硼含量的测定-姜黄素比色法

有效硼、硫、硅分析步骤简介一、有效硼——姜黄素比色法⑴称 2mm 土样10.00g 100ml 聚四氟乙烯烧杯 加20.00mL 称重 小火煮沸 冷却加2滴称重用H 2O 补足干过滤H 2O 5min MgSO 4 与煮沸前重量相同⑶同时做空白和标线。

二、有效硫——硫酸钡比浊法⑴称2mm 土样10.00g100mL 塑料瓶 加50.00mL20-25℃、180r/min 、振荡1h干过滤磷酸盐-乙酸浸提剂 ⑶同时做空白和标线。

三、有效硅——硅钼蓝比浊法⑴称2mm 土样5.00g 100mL 塑料瓶 加50.00mL25-30℃、180r/min 、振荡2h干过滤0.025mol/L 柠檬酸⑶同时做空白和标线。

⑵取 1.00mL 滤液30ml 聚四氟乙烯坩埚 加4.00mL 55±3℃蒸发至干呈玫瑰红时 冷却加20.00ml95% 立即在550nm 、1cm 比色皿-----比色测量姜黄素-草酸烘焙乙醇⑵取25.00mL 滤液100mL 三角瓶 加4滴 煮沸15min 左右 (剩滤液5-10mL) 加1mL冷却25mL 容量瓶 加2mL 定容 加1.0g搅拌1min5-30min 、440nm 、3cm比色皿-----比浊测量H 2O 2BaCl 2 ⑵取1.00-5.00mL 滤液 20mLH 2O 50ml 容量瓶 加5mL0.6mol/L 35℃保温15min 加5mL50g/L 摇匀放置5min 加5mL50g/L 草酸定容20min 后、700nm 、1cm 比色皿-----比浊测量稀释 H 2SO 4 钼酸铵 加5mL15g/L。

硅粉中硼、磷的含量测定第一部分：硼含量的测定姜黄素分光光度法1方法提要硅粉试料经硝酸、氢氟酸溶解，在无水条件下，硼与姜黄素显色形成络合物，在分光光度计波长550nm处测量其吸光度，并计算出硼含量。

2试剂和材料本标准中，除特殊规定外，试剂均使用优级纯，实验用水应符合GB/T 6682中二级水的要求。

硼酸（高纯试剂）。

氢氟酸（ρ=1.12g/mL）。

盐酸（ρ=1.18g/mL）.硝酸（ρ=1.41g/mL）.硝酸（1+1）。

盐酸（1+1）。

盐酸（1+5）。

无水乙醇。

硫—磷混合物：将5mL浓硫酸（ρ=1.84g/mL）慢慢加入到2mL水中，冷却后加入3mL 磷酸（ρ=0.98g/mL）。

显色剂：称取1.25g草酸和0.25g姜黄素，溶解于50mL无水乙醇中，再加入2mL盐酸（2.7），混匀（室温下有效期为24h）。

硼标准贮存溶液（0.1mg/mL）：称取0.5719g硼酸（高纯）溶于水中，温热溶解，冷却后转移到1000mL聚乙烯容量瓶中，用水稀释至刻度，贮存于塑料瓶中（室温下有效期为一个月）。

硼标准溶液（1.0ug/mL）：移取硼标准贮存溶液（2.12）10.00mL于1000mL聚乙烯容量瓶中，用水定容至刻度，贮存于塑料瓶中（室温下有效期为一个月）。

3仪器和设备聚四氟乙烯烧杯、石英坩埚、分光光度计、分析天平。

4分析步骤试料称取0.1g~0.5g试样，精确至0.0001g测定4.2.1将试料置于100mL聚四氟乙烯烧杯中，加入4滴硫—磷混合酸，再加入8.0mL硝酸（2.6），慢慢滴加氢氟酸至试料大部分溶解。

4.2.2 将4.2.1的样品放到温度为200℃的电加热板上加热，进一步溶解，并将溶液浓缩至2~3滴左右，取下，稍冷后加入1.0mL盐酸（2.7），加热，继续浓缩至2~3滴左右，取下，稍冷后加入1.0mL纯水，加热，继续浓缩至2~3滴左右，取下，冷却。

