配方-血浆蛋白的研究进展及其应用
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人体血浆蛋白组学人体血浆蛋白组学是研究人体血浆中蛋白质组成和功能的学科。
血浆蛋白是血液中最丰富的蛋白质类别,不仅起着运输、免疫、凝血等重要功能,还与多种疾病的发生和发展密切相关。
蛋白质组学通过对人体血浆中蛋白质的分析,可以揭示疾病的发生机制、疾病标志物的筛选和治疗靶点的发现,为临床诊断和治疗提供重要依据。
血浆蛋白组学的研究方法主要包括两大类:一类是定性分析,用于鉴定血浆中存在的蛋白质种类和含量;另一类是定量分析,用于比较不同样本中蛋白质的表达差异,寻找与特定疾病相关的标志物。
在定性分析中,常用的方法有质谱分析和凝胶电泳。
质谱分析通过测量蛋白质分子的质量和荷质比,可以快速鉴定出血浆中的蛋白质种类,包括已知的蛋白质和未知的蛋白质。
凝胶电泳则是通过将血浆样品在凝胶上进行分离,根据蛋白质的大小、电荷等特性,可以将蛋白质分离成不同的带状,从而鉴定出血浆中的蛋白质组成。
在定量分析中,常用的方法有同位素标记和多反应监测。
同位素标记是通过给样品中加入同位素标记物,然后通过质谱分析测量同位素标记物的含量,从而比较不同样品中蛋白质的表达差异。
多反应监测则是通过质谱分析测量特定蛋白质的多个肽段的含量,从而确定该蛋白质在不同样品中的表达差异。
血浆蛋白组学的研究已经在许多领域取得了重要进展。
例如,在肿瘤学中,通过比较癌症患者和健康人血浆中蛋白质的表达差异,可以发现与肿瘤相关的标志物,为早期诊断和治疗提供依据。
在药物研发中,通过比较药物在体内和体外的作用差异,可以筛选出与药物敏感性相关的蛋白质,为个体化用药提供指导。
在免疫学中,通过比较不同疾病患者和健康人血浆中蛋白质的表达差异,可以揭示疾病的发生机制,为疾病治疗提供新的靶点。
人体血浆蛋白组学是一门重要的研究领域,通过对人体血浆中蛋白质的分析,可以揭示疾病的发生机制和治疗靶点,为临床诊断和治疗提供重要依据。
随着技术的发展和研究的深入,相信血浆蛋白组学将在未来发挥更大的作用,为人类健康事业做出更大贡献。
我国血浆综合利用研究概述
裴仁俊;费章城;潘波;曹海军;李长清
【期刊名称】《临床输血与检验》
【年(卷),期】2022(24)6
【摘要】血浆是宝贵的资源,随着我国未来几十年老龄化程度的不断加剧,对血浆采集将带来巨大冲击,如何提升血浆的综合利用是行业亟待解决的问题。
本文对我国原料血浆的采集、血浆蛋白制品种类及制备工艺、血浆蛋白研究现状、促进血浆综合利用法规等方面进行了较全面的综述。
目前我国血浆蛋白制品种类不断增多,促进血浆综合利用相关政策不断出台,但与国外相比我国生产厂家规模较小、新产品及新技术研发动力不足、血浆蛋白制品的深入研究欠缺,血浆蛋白制品企业重组并购,加强产学研合作,科研实力的提升将是未来发展的方向。
【总页数】10页(P807-816)
【作者】裴仁俊;费章城;潘波;曹海军;李长清
【作者单位】中国医学科学院
【正文语种】中文
【中图分类】R977.8
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血浆蛋白的测定及临床意义一、血浆蛋白质测定方法的进展:(一)、比色法:例如总蛋白的测定方法:双缩脲反应法;白蛋白的测定方法:溴甲酚绿法。
(二)、电泳法:是进一步分离蛋白质的方法。
(三)、免疫测定法:是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的分析方法。
特点:(1)特异性好:即某一抗原只与其相应的抗体起反应。
(2)敏感性高,可检测出纳克(ng)水平的的量。
免疫测定法包括:1、免疫扩散法:敏感度在ug/ml,因此只能用于检测含量较高的蛋白质。
且操作繁琐、时间长,需18-48小时。
2、免疫电泳法:是区带电泳与免疫扩散相结合的方法。
一般不能定量,仅用于检测异常蛋白成分。
