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大肠菌群不同检测方法的结果分析作者：陈梅王楠馨左泽彦罗绍楠来源：《食品安全导刊·中旬刊》2021年第07期摘要：目的：通过对大肠菌群质控样品的检测，比对VRBA平板计数法和LST多管发酵法在大肠菌群计数检测中的准确性，同时分析移液管和移液枪对检测结果的影响。
方法：质控样品来源于中国检验检疫科学研究院测试评价中心，按照质控样品证书和GB 4789.3—2016进行检测。
结果：VRBA平板计数法的检测结果|z|值为0.095，LST多管发酵法的检测结果|z|值为1.349。
使用移液管进行VRBA平板计数法检测的|z|值为0.095，而使用移液枪进行VRBA 平板计数法检测的|z|值为0.804。
结论：相比于LST多管发酵法，VRBA平板计数法的检测结果更接近质控样品的特性值，灵敏度和准确性更高。
相比于移液枪，使用移液管进行VRBA 平板计数法检测的结果更接近质控样品的特性值，准确性更高。
关键词：大肠菌群;质控样品;VRBA平板计数法;LST多管发酵法大肠菌群是指需氧及兼性厌氧、在35～37 ℃培養条件下，48 h内能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽孢杆菌[1-2]。
大肠菌群的检测方法主要有VRBA平板计数法、乳糖胆盐多管发酵法、LST多管发酵法、纸片法、PCR试剂盒法、全自动生化鉴定仪法等。
根据《食品安全国家标准食品微生物学检验大肠菌群计数》（GB 4789.3—2016），在食品检测领域，VRBA平板计数法、乳糖胆盐多管发酵法和LST多管发酵法是常用的检测方法[3-4]。
1 材料与方法1.1 质控样品来源质控样品来源于中国检验检疫科学研究院测试评价中心。
质控样品为西林瓶真空包装，包装完好。
1.2 试剂与仪器VRBA琼脂、BGLB肉汤、LST肉汤均购于北京陆桥;氯化钠试剂购于国药集团。
立式压力蒸汽灭菌器（型号：SQ810C，厂家：重庆雅马拓）;生化培养箱（型号：BD115，厂家：宾得）;光学显微镜（型号：DM3000LED，厂家：徕卡）。
高灵敏度大肠菌群测试片法与多管发酵法检测海水中粪大肠菌群的比较研究韩朝国;董炜峰;杨毕铖;李蔚萍【摘要】Fecal coliform is an important detection index for the quality of seawater baths,the tra-ditional method is mature and based on the multi-tube fermentation,but it takes a long time and the operation is tedious.High sensitivity coliform test method has been accepted by the interna-tional authorities,and this method has been incorporated into the standard method in China.This paper took the water quality test of Xiamen seawater bathing as an example,to carry out the com-parison experiment of two methods.The study showed that the two methods of fecal coliform test results are consistent well.High sensitivity coliform test method has the advantages of easy opera-tion,high efficiency and labor-saving,and more suitable for daily testing as well.%粪大肠菌群是海水浴场水质状况的重要检测指标,传统检测方法以多管发酵法为主,其方法较为成熟,但耗时较长、操作繁琐;高灵敏度大肠菌群测试片法获国际官方认证,我国也已将其纳入标准方法.文章以厦门海水浴场的水质检测为例,开展2种方法的对比实验,结果表明:2种方法对粪大肠菌群的检测结果基本一致;高灵敏度大肠菌群测试片法具有简便、快速和省力的优点,更加适用于日常检测工作.【期刊名称】《海洋开发与管理》【年(卷),期】2017(034)010【总页数】4页(P68-71)【关键词】高灵敏度大肠菌群测试片法;多管发酵法;粪大肠菌群;海水浴场;海水质量【作者】韩朝国;董炜峰;杨毕铖;李蔚萍【作者单位】国家海洋局厦门海洋环境监测中心站厦门 361008;国家海洋局厦门海洋环境监测中心站厦门 361008;国家海洋局厦门海洋环境监测中心站厦门361008;国家海洋局厦门海洋环境监测中心站厦门 361008【正文语种】中文【中图分类】X834粪大肠菌群主要来源于人类和其他动物排泄的粪便，随着雨水和污水等的排放进入海水中，对沿海的海水浴场造成污染，进而对人体产生危害。
