白色念珠菌
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白色念珠菌环境检测标准白色念珠菌是一种常见的真菌病原体,常见于空气、土壤、水源及其他环境中。
白色念珠菌有时会引起医疗机构感染病例,特别是在有免疫抑制患者的病房内。
因此,白色念珠菌的环境检测对于保护患者和工作人员的健康非常重要。
在进行白色念珠菌的环境检测时,需要遵守一定的标准和程序。
以下是白色念珠菌环境检测标准的相关内容。
一、检测标准1. 室内空气中白色念珠菌的检测标准:空气中白色念珠菌的浓度不得超过1CFU/m3。
二、采样时间1. 室内的检测:在具有代表性和稳定状态的环境中进行采样和检测。
采样应在人员和空气活动最少的时间进行,最好是在清晨或已经停止工作时间进行采样,采样时间长短应根据实际环境来确定。
2. 室外的检测:随机选择不同的时间段采样是最好的方法,以获得有代表性的数据。
一般来说,最好选择早晨和傍晚两个时段进行采样。
采样时间长短应根据实际环境来确定。
三、采样点1. 室内的检测:应选择代表性、容易受到环境影响和可能污染的区域进行采样,例如:空调通风口、水管、地毯、墙壁、天花板角落等。
2. 室外的检测:应选择代表性且有可能污染的区域进行采样,例如:道路、空气跑道、垃圾堆放场、建筑物附近等。
四、采样方法1. 室内的检测:(1)空气中白色念珠菌的采样方法:空气中白色念珠菌的采样应采用空气采样器进行,采样器应根据实验室标准操作,在环境内风速1m/s,采样时间30min。
(2)表面白色念珠菌的采样方法:应使用消毒过的无菌棉签涂取表面样品,面积应大于25cm2,然后用空气管吸取样品,直接送到实验室进行检测。
五、环境检测的质量控制要求1. 空气采样器应每隔两周进行一次校准,确保采样器的准确性和稳定性。
2. 实验室应按照标准操作规程操作,以确保分析过程的准确性和可重复性。
3. 实验室应参加外部质量控制方案,例如质控实验和环境标准样品等,以确保实验室分析的质量和可靠性。
4. 应定期维护和检查检测设备以确保设备性能的稳定性和精度。
白色念珠菌的研究进展摘要随着医疗技术的快速发展,白色念珠菌作为重要的条件致病菌,其感染问题日益受到临床关注。
本文综述了近年来白色念珠菌在生物学特性、致病机制、耐药机制以及诊断与治疗等方面的研究进展。
通过深入探讨,旨在为临床防治白色念珠菌感染提供新的理论支撑和实践指导。
关键词:白色念珠菌;生物学特性;致病机制;耐药机制;诊断;治疗白色念珠菌是一种常见的条件致病菌,广泛存在于人类皮肤和黏膜上。
在人体免疫力下降或菌群平衡失调时,白色念珠菌可大量繁殖并引起各种感染,如口腔念珠菌病、念珠菌性阴道炎、念珠菌性皮炎等。
此外,在医院环境中,白色念珠菌也是引起院内感染的重要病原体之一。
因此,对白色念珠菌的研究具有重要的临床意义。
白色念珠菌的致病能力与其独特的生物学特性密切相关。
它可以在多种环境下生长繁殖,具有较强的环境适应能力。
同时,白色念珠菌还具有复杂的致病机制,包括粘附、侵袭、菌丝形成和生物被膜形成等多个环节。
这些机制使得白色念珠菌能够在宿主细胞内寄生、繁殖,并引起严重的感染。
近年来,随着医疗技术的进步和抗生素的广泛使用,白色念珠菌的耐药性逐渐增强,给临床治疗带来了极大的挑战。
因此,深入研究白色念珠菌的耐药机制、寻找新的治疗靶点和药物已成为当前研究的热点。
本文旨在全面梳理近年来白色念珠菌的研究进展,包括其生物学特性、致病机制、耐药机制以及诊断与治疗等方面的内容,以期为临床防治提供新的思路和方法。