3、免疫浊度法:基本原理是:当可溶性抗原与相应抗体特异结合,在二者比例合适,并有一定浓度的电解质存在时,可以形成不溶性的免疫复合物,即沉淀反应。
二、免疫浊度法的原理:免疫浊度法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。
1、透射免疫比浊法:当一定波长的光线通过抗原抗体反应混合液时,被形成的免疫复合物反射、遮挡或吸收而减弱。
在一定范围内,吸光度(A)与IC量呈正相关。
因此当抗体量固定时,根据吸光度可计算出抗原量。
要求形成的IC达到一定的数量,而且分子颗粒较大,否则难以精确测定,因此检测灵敏度相对较低。
2、散射免疫比浊法:光线通过检测溶液时,被反应形成的抗原抗体复合物折射而部分偏转,产生散射光,散射光强度(I)与样本的IC量、散射夹角(θ)成正比,而与入射光波长成反比。
散射免疫比浊法又可分为终点散射比浊法和速率散射免疫比浊法(1)终点散射免疫比浊法:当反应达到平衡时进行检测,通常需10-30min,且灵敏度较低。
(2)速率散射免疫比浊法:由于抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度在单位时间内时不同的,当反应开始时,进行动力学测定可以发现在某一时间反应速度最快,IC形成最多,散射光强度相应最大,即所谓速率峰(最大反应速率Vmax),Vmax与待测抗原量呈正相关而获得测定。
动物血液主要功能成分制备及应用研究进展闫文杰;李兴民【摘要】动物血液是畜禽屠宰加工的主要副产品,营养价值高,尤其含有血红素铁、生物活性肽等具备特定功能的成分,应用前景广阔.本文对来源于动物血液中的主要功能成分血红素铁、亚硝基血红蛋白、血浆蛋白粉、血红蛋白粉、生物活性肽、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的制备和应用进行综述,以期为未来动物血液的研究和应用提供参考.【期刊名称】《食品研究与开发》【年(卷),期】2018(039)016【总页数】5页(P215-219)【关键词】动物血液;功能成分;血红蛋白;蛋白粉;超氧化物歧化酶【作者】闫文杰;李兴民【作者单位】北京联合大学生物化学工程学院,北京100023;中国农业大学食品科学与营养工程学院,北京100083【正文语种】中文动物血液是畜禽屠宰加工过程中的主要副产品,营养价值高,应用前景广阔。
美国在动物血液的开发研究上处于世界领先水平,在政策鼓励和法律方面,血液加工也得到政府的大力支持,仅美国Sigma、Boaolai等蛋白质公司的血液制品产量占全世界产量的30%以上。
这些公司一直不断加强对血液制品科技上的投入,目前,已将资源和力量集中在亚硝基血红蛋白、血浆蛋白粉、血红素铁、生物活性肽等产品的研发上,它们是食品添加剂、保健食品、生物制剂的重要原料,广泛应用于医药、食品等领域。
中国作为世界第一产肉大国,每年可得动物血液2.3×109kg以上,这是一个巨大的动物蛋白资源库。
但是,我国动物血液的利用率还很低,除小部分用作饲料、食用及提取生化药品外,大部分被废弃,既造成重大的蛋白质资源的损失,而且还污染环境,危害人类健康。
从上世纪90年代以来,随着美国公司的产品大量进入中国市场,一些国内研究人员和企业开始研究生产血浆蛋白粉、血红蛋白粉等产品,已形成血液抗凝,血液分散集中等一批重大成果,但尚未突破动物血液中功能成分制备的关键技术与产业化生产[1]。
医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术在当今世界,生物技术的发展已经成为医学和生物制药领域最为重要的技术之一。
而医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术,正是生物技术在医学领域的一个重要应用。
本文将从浅入深地讨论这一技术,探究其应用前景以及对医学和生物制药领域的意义。
