循环肿瘤细胞检测原理及其应用35页PPT

循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的重要性
预后评估
复发监测
通过检测循环肿瘤细胞的数量和特性，可 以对胃肠道肿瘤患者的预后进行评估，为 患者提供个体化的治疗方案。
循环肿瘤细胞检测可用于胃肠道肿瘤复发 监测，提高复发诊断的敏感性和特异性， 有助于早期发现复发并采取干预措施。
疗效评价
研究价值
在胃肠道肿瘤患者治疗过程中，循环肿瘤 细胞检测可用于实时评估治疗效果，指导 治疗方案的调整和优化。
06
总结与展望
循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的意义与价值
01
预后评估
循环肿瘤细胞（CTC）检测可成为胃肠道肿瘤患者预后评估的重要指标
，通过检测CTC数量变化，可以实时监测肿瘤负荷和治疗效果，为患者
个性化治疗方案提供有力支持。
02
复发监测
CTC检测对于胃肠道肿瘤复发的监测具有较高灵敏度，能够在肿瘤复发
敏感性。
疗效评估
监测胃癌患者治疗过程中的循环肿 瘤细胞数量变化，评估治疗的疗效 。
预后判断
通过检测循环肿瘤细胞的数量和活 性，对患者的预后进行判断和预测 。
案例分析二
早期发现
通过循环肿瘤细胞检测，有助于 结直肠癌的早期发现，提高治愈
率和生存率。
复发监测
对于已经接受过治疗的结直肠癌 患者，定期检测循环肿瘤细胞，
数据收集
从多个医疗中心收集胃肠 道肿瘤患者的临床数据， 包括诊断信息、治疗过程 和预后等。
数据分析
对收集的数据进行统计分 析，以评估循环肿瘤细胞 检测在胃肠道肿瘤诊疗中 的临床价值。
结果展示
通过图表和表格等方式， 直观展示循环肿瘤细胞检 测在胃肠道肿瘤诊疗中的 临床应用和效果。

阴性富集流程图
全亚型、高效率、非依赖
通用于绝大部分实体肿瘤、非血源性循环稀有细胞的富集
我们的选择
imFISH
imFISH技术将基因水平的FISH技术与蛋白水平的 免疫荧光染色技术相结合,是兼具核遗传信息及细 胞形态改变的精准CTC鉴定分析方法。
技术优势： ➢ 核酸水平稳定性、灵敏度高（80％） ➢ 引入CD45染色，提高特异性（97％) ➢ 细胞计数、核型分析、表型分析、分子分型
便捷性
CTC只需采集少量外周静脉血便可进行检测，对人体基 本无创，取样便捷，适于动态连续性监测。
循环肿瘤细胞CTC临床应用方向
CTC临床重点应用：一、辅助诊断
判断病灶良恶性 无创便捷，发现早期隐匿转移
辅助传统TNM参考分期 提供适时诊断信息，实现精准治疗
辅助诊断
CTC检测应用于辅助诊断
诊断难
异常占位，良性? 恶性? 病灶位置不宜活检怎么办? 有创操作，是否有瘤细胞种植？
诊准难
肿瘤异质性的影响? 临床分期与病理分期不一致?如何针对肿瘤时空信 Nhomakorabea变化提供
即时诊断信息?
辅助诊断
CTC功能：
对尚未完善病理诊断的患者，CTC 可联合影像学、血清学作为辅助判断病灶良恶性的指标。 同时,CTC是对原发灶与转移灶信息的全面反映，可弥补现有传统TNM 分期的不足，提示早 期微转移的存在风险，指导临床调整诊疗策略，制定更加合理的个体化诊疗方案（如进一 步筛查转移、拟定新辅助化疗、辅助化疗方案等。
联合影像学更客观评价疗效 监测耐药发生
疗效评估、耐药性监测
胰腺癌
49.00% （单8）
75.49%
72.39% 70.3% 70.92%
（8+17） （8+17） （1+8） （8+3）