在研究方法上,本文采用文献综述的方法,广泛收集国内外相关领域的学术文献,进行系统的分析和总结。
1 白色念珠菌的生物学特性研究进展1.1 细胞壁结构与功能白色念珠菌的细胞壁是其重要的保护屏障,对其生长、繁殖和致病性具有重要作用。
近年来,研究人员通过分子生物学和遗传学技术,对白色念珠菌细胞壁的结构和功能进行了深入研究。
发现细胞壁中的多糖、蛋白质和脂质等成分与白色念珠菌的致病性和耐药性密切相关。
1.2 代谢途径与适应性白色念珠菌具有较强的代谢能力和适应性,可以在不同的环境下生长繁殖。
白色念珠菌白色念珠菌白假丝酵母菌(candida Albicans)又称白色念珠菌,广泛存在于自然界,也存在于正常人口腔,上呼吸道,肠道及阴道,一般在正常机体中数量少,不引起疾病。
为条件致病性真菌。
假丝酵母菌俗称念珠菌,有81个种,其中有11种对人有致病性:白假丝酵母菌、为最常见的致病菌。
此外,热带假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌也较多引起疾病。
编辑本段生存年代类似的菌类化石在世界各地的前寒武纪岩石中都有发现。
编辑本段生存环境念珠菌对热的抵抗力不强,加热至60℃1小时后即可死亡。
但对干燥、日光、紫外线及化学制剂等抵抗力较强。
在假丝酵母菌中80%~90%病原体为白假丝酵母菌10%~20%为光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌热带假丝酵母菌等。
白假丝酵母菌为条件致病菌,10%~20%非孕妇女及30%孕妇阴道中有此菌寄生但菌量极少,呈酵母相,并不引起症状。
念珠菌生长最适宜的pH值为5.5,阴道的弱酸性环境能保持阴道的自洁功能,正常人为3.7-4.5,但阴道的弱酸性改变为pH5.5后,假丝酵母菌大量繁殖,并转变为菌丝相�x,才引发阴道炎症状。
因此用Ph4弱酸配方的女性护理液除了适合日常的清洁保养外,治病期间使用娇妍弱酸配方的女性护理液对霉菌的生长繁殖会有抑制作用。
编辑本段白色念珠菌在DYMD系统的位置临床真菌按其所致疾病的症状和体征进行分类,DYMD系统(皮肤真菌、酵母菌、真菌)这一分类模式已得到公认,是以组织发生学、生理学及形态学特征为基础,将真菌分类为类酵母菌和丝状真菌,又进一步按其组织亲和性分别将它们分为皮肤真菌和真菌。
对妇产科医生来说,不同种类的真菌医学相关性大不相同,迄今未发现由真菌引起的妇科疾患,由皮肤真菌引起的外阴及其周围的皮肤感染也极少见。
妇产科临床所见的真菌感染大多为白假丝酵母菌属的酵母菌所致。
阴道内定居的酵母菌有白假丝酵母菌、光滑假丝酵母菌、近平滑假丝酵母菌、热带假丝酵母菌、蔷薇色假丝酵母菌、酿酒假丝酵母菌、克柔假丝酵母菌、季以蒙假丝酵母菌等。
白色念珠菌核酸检测试剂指导原则白色念珠菌(Candida albicans)是一种常见的真菌,在人体内常常存在。
然而,当人体的免疫系统受到削弱或存在其他风险因素时,这种真菌可能会引发感染。
有时,判断感染是否存在以及确定最佳的治疗方案可以变得非常困难。
幸运的是,现在有一种称为白色念珠菌核酸检测试剂的新型技术可以为医生提供更准确的诊断和治疗指导。
白色念珠菌核酸检测试剂是一种基于聚合酶链反应(Polymerase chain reaction, PCR)的分子生物学方法。
它可以直接检测念珠菌的核酸,从而确认感染的存在以及感染的类型。
传统的方法通常依赖于培养和观察细菌或真菌的生长情况,这需要时间并且很容易出现误诊。