1. 医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术概述在传统的医药制备中,血清白蛋白通常是通过人类血浆提取的。
然而,由于传统提取方法存在着诸多限制和风险,因此科学家们开始探索将重组DNA技术应用于人血清白蛋白的生产中。
植物作为重组蛋白的高效生产平台,成为了制备医药级植物源重组人血清白蛋白的首选。
2. 医药级植物源重组人血清白蛋白的制备原理及技术路线医药级植物源重组人血清白蛋白的制备主要涉及到重组蛋白的基因克隆、表达、纯化和功能评价等关键技术。
通过对植物细胞内主要的生物合成途径进行调控,使其能够表达出与人体血清白蛋白相同的蛋白质。
而后通过分子生物学技术、细胞生物学技术以及蛋白纯化技术等,实现医药级植物源重组人血清白蛋白的高效制备。
3. 医药级植物源重组人血清白蛋白的应用前景医药级植物源重组人血清白蛋白除了具备传统人血清白蛋白所具备的医学应用价值外,还具有生产成本低、来源可控等优势。
该技术在现代生物制药领域具有广阔的应用前景。
在疾病治疗、生物材料及疫苗研发等方面都有着重要的作用。
4. 个人观点和总结医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术的发展,标志着医学和生物制药领域进入了一个全新的阶段。
作为一个有着深厚生物技术背景的研究人员,我相信该技术必将在未来取得更加广泛的应用,为医学和生物制药领域带来更多的发展机遇和可能性。
通过对医药级植物源重组人血清白蛋白制备技术的全面评估,我们不仅从技术角度全面了解了这一技术的原理和应用,还深入探讨了其在医学和生物制药领域的应用前景和意义。
希望能够通过本文的阐述,对相关领域的科研工作者和读者们有所启发和帮助。
血浆蛋白质临床意义(一)前白蛋白前白蛋白(prealbumin,PA),分子量5.4万,由肝细胞合成,在电泳分离时,常显示在白蛋白的前方,其半寿期很短,仅约12小时。
因此,测定其在血浆中的浓度对于了解蛋白质在营养不良和肝功能不全,比之白蛋白和转铁蛋白具有更高的敏感性。
PA除了作为组织修补的材料外,还可视作一种运载蛋白,可结合T4与T3,而对T3的亲和力更大。
PA与视黄醇结合蛋白形成复合物,具有运载维生素A的作用。
在急性炎症、恶性肿瘤、肝硬化或肾炎时其血浓度下降。
(二)白蛋白白蛋白(albumin,Alb)系由肝实质细胞合成,在血浆中的半寿期约为15-19天,是血浆中含量最多的蛋白质,占血浆总蛋白的40%-60%。
其合成率虽然受食物中蛋白质含量的影响,但主要受血浆中白蛋白水平调节,在肝细胞中没有储存,在所有细胞外液中都含有微量的白蛋白。
关于白蛋白在肾小球中的滤过情况,一般认为在正常情况下其量甚微,约为血浆中白蛋白的0.04%,按此计算每天从肾小球滤过液中排出的白蛋白即可达3.6g,为终尿中蛋白质排出量的30-40倍,可见滤过液中多数白蛋白是可被肾小管重新吸收的。
有实验证实白蛋白在近曲小管中吸收,在小管细胞中被溶酶体中的水解酶降解为小分子片段而进入血循环。
白蛋白可以在不同组织中被细胞内吞而摄取,其氨基酸可被用为组织修补。
白蛋白的分子结构已于1975年阐明,为含585个氨基酸残基的单链多肽,分子量为66458,分子中含17个二硫键,不含有糖的组分。
在体液pH7.4的环境中,白蛋白为负离子,每分子可以带有200个以上负电荷。
它是血浆中很主要的载体,许多水溶性差的物质可以通过与白蛋白的结合而被运输。
这些物质包括胆红素、长链脂肪酸(每分子可以结合4-6个分子)、胆汁酸盐、前列腺素、类固醇激素、金属离子(如Cu2+、Ni2+、Ca2+)药物(如阿司匹林、青霉素等)。
具有活性的激素或药物当与白蛋白结合时,可以不表现其活性,而视为其储存形式,由于这种结合的可逆性和处于动态平衡,因此在调节这些激素和药物的代谢上,具有重要意义。
血浆蛋白的研究进展及其应用
浙江农业大学饲料研究所 程忠刚
近十几年来,仔猪断奶饲料和饲养技术取得了长足的进步,养猪生产者把更多的注意力放在早期断奶上。