传统方法与Petrifilm纸片法的成本分析一.劳动力成本计算
个工作日，每个工作日8个小时工作时
注：30
二.传统方法的材料成本计算
传统方法大肠菌群检测的成本计算
3M 大肠菌群测试片法成本
传统平板法检验金黄色葡萄球菌的成本计算
注: 1. 培养皿/试管，循环使用,每次使用的成本：培养皿为0.2元，试管为0.1元3M 金葡菌测试片法成本
三. 综合成本比对(基于以上数据)
四. 结论
细菌总数、大肠菌群、金葡检测项目都使用3M测试片，每月费用增加在6000元左右(由于Petrifilm使用带来的固定资产投资减少尚不在计算之列）
纸片法还有几大优点：1.结果准确,平行效果好；
2.省去了准备实验用品的步骤；
3.菌落生长典型,便于计数;
4.大肠菌群和金黄色葡萄球菌
的检出时间大幅提前；5.实验结束的后期处理简单。
0002
0成本分析
.5.51
m
元左右(由于Petrifilm使用带来的。
快速检测技术能缩短检测时间，简化操作，常见的食品微生物检测技术有测试片法、纸片法和试剂盒法等，不同的快速检测法有不同的优缺点，但也有共同点，应用的领域不同，起到的作用就不同。
对测试片法、试剂盒法和纸片法的优缺点及意义作对比分析以促进其在食品微生物检验中的应用和推广。
1 常见的食品微生物快速检测 技术测试片法是以纸片、冷水可凝胶和无水纺布等作为培养基载体，将特定的显色物质固定在上面，通过观察试纸的显色反应来测定食品微生物的方法。
纸片扩散法是将含有定量抗菌药物的滤纸片贴在已接种了测试菌的琼脂表面，纸片中的药物在琼脂中扩散，随着扩散距离的增加，抗菌药物的浓度呈对数减少，在纸片周围形成浓度梯度，在药物扩散区域，纸片周围一定抑菌浓度范围内的测试菌不能生长，范围外的菌株继续生长，从而在纸片周围形成透明抑菌圈，抑菌圈的大小可以反映测试菌对测定药物的敏感程度，并与该药对测试菌的最低抑制浓度呈负相关，即抑菌圈越大，最低抑菌浓度越小。
试剂盒法是在检测样品中加入部分富集培养物，样品沿着检测装置流动，渐渐会出现分区，根据对照区和检测区的对比分析判定结果，短时间内就可以完成检测，是检测沙门氏菌的简便方法。
2 常见微生物快速检测技术在食品微生物检验中的应用食品微生物检测的三大指标是菌落总数、大肠菌群、致病菌，其中，菌落总数主要是作为判定食品被细菌污染程度的标志，是卫生检验指标的常检项之一，纸片法和测试片法均可用于检测食品中的菌落总数，虽检测原理和步骤不同，但结果的准确性均较高，是检测菌落总数的不二之选。
大肠菌群是评价食品卫生质量的重要指标之一，常用作粪便污染指标，以检出情况判定食品是否被粪便污染，常用纸片法检测大肠菌群数，该法比传统的最可能数法结果要更准确且所需时间要更短。
霉菌和酵母菌会使食品腐败变质，也常作为衡量食品卫生质量的指标菌，纸片法和快速测试片法均可用于霉菌和酵母菌的检测，霉菌和酵母菌在纸片上生长后显示蓝色斑点，霉菌菌落斑点较大且扩散，酵母菌菌落较小且圆滑。
简述食品中大肠杆菌的快速检测方法相关研究进展摘要：大肠菌群的快速检测是食品、药品卫生监督检验迫切需求，本文从免疫学技术，酶学的技术，分子生物学技术，传统检测方法改进技术，物理化学技术，其它技术方面对大肠菌群快速检测方法研究进展进行综述，并对其存在问题及应用前景进行分析。
这些方法各有优缺点，免疫学技术和分子生物学技术灵敏度高，但假阳性率高，无法区分死活菌；酶学的技术和物理化学技术特异性好，省时省力，但这些方法成本较高，不适合基层实验室使用；传统检测方法改进技术结果准确，但费时费力。
因此，仍需要发展一种新的方法解决所存在的问题。
要真正实现大肠菌群的快速检测还需要不断进行科学研究，以寻找一种能够真正实现成本低、灵敏度好、准确性高并且检测速度快的更合适的方法。
关键词：食品；大肠菌群；快速检测；研究1引言大肠菌群为一群在37C、24h能发酵乳糖，产酸、产气，需氧和兼性厌氧的革兰阴性无芽胞杆菌的统称。
这些细菌多存在于温血动物粪便中，人、畜粪便对外界环境的污染是大肠菌群在自然存在的主要原因。
因此，大肠菌群被国际上公认为检测各种水质、医药及食品在流行病学上安全性的指示菌。
如果检测到大肠菌群呈阳性结果，那么便表明食品、药品或者水质存在大肠菌群，已经被粪便污染。
大肠菌群的数量与受到的污染程度成正比，数量越多，受污染越严重。
目前我国国家标准主要用多管发酵法来检测大肠菌群多管发酵法作为一种传统的检测方法已沿用多年，其准确性、权威性无可质疑，但该方法费时费力，而且检测所需的费用较高，已无法满足人们对食品、药品安全现场监测的要求，因此，现在食品、药品卫生监督检验迫切需要一种更加有效、快速的大肠菌群检测方法。
近年来，世界各国针对大肠菌群的快速、定量检测技术都进行了专门的研究，本文综述了大肠菌群快速检测技术的研究进展，并对其存在问题及应用前景进行分析。
2大肠菌群主要的快速检测方法2.1免疫学技术免疫学方法检测原理是依据抗原和抗体特异性反应。