而核酸检测试剂可以在短时间内提供准确的结果,帮助医生更快地做出诊断和制定治疗方案。
在使用白色念珠菌核酸检测试剂时,医生首先会收集患者样本,例如口腔拭子、尿液或血液。
样本中的DNA或RNA将被提取并通过PCR 方法进行扩增。
通过与已知的念珠菌核酸序列进行比对,医生可以确定是否存在感染,并可以确定具体的感染类型。
白色念珠菌核酸检测试剂的主要优势在于其高度准确性和敏感性。
它可以检测到极少量的念珠菌核酸,甚至在感染初期。
这对于那些免疫系统受损或接受抗真菌治疗的患者尤为重要,因为对念珠菌感染的早期干预可以有效地减少并发症发生的风险。
白色念珠菌核酸检测试剂还具有多样化的应用场景。
它可以在不同类型的样本中使用,例如血液、尿液、唾液等,因此可以应对各种可能的感染病症。
它还可以检测出不同的念珠菌类别和亚型,这对于制定个性化的治疗方案来说至关重要。
然而,白色念珠菌核酸检测试剂也存在一些限制。
首先是成本因素,这种新型技术相对较为昂贵,可能限制了其在某些地区和医疗机构的应用。
与传统方法相比,核酸检测试剂的操作和数据分析也需要更高的技术要求,这可能需要专门培训医生和实验室人员。
总结起来,白色念珠菌核酸检测试剂是一种新型的分子生物学技术,可以快速、准确地检测白色念珠菌的感染。
白色念珠菌在tsb培养基的形态特征
白色念珠菌(Candida albicans)是一种常见的真菌,常见于人体的口腔、呼吸道、生殖器官和消化道等部位。
它在不良环境下可能引发感染,特别是影响免疫系统的人群。
在研究白色念珠菌的培养中,TSB培养基常被用来提供营养物质,以
促进其生长和形态特征的观察。
在TSB培养基上,白色念珠菌呈现出以下形态特征:
1. 营养生长:白色念珠菌在TSB培养基中能够良好地生长,形成乳白色至淡
黄色的菌落。
2. 极性生长:白色念珠菌的菌丝呈分枝状,菌落往往呈现出树枝状的形态。
3. 念珠体形成:白色念珠菌在TSB培养基中,经过适当的培养时间后,菌丝
会发生分化,形成大量的圆形或椭圆形念珠体。
这些念珠体具有类似于项链的排列方式,因此得名“念珠菌”。
4. 粘附能力:白色念珠菌的念珠体可以通过分泌黏附因子粘附在宿主上皮细胞
表面,这是其致病性的重要特征之一。
总结来说,在TSB培养基上培养的白色念珠菌表现出乳白色至淡黄色的菌落,菌丝呈分枝状,经过分化后形成念珠体,具有粘附能力。
这些形态特征对于了解白色念珠菌的生长和致病机制具有重要意义。
白色念珠菌菌落形态特征
白色念珠菌(Candida albicans)菌落形态特征通常表现为白色或乳白色的凸起或平坦的圆形菌落。
以下是具体形态特征:
1. 外观:白色念珠菌菌落通常呈现出较粘稠的质地,边缘光滑,表面如蜡状或绸状光泽。
2. 形状:菌落呈圆形或卵圆形。
3. 直径:初生菌落直径约为2-3毫米,经过48小时至72小时培养,菌落直径可增大至5-8毫米。
4. 高度:菌落高度一般比较低,通常在1-2毫米左右。
5. 结构:菌落边缘平滑,并且具有一个明显可见的白色菌丝状环。
需要注意的是,以上特征是白色念珠菌一般情况下的表现,但也存在一些变异的情况,不同的环境和培养条件可能导致菌落形态的变化。
在鉴定的过程中,还需要结合其它的鉴定方法,如显微镜观察和生化试验等,来准确确定菌种。
利用分子生物学技术研究白色念珠菌的致病机制一、引言白色念珠菌(Candida albicans)是一种常见的真菌,它可以引起多种疾病,包括超菌感染、口腔念珠菌病、阴道炎和侵袭性念珠菌病等。
