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青岛有限公司文件目的建立洁净区环境监测规程，规范洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的测试，保证药品在规定的洁净级别内进行生产。
范围本标准适用于洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的监测。
责任环境监测员内容1、检验依据：1.1 GB/T16294-2010《医药洁净室（区）沉降菌的测试方法》1.2 GB/T16293-2010《医药洁净室（区）浮游菌的测试方法》1.3 GB/T16292-2010《医药洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》2、悬浮粒子的监测2.1概述：本测试方法采用计数浓度法，即通过测定洁净区环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径悬浮粒子数，来评定洁净室（区）的悬浮粒子洁净度等级。
2.2仪器和设备：尘埃粒子计数器，严格按照《尘埃粒子计数器操作、维护保养规程》（SOP-ZL95-1）操作。
2.3测试步骤2.3.1测试条件：在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，包括温度控制在18-26℃、相对湿度控制在45-65%、压差等，同时应满足仪器的使用范围。
2.3.2测试状态：静态测试，人员不得多于2人。
测试报告中应明确测试时所采用的状态及测试人员数。
2.3.3测试时间：在空态或静态a测试时，对单向流洁净室（区）而言，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。
对非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min开始。
在静态b测试时，对单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min后开始；对非单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。
2.4采样点数目及其布置2.4.1在空态或静态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应力求均匀，并不得少于最少采样点数目。
在动态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设置。
最少采样点数目如下采样点的布置：2.4.2试人员应在采样口的下风侧。
2.4.3采样次数的限定：对于任何小洁净室或局部空气净化区域，采样点的数目不得少于2个，总采样次数不得少于5次。
GMP净化车间洁净室（区）监测操作规程一、目的：建立GMP净化车间洁净室（区）监测操作规程，规范洁净室（区）的各项监测，确保洁净区环境符合相关规定。
二、适用范围：满足新版GMP（2010年修订）要求的洁净室（区）环境监测。
三、职责：1、车间化验室检验人员负责对洁净区的非在线监测悬浮粒子和微生物填写请样单递送制剂分厂化验室。
2、当班生产班组负责对所使用洁净区的温度、湿度、风速和风量、压差等进行监测。
操作工负责对小容量注射剂Ⅰ线A级洁净区的悬浮粒子进行在线监测，当班工段长负责对Ⅱ线A级洁净区和B级洁净区主要功能间的悬浮粒子进行在线监测，车间化验室检验人员负责对主要功能间的非在线监测微生物（沉降菌，浮游菌，表面微生物）进行监测并出具报告，异常情况及时向主管领导汇报。
3、技术主任、车间质监员负责每年对所使用的洁净室（区）的监测数据进行汇总、分析，监督各项监测结果是否在警戒限度和纠偏限度之内，以及超出警戒限度和纠偏限度的纠正预防措施的制定和执行。
4、技术主任、技术员负责105车间洁净室（区）监测管理规程执行情况的监控及修订。
四、内容：1.每月开班处理时，车间化验室人员按沉降菌、浮游菌、表面微生物的监测频次，及时填写请样单送分厂化验室；分厂化验室按要求定期检测小容量I线洁净区的非在线悬浮粒子和微生物、小容量II线非主要功能间非在线悬浮粒子和微生物。