4.2.3 将4.2.2处理后的样品移入石英坩埚中，分别依次用1.5mL盐酸（2.8）、1.0mL纯水和1.0mL无水乙醇（2次）清洗聚四氟乙烯烧杯，将每次清洗后的洗液倒入石英坩埚中。

硼酸（H3B03）及硼砂（Na2B407· 10H20）是常见的含硼化合物，硼以硼酸盐（B4072-）或硼酸的形式天然存在于食物中。

硼酸及硼砂在不同食物中用作添加剂已有悠久历史，然而其具有较强的毒性，过量摄入会危害身体健康。

2008年，我国发布的《食品中可能违法添加的非食用物质和易滥用的食品添加剂名单》明确硼酸与硼砂禁止用于食品。

目前，我国食品安全国家标准检验方法GB 5009. 275-2016规定了食品中硼酸的测定方法。

在实际检验中，影响实验的稳定性和结果的准确性的因素较多，如本底、器皿、显色剂、试剂与操作方式等。

本文从这几方面分析总结实验的注意事项。

1　食品中硼酸的测定原理及方法食品样品中的硼酸通过乙基己二醇-三氯甲烷溶液进行快速富集、萃取，并除去共存盐类的影响，采用姜黄作显色剂，利用硫酸与姜黄混合生成的质子化姜黄与硼酸反应生成红色产物[1]。

溶液颜色的深浅与样品中硼酸含量成正比，通过比色可以测定样品中的硼酸含量。

2　内源性食品中硼本底的干扰标准GB 5009.275-2016中测定的是硼酸或硼砂的含量，难以明确界定食品中的硼是天然存在的，还是人为添加到食品中的。

硼以硼酸盐（B4072-）或硼酸（H3B03）的形式天然存在于食品中，其硼含量在不同的食品类别中存在较大差异。

植物性食品中硼含量丰富，如豆类及其制品、木本坚果、水果及叶菜，酒类、苹果酒及啤酒含有大量硼，奶制品、鱼类、肉类及大部分谷类则只有少量硼[2]。

因此需要了解食品中硼的本底含量，为判断食品中的硼是否为违法添加提供技术参考。

3　避免外源性器皿的硼带入玻璃器皿可分为钠-钙玻璃和硼硅酸盐玻璃。

钠-钙玻璃适用于短时间接触化学试剂与有限的热冲击，而硼硅酸盐中加入了硼酸或硼砂，具有出色的化学与物理性质，是一种具有化学耐性与热耐性、高机械稳定性的器皿，包括烧杯及计量产品。

硼酸盐玻璃在强酸条件下不稳定，可转化为硼酸溶出。

食品中硼砂的测定中的前处理即利用这个原理将样品的硼酸盐溶成硼酸溶出。

土壤中全硼的测定方法
1. 嘿，你知道吗？可以用比色法来测定土壤中全硼哦！就像我们通过观察颜色的变化来判断食物是否熟了一样。

比如在实验室里，把土壤样本处理后加入特定试剂，然后观察颜色的深浅，就能知道全硼的含量啦！不试试看吗？
2. 哇塞，还有一种方法叫姜黄素比色法！这就像是给全硼做了一个特别的标记。

想象一下，把土壤放进去，就像在茫茫人海中一下子找到了那个独特的人，然后就能准确测出全硼啦！为什么不试试这种有趣的方法呢？
3. 嘿呀，火焰原子吸收光谱法也是不错的选择哟！它就像是个超级侦探，能精准地找到土壤中的全硼。

比如说在复杂的土壤环境里，它也能准确锁定目标，厉害吧！你还不想了解一下吗？
4. 哦哟，电感耦合等离子体发射光谱法也能大显身手呢！它就如同有一双锐利的眼睛，能看穿土壤中全硼的秘密。

好比在一个神秘的世界里，它能快速找到我们想要的东西，牛不牛？不想亲自试试吗？
5. 哈哈，离子选择电极法也是个好办法呀！这就好像给全硼安装了一个信号器，能被轻易检测到。

