关即可)5.进样分析:将样品液过0.45um过滤器注入样品瓶,置于自动进样器样品盘上,设置序列(样品瓶位置,名称,分析方法,进样次数。
其中后两者为必须的,缺一则报告错误,前两者非必须,当样品瓶位置空缺时只运行方法不进样;设置时将鼠标指针置于样品序列视图上,左键单击即可弹出对话框。
)6.洗柱:样品分析完毕,对于反相柱使用10%甲醇、100%甲醇各冲稀30min,最后柱子须充满100%甲醇保存。
(洗柱方法:洗柱.M;使用洗柱方法时,最好设定自动关机。
序列/序列参数/后运行:macro “shutdown .MAC”,go。
也可以在样品序列上添加洗柱程序)。
7.关机:关闭电脑和仪器各组件电源。
(关闭操作界面时要注意弹出对话框内容,关闭灯等)(先关闭电脑,然后再关闭液相各开关)编辑完整方法1.点击方法/编辑完整方法:点击确定2.进入泵参数设置界面:设置流速、分析时间、溶剂比例梯度洗脱设置:3.点击确定进入进样器设置界面:设置进样方式,进样量。
一、开机1、开机前准备:流动相使用前必须过0.45um的滤膜(有机相的流动相必须为色谱纯;水相必须用新鲜注射用水,不能使用超过3天的注射用水,以防止长菌或长藻类);把流动相放入溶剂瓶中。
A瓶:为水相;B瓶:为有机相。
2、打开电脑,选Win 2000,进入Win 2000界面。
3、双击CAG Boodp server图标,放大CAG Boodp server小图标,出现窗口,5min内打开液相各部件电源开关,等待1100广播信息后,表示通讯成功连接,关闭CAG Boodp serve窗口。
4、双击online图标,仪器自检,进入工作站。
该页面主要由以下几部分组成:——最上方为命令栏,依次为File,Run Control,Instrumen…等;——命令栏下方为快捷操作图标,如多个样品连续进行分析、单个样品进样分析、调用文件保存文件……等;——中部为工作站各部件的工作流程示意图;依次为进样器-输液泵-柱温箱-检测器-数据处理-报告;——中下部为动态监测信号;——右下部为色谱工作参数:进样体积、流速、分析停止时间、流动相比例、柱温、检测波长等。
4、从“View”菜单中选择“Method and control”画面。
二、编辑参数及方法1、开始编辑完整方法:从“Method”菜单中选择“New method”,出现DEF-LC.M,从“Method”菜单中选择“Edit entire method”,选择方法信息、仪器参数及收集参数、数据分析参数和运行时间表等各项,单击OK,进入下一画面。
2、方法信息:在“Method Comments”中加入方法的信息,如方法的用途等。
单击OK,进入下一画面。
3、泵参数设定:进入“Setup pump”画面,在“Flow” 处输入流量,如1ml/min;在“Solvent B”处输入有机相的比例如70.0,(A=100-B),也可在Insert 一行“Timetable”,编辑梯度;输入保留时间;在“Pressure Limits Max”处输入柱子的最大耐高压,以保护柱子。
单击OK,进入下一画面。
4、DAD检测器参数设定:进入“DAD signals”画面,输入样品波长及其带宽、参比波长及其带宽(参比波长带宽默认值为100nm);选择Stoptime:as Pupm;在“Spectrum”中输入采集光谱方式“store”:选All;如只进行正常检测,则可选None;范围Range:可选范围为190~950nm;步长Step可选2.0nm;阀值:选择需要的灯;Peak width(Response time)即响应值应尽可能接近要测的窄峰峰宽,可选“2s”或4s;Slit-:狭窄缝,光谱分辨率高;宽时,噪音低。
可选4nm单击OK,进入下一画面。
5、进入“Signal Details”画面,单击OK,进入下一画面。
6、进入“Edit Integration Events”(编辑积分结果)画面,单击OK,进入下一画面。
7、进入“Specify report”(积分参数)画面,单击OK,进入下一画面。
8、进入“Instrument curves”画面,单击OK,进入下一画面。
9、进入“Run Time checklist”(运行时间表)画面,选择“Date Acquistition”和“Standard Date Analsis”,单击OK,完成参数设定,回到工作站画面。
10、单击“Method”菜单,选中“Save method as”,输入文件名,单击OK。
(路径:e\HPCHEM\1\methods\***)注:如果调用一个方法,则在“Method”菜单,选中“Load method”,选方法名,单击OK。
11、从菜单“View”中选择“Online signal”,选中Window 1 ,然后单击Change 钮,将所要绘图的信号移到右边的框中,点OK。
(如同时检测二个信号,则重复11,选中Window 2)。
三、运行样品1、单击泵(Pump)图标下面的小瓶图标,输入溶剂的实际体积和瓶体积,并且选停泵体积。
单击OK。
2、手动打开Purge阀:逆时针转2~3圈。
3、单击泵(Pump)图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
设Flow:5ml/min,单击OK。
4、开泵:直接点Pump图标下面的泵开关小图标,或单击Pump图标,出现参数设定菜单,单击Pump contrlo选项,选中On,单击OK。
5、系统开始排液(Purge),直到管线内(由溶剂瓶到泵入口)无气泡为止,切换通道继续排液,直到所有通道无气泡为止。
(每个管线内液体约20ml,在5ml/min的流速下,均需4~5min才能排完)6、单击泵(Pump)图标,出现参数设定菜单,单击Setup pump选项,进入泵编辑画面。