2.车间化验员负责小容量Ⅱ线A级洁净区和B级洁净区主要功能间的微生物（沉降菌、浮游菌、表面微生物）检测，按《洁净室（区）沉降菌监测操作规程》、《洁净室（区）浮游菌监测操作规程》、《洁净室（区）表面微生物测操作规程》及规定频次（具体频次见6）操作并做好相应的监测记录。
3.为确保洁净室（区）的悬浮粒子数和微生物数及温、湿度，风速、风量、压差符合使用要求，洁净区各生产工序需对洁净室（区）按规定频次（具体频次见5）监测，监测后及时填写记录。
批生产记录的审核应包括对环境监测的结果进行审核。
洁净区环境测试操作规程颁发部门：质量部分发部门：生产部、设备部、质量部、采购部、仓储部、财务部一、目的：建立一个空气洁净度监测标准操作规程,规范空气洁净度监测操作程序,保证细胞生产洁净车间的空气洁净度符合GMP 要求。
二、范围：合用细胞生产洁净车间的空气洁净度的监控。
三、职责/依据：质量部负责该标准操作规程的制订,并监督制度的执行；质量保证部和质量控制部门负责该标准操作规程的实施；质量保证部门对进行监督与检查。
四、程序/内容：1 概述1.1 洁净厂房是指根据需要对空气的尘粒〔包括微生物、风速、温湿度及压力等进行控制的密闭环境, 其建造结构、装备及其使用均具有减少该区域内污染源的介入、产生和滞留的功能,并以其空气洁净度等级符合《药品生产质量管理规范》的要求。
1.2 洁净厂房分为：D 级、C 级,B 级、A 级。
本公司细胞生产洁净区为 D 级、C 级和局部 A 级。
2 沉降菌测试2.1 方法概述本测试方法利用沉降法,即通过自然沉降原理采集在空气中的生物粒子于培养基平皿,经 48 小时以上培养,在适宜的条件下让其繁殖到可见的菌落数,来评定洁净环境内的活微生物数,并以此来评定洁净室〔区的洁净度。
2.2 所用设备及仪器高压灭菌锅：使用时严格按照操作规程使用恒温培养箱：定期对培养箱温度进行检定2.3 培养皿：普通采用ф90mm×15mm 玻璃培养皿。
2.4 培养基：普通营养琼脂培养基将培养基加热熔化,冷却至约45℃,在无菌操作条件下将培养基注入培养皿,每皿约 15ml。
待琼脂培养基凝固后,将培养皿放入30~35℃恒温培养箱中培养 48 小时,若培养基平皿上确无菌落生长,即可供采样用,制备好的培养皿应在2~8℃的环境中存放。
2.5 测试步骤1 采样①将已制备好的培养皿放置在预先确定的取样点,然后从里到外逐个打开培养皿盖,使培养基表面暴露在空气中。
②静态测试时,培养皿暴露时间为30 分钟以上；动态测试时,培养皿暴露时间为 4 小时,单个沉降碟的暴露时间可以少于 4 小时,同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并积累计数。
建立车间洁净区悬浮粒子和沉降菌的检验标准操作规程，为检验人员提供正确的标准操作 方法。
本规程合用于车间洁净区悬浮粒子和沉降菌检查项的检测操作。
化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程 微生物室检验员：负责对本规程的实施。
1、悬浮粒子 1.1、测定目标车间洁净区悬浮粒子 1.1.1 悬浮粒子可悬浮在空气中的尺寸普通在 0.001~1000um 之间的固态和液态或者两者的混合物质 1.1.2 洁净度洁净环境内单位体积空气中含大于或者等于某一粒径的悬浮粒子的允许统计数。
1.2、测定方式：静态测试洁净区(室)净化空气调节系统已处于正常运行状态，洁净区(室)内没有工作人员的情况下进 行的测试。
1.3、测试方法：本测试方法采用计数浓度法， 即通过测定洁净环境内单位体积空气中含大于或者等于某粒径的 悬浮粒子数，来评定洁净区(室)的悬浮粒子洁净度等级。
1.3.1 仪器：悬浮粒子计数器 1.3.2 工作原理本仪器根据悬浮粒子的光散射原理， 即空气中的尘埃粒子在一定强度的光束照射下， 向其周 围空间散射出与其粒径成一定比例关系的光通量的原理而设计的。
1.3.3 使用要点：使用仪器时应严格按照仪器说明书操作。
1.3.3.1 仪器开机，预热至稳定后，方可按说明书的规定对仪器进行校正。
1.3.3.2 采样管口置采样点采样时，在确认计数稳定后方可开始连续读数。
1.3.3.3 采样管必须干净，严禁渗漏。
1.3.3.4 采样管的长度应根据仪器的允许长度。
1.3.3.5 计数器采样口和仪器工作位置应处在同一气压和温度下，以免产生测量误差。