就像我们在捉迷藏中一下子就找到了躲藏的人一样，超级神奇呀！还等什么呢？
6. 哇哦，重量法也可以用来测定哦！它就像一个稳稳的基石，虽然简单但可靠呀。

比如说不管遇到什么情况，它都能稳稳地给出结果，是不是很厉害？赶紧去尝试一下吧！
我的观点结论就是：这些方法各有特点，我们可以根据实际情况选择适合的方法来准确测定土壤中全硼的含量，可不要小瞧了它们哟！。

土壤有效硼的测定A 、甲亚胺－H 比色法1 方法提要土壤中有效硼采用沸水提取，提取液用EDTA 消除铁、铝离子的干扰，用高锰酸钾消褪有机质的颜色后，以甲亚胺－H 比色法测定提取液中的硼量。

2 适用范围本方法适用于各类土壤中有效硼含量的测定。

3 主要仪器设备3.1 分光光度计；3.2 石英三角烧瓶，250mL ；3.3 石英回流冷凝装置。

4 试剂4.1高锰酸钾溶液[c (51KMnO 4)=0.2mol ·L -1]：称取31.62g 高锰酸钾溶于水中，稀释至1L ； 4.2 硫酸溶液[c (21H 2SO 4)=3mol ·L -1]：量取168mL 浓硫酸缓缓加入到盛有约800mL 水的大烧杯中，不断搅拌，冷却后，稀释至1L ；4.3 酸性高锰酸钾溶液：0.2mol ·L -1高锰酸钾溶液与3 mol ·L -1硫酸等体积混合，当天现配；4.4 抗坏血酸溶液（100g ·L -1）：称取10g 抗坏血酸溶于水中，稀释至100mL ，当天现配；4.5 甲亚胺溶液：称取0.90g 甲亚胺和2.00g 抗坏血酸溶解于微热的60mL 水中，稀释至100mL ，必要时过滤，用时现配；4.6 pH5.6～5.8缓冲液：称取250g 乙酸铵和10.0gEDTA 二钠盐溶于250mL 水中，冷却后用水稀释至500mL ，再加入80mL 1：4硫酸溶液，摇匀（用酸度计检查pH 值）；4.7 混合显色剂：量取份3份体积上述甲亚胺溶液和2份体积pH5.6～5.8缓冲液混合；4.8 硼标准贮备溶液[ρ（B ）＝100μg ·mL -1]：称取预先在浓硫酸干燥器内至少干燥24h 的硼酸（H 3BO 3，优级纯）0.5719g 于400mL 烧杯中，加200mL 无硼水溶解，移入1L 容量瓶中定容，贮于塑料瓶中。

4.9 硼标准系列溶液：吸取50.00mL 硼标准贮备溶液于500mL 容量瓶中，用无硼水定容，即为10μg ·mL -1硼标准溶液，贮于塑料瓶中。

（6）分离铁、铝及钠盐时，溶液的pH应为6.0~7.0。

若为碱性，则硼的共沉淀现象极为严重，会使结果偏低。

但pH<5.5时，由于Al3+未完全沉淀，分离时进入溶液参与络合显色反应，使测定结果偏高。

（7）姜黄素比色法干扰因素消除：①分离铁、铝及大量钠盐：碳酸钠高温熔融分解试样后，用固体碳酸钠和4 mol/L硫酸溶液调节杯内溶液pH应控制为6.0~7.0（用pH试纸检查）。

在pH 6.0~7.0介质中，分离铁、铝及大量钠盐。

若为碱性，则硼的共沉淀严重，测定结果偏低。

但pH<5.5时，由于Al3+未完全沉淀，分离时进入溶液参与络合显色反应使测定结果偏高。

②姜黄素与B配合形成玫瑰花青苷需要在无水条件下进行，有水存在会使配合物颜色强度降低，所以需蒸干脱水显色。

③要准确操作蒸干显色条件如蒸干温度、时间、速度、试剂量、溶剂等，甚至空气流速等须保持一致，否则再现性不良。

蒸发温度55±3 ℃，随着温度升高，反应速度加快。

④蒸发和干燥后不应长时间暴露在空气中，以免玫瑰花青苷吸收空气中的水分而水解。

应立即将蒸发皿从水浴中取出擦干，放入干燥器内，待比色时再随时取出。

显色反应产物玫瑰花青苷遇热迅速分解，溶于乙醇后，室温下1 h~2 h内稳定。

酒精溶解后应尽可能迅速比色，酒精易挥发，显色体积缩小，使溶液的吸收值发生变化。

⑤标准工作曲线制作：系列显色中分别吸取l mL氯化钠溶液（20 g/L）于石英比色皿中，在水浴上蒸干，再分别加硼标准系列溶液1.00 mL，加入氯化钠的目的是为了抵消中性盐对显色的影响。

