实验室检验项目性能验证和分析后质量保证

检验程序的性能验证
南通大学附属医院 王惠民
一、有关基本概念
1、临床实验室管理学主要内容

“临床实验室管理学”已成为检验医学重要组成
之一。 临床实验室管理学兼有管理学和检验医学的特点。 掌握临床实验室管理学的内容架构有助于建立科 学的管理体系和做好实验室的管理工作。

临 床 实 验 室 管 理
• 5.5.5 应定期评审生物参考区间。当实验室更改检验 程序或检验前程序时，如适测量系统校准和正确度验证计划， 以确保结果可溯源至SI 单位。
ISO 15189:2012 的要求
• 5.5.1.2 检验程序验证 • • 在常规应用前，应由实验室对未加修改而使用的已确 认的检验程序进行独立验证。 实验室应从制造商或方法开发者获得相关信息，以确 定检验程序的性能特征。
CNASCL38
CNASCL39 CNASCL41 CNASCL42 CNASCL43
精密度、线性、准确度、分析灵敏度、分析特异度、 临床微生物 生物参考区间。培养方法的性能指标通常不包括精 学 密度和线性 临床血液学 精密度、正确度、可报告范围等
卫生部“医疗机构临床实验室管理办法” 的要求（2006）
实验室应对以下来源的检验程序进行确认： • a) 非标准方法； • b) 实验室设计或制定的方法； • c) 超出预定范围使用的标准方法； • d) 修改过的确认方法。 方法确认应尽可能全面，并通过客观证据（以性能 特征形式）证实满足检验预期用途的特定要求。
ISO 15189:2012 的要求
•检验程序的性能特征宜包括：

质量控制
质量管理 安全管理

（技术层面） 方法学研究

IQC
EQA/PT

2019年华医网继续教育答案-271-实验室检验项目性
能验证和分析后质量保证
备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项
(一)全面质量管理体系的概念和要求
1、按照IS015189建议质量手册目录中关于分析后质量保证的是（）
A、第8条、第9条
B、第14条、第15条
C、第16条、第17条
D、第19条、第20条、第22条[正确答案]
E、以上都不是
2、按照IS015189：2003（E）《医学实验室质量和能力的专用要求》的规定，检验项目的标准操作规程（即SOP）编写的最基本要求是（）
A、实验室所有使用的检验方法都应该有操作手册
B、外文说明书必须译成中文
C、每一检验项目都应有相应的操作规程，必须与当前的检测方法与操作步骤相一致[正确答案]
D、按照检测项目编写
E、以上都不是
3、质量体系最终要符合（）
A、顾客要求
B、质量控制要求
C、质量保证要求
D、实验室认可的要求[正确答案]
E、以上都不是
4、按照IS015189建议质量手册目录中关于分析前质量保证的是（）
A、第8条、第9条
B、第14条、第15条[正确答案]
C、第16条、第17条。

what
如何实施性能验证？
准备工作 范围、材料、方案：应确定定量检测 的项目；所需的仪器、配套试剂、校 准品、质控品等材料；制定完整的性 能验证方案（尤其是各项性能参数的 判断标准的制定及其依据）。
how
试验要求：
仪器应进行校准或保养；要尽可能在 相同条件下进行各项试验；所有试验 均需在室内质控结果在控的情况下方 可进行。
测量重复性（批内精密度）
试验方法：连续重复测定20/21次； 结果计算：计算后20次检测结果的SD和CV； 判断标准：以能力验证/室间质评评价界限作 为允许总误差（TEa），批内精密度 <1/4TEa；或者符合试剂说明书的要求。 注意事项：若选择标本，则其浓度应尽可能 接近质控品或试剂说明书中评价该性能所提 供的标本浓度
检验程序的性能特征宜包括：测量正 确度、测量准确度、测量精密度(含测 量重复性和测量中间精密度)、测量不 确定度、分析特异性（含干扰物）、 分析灵敏度、检出限和定量限、测量 区间、诊断特异性和诊断灵敏度
为什么要做性能验证？
性能验证是为了确保实验室开展的检 验项目，所应用的检测系统的分析性 能或检验项目的方法学(检验程序)能够 满足检测及临床要求，从而保证患者 标本检测结果准确可靠。
when 能对结果产生较大的影响时，可选择
其所开展的部分检验项目进行分析性 能验证。
初次验证后，对精密度、正确度及可 报告范围等性能参数至少每12个月进 行一次评估，可通过评估如CV、均值 等室内质控数据的变化趋势（批间精 密度）、室间质评项目的结果的可接 受性（正确度）、临床医护人员对结
when 果的反馈（可报告范围）、小样本的
实验室内精密度：
同一实验室内，使用同样的设备，由不同操 作者在不同时间内获得的精密度，以前曾被 称为总精密度（不包括大的设备维护、仪器 校准和更换试剂批号）