1.3.3.6 必须按照仪器的检定周期，定期对仪器作校准，以保证测试数据的可靠性。
1.3.4 测试条件1.3.4.1 温度和相对湿度洁净区(室)的温度控制在 18~26℃，相对湿度控制在45％~65％之间为宜。
部门/姓名 部门/姓名 部门/姓名 部门/姓名颁发部门签收/日期：编写/修订人/日期 第一审核人/日期 第二审核人/日期 批准人/日期 执行日期分发部门 品质部年 月 日 年 月 日 年 月 日 年 月 日 2022 年 04 月 15 日品质部/ 品质部/ 品质部/ 品质部/ 品质部1.3.4.2 压差空气洁净度不同的洁净区 (室)之间的压差为≥10Pa ，空气洁净度级别要求高的洁净区 (室) 对相邻的空气洁净度级别低的洁净区(室)普通要求呈相对正压。
一、目的：建立洁净区的管理标准，监测环境是否达到规定的洁净级别。
二、范围：适用于生产车间洁净区域和微生物限度室。
三、责任1. QC室主任对本规程的制定负责；2. QC对本规程的执行负责。
四、内容1. 悬浮粒子1.1 监测频率和限度如下表：“静态”标准。
1.2 监测方法1.2.1采样管道必须干净，严禁渗漏，严格按仪器说明书正确使用尘埃粒子计数器，并定期对仪器作检定。
应使用采样管较短的便携式尘埃粒子计数器，避免≥5.0μm悬浮粒子在远程采样系统的长采样管中沉降。
1.2.2动态测试可在常规操作过程中进行，证明达到动态的洁净度级别。
1.2.3可根据需要采取静态测试或动态测试，静态测试室内测试人员不得多于2人，测试报告中应标明所采用的测试状态。
1.2.4在静态测试时，对单向流洁净室（区）而言，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10mim后开始。
对非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30mim后开始。
1.2.5测试人员应穿戴好与其洁净度相适应的工作衣、工作帽，采样时应在采样口的下风侧。
1.2.6应按采样点布置规定布置采样点位置及其数目，布置采样点应避开回风口，最小采样量应按其相应规定确定。
1.2.7最少采样点数目如下表：1.2.9采样次数的限定：对任何小洁净室（区）或局部空气净化区域，采样点的数目不得少于2个，总采样次数不得少于5次。
每个采样点的采样次数可以多于1次，且不同采样点的采样次数可以不同。
1.2.10更换初中高效过滤器之后必须监测，合格后才可正常运转。
2. 沉降菌2.1 监测频率和限度如下表：2.1.1表中数值均为平均值。
2.1.2单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉降碟连续进行监测并累积计数。
2.2 监测方法2.2.1沉降菌的测试点应布置在有代表性的地方和气流扰动较小的地方。
采样点的布置参照GB/T 16294-2010执行。
2.2.2采样点的位置：一般在离地面0.8m～1.5m左右（略高于工作面）。
青岛有限公司文件目的建立洁净区环境监测规程，规范洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的测试，保证药品在规定的洁净级别内进行生产。
范围本标准适用于洁净区沉降菌、浮游菌、悬浮粒子的监测。
责任环境监测员内容1、检验依据：1.1 GB/T16294-2010《医药洁净室（区）沉降菌的测试方法》1.2 GB/T16293-2010《医药洁净室（区）浮游菌的测试方法》1.3 GB/T16292-2010《医药洁净室（区）悬浮粒子的测试方法》2、悬浮粒子的监测2.1概述：本测试方法采用计数浓度法，即通过测定洁净区环境内单位体积空气中含大于或等于某粒径悬浮粒子数，来评定洁净室（区）的悬浮粒子洁净度等级。
2.2仪器和设备：尘埃粒子计数器，严格按照《尘埃粒子计数器操作、维护保养规程》（SOP-ZL95-1）操作。
2.3测试步骤2.3.1测试条件：在测试之前，要对洁净室（区）相关参数进行预先测试，包括温度控制在18-26℃、相对湿度控制在45-65%、压差等，同时应满足仪器的使用范围。
2.3.2测试状态：静态测试，人员不得多于2人。
测试报告中应明确测试时所采用的状态及测试人员数。