特点
CTCs具有稀有性、异质性和动态变化的特点，是一种非侵入性的“液态活检”手 段。
检测原理及技术方法
检测原理
基于物理、生化及免疫学方法对血液中的CTCs进行富集和鉴 定。
技术方法
包括大小、密度、电荷等物理特性差异进行富集的方法（如 滤膜法、微流控芯片技术等）、利用抗体与抗原特异性结合 进行捕获的方法（如免疫磁珠法）以及其他新兴技术（如基 于核酸适配体的方法等）。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃 肠道肿瘤诊疗中的应用 中国专家共识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目 录
• 引言 • 循环肿瘤细胞检测的基本原理与技术 • 循环肿瘤细胞检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用 • 专家共识详细解读 • 未来展望与研究方向
01 引言
背景介绍
癌症负担
胃肠道肿瘤是我国常见的恶性肿瘤之一，严重威胁着人民的健康和生命安全， 给社会和家庭带来巨大的负担。
VS
早期发现
CTC检测有助于胃肠道肿瘤的早期发现， 从而提高治疗的成功率和患者的生存率。
在胃肠道肿瘤分期中的应用
判断肿瘤侵袭程度
通过CTC检测可以判断胃肠道肿瘤的侵袭程度，有助于准确分期。
指导治疗方案
准确的分期信息有助于医生为患者制定更合适的治疗方案。
在胃肠道肿瘤预后评估中的应用
预测生存时间
CTC检测可用于预测胃肠道肿瘤患者的生存时间，为患者提供更个性化的治疗建议。
探索循环肿瘤细胞检测在其他肿瘤类型中的应用
拓宽应用领域
基于现有研究基础，进一步探索循环肿瘤细胞检测在 其他肿瘤类型（如肺癌、乳腺癌等）中的应用，为更 多肿瘤患者提供个体化诊疗服务。
跨瘤种比较
开展循环肿瘤细胞检测在不同肿瘤类型中的比较研究 ，揭示其在各类肿瘤中的共性与特性，为临床提供更 多维度的参考信息。

CTC的HER-2分型
• 在CTC的分子分型中，HER-2作为乳腺癌重要的 预后指标，一直广受关注
• 既往研究中CTC和组织学的HER-2状态的不一致 率波动较大（15%-61%）。CTC的HER-2阳性标 准也各不统一
CTC的HER-2分型
• 国内采用CellSearch系统提出了大于30%的CTC 强表达HER-2，即为阳性（307）
• 入组患者2026例 • Ⅰ-Ⅲ乳腺癌患者 • 确诊后辅助化疗之前进行CTC检测 • 检测采用23.5ml血液样本，出现1个CTC为阳性，
中位随访35月
早期乳腺癌
• 研究发现 • CTC阳性率为21.5%，均值1.3个，数值区域1-
827个。 • 检测出CTC的患者在DFS及无转移生存DMFS
（无转移生存期）及OS上均显著差异检测阴性的 患者 • 该研究非常确凿的证实了CTC再早期乳腺癌患者 中的独立预后价值
• CTC的出现被认为是肿瘤发生转移的前提，其数 目及分子分型在某种程度上代表了肿瘤的恶心程 度
CTC
• 检测CTC可以 • 判断预后 • 疗效预测与评价 • 研究肿瘤转移机制 • 研制新的药物 • CellSerach系统是目前唯一通过FDA批准的CTC
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ检测技术
早期乳腺癌
• SUCCESS研究为一项评价CTC在早期乳腺癌患 者预后的大型临床研究
• 并在研究中发现，只有HER-2在组织学和CTC中 同时阳性，患者才能从靶向治疗中获益。
提问与解答环节
Questions And Answers
谢谢聆听
·学习就是为了达到一定目的而努力去干, 是为一个目标去 战胜各种困难的过程,这个过程会充满压力、痛苦和挫折

发展历程
随着生物技术和精准医学的发展，CTC检测逐渐成为肿瘤研 究领域的热点，其对于肿瘤的诊断、预后判断和疗效监测具 有重要意义。
胃肠道肿瘤诊疗现状
流行病学特征
胃肠道肿瘤是世界上最常见的恶性肿瘤之一，包括胃癌、结直肠癌等。其发病 率和死亡率均居高不下，严重威胁人类健康。
诊疗方法
目前胃肠道肿瘤的诊疗方法主要包括手术切除、放疗、化疗以及免疫治疗等。 然而，现有诊疗方法仍面临许多挑战，如肿瘤复发、转移和耐药性等。
CTC检测在胃肠道肿瘤诊疗中的意义
早期诊断
通过CTC检测，可以在肿瘤早期 发现外周血中的肿瘤细胞，从而 实现胃肠道肿瘤的早期诊断，提
高治愈率。
预后判断
CTC的数量与患者的预后密切相关 ，通过监测CTC的动态变化，可以 评估患者的预后情况，为个体化治 疗方案提供依据。
疗效监测
在胃肠道肿瘤患者治疗过程中， CTC检测可以实时监测治疗效果， 帮助医生及时调整治疗方案，提高 治疗效果。
早期诊断
进一步探索CTC检测在胃肠道肿瘤早期诊断中的应用 价值，通过发现早期循环肿瘤细胞，实现肿瘤的早发 现和早治疗。
个性化治疗
结合CTC检测结果，为胃肠道肿瘤患者提供个性化治 疗方案，根据患者的循环肿瘤细胞特征，制定针对性 的治疗措施。
推动CTC检测技术在临床的广泛应用与标准化
临床普及
积极开展CTC检测技术的临床推广和普及工作，让更多 的医生和患者了解并应用CTC检测技术。
5. 数据分析
对鉴定为CTC的细胞进行数量统计、表型分析、基因突 变检测等，以获取与肿瘤相关的信息。
6. 结果解读
结合患者的临床资料和其他检查结果，对CTC检测结果 进行解读，为胃肠道肿瘤的诊疗提供依据。