这些疾病在世界范围内都非常普遍,特别是在免疫抑制的患者中,发病率更高。
因此,白色念珠菌的致病机制一直是研究的热点之一。
分子生物学技术为我们研究白色念珠菌致病机制提供了有力工具。
本文将重点介绍利用分子生物学技术研究白色念珠菌的致病机制。
二、白色念珠菌的致病机制白色念珠菌有多种致病因素,包括表面结构、分泌蛋白和细胞信号通路等。
这些致病因素相互作用,诱发宿主免疫反应,从而导致炎症、休克和器官功能障碍等症状。
下面,我们将分别介绍其中一些主要的致病因素。
1.表面结构白色念珠菌的表面结构变化是其致病性的关键因素之一,其中主要的结构包括几丁质、β-葡聚糖和α-葡聚糖。
这些结构可以与宿主免疫系统相互作用,诱导炎症反应。
几丁质是白色念珠菌细胞壁的重要组分,它可以激发宿主免疫系统的Toll样受体2(TLR2)和TLR4,从而启动炎症反应。
β-葡聚糖和α-葡聚糖可以通过激活Complement系统和细胞黏附分子(CAMs)与宿主免疫系统产生交互作用,促进炎症反应和细胞黏附。
2.分泌蛋白白色念珠菌可通过分泌多种蛋白质来干扰宿主免疫反应,并促进其自身生存。
其中最研究的蛋白质是蛋白沙漏(SAPs),SAPs是一组分泌性酸性蛋白酶,它们可以降解宿主免疫系统所释放的一系列蛋白质,包括免疫球蛋白、血凝素和补体等,从而干扰宿主对真菌的清除。
此外,白色念珠菌还能分泌其他类别的蛋白质,包括交联素(ALS)、分泌性浆液胞蛋白(EPA)、花生四烯酸特异性磷脂酰肌醇氨化酶(PLB)等,这些蛋白质在致病过程中也发挥了重要的作用。
3.细胞信号通路念珠菌细胞内的信号通路(CIS)也是影响其致病性的重要因素之一。
CIS按照功能可分为三大类,分别是信号转导、转录调控和细胞生理学。
男性白色念珠菌治疗方法有什么?
白色念珠菌其实就是一种真菌,这种真菌会寄生在人的多个部位,比如口腔以及呼吸道里面,还会出现在肠道里面,也容易出现在女性阴道里面,值得一提的是,男性的龟头部分也会感染白色念珠菌,这时候容易发生龟头炎症,下面介绍治疗的方法。
★1、念珠菌龟头炎现在来说,是一种比较常见的病
而且发病人群基本上年轻人比较多,主要就是性生活频繁,而且有不良生活作风的人比较多,平时生活中一定要多加的注意,如果男方有念珠菌龟头炎的情况,一定要做好措施,不要把这种情况传染给女方,带来更大的伤害。
★2、如果发现有念珠菌龟头炎,一定要去正规医院接受治疗
可以使用一定的药物治疗,但是不要乱用药,只要治疗的及时,就会很快的得到治愈
★3、要想彻底的治疗念珠菌的病症,平时就要注意个人卫生
一定要经常洗澡,而且选择质量比较好的内裤,棉质的比较好一些,要有良好的生活作风,性生活不要混乱
★4、男性一旦发现有念珠菌龟头炎
性生活的时候,就要注意不要出现交叉感染的情况,传染给女方。
★5、治疗念珠菌龟头炎
就要注意清洗包皮。
但是尽量要选择清水清洗,不要随便使用清洗剂,更不要用太刺激性的肥皂,如果有包皮过长的情况,还要及时的进行治疗。
★6、发现有念珠菌龟头炎的情况,更不要乱用抗生素,一定要去正规的医院,不要引发其他的一些疾病。
赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA目录1.用途2. 诊断意义3. 赛润ELISA classic - 检测原理4.试剂盒组成5.检测所需物质,试剂盒未提供6.储存和稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1 注意事项7.2 样品准备和储存7.3 试剂盒反应试剂的准备7.4 检测程序概要7.5 检测过程8. 检测结果评估8.1 4PL单点定量法8.2 检验有效性标准8.3 计算赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA(定量)8.4 检测结果分析9.性能特性9.1 重复性9.2 敏感性和特异性10.警告10.1警告和安全措施10.2废料处理11.参考文献V9.03/06-1赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA试剂盒用于人抗体(IgG/IgM/IgA)的酶联免疫检测- 体外诊断用-IgG试剂盒(定量) 编号: ESR117GIgM试剂盒(定量) 编号: ESR117MIgA试剂盒(定量) 编号: ESR117A检测评估标准: Dade Behring BEP ® III / BEP ® 2000, DSX, 手动操作1.用途赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA试剂盒主要用于定性和/或定量检测人血清或血浆中抗白色念珠菌的抗体。
由于细胞质和数量减少的细胞壁成份组成的复合抗原的存在,使得能够在浅表性和侵入性霉菌病感染的不同时期,进行抗念珠菌属抗体的检测,。
2.诊断依据白色念珠菌是属于类酵母真菌科的、普遍存在的一种酵母菌。
表1:具有医学相关性的真菌除了引起浅表性感染的酵母型之外,而所谓的假菌丝体是类酵母真菌的另一种形态学表现。
芽管和假菌丝体的产生主要发生在侵入性感染的病人体内。
念珠菌属酵母菌能够产生和分泌多种酶,使兼性病原体微生物能够穿透血管和粘膜屏障。
念珠菌属各种病菌一般是通过污物的污染进行传播的,主要的入口是鼻咽通道,但脂肪酸、酸性pH值和敌对性菌群等也会引起皮肤表面抑制真菌感染的功能障碍,从而导致浅表性的念珠菌病。
病菌感染粘膜后,侵入性的霉菌病会从胃肠道向外传播。
类酵母真菌对不同上皮粘膜的附着是通过粘附蛋白和外部细胞膜细微结构的差异来实现的,下面流程图描述了重度感染病人体内引起感染传播扩散的(假设性)过程:图1:念珠菌的感染过程念珠菌属的细菌不属于健康人群生理活动的微生物菌群,但可以观察到它对人类宿主的普遍感染。
念珠菌病根据下面的主要特征可分为两大类:表2:念珠菌感染的特征念珠菌属感染的血清学诊断是很困难的,一方面酶母菌短时间的定植会引起免疫反应,另一方面在免疫抑制病人体内,系统性的念珠菌性霉菌病可能只会引起低活性的免疫应答。
对于这些病人血清学检测的必要性,要做明确的解释。
此外系统性的念珠菌感染没有典型的临床症状。
目前不同试验系统对念珠菌抗体的检测结果还不具有可比性及可转换性,抗体检测的特异性明显取决于所采用的试验系统(ELISA或HAT)或抗原制备过程,用HAT试验检测IgM抗体高于IgG,因为IgM具有更强的凝集能力。
HAT主要用于检测抗类酵母真菌细胞壁抗原的抗体,从而进行血清学解释,而对于更复杂的情况仅提供了鉴别诊断的机会。
抗体滴度的变化可以用ELISA试验来检测,而HAT无法检测,因此两种检测方法应该联合使用,尤其是针对IgM抗体活性降低而同时IgG抗体增加的情况。
目前还没有哪一种检测技术能够在念珠菌感染的血清学诊断单独使用,对于高危人群的监测和治疗控制最好是几种血清学检测方法联合使用。
3.赛润ELISA classic - 检验原理用抗原包被微量板孔,制成固相载体。
加患者血清到板孔中,其所含的抗体特异性地与固相载体中存在的抗原结合,形成免疫复合物。