2.3.3测试时间：在空态或静态a测试时，对单向流洁净室（区）而言，测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于10min后开始。
对非单向流洁净室（区），测试宜在净化空气调节系统正常运行时间不少于30min开始。
在静态b测试时，对单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过10min后开始；对非单向流洁净室（区），测试宜在生产操作人员撤离现场并经过20min自净后开始。
2.4采样点数目及其布置2.4.1在空态或静态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应力求均匀，并不得少于最少采样点数目。
在动态测试时，悬浮粒子采样点数目及其布置应根据产品的生产及工艺关键操作区设置。
最少采样点数目如下采样点的布置：2.4.2采样点位置：一般在离地0.8m 高度的水平面上均匀布置，并避开回风口。
1 目的制定洁净区环境监测标准管理规程，以规范洁净室（区）的环境监测，确保洁净室（区）的洁净度达到标准。
2 范围适用于洁净区的温湿度、压差、风速、风量、悬浮粒子、沉降菌、浮游菌的测试。
3 责任化验室环境检测人员、QA人员、原料车间。
4 引用标准4.1《药品生产质量管理规范》（2010年修订）。
4.2《中国药典》（2015版）。
5 流程图N/A6 内容6.1环境监控简介6.1.1环境监控对象包括空气、表面和人员。
6.1.2监测项目包括温湿度、压差、风量风速、悬浮粒子、微生物监测等。
其中，微生物监测包括空气微生物监测、表面微生物监测以及人员卫生监测。
（1）空气微生物的测定有浮游菌和沉降菌两种测定方法。
（2）表面微生物监测用来监测生产区域表面以及设备和与产品接触表面的微生物数量。
（3）人员卫生监测的关键是手套和洁净服表面的微生物监测。
6.2温湿度的监测6.2.1测试标准6.2.1.1洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。
无特殊要求时，温度控制在18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%。
6.2.1.2 C级和D级洁净区：温度18℃～26℃，相对湿度45%～65%。
6.2.2测试周期：每天记录两次，上午一次，下午一次。
6.2.2.1主要房间都应放置温湿度表，可随时观察温湿度变化情况，并记录。
6.2.2.2由空调人员和岗位操作人员监测，并填写监测记录。
6.2.3当发现监测结果超出标准规定的范围时，应立即通知主管领导和空调岗位人员，对空调系统进行调整，记录并归档。
6.3压差的监测6.3.1压差表安装在墙上，可随时观察室内外压力变化情况，并记录。
6.3.2测试时所有空调系统应处于连续运行状态。
6.3.3观察压差时，洁净区所有门应关闭，不许有人穿越房间。
6.3.4监测频率：洁净室（区）的压差每天记录两次，上午一次，下午一次。
6.3.4监测人员：空调人员和岗位操作人员在动态条件下监测，填写监测记录。
1目的规范洁净区环境监控管理，确保洁净区的环境符合GMP要求。
2范围适用于各生产车间的洁净区的监控。
3职责QA负责各车间洁净区的环境监控。
4内容4.1定义4.1.1静态4.1.1.1静态a：洁净室（区）在净化空气调节系统已安装完毕且功能完备的情况下，生产工艺设备已安装，洁净室（区）内没有生产人员的状态。
4.1.1.2静态b：洁净室（区）在生产操作全部结束，生产操作人员撤离现场并经过20min自净后。
4.1.2动态：洁净室（区）已处于正常生产状态，设备在指定的方式下进行，并且有指定的人员按照规范操作。
4.2测试项目、标准及频次4.2.1风速、风量及换气次数4.2.1.1风速测试：A级区进行风速测试，检测频次：每个月一次。
4.2.1.2风量及换气次数测试：A级区外的其它区域测量风量及换气次数。
检测频次：至少每年一次。
4.2.1.3标准a.A级区风速：层流系统在其工作区域必须均匀送风，风速为0.36-0.54m/s。
b.换气次数：B级洁净室换气次数n≥50次/h，C级洁净室换气次数n≥25次/h，D级洁净室换气次数n≥15次/h。
4.2.2流型4.2.2.1检测区域：A级区，检测频次：至少每年一次。