把Flow改为0.5~1.0ml/min,单击OK。
7、等待流速降下来后,关闭排液阀。
8、待压力稳定后,从“Instrument”菜单中选择“System on”或单击GUI图标的On图标启动系统。
开始走基线,并可选择观察信号。
注:仪器运行过程,画面颜色由灰色转变成黄色或绿色,当各部件都达到所设参数时,画面均变为绿色,左上角红色的“not ready”变为绿色“ready”,表明可以进行分析。
(此时如果要终止仪器的运行,可单击流程图右下角的“off”,再单击“Yes”,关闭输液泵和检测器氘灯)。
9、单击最大化按钮,将online Plot窗口放大。
待基线平稳后,点信号窗口的“Banlance”,调至零点。
10、等仪器Ready ,从“Runcontrol”菜单中选择F5或“Run method”。
11、编辑样品信息:从“Run control”菜单中选择“Sample into”选项,选择“Sample Info…..”,即打开了样品信息页面,输入操作者(Operator Name)、数据存贮通道(Subdirectory)、样品名(Sample Name)、进样瓶号(Vial)、浓缩因子(Multipline)、稀释因子(Dilution)、,“Data file”中选择“Prefix”,在Prefix框中输入批号或日期等,在Counter框中输入计算器的起始位,仪器会自动命名。
(样品量(Sample Amount)、内标量(ISID Amount)可不选,Location 只对自动进样器有用,不填则走空白,检查干扰峰的来源。
)单击OK。
12、进样分析:进样阀扳到Load位置,插入注射器,注样品,进样后扳动阀至Inject位置。
13、进样分析结束,点Close键退出样品分析。
(注意:检测完尽量要关DAD的灯,以保持灯的寿命。
单击DAD图标,出现参数设定菜单,单击control ,选择关灯。
)四、数据分析方法编辑(可在offline下操作)1、从“View” 菜单中选“Date analysis”进入数据分析画面。
该页面最上方为命令栏,依次为File ,Graphics,Integration……等。
命令栏下为快捷操作图标,如积分、校正、色谱图、单一色谱图调用、多色谱图调用、调用方法、保存等。
2、从“File”菜单中选“Load signal”,或单击快捷操作的“单一色谱图调用”图标,选择色谱图文件名,单击“OK”,画面中即出现所调用的色谱图。
3、做图谱优化,从“Graphics”菜单中选择“Signal options”选项。
从Ranges 中选择Auao scale及合适的显示时间,单击OK,或选择“Use Ranges”调整。
反复进行,直到图的比例合适为止。
4、积分(1)先调用所要分析的色谱图,从“Integration”中选择“Auto integrate”,从“Integration”中选择“Integration Results”,此时仪器将内置的积分参数给出积分结果。
如积分结果不理想,再从“Integration”菜单中选择“Integration Events”选项,或单击快捷操作的“编辑/设定积分表”图标,此时,在屏幕下方左侧出现积分参数表,右侧为积分结果,在积分参数表中按实际的要求输入修改的参数,如斜率(Slope sensitivity)、峰宽(Peak width)、最小峰面积(Area reject)、最低峰高(Height reject)等。
(2)从“Integration”中选择“Integrate”选项或单击快捷操作的“对现有色谱图积分”图标,仪器即按照新设定的积分参数重新积分。
(3)若积分结果不理想,则修改相应的积分参数,直到满意为止。
(4)完成后,单击左边的“ˇ”图标,将积分参数存入方法。
5、打印报告:(1)从“Report”菜单中选择“Specify report”选项,或单击最右侧快捷操作的“定义报告及打印格式”(右下角带叉的报告画面)图标,进入打印画面。
(2)根据实际要求选择报告的格式和输出形式等。
可在“Calculate”右则的黑三角中选“Percent”(面积百分比),其它项不变。
(如“Destination”项下选择“Screen”;“Based On”选“Area”;“Sorted By”选“Signal”;“Repirt Style”选“Short”;选择“Add chromatogram Output(打印色谱图)”;选择“With Calibrated Peaks”;选择“Portrait”;可根据需要选择“Size”)。
(3)单击OK。
(4)选择快捷操作的“报告预览”图标,可预览报告的全貌。
从“Report”菜单中,选择“Print Report”,则报告打印到屏幕上,如想输出到打字机上,则单击“Print”,即可进行报告的打印。
最后,单击“close”退出此操作页面。
6、定量分析如果需要进行标准曲线制备,可按此项进行操作。
(1)一级校正表的建立:在“Data Analysis”界面下,调用最低浓度的色谱图,在“栏“Calibration”下,选择“New Calibration Table”,选择“Automatic Setup Level”,并设校正级数为“1”,单击“OK”。
在画下方左侧出现校正表,右侧为校正图。
在画面左下侧的校正表中选择所要的色谱峰,输入校正级数、化学物名称及浓度,如果采用内标法,需对内标峰进行标记。
单击OK,工作站提示是否删除0浓度行,单击Yes 。
(2)二级校正表的建立:调用第二个色谱图,在命令栏“Calibration”下,选择“Add Level”,设为“2”,单击“OK”,在画面左下侧的校正表中输入校正级数、化学物名称及样品浓度。