实验室检测结果的质量控制方法质量控制是指为达到质量要求所采取的作业技术和活动。

目的在于监视过程并排除导致不合格、不满意的原因以取得准确可靠的数据和结果。

采取合理有效的质量控制手段可监控检测/校准工作过程,预见到可能出现问题的征兆或及时发现问题的存在,使实验室可有针对性地采取纠正措施或预防措施,避免或减少不符合工作的发生。

因此，如何在日常的检测工作中对检测结果进行有效的监控成为很多实验室急需解决的课题。

实验室检测结果的质量监控可分为外部监控和内部监控。

一是借助外部力量实施实验室间比对验证活动，实验室间的能力验证是一种检测质量的全面的审核工作,它不但包括了对检测人员、设备、环境等的比对,也包括对检测报告、数据处理的验证等，是实验室能力确认的重要方法之一，也是实验室质量控制的重要手段,它有助于实验室检测能力的提高。

二是内部质量监控。

利用内部手段如对盲样检测、留样检测、人员比对、方法比对等验证检测工作的可靠性，具体方法有以下几种：1．对保留样品再检验对无标准物质的检测参数如蛋白质、脂肪、灰分等指标并易保存的样品采取留样再检测的方法对检测结果的准确性进行控制,这样不但使检验人员认真对待每一次检验工作，从而提高自身素质和技术水平，也有助于发现检测中存在的问题并得到及时有效地纠正。

2．定期使用标准物质（1）按计划定期对有证标准物质进行检测,将检测结果与标准值进行比较，如果检测结果异常应查明原因排除异常因素，使检测体系恢复正常。

（2）通过对标准物质的检测来完成仪器的期间核查，判断仪器是否处于正常状态的校准状态，对经分析发现仪器设备已经出现较大偏离导致检测结果不可靠时，应按相关规定处理，直到经验正的结果满意时方可投入使用.（3）利用对标准物质的检测对检验人员进行考核，以查明检验人员是否熟练掌握检验技术,是否能够检出符合要求的准确数据及结果,这也是对检测质量控制的重要手段.3．利用质量控制图质量控制图是把检验的性能数据与所计算出来的预期的“控制限”进行比较的图，此方法通过统计技术,将指控样用于检测中,对每次的检测数据进行分析，从而得出较为科学的波动范围，通过检测查出异常原因所导致的波动,制定相应措施进而消除异常原因。