V4) 390*9=3510
THANKS
SUCCESS
THANK YOU
2019/5/28
流式正向富集技术荧 免疫磁珠负向富集、
ISET（滤膜）
光标记
Fish技术
原位杂交RNA分析
CTC-BiopsyⓇ （武汉友之友)
ISET（滤膜) 荧光标记
80%
83%
30%
腺癌：46%
全自动
半自动
7.5mL
4mL
晚期乳腺癌、结直肠癌、晚期肺癌、胰腺癌、乳
前列腺癌
腺癌
75% 30% 半自动 5mL 晚期癌肿
循环肿瘤细胞指从实体瘤中脱离 出来并进入外周血液循环的肿瘤细 胞。
原发肿瘤血管生成 侵润
上皮－间质转化 （EMT）
侵润
转移
侵入血管内
循环肿瘤细胞 （CTC）
循环肿瘤 微栓 （CTM）
凋亡的CTC
肿瘤细胞 扩增 血管生成
间质－上皮转化 （MET）
侵入血管外 (CTC)
转移到骨髓 和其他器官
血管内增殖 (CTM)
0.585 (0.495-0.675) 0.76 (0.69-0.83)
0.505 (0.417-0.592) 0.716 (0.615-0.816) 0.624 (0.535-0.713)
天津市肿瘤医院 成都大学附属医院 重庆市肿瘤医院 苏州大学第一附属医院 西安交大一附院 陕西省人民医院 西京医院 长安医院等
转移
播散肿瘤细胞 （DTC）微转移休 眠灶
CTCS
取样简单、创伤小
基因检测准确性高 可评估肿瘤的侵袭 性
放 化 疗 患 者
手 术 患 者
无

;
阳性富集-CellsearchTM
运用抗EpCAM抗体抗体包被磁微粒，使其与肿瘤细胞结合，在特定磁 场作用下到达分别CTC的目的。
Anti-EpCAM Coated
ferrofluids
magnet
7.5ml
Automated fluorescence detection system
CTC
WBC
特点：
细胞完好性好；
可完全分别上皮型、间质型CTCs；
可检出循环肿瘤拴子；
局限：不宜检出细胞直径小于8μm的肿瘤
如神经内分泌瘤
;
HepG2 cells stained with anti-KL1
密度梯度离心
➢ 原理： ➢ 根据肿瘤细胞与白细胞密度不同，经过梯度离心分别CTCs ➢ OncoQuick分别体系 ➢ 方法： ➢ 密度梯度离心后，白细胞经过多孔滤膜被滤除，而CTCs被富集
过滤法〔根据细胞大小〕 密度梯度离心
〔根据细胞密度〕
ISET膜过滤 OncoQuick别离体系
;
免疫捕获法——磁珠分选
原理： 将特异性抗原包被在已有同源二抗的磁珠上制成免疫磁珠再与
靶细胞上抗抗原结合成“靶细胞—抗原抗体—磁珠〞复合物，在 磁场作用下向一定方向挪动，从而富集靶细胞. 分选战略 阳性富集：运用外表耦联抗目的细胞抗体的磁珠，细胞与磁珠结 合后直接在磁场中被分别出来。 负性挑选：经过去除无关细胞使目的细胞得以纯化
✓ 鉴定不稳定 • ✓断定规范：DAPI阳性、CD45阴性，8
号染色体扩增； • 特异性缺乏
;
滤膜法 基于细胞大小过滤
原理：根据肿瘤细胞的体积大于白细胞体积分别CTC
代表技术：滤膜滤法分别上皮源肿瘤细胞〔ISET〕