早期断奶可缩短断奶日龄,减少疾病传染源,提高母猪繁育性能和畜群周转速度,从而提高养猪经济效益。
但由于早期断奶仔猪的消化机能发育不完善,消化酶分泌不足和机体免疫功能尚未建立,所以提早断奶及日粮从摄取液体母乳到摄食固体饲料的突然改变常引起仔猪应激,导致采食量降低,日增重下降,下痢,生长停滞,甚至死亡。
近年来,营养学家一直在探讨适合仔猪消化机能的日粮配制技术及合适的饲料源,乳制品常用于仔猪开食料中。
近期研究表明,喷雾干燥血浆蛋白(SDPP)是断奶仔猪饲料中一种很好的蛋白源,可提高仔猪采食量,加快生长速度及提高仔猪机体免疫机能等。
SDPP是一种采用喷雾干燥工艺加工而成的无腥味、高蛋白质、高氨基酸且含有大量IgG的新产品。
其加工工艺是:首先收集屠宰场猪的新鲜血液,加入抗凝剂,于密闭容器中冷却,离心分离红血球与血浆,为防止血浆中细菌繁殖,应保存在低温冷藏库中。
加工时用冷藏车将冷藏血浆运至加工厂,利用膜技术分离水分,最后应用特殊的喷雾干燥法加工成血浆蛋白。
红血球可另外干燥制成血粉。
1 血浆蛋白的特点
1.1 适口性好 通过离心分离红血球和血浆,然后再喷雾干燥,可彻底消除血浆蛋白的血腥味,降低其粘稠度,使其具有很好的适口性,如配合酸化剂或乳糖使用,效果更好。
Pierce(1996)研究表明,21天断奶仔猪饲料中加入SDPP和SDBP均可提高采食量(P<0.01),且SDPP组比SDBP组采食量提高更多,随供给量增加呈线性关系(P<0.05)。
Nelssen 等(1991)研究表明,SDPP与乳糖合用,可使饲料适口性更好。
1.2 蛋白质含量高,氨基酸平衡且利用率高 SDPP的粗蛋白质含量可达70%~80%,其所含氨基酸不但含量较高且较为平衡,消化利用率高,只是蛋氨酸相对较低,如果补加蛋氨酸则效果更佳。
Kats(1993)等试验表明,断奶仔猪在SDPP日粮中补加0.1%蛋氨酸,经过21天饲养,与不加蛋氨酸相比,在第1周内平均日增重和平均日采食量明显提高(P<
0.05),在全期试验中提高了饲料转化率(P<0.05)。
1.3 含有多种功能蛋白质 SDPP中含有丰富的白蛋白、营养结合蛋白、生长因子及免疫球蛋白(含量达22%,而初乳中只有15%),尤其含有大量IgG,仔猪采食后免疫机能大大提高,从而提高了仔猪抗病力,减少了下痢等疾病发生。
1989年,Gatnau等用12头初生仔猪做试验,出生24h后采血样用平板双向凝胶扩散法检测显示:饲喂含SDPP日粮的初生
仔猪血清中有IgG存在,而对照组仔猪血清中未检出IgG。
本试验表明,没吃初乳的仔猪可通过肠腔吸收SDPP中的IgG到血液中,提高机体免疫力。
1.4 消化率高 由于SDPP是分离出红血球的产物,从而大大提高了可消化性(血球结构造成血粉消化性差)。
研究表明,SDPP要比其他蛋白源(如奶蛋白、酪蛋白、豆粕蛋白等)有更高的消化率。
1.5 含有丰富的铁及其他物质 SDPP中含有丰富的铁,属于铁强化剂,可防止仔猪发生贫血,是良好的抗贫血药物。
此外,SDPP中还含有大量干扰素、激素、溶菌酶、凝血酶、抗癌物质等。
2 血浆蛋白的应用效果
2.1 提高日增重、采食量及饲料报酬 1996年,管武太等报道,采食含7.5%SDPP日粮的仔猪,按1.4kg/头*d定量饲喂时,采食量和平均日增重最大,随着高营养浓度日粮中SDPP从
3.75%到7.5%递增,仔猪日增重呈线性增加(P<0.05),饲料转化率有改善的趋势。
Pierce等(1996)报道,富含球蛋白的蛋白质可有效提高断奶仔猪的生长性能,降低仔猪腹泻发生率(如SDPP、SDBP、牛血分离球蛋白浓缩物等)。
管武太和李德发(1994、1996)在日粮中使用5%SDPP后,明显提高了(P<0.05)仔猪平均日增重与采食量。
另外,用猪或牛血浆蛋白粉作犊牛代用乳的蛋白源,采食量和体增重分别比用乳蛋白组高4.15kg和2.6kg,而血液中蛋白、白血球、红血球和血红朊浓度没有差异。