除去多余物质后,加入碱性磷酸酶标记的IgG、IgA和IgM抗体,使之与上述免疫复合物反应。
洗板,除去多余的结合物,加入底物(对硝基苯磷酸盐)。
该反应产生有颜色产物,颜色强度与特异性抗体含量成正比。
4.试剂盒的组成5.其它检测所需物质- 普通实验室所需的仪器装置- IgM检测: 赛润类风湿因子Rf -吸附剂(产品编号Z100/5ml和Z200/20ml)- 分光光度计,波长405纳米,建议参考波长范围620纳米- 690纳米(例如650纳米)- 37℃温箱- 湿盒- 蒸馏水。
6.储存及稳定性7.赛润ELISA classic的检验步骤7.1注意事项只有全部使用赛润ELISA classic试剂才能保证检测效果,因为所有试剂都是有关联的,不能混用其他制造商的产品。
尤其是标准血清,对照血清以及酶标记物,必须使用试剂盒配备的,不要使用其它批号产品。
稀释缓冲液,洗液,终止液和底物溶液可用于所有赛润ELISA classic试剂盒。
ELISA classic试剂盒内所有试剂均必须正确地存放。
应在未开封的情况下,保存于2-8℃,并在有效期(见标签说明)内使用。
详细的稳定性和储存资料在“6. 储存及稳定性”内将加以详述。
每一种试剂都是经过校准以保证最佳的检测结果。
这些试剂如果未经规定被稀释或改动都会导致检测的敏感度的降低。
在储存及孵育过程中避免将试剂暴露在强光中。
所有试剂瓶盖须盖紧以防止蒸发和污染,试剂避免受到微生物的污染,因为蛋白水解酶的干扰将导致出现错误的结果。
应按照规定刻度截断微孔条。
如果铝袋破损或者开启装有干燥剂的铝袋后而未以夹子封紧的,则不要继续使用。
开始试验前,将所有试剂置于室温。
从试剂管中吸取试剂的时候,应注意使用无菌技术以防污染。
为避免假阳性结果,吸加酶结合物时,吸嘴应确保不接触或喷洒于小孔的外面,注意不要盖错瓶盖或管盖。
试验结果的可重复性依赖于充分混合试剂。
使用前振荡装有对照血清的小管和所有稀释过的溶液(例如使用混合器)。
小心吸取试剂并严格遵守给定的孵育时间和温度。
请注意在吸取标本 / 对照血清,酶结合物或底物时,第一个孔与最后一个孔加样之间的时间间隔如果太大,将会导致不同的“预孵育”时间,从而明显地影响到测量值的准确性及重复性。
只有严格遵守赛润ELISA classic试剂的试验说明才会得到最佳的检测结果。
如果实验中未严格遵守控制质量控制认证文件上的有效性特异准则,则试验结果无效。
洗涤不充分将影响试验结果:应该小心进行洗涤。
洗涤步骤应遵守相关洗涤器(平底孔,孔直径7毫米,深10.9毫米)指导手册进行。
重要的是所有的孔内均应加入相同体积的洗涤缓冲液。
洗涤结束时,应将微孔板倒扣于纸巾上并轻轻敲打,以确保所有孔内均无洗涤缓冲液。
避免产生泡沫!如果使用自动洗板机,注意正确操作。
7.2 样本准备储存虽然,在检验中不会产生副影响,但为避免干扰结果,应保留使用高血脂的、溶血的或污染的血清。
样品不应加热灭活。
7.2.1样品稀释开始试验前,患者的待测样品必须以稀释缓冲液稀释如下(V1+V2):赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgA稀释后及加入微孔板前,样品必须充分混合。
赛润ELISA classic白色念珠菌IgM类风湿因子干扰类风湿因子抗体是IgM的自体抗体,可与IgM免疫复合物结合。
非特异性IgM 抗体(风湿因子)的存在将导致IgM检测的假阳性结果。