供更为精确的个体化治疗方案。
02
在预后评估中的应用
共识指出，CTC检测可用于胃肠道肿瘤患者的预后评估。通过定期监测
患者CTC水平，可实时了解患者病情变化，为医生提供有力依据，进而
调整治疗方案。
03
在疗效监测中的应用
在治疗过程中，共识推荐定期进行CTC检测，以评估治疗效果。通过比
较治疗前后的CTC水平变化，可及时发现治疗反应，为医生调整治疗方
CTC检测在胃肠道肿瘤预后评估中的案例分享
案例三：CTC检测评估胃癌 患者预后
• 预后判断。CTC检测在胃 癌患者预后评估中发挥重 要作用，通过检测循环肿 瘤细胞的数量和活性，可 为医生提供患者预后的参 考信息。
案例四：CTC检测监测胃肠 道肿瘤复发
• 复发监测。对于胃肠道肿 瘤患者，CTC检测可用于 监测肿瘤复发，及时发现 并采取干预措施，提高患 者的生存率。
专家共识的目的和意义
总结词
指导实践、推动研究、提高诊疗水平
详细描述
专家共识的目的在于指导临床实践，推动相关领域的进一步研究，并提高胃肠道肿瘤的诊疗水平。通过明确CTC 检测在胃肠道肿瘤诊疗中的价值和地位，共识有助于规范临床操作，提高诊疗的准确性和效率。同时，共识的发 布也将促进国内外学术交流和合作，推动胃肠道肿瘤诊疗技术的创新和发展。
2023版《循环肿瘤细胞检测在胃 肠道肿瘤诊疗中的应用中国专家共 识》解读
汇报人：XXX 2023-11-17
目录
• 介绍 • 循环肿瘤细胞（CTC）检测的基础理
论与技术 • CTC检测在胃肠道肿瘤诊疗中的应用
价值 • 专家共识解读与临床实践建议 • 案例分享与讨论
01 介绍
共识概述
总结词

CTCs的富集
CTCs各种富集方法的优缺点
CTCs的检测
CTCs的检测
CTCs部分检测方法
流式细胞仪分析 (flow cytometry FCM) 免疫细胞化学技术 ICC （immunocytochemistry） 鉴定标本中细胞抗原性和形态学特征， 能使富集的目的细胞维持细胞形态并 保持细胞活力 ICC是用能与显色剂结合的单抗与 CTCs特异性结合后，通过显色剂显 色从而对CTCs进行鉴定的技术 通过分析上皮细胞或肿瘤细胞的正常 起源组织特异的候选基因的表达来检 测 CTC, 灵敏度非常高但是坏死的癌 细胞、上皮细胞污染等都可以造成假 阳性结果，此法无法检测CTCs细胞 形态，在临床应用上有局限性。
CTCs的检测有助于早期转移肿瘤患者的诊断、监测术 后患者肿瘤的复发与转移
有助于评估抗肿瘤药物的敏感性与患者预后以及选择 个体化的治疗策略
研究难点
无显著 特异性 CTCs并没有显著的特异性同其它血细胞明确区分 且不同组织学类型和分子表型的肿瘤分别表达不同 的标志物。 数量少 CTCs在外周血中数量稀少，一般在106-107个白细 胞中仅含有1个。
循环肿瘤细胞 （Circulating tumor cells(CTCs)）
目录
CTCs的概念与特点
CTCs的富集与检测
CTCs的应用与研究进展
概念
Circulating tumor cells (CTCs) are cells that have shed into the vasculature from a primary tumor and circulate in the bloodstream. 2005年Pachm ann将CTCs正式定义为自发或因诊疗操 作由实体瘤或转移灶释放进入外周血循环的肿瘤细胞.

CTC检测技术在心血管疾病诊断和治疗中的应用
心血管疾病风险评估
CTC检测技术能够检测心血管疾病患者血液中的循环肿瘤细胞，为心血管疾病的风险评估 提供重要依据。
个性化治疗方案制定
通过分析CTC的基因和蛋白表达谱，可以为心血管疾病患者制定个性化的治疗方案，提高 治疗效果。
心血管疾病复发和并发症监测
CTC检测技术能够实时监测心血管疾病患者的循环肿瘤细胞数量变化，为心血管疾病的复 发和并发症的预测提供重要信息。
CTC检测技术的意义和应用价值
癌症早期诊断
预后评估和复发监测
CTC检测技术能够在癌症早期发现血 液中的肿瘤细胞，为早期诊断提供了 有力手段。
CTC检测技术可用于评估患者的预后 情况，及时发现复发迹象，为临床医 生提供决策支持。
个性化治疗指导
通过分析CTC的基因表达谱和蛋白质 组学特征，可以为患者提供个性化的 治疗方案，提高治疗效果。
存分析等。
可视化展示
利用图表、图像等方式 将数据结果进行可视化 展示，便于理解和解释
。
CTC检测技术实验设计和数据分析的注意事项
实验设计方面 严格控制实验条件，减少误差和干扰因素对实验结果的影响。
合理设置实验对照组，以便对实验结果进行准确评估。
CTC检测技术实验设计和数据分析的注意事项
根据实验目的选择合适的样本类型和处理方法。
化，为药物疗效的评估提供重要信息。
04
CTC检测技术的实验设计和数据 分析
CTC检测技术的实验设计
01
02
03
04
实验目的
明确实验目的，如检测特定类 型的CTC、评估CTC数量与疾
病进展的关系等。
样本收集
选择合适的样本类型（如血液 、组织液等），并确定采集时