临床检验定量测定项目精密度与正确度性能验证在临床检验中，精密度与正确度是评价定量测定项目质量的重要指标。

精密度指的是在一定条件下，测定同一样本的重复性；而正确度则是测定结果与参考值之间的接近程度。

为了保证临床检验结果的准确性和可靠性，对于定量测定项目的精密度与正确度性能需要进行验证。

一、精密度验证精密度验证是评估定量测定结果的重复性和一致性，通常使用同一浓度的样本进行重复测定，以评价测定结果的离散程度。

精密度验证需要满足以下要求：1. 选择适当的样本：样本的选择应考虑到临床意义和测试目的。

通常选择近似于临床样本的类型和浓度，以便更准确地评估实际分析中的结果。

2. 确定测定条件：包括仪器、试剂、操作步骤等。

这些条件应与实际检验过程中的条件一致，以保证验证结果的可靠性。

3. 重复测定：至少重复测定3次，并记录每次测定结果。

重复测定的间隔时间应符合实际临床检验的情况，以考察长期测试的一致性。

4. 分析结果：计算测定值的平均值、标准差、变异系数等指标，评估重复测定的精密度。

指标的计算可以使用统计学方法进行。

二、正确度验证正确度验证是评估定量测定结果与参考值之间的一致性和准确性。

正确度验证需要满足以下要求：1. 参考物质的选择：参考物质是用于确定测定方法的准确性和可靠性的标准。

可以选择纯品、国际标准品或已验证的对照品作为参考物质。

2. 确定测定条件：与精密度验证相同，需要确保测定条件与实际检验过程一致，以保证验证结果的可靠性。

3. 测定参考物质：使用所选的参考物质进行测定，并记录测定值。

4. 分析结果：通过比较测定结果与参考值之间的接近程度，评估定量测定方法的正确度。

常用的评价指标包括相对偏差、共同认可误差等。

三、数据分析与结果判定在完成精密度与正确度验证后，需要进行数据分析和结果判定。

一般采用统计学方法对数据进行处理和分析，包括计算平均值、标准差、变异系数、相对偏差等指标。

通过与预设的指标或设定的可接受范围进行比较，判断验证结果是否符合要求。

xx
ISO15189实验室认可系列培训讲座
结果判断-4
用该方法检测，C50-20%的样本检测结果一致，C50+20%的样本不一定能得到一致 结果；需要用高于C50更大百分率浓度的样本（如+30%）进行补充试验。
xx
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检出限的验证
n检测限（limit of detection）是指检测方法可检 测 出 的 最 低 被 测 量 浓 度 ， 也 称 检 测 低 限 （ lower limit of detection ） 或 最 小 检 出 浓 度 （ minimum detectable concentration），有时也称为分析灵敏 度（analytical sensitivity）。 n如前所述，分析物浓度位于C5-C95区间之外（小于 C5或大于C95）时，候选方法对同一样本的重复性检 测将得到相同结果。因此，C95代表了某一试剂可以 测出的最低被测量浓度。
xx
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筛查试验
n筛查试验用于检测整个人群或部分人群中分析物的 存在情况。
n一般而言，筛查试验应当具有较高的临床敏感性（ 即临床检出率大于95%），对其特异性的要求（和阳 性预测值）则取决于对各种因素的综合考虑。
如粪便隐血检测
xx
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n这里的C50指的是一个处于试剂检测临界点的样本浓 度，其一旦确定，是不变的。 n试剂盒CUT-OFF值指的是一个判断某一次测定结果的 由阴性和阳性对照信号值按一定公式计算出来的信号 值，每次测定都会有所差异。
xx
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C5 浓度的定义
n一份样本，在多次重复实验中有95%的几率获得阴性 结果时该分析物的浓度。

医学实验室ISO 15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。

适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。

本方案从准确度、精密度、参考围、线性围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。

精密度通常用不精密度表示。

可以分别评价连续精密度（批精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。

本方案采用批和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。

全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。

1、批精密度（连续精密度）：方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。

计算批精密度的CV值和SD值。

结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

（2）按照国际推荐标准：批精密度应在CLIA88允许误差的1/4以，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

2、天间精密度（中间精密度）：方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。

要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。

连续测试20天，每天检测1次。

在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。

测试完成后记录检测结果。

结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。

精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

• 5.6.5 对没有开展能力验证/室间质评的检验项目，应通过与其他实验室（如已获认可 的实验室、使用相同检测方法的实验室、使用配套系统的实验室）比对的方式，判断 检验结果的可接受性，并应满足如下要求： （a） 规定比对实验室的选择原则； （b） 样品数量：至少5份，包括正常和异常水平； （c） 频率：至少每年2次；
相同检测项目两套系统（相同）
相同检测项目两套系统（相同）
相同检测项目两套系统（相同）
相同检测项目两套系统（相同）
相同检测项目两套系统（相同）
相同检测项目两套系统（相同）
质量控制目标
室内质量控制目标
如何建立控制值的均值和范围
• 对每个水平的控制品至少收集 20 个控制值。数据来自 20 批检测结果，以反映不同次校准、试剂或试剂批号 更换、操作人员技术、检验场地的温度/湿度、每天/每 周保养等变异。所有新的控制品应与以往证实的控制品 结果作比较( 平行性观察) 。
同种控制品更换批号 • CLSI – 至少需要20批的结果 • CLSI– 开始使用新批号前，与老批号进行20批的比对 • 临床实验室定量测定室内质量控制指南 – 新批号质控品的每个 项目都应和现用的质控品作平行检测，最好是在不同天内至少作 20瓶的检测。若无法从20天内得到20个数值，至少在5天内，每 天作不少于4次重复检测来获得。
检验质量规范与性能评估
• 分析质量目标 • 质量控制流程
• 性能评估
• 检验参考值
医学实验室的质量体系
患者准备 样本采集 报告结果 标本运输
医学实验室 工作流程
样本接收登记
记录结果 项目评估 分析过程控制
TEa（%）：卫生部临检中心（生化）
TEa（%）：卫生部临检中心（临检）