⑥NO3－干扰：若NO3－浓度超过20 mg/L，能氧化姜黄素，对比色测定有干扰。

可准确吸取一定量浸出液于蒸发皿中，加入少许饱和Ca(OH)2溶液碱化，在水浴上蒸干，再慢慢灼烧以破坏硝酸盐。

再用一定量的0.1 mol/L HCl溶液溶解残渣，吸取1.00 mL溶液进行显色。

标准系列也应按同样步骤处理。

（二）碱熔－等离子体发射光谱法14.2.1编制依据本方法依据《土壤分析技术规范》（第二版）18.1土壤全硼的测定编制。

北京理工大学珠海学院分析监测中心原始记录表（ZHBIT/JB0057Ⅱ）编号：
校准曲线绘制原始记录表
曲线名称：硼校准曲线标准溶液来源：国家环境保护总局标准样品研究所
适用项目：生活饮用水中硼的测定仪器型号：722N分光光度计
仪器编号：方法依据：《水和废水监测监测分析方法》（第四版）国家环境保护总局 2002年
分析：校核：审核：
第页共页
北京理工大学珠海学院分析监测中心（ZHBIT/JB0057Ⅰ）编号：
水和废水硼分析原始记录表
样品名称：□水□废水收样日期：年月日分析日期：年月日.
仪器型号： 722N分光光度计仪器编号：
校准曲线编号：绘制日期：年月日回归方程：a= b= r=
分析：校核：审核：
第页共页。

微量元素的测定(沸水浸提一姜黄色法)1、选择的依据土壤中的硼可区分成水溶性硼、酸溶性硼和难溶性硼。

全硼含量一般不宜用来判断土壤对植物供硼的能力。

土壤有效性般用水溶性硼表示，水溶性硼指沸水能溶解的硼，是对植物有效的。

土壤有效硼硼用沸水浸出后，常用比色法测定。

比色测定硼的显色剂很多，以姜黄素应用得最为广泛。

姜黄素与硼的显色在水溶液蒸干过程中进行；而四羟基蒽醌、胭脂红酸、1,1′-二蒽醌亚胺等试剂则只能在浓HSO4中显色，试剂溶液的配制、贮存和比色操作都十分不便，对玻璃器皿也有较高的要求。

姜黄素法避免了这些缺点，灵敏度也较高，适用于土壤和植物中硼的测定。

2、主要仪器三角瓶（250ml）、容量瓶(100ml)，离心机、瓷蒸发皿、水浴锅、分光光度计。

3、试剂（1）95%酒精（2）无水乙醇（3）姜黄素-草酸溶液：0.04g姜黄素和5g草酸溶于无水酒精，加入4.2ml 6NHCL,移入100ml容量瓶。

在冰箱可存3-4天。

（4）硼标准系列溶液：0.5716g硼酸溶于水，在容量瓶中定容至1L.次为100ppm硼标准溶液。

再稀释10倍成10ppm B标准贮备溶液。

分别吸取B溶液1.0、2.0、3.0、4.0、5.0ml,用水定容50ml,成为0.2、0.4、0.6、0.8和1.0ppm B的标准系列溶液，贮存在塑料试剂瓶中。

（5）1NCaCl2溶液7.4g CaCl.2H2O溶于100ml水中。

4、操作步骤(1)待测液制备称取风干士壤(通过1mm尼龙筛)10.00g到250ml 或300ml的石英三角瓶中，加20.01无硼水。

放在电热板上小火煮沸5分钟（加漏斗），立即停火，稍冷却后取下三角瓶，冷却后倒入离心管，加2滴1N CaCl2溶液以加速澄清，离心分离出清夜。

(2)测定吸取1.00清液(含硼不超过1ug)，放在瓷蒸发皿中，加入4ml姜黄素溶液。

在55±3℃水浴上蒸发至干，并且继续在水浴上烘干15分钟出去残存的水分。