另外,也存在弱结合的病原体特异性IgM抗体被强结合的IgG抗体取代的可能性。
在这种情况下,IgM的检测将得到假阴性的结果。
因此,在进行IgM检测前应用类风湿因子吸附剂对血清作预处理。
(赛润类风湿因子吸附剂,产品编号Z100 (5ml/25样品)及Z200(20ml/100样品))。
首先应该使用稀释缓冲液(V2)对类风湿因子吸附剂(V1)进行如下稀释:然后将患者的待测样品(V1)在此Rf-稀释缓冲液(V3)中进行稀释:7.2.2样品储存密封的患者样品可在冰箱中2-8℃保存7天。
≤ -20℃可保存更久。
避免样品反复冻融。
已稀释的样品可在2-8℃保存一星期。
7.3试剂盒反应试剂的准备7.3.1微孔条微孔条置于一框架内,并与干燥剂一同封于铝袋之中。
应将不需要的微孔条取下并重新放入铝袋。
将袋口折叠2-3次,并以夹子夹紧,确保铝袋的密封性。
7.3.2对照血清/ 标准血清对照和标准血清稀释,可直接使用。
对于每次试验和每批检测体系,无论使用的微量板数目的多少,均应包括阴性阳性对照孔。
界定对照应作双份。
如果定量试验,标准血清也应作双份。
不要用Rf-吸附剂处理对照血清!7.3.3抗人IgG, IgA或IgM抗体,用AP标记(即用)禁止将不同试剂盒的酶标抗体混合使用。
同一试剂盒才能达到最佳检测效果。
7.3.4洗液以1:30稀释浓缩洗涤缓冲液(V1)至体积V2。
例如:7.3.5样品的稀释缓冲液(即用)7.3.6底物(即用)试验时戴手套以避免污染。
必须以无菌针头吸取底物溶液。
7.3.7 终止液(即用)7.4检测程序概要白色念珠菌IgG / IgM/ IgA定量进行IgM检测时先吸除RF 因子样品稀释液(患者样本)IgM:1+100IgG/IgA:1000↓将稀释的样本,和立即可用的对照血清 / 标准血清,加到微量孔内(100微升)↓↓洗涤↓加入已稀释的酶标记抗体溶液(100微升)洗涤↓加入底物溶液(100微升)↓↓加入终止液(100微升)7.5检测过程7.5.1将检测所需数目的微孔条放到微孔板框上并准备好一张标签。
7.5.2在微量孔内分别加入100微升的已稀释样本对照血清。
留一个孔为底物空白使用,例如:7.5.3将样品于湿盒内37℃(± 1℃)孵育60分钟(± 5分钟)。
7.5.4 孵育后以洗液缓冲液洗涤板孔(使用自动洗板机或手工洗板):- 吸去或甩去洗液- 每孔内加入300微升洗液- 吸去或甩去洗液- 重复洗涤过程3次(共4次!)- 将微孔板翻转过来在纸巾上拍打,使微孔中不再含有液体7.5.5 加入酶标记抗体。
于相应孔内(底物空白除外)加入100微升IgG / IgM / IgA酶标记抗体7.5.6湿盒内37℃(± 1℃)孵育30分钟(± 1分钟)*。
7.5.7孵育后,以洗液清洗板孔(洗涤见上)7.5.8加入底物于每孔内加入100微升底物溶液(包括底物空白孔)7.5.9 湿盒内37℃(± 1℃)孵育30分钟(± 1分钟)*。
*注意:在特殊的工作环境下有必要对孵育时间进行调整。
7.5.10终止反应每孔内加入100微升终止液,轻微振荡微孔板以混合溶液。
7.5.11读取消光度以底物空白为空白对照液,60分钟内读取405纳米的OD值,建议参考波长范围为620纳米-690纳米(例如650纳米)。
8.检测结果评估赛润ELISA classic白色念珠菌IgG/IgM/IgA(定量)8.1 4PL单点定量法用赛润ELISA classic试剂检测,抗体浓度可通过逻辑对数模型(4PL, 4个参数)来计算,该模型对浓度曲线有很精确的适用性。