2.2 血浆蛋白可有效替代其他蛋白源 喂SDPP的小猪要比喂其他蛋白源的小猪长的更快,且料肉比更低,其他蛋白源包括乳蛋白、乳清粉、喷雾干燥血粉、鱼粉、肉提取液、小麦谷蛋白、分离大豆蛋白、浓缩大豆蛋白、挤压大豆粉和组合氨基酸等。
1993年,Nansen等发现,喂含SDPP日粮的仔猪比饲喂含脱脂奶粉、肉浸出物和大豆分离蛋白日粮的仔猪,有更高的日增重。
Nelssen等(1991)报道,仔猪采食SDPP比采食乳蛋白、酪蛋白、大豆蛋白日粮的仔猪有更高的日增重(P<0.01)。
Kats 等(1992)做试验比较了SDPP与挤压大豆蛋白、喷雾干燥血粉的饲用效果,结果显示,在第1周日增重和平均日采食量更高(P<0.01);在2至4周时效果更好(P<0.03)。
1992年,Tokach等用432头21天断奶仔猪做试验比较不同蛋白源对仔猪增重的影响,试验分为6组,每组72头,6组日粮分别添加5%的鱼粉、合成氨基酸、SDPP、喷干血粉、浓缩大豆蛋白和挤压大豆粉。
试验表明,SDPP组的猪比其他5种蛋白源组生长更快(P<0.03)。
2.3 仔猪日粮中血浆蛋白最适添加量 确定最适添加量可避免添加量不足或过量浪费。
Gatnau等(1991)以玉米+豆粕粉+干乳清粉为基础日
粮,分别添加0、2%、4%、6%、8%的SDPP,结果显示,在0~14天,日增重和采食量随SDPP量增加而呈线性增加(P<0.04),G/F也呈线性增加(P <0.02),6%SDPP是最理想的添加水平。
1992年Gatnau又做了类似试验,结果与1991年完全相同。
Kats等(1993)试验表明,SDPP添加量在8%~10%时,在0~14天增重效果最好。
Cabrera(1995)报道,添加8%SDPP 对仔猪有最好的增重效果和饲料转化率。
综上所述,添加范围在6%~10%之间较为理想,具体应用时应考虑如动物品种、环境条件、饲养阶段、饲料配方组成等诸多因素。
2.4 血浆蛋白与其他物质的关系 Nessmith(1996)试验表明,在早期隔离断奶仔猪的前两周饲养中,加SDPP可提高生长性能,再加入乳糖可使生长性能更好,采食量更大,乳糖可促进SDPP对仔猪生产性能的改善作用 。
Kats等研究指出,混合使用SDPP和喷干血粉比单独使用SDPP有更好的日增重和更低的饲料成本。
Burndan(1995)试验表明,蛋白源中SDPP与小麦谷蛋白比为1∶1时,有最大的日增重和采食量。
3 作用机理探讨
关于SDPP作用机理的研究不太多,综合国内外报道可能有以下两种机理:
3.1 仔猪饲喂SDPP后,血液中生长激素(GH)量显著增高,从而发挥促生长作用。
Rodes(1993)等研究表明,血浆蛋白中含有较高水平的IGF-I,这一发现表明在早期断奶仔猪体内,IGF-I、生长激素、胰岛素和血浆葡萄糖浓度影响仔猪生长性能。
他们做了试验对仔猪分别饲喂豆粕粉和SDPP,采血做血清测定,两组中IGF-I和葡萄糖浓度差异不显著(P>0.1),但SDPP组仔猪血液中GH水平高,而豆粕粉组猪体血液中胰岛素水平较高,且血浆中GH与IGF-I呈负相关(P<0.05),所以他们认为在断奶仔猪日粮中加入SDPP可增加生长速度,可能是由于血液中GH浓度升高而引起的。
3.2 SDPP中含有大量IgG,仔猪采食后血液中IgG浓度上升,从而提高机体免疫力和抗感染力,使仔猪腹泻减少,同时可提高机体免疫球蛋白效价,减少了病原菌感染,利于肠内膜绒毛正常发育,更好地吸收营养物质,从而有更好的生长性能。
目前,在许多饲养场已在哺乳、断奶仔猪以及哺乳反刍动物饲料中应用SDPP,且取得了良好的效果。
实践证明,SDPP可增加动物采食量,促进生长发育,提高饲料转化率,缩短上市周期,同时可使仔猪提早断奶增加母猪利用率。
当前应用中的限制因素是成本较高,需在今后不断研究改进SDPP生产加工工艺,以降低其生产成本,同时还要进一步探讨其作用机理等。
(参考文献略)
[通讯地址:杭州华家池,邮编:310029]。