4.2.2.2标准：应为层流4.2.3压差4.2.3.1检测频次：正常投产时每天一次。
4.2.3.2标准a.洁净区与非洁净区之间、不同等级洁净区之间的压差应不低于10帕斯卡。
b.相同洁净度等级不同功能的操作间之间应保持适当的压差梯度，以防止污染和交叉污染。
4.2.4温度、相对湿度4.2.4.1检测频次：正常投产时每天一次。
4.2.4.2标准：温度18-26℃，相对湿度45-65%。
4.2.5高效过滤器检漏4.2.5.1检测频次：A级区每半年用尘埃粒子计数扫描巡检法进行一次过滤器完整性测试，每年用气溶胶法进行一次过滤器完整性测试；B级、C级区每年用气溶胶法进行一次过滤器完整性测试，D级区每年用尘埃粒子计数扫描巡检法进行一次过滤器完整性测试。
1 目的制定洁净区环境监测标准管理规程，以规范洁净室（区）的环境监测，确保洁净室（区）的洁净度达到标准。
2 范围适用于洁净区的温湿度、压差、风速、风量、悬浮粒子、沉降菌、浮游菌的测试。
3 责任化验室环境检测人员、QA人员、原料车间。
4 引用标准4.1《药品生产质量管理规范》（2010年修订）。
4.2《中国药典》（2015版）。
5 流程图N/A6 内容6.1环境监控简介6.1.1环境监控对象包括空气、表面和人员。
6.1.2监测项目包括温湿度、压差、风量风速、悬浮粒子、微生物监测等。
其中，微生物监测包括空气微生物监测、表面微生物监测以及人员卫生监测。
（1）空气微生物的测定有浮游菌和沉降菌两种测定方法。
（2）表面微生物监测用来监测生产区域表面以及设备和与产品接触表面的微生物数量。
（3）人员卫生监测的关键是手套和洁净服表面的微生物监测。
6.2温湿度的监测6.2.1测试标准6.2.1.1洁净室（区）的温度和相对湿度应与药品生产工艺要求相适应。
无特殊要求时，温度控制在18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%。
6.2.1.2 C级和D级洁净区：温度18℃～26℃，相对湿度45%～65%。
6.2.2测试周期：每天记录两次，上午一次，下午一次。
6.2.2.1主要房间都应放置温湿度表，可随时观察温湿度变化情况，并记录。
6.2.2.2由空调人员和岗位操作人员监测，并填写监测记录。
6.2.3当发现监测结果超出标准规定的范围时，应立即通知主管领导和空调岗位人员，对空调系统进行调整，记录并归档。
6.3压差的监测6.3.1压差表安装在墙上，可随时观察室内外压力变化情况，并记录。
6.3.2测试时所有空调系统应处于连续运行状态。
6.3.3观察压差时，洁净区所有门应关闭，不许有人穿越房间。
6.3.4监测频率：洁净室（区）的压差每天记录两次，上午一次，下午一次。
6.3.4监测人员：空调人员和岗位操作人员在动态条件下监测，填写监测记录。
**********科技有限公司GMP文件1目的：建立洁净区环境监测管理规程，规范洁净区环境监测的管理。
2适用范围：适用于化验室洁净区、生产洁净区的监测管理。
3责任者：质量部4管理内容：4.1监测项目包括：温湿度、悬浮粒子、沉降菌。
4.2温湿度为日常监控，由洁净区使用人员负责。
悬浮粒子和沉降菌由质量部负责定期安排监测工作，生产部或化验室人员负责协调工作，QA负责取样工作，化验室负责微生物的检验工作。
4.3悬浮粒子4.3.1测试方法：用计数浓度法，即通过测定环境内单位体积空气中含大于或等于某粒直径的悬浮粒子数来评定洁净室内的悬浮粒子洁净度等级。
测试方法参照GB/T 16292-2010。
4.3.2标准规定4.3.4采样次数：对任何洁净区或局部空气净化区域，采样点数目不得少于2个。
4.3.5监测频率：100级洁净区每季度一次，100000或300000级洁净区每半年一次，特殊情况下如厂房改造，更换过滤器时，需要在工作完成后进行测定。
4.3.6采样量4.4.1测试方法：参照GB/T 16294-20104.4.1.1 培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）或沙氏培养基（SDA）4.4.1.2 培养条件：30～35℃培养不少于48小时或20～25℃培养不少于5天。
4.4.1.3 采样位置：工作区采样点的位置离地0.8～1.5m左右（略高于工作面）。