检验项目性能验证
3.干扰物浓度梯度设置。按下表 进行设置(可根据最高浓度采用 不同稀释方式)
4.各干扰血清的配制。将干扰物 质与基础血清比例为1：9的比例 进行配制，按下表操作
序号 干扰物
01
DH 2O
干(1)
干扰物加入 量(ul)
50
50
2 干(2) 50
3 干(3) 50
4 干(4) 50
5 干(5) 50
20xx
检验项目性能 验证ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
-
目录
检验项目性能验 证
CHAPTER 1
检验项目性能验证
检验项目性能验证
随着科学技术的不断发展，各类检验仪器设备的不断更新，临床检验实验室自动化检测系 统基本覆盖二级以上医院检验实验室，同时，多地政府、卫省健康行政部门为减轻患者就 医负担，控制不必要的重复检查，正加快推进二级甲等以上综合医院检验检查结果互认工 作，检验结果的质量是结果互认的必要前提，而检验项目的性能验证是保障检验结果质量 的最基本条件
血清量(ul)
45 0
450
450
450
450
450
对应干扰浓 度
0
1/80* 1/40* 1/20* 3/40* 1/10*
C
C
C
C
C
测定：分别测定0～5 号样本，每样本平行 测定3次，取均值统 计
5.数据处理
(1)统计：采用配对 差异实验，以0号管 为对照，判定试剂的 干扰能力；计算1—5 号管与0号管的偏差
系列 低值样本 高值样本
1
2
3
4
5
400
300
200
100
0
0

1 目的通过各种质量控制活动(技术核查)加强对检测结果的质量控制，以确保公司检测结果的长期有效性和准确性。

2 适用范围本程序适用于公司检测范围内的所有检测结果的质量控制活动(或称技术核查)。

3 引用文件CNAS-RL02 能力验证规则记录和档案管理程序纠正/预防措施管理程序结果报告管理程序检测质量抽检作业指导书检测过程管理程序记录目录清单4 职责4.1 质量负责组织编制并审批公司检测项目的验证、比对计划及实施方案并组织实施；组织对检测质量控制活动的可行性和有效性的评审。

4.2 办公室/异地实验室负责验证、比对计划的编制和验证活动记录的汇总和存档；负责验证、比对单位的联系，负责抽检计划的实施。

4.3 各检测室负责具体实施能力验证、比对和内部检测质量控制和校核活动，参加对验证、比对活动的有效性评审。

4.4 异地实验室负责异地实验室检测结果质量的保证和控制。

5 措施/方法5.1 质量负责组织和策划实验室质量监控计划，其中包含内部质量监控和外部质量监控两个部分，编制《年度质量控制计划表》。

5.1.1 实验室制定内部质量监控计划时应考虑以下因素：a)检测或校准业务量；检测或校准结果的用途；检测或校准方法本身的稳定性与复杂性；b)对技术人员经验的依赖程度；c）参加外部比对（包含能力验证）的频次与结果；d)人员的能力和经验、人员数量及变动情况；e)新采用的方法或变更的方法。

5.1.2 实验室制定外部质量监控计划除应考虑上述5.1.1中的因素外，还应考虑以下因素：a）内部质量控制结果；b)外部比对（包含能力验证）的可获得性，对没有能力验证的领域，实验室应有其他措施来确保结果的准确性和可靠性；c）CNAS、CMA、客户和管理机构对能力验证的要求。