2024/1/27
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CTC与肿瘤转移的关系
CTC与肿瘤转移潜能
CTC数量与肿瘤患者的预后密切相关，高数量的CTC往往预示着更高的转移潜能和 更差的预后。
CTC在肿瘤转移中的作用
CTC可作为肿瘤转移的“种子”，在适宜的微环境下重新生长形成转移灶。同时， CTC还可通过分泌生长因子、促血管生成因子等促进肿瘤转移。
流式细胞术
将血液样本通过高速流动的细胞悬液，利用光学、电学等原理对细胞进行快速检测和分类。 该方法可实现对CTC的定量分析和多参数检测，但操作复杂且成本较高。
2024/1/27
微流控芯片技术
利用微流控芯片模拟人体微环境，实现CTC的高效捕获和检测。该技术具有高通量、高灵敏 度和低成本的优点，是未来CTC检测的重要发展方向。
对未来CTC研究的展望与建议
01
02
03
04
深入研究CTC的生物学特性及 其与肿瘤转移的关系，为肿瘤
治疗提供新靶点。
开发高效、灵敏的CTC检测技 术，提高检测准确性和可重复
性。
开展大规模、多中心的临床研 究，验证CTC检测在肿瘤诊疗
中的价值。
加强跨学科合作，推动CTC研 究在临床转化和应用方面的发
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CTC检测技术的改进与创新
提高检测灵敏度
通过改进现有技术或开发 新技术，提高CTC检测的 灵敏度，降低假阴性率。
2024/1/27
提高检测特异性
针对CTC的特异性标志物 进行深入研究，开发高特 异性的检测方法，减少假 阳性结果。
实现无创检测
探索基于血液或其他体液 的无创检测技术，减轻患 者痛苦，提高检测便利性。
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CTC在肿瘤研究中的重要性
01

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相比于CA15-3和循环 肿瘤细胞，循环肿瘤DNA 具有更高的灵敏度。
Comparison of Circulating Tumor DNA, CA 15-3, and Circulating Tumor Cells as Blood-Based Biomarkers.
13
相对于蛋白类诊断标志CA15-3及
3
ctDNA发展简史
1948年首次发现人体血液中存在着循环DNA，癌症患者的循环肿瘤 DNA则发现于1977年。
1994年发现这些DNA含有癌症的标志性突变，证明其来自于肿瘤。 鉴于肿瘤DNA会流入血液，香港中文大学的卢煜明（Dennis Lo）教授
推测胎儿DNA应该也能进入血液。1997年证明孕妇血液中携带着男性 胎儿的Y染色体。该发现允许医生们在怀孕初期通过无创方式检测胎儿 的性别，甚至筛查唐氏综合症等发育疾病。这是产前诊断领域的一次
CA15-3没有预后判断功能。
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肝癌病人的血浆中存在两种不同长度的DNA分子：短链DNA分子（<150bp） 和长链DNA分子（ >180bp ）； 短链DNA分子与ctDNA突变率及拷贝数异常相关，且与ctDNA浓度正相关； 长链DNA分子不携带肿瘤相关ctDNA特征，且与ctDNA浓度负相关。
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监测ctDNA的突变率 比监测cfDNA浓度， 对胃癌动态发展的 监控灵敏度更高。
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利用区域捕获测序技术检测乳腺癌原发瘤及肝脏转移瘤的基因突变情
况，并监控血液中ctDNA在治疗过程中的动态变化。
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ctDNA在监测肿瘤的动态发展中具有更高的灵敏度和特异性； ctDNA能比蛋白类标志物CA15-3更早的预测肿瘤动态发展1情8 况。