4.4.2 监测频率：100级洁净区每季度一次，100000或300000级洁净区每半年一次，特殊情况下如厂房改造，更换过滤器时，需要在工作完成后进行测定。
4.4.3采样次数：每个采样点采样一次。
4.4.4洁净区沉降菌监测的标准如下：4.5停产期间，可按照监测频率一次性完成所有监测项目。
4.6空气洁净度超过标准时的纠正措施4.6.1当空气洁净度中的悬浮粒子数量超过纠偏限度时，由质量部联合生产部查明原因，如果换气次数和风速均正常，则可通过进行洁净环境重新清洁，按要求净化至少半小时，依法测定，应符合规定；如属过滤器问题，则对初效、中效过滤器进行处理或更换高效过滤器；4.6.2当微生物数量超过纠偏限度时，则必须对此区域进行重新进行清洁，然后重新监测，测试结果应符合规定。
洁净区环境检测规程1目的规定洁净区的控制指标和检测方法，有效的控制洁净车间和实验室洁净区环境的洁净度，满足生产和检测环境的要求。
2范围本规程适用本公司洁净区环境的洁净度检验。
3职责化验员负责洁净环境检测各项技术要求的检验。
4.工作程序检验项目温度、湿度、压差、风速（换气次数）、尘埃粒子数、菌落数。
温度、湿度要求洁净区温度（18-28）℃，相对湿度（45-65）%仪器与设备温湿度计温湿度计必须在检定合格周期内操作方法目测温湿度计测定频次1次/班压差要求洁净室与室外压差≥10Pa，洁净室与非洁净室≥5Pa，不同级别洁净室之间≥5Pa。
仪器与设备微压计微压差计或手持式数显压差计须在检定合格周期内。
操作方法用微压计或数显压差计测试各室的静压力，由两室静压力之差，为静压差。
测定频次1次/月换气次数/风速要求如表1所示：表1各级别洁净区风速的技术指标仪器与设备风速计风速计必须在检定合格周期内。
操作方法用风速计距风口下25cm处测量风速，采样点为风口的四个顶角及中心位置（不少于5点）。
计算5个点风速平均值，为一个风口的风速。
换算公式：换气次数=∑（高效送风口风速×高效送风口面积）被测房间体积测定频次：1次/月尘埃粒子数要求如表2所示：表2各级别洁净区尘埃粒子数的技术指标仪器与设备尘埃粒子计数器内容（1）用尘埃粒子计数仪在高度米水平面上的位置采样，总采样次数不少于5次。
（2）最少采样点数目的确定如3表所示：表3：最少采样点数目（3）采样点的位置采样点一般在离地面高度的水平面上均匀布置。
采样点多余5点事，也可以在离地面至高度区域内分层分布，但每层不少于5点。
采样点分布见附录A（4）采样次数的限定对任何小洁净室（区）或局部空气净化区域，采样点的数目不得小于2个，总采样次数不得少于5次。
每个采样点的采样次数可以多余一次，且不同采样点的采样次数可以不同。
（5）采样量不同洁净度级别每次最小采样量见表4表4最小采样量（6）采样注意事项对于单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），粒子计数器的采样管口宜朝上。
布置采样点是应尽量避开风口。
采样时，测试人员应在采样口的下风侧，并尽量少活动。
采样完毕后，宜对粒子计数器进行自净。
应采取一切措施防止采样过程的污染。
采样结果的计算（1）采样点的平均悬浮粒子浓度A采样点的平均悬浮粒子浓度A的计算公式：A=∑C C CC=1C式中：A—某一采样点的平均粒子浓度，粒每立方米（粒/m3）Ci—某一采样点的粒子浓度（i=1,2,3，…，n）,粒每立方米（粒/m3）n—某一采样点的采样次数，次（2）平均值的均值M平均值的均值M的计算公式：M=∑C C CC=1C式中：M—平均值的均值，即洁净室（区）的平均粒子浓度，粒每平方米（粒/m3）Ai—某一采样点的平均粒子浓度（i=1,2,3，…，n），粒每平方米（粒/m3）L—某一洁净室（区）内的总采样点数，个（3）标准差SE标准差SE的计算公式：SE=√（A1−M）2+（A2−M）2+（A3−M）2+⋯+（A C−M）2C（L−1）式中：SE—平均值均值的标准误差，粒每平方米（粒/m3）（4）95％置信上限（UCL）95％置信上限（UCL）计算公式：UCL=M+t×SEUCL—平均值均值的95％置信上限，粒每平方米（粒/m3）t—95％置信上限的t分布系数，见表5结果的判定判断悬浮粒子的洁净度级别应同时满足以下两个条件（1）每个采样点的平均悬浮粒子浓度必须不大于规定的级别界限，即A≤级别极限；i （2）全部采样点的悬浮粒子浓度平均值均值的95％置信上限必须不大于规定的级别极限，即UCL≤级别界限。
测定频次1次/月沉降菌要求（1）判定标准如表6所示（2）最少采样点数目最少采样点数目见表3（3）采样点位置工作区采样点位置离地面～（略高于工作面）。
可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
采样点位置分布见附录A（4）最少培养皿数在满足最少采样点数目的同时，还需满足最少培养皿数，见表7（5）采样次数每个采样点一般采样一次仪器与设备仪器设备包括：培养皿、培养基、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器（1）培养皿：采用?90mm×15mm规格的培养皿（2）培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基或沙氏培养基。
配制方法见附录B。
（3）恒温培养箱：必须定期对恒温培养箱进行校验。
测试步骤（1）测试前，培养皿表面需严格消毒。
（2）将已制备好的培养皿按采样要求逐个放置，然后从里到外逐个打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。
（3）静态测试时，培养皿暴露时间为30min以上；动态测试时，培养皿暴露时间不大于4h。
（4）全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中培养。
（5）采用大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）配制的培养皿经采样后，在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基（SDA）配制的培养皿经采样后，在20℃～25℃培养箱中培养，时间不少于5d。
（6）每次采样应有对照试验，避免培养皿运输或搬动过程中造成影响，每次或每个区域取不低于1个对照皿，与采样皿同法操作但不需暴露采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱中培养，结果应无菌生长。
（7）每批培养皿应有对照试验，检验培养皿在使用前已被污染。
每批可选定不少于3个培养皿作为批对照培养。
采样注意事项（1）对于单向流洁净室（区）或送风口，采样器采样口朝向应正对气流方向；对于非单向流洁净室（区），采样口向上。
（2）布置采样点时，至少应尽量避开尘粒较集中的回风口。
（3）采样时，测试人员应站在采样口的下风侧，并尽量少走动。
（4）应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。
菌落计数（1）用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数。
（2）若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
（3）当某个测试点有多个培养皿时，可计算单个培养皿的沉降菌平均菌落数，计算公式如下：C=C1+C2+⋯+C CC式中：C—平均菌落数Mn—n号培养皿菌落数n—培养皿总数结果的判定（1）每个测点的沉降菌平均菌落数必须低于所选定标准中的界限（2）在静态测试时，若某个测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判定合格。
测定频次1次/月浮游菌要求（1）判定标准如表8所示（2）最少采样点数目最少采样点数目见表3（3）采样点的位置工作区测点位置离地～左右送风口测点位置离开送风面30cm左右可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点采样点布置的规则见附录A。
（4）最小采样量浮游菌每次最小采样量见表9所示表9 最小采样量（5）采样次数每个采样点一般采样一次仪器与设备仪器与设备包括：浮游菌采样器、培养皿、培养基、恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器。
（1）培养皿：采用?90mm×15mm规格培养皿。
（2）培养基：大豆酪蛋白琼脂培养基或沙氏培养基，其配制方法见附录B。
（3）恒温培养箱：必须定期对恒温培养箱进行校验。
测试步骤（1）测试前仪器、培养皿表面必须严格消毒（2）采样器进入被测房间前先用消毒房间的消毒剂消毒，用于100级洁净室的采样器宜预先放置在被测房间内。
（3）消毒剂擦拭培养皿的外表面。
（4）采样前，先用消毒剂清洗采样器的顶盖、转盘以及罩子的内外表面，采样结束，再用消毒剂轻轻喷洒罩子的内壁和转盘。
（5）采样口和采集管，使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对对采集管内外壁进行消毒时，应将管中残留液倒掉并晾干。
（6）采样者应穿戴被测洁净区相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手消毒剂消毒或戴无菌手套操作。
（7）采样仪器经消毒后先不放入培养皿，开启浮游菌采样器，使仪器中的残留消毒剂蒸发，时间不宜少于5min，并检查流量并根据采样量调整设定采样时间。
（8）关闭浮游菌采样器，放入培养皿，盖上盖子。
（9）置采样口于采样点后，开启浮游菌采样器进行采样。
（10）全部采样结束后，将培养皿倒置于恒温培养箱中进行培养。
采用大豆酪蛋白琼脂培养基配制的培养皿经采样后，在30℃～35℃培养箱中培养，时间不少于2d；采用沙氏培养基配制的培养皿经采样后，在20℃～25℃培养箱中培养，时间不少于5d。
（11）每次采样应有对照试验，避免培养皿运输或搬动过程中造成影响，每次或每个区域取不低于1个对照皿，与采样皿同法操作但不需采样，然后与采样后的培养皿一起放入培养箱中培养，结果应无菌生长。
（12）每批培养皿应有对照试验，检验培养皿在使用前已被污染。
每批可选定不少于3个培养皿作为批对照培养。
采样注意事项（1）所使用仪器必须在检定有效期内（2）采样管严禁渗漏，内壁应光滑。
（3）使用前应仔细检查每一个培养皿的质量，培养基及培养皿有变质、破损或污染的不能使用。
（4）对培养基。
培养条件及其他参数详细记录。
（3）采样管的长度应根据测点的高度定，尽量减少弯曲。
菌落计数（1）用肉眼对培养皿上所有菌落直接计数、标记或在菌落计数器上点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。
（2）若平板上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个以上菌落计数。
（3）每个测点的浮游菌平均浓度的计算公式如下：浮游菌平均浓度(个/m3)=菌落数采样量（4）由于细菌种类繁多，差别甚大，计数时一般用透射光于培养皿背面或正面仔细观察，不要漏计培养皿边缘生长的菌落，并须注意细菌菌落和培养基沉淀物的区别，必要时用显微镜鉴别。
结果判定（1）每个测点的浮游菌平均浓度必须低于所选定评定标准中的界限。
（2）在静态测试时，若某测点的浮游菌平均浓度超过评定标准，则应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判定为符合。
测定频次1次/月日常监控（1）对于压差及温湿度的日常监控，在工作阶段，每天早晚各一次记录工作场所的微压差计及温湿度计的度数。
（2）尘埃粒子、浮游菌及沉降菌除定期检测外不做日常监控，但在出现以下情况时，需对洁净区相关项目做重新检测：停工时间比预计时间延长关键区域内发现有污染存在在生产期间，空气净化系统进行任何重大维修日常操作记录反映出倾向性的数据消毒规程的改变引起生物污染的事故等当生产设备有重大维修或增加设备时当洁净区（室）结构或区域分布有重大变动时附录A 洁净室（区）采样点布置洁净室（区）采样点布置宜力求均匀，避免采样点在局部区域过于稀疏。
下列多采样点布置图示可做参考:100级单向流区域，洁净工作台或局部空气净化设施的采样点宜布置在正对气流方向的工作面上，气流形式可参考下图：水平单向流的气流形式：→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→→垂直单向流的气流形式：↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓↓附录B 培养基的灭菌及准备1、大豆酪蛋白琼脂培养基（TSA）培养基的灭菌及准备培养基采用大豆酪蛋白琼脂培养基，可以按照以下处方制备，也可使用按该处方生产的符合要求的脱水培养基。