5.2内部质量控制计划应包括空白分析、重复检测、比对、加标和控制样品的分析，计划中还应包括内部质量控制频率、规定限值和超出规定限值时采取的措施。

质量控制计划应覆盖申请认可或已获认可的所有检测技术和方法。

检出限的验证方法
样本选择：评估试剂分析灵敏度所使用的样本，如 检测项目有国家参考品，则可使用国家参考品或经国 家参考品标化的参考品进行检测，如没有国家参考品 ，则使用可以溯源或量化的样本，如国际标准物质， 或与国际标准物质溯源的样本。 验证方法：处于测定下限浓度（ C95 ）的样本，重 复检测20次，应至少有18次以上为阳性反应。
精密度评估的基本原则（2）
评估精密度时，应至少评估两个浓度水平样本的精 密度。 所选样本浓度应在测量范围内有医学意义，即至少 有一个浓度在医学决定水平左右，在定性测定，即为 接近临界水平的浓度。
批内精密度的评估
评估方法：三个不同浓度的样本，在一个测试批内 重复进行至少20次检测，计算所得S/CO值的均值和SD ，计算批内CV%。 质量控制：检验时应同时至少测一个质控品。 判断结论：应≤试剂说明书所标明的批内变异。 ELISA的批内变异CV%应≤10%。
（三）准确度验证
验证方法及指标： 以与临床诊断、金标准方法和标准血清盘的检 测比较来评价，常以敏感性（包括临床敏感性）/ 特异性（包括临床特异性）和阳性符合率/阴性符 合率来表示。
临床特异性和临床敏感性
临床敏感性：在患有明确临床疾病的患者中，其检 测结果呈阳性或者超过正常值范围的比率 （即出现 阳性结果和确定患者患病）。 临床特异性：在没有特定临床疾病的患者中，其检 测结果呈阴性或者在正常值范围内的比率。
（一）不精密度的验证
纯定性试验：采用浓度接近临界值的分析物作为检 测材料，不宜采用阴性低值或强阳性样本来评价定性 检测方法的不精密度。 量值化定性试验：以COI（cut-off Index）或S/CO 比值作为分析方法的精密度评价指标。
纯定性测定不精密度的评估方法

。 和批内变异系数 CV（%）
批间精密度：浓度分别处于正常和病理水平的混合新鲜临床标本，按照临床标本相同的 检测方法（或将室内质控品按照常规标本的方法一样测定，测定结果在遵照厂商参数不出控 的前提下） ，同批次内检测混合的新鲜临床标本 20 次，同一批号室内质控品某一时间段（至 少 20 天）的室内质控数据逐步累积最终得出均值、标准差。 1.1.3 结果判断
其中： D：表示总共检测天数(D=5)； n：单个样本每天重复检测的次数(n=4)； xdi：每个样本每天四次单独检测的结果； xd：每个样本每天四次检测结果的算数均数； xt：单个样本每天检测结果的算数均数的算数均数。 4.1.3 结果判断（可参考）
4.1.3.1 于批内精密度的判断，具体的计算和判断过程： 1)按照下述公式计算出批内精密度的自由度 ν。
1.2 正确度 1.2.1 卫生部临检中心室间质评含盖的项目，则以卫生部临床检验中心室间质评结果为
准；成绩在 80%者即为验证通过。 1.2.2 卫生部临检中心室间质评未涉及的项目，通过仪器之间的比对来实现，以参加卫
生部临检中心的室间质评的作为比对基准仪器，其最近 1 次参加卫生部临检中心的室间质评 结果。采用 5 个患者的样本，样本浓度水平尽量覆盖测量范围，包括医学决定水平。计算在 医学决定性水平下的系统误差（偏倚%） ，偏倚= ︱测定值-靶值︳/靶值*100%，偏倚%应<1/2 CLIA’88 或卫生部临检中心室间质评最大允许误差，80%以上的数据符合以上要求即为通过。 成绩在 80%以上者即为验证通过。 1.3 线性范围 1.3.1 目的：在确定某项目检测上限的同时检测其检测上下限是否呈线性关系，从而保
D：表示总共检测天数(D=5)； n：单个样本每天重复检测的次数(n=4); 因此，按照我们的验证方案，批内精密度(Swithin)的自由度为 15。 2)按照下述公式计算出 C 值百分点。

浙江省中医院徐淑贞陈明涛姚轶敏摘要为了提高医学实验室的质量和能力，规范实验室检测系统的性能验证过程，文章从制定计划，确定方案，执行方案三个方面详细的介绍了检测系统分析性能评价的程序。

医学实验室为保证检验结果的可靠有效，最大程度的得到质量和能力方面的认可，近年来各实验室着力推行检验过程的规范化和标准化，用审视的态度评价日常的操作行为，其中对检测系统的验证评价尤其重视。

检测系统的验证是指对实验室新购置的已被政府有关部门认可了其分析性能的检测系统，实验室在投入进行常规病人标本检测前，需对厂商提供的性能资料中的几个分析性能进行实验确认该检测系统是否具有预期的水平。

对检测系统性能验证的内容一般包括精密度，正确度，分析测量范围，临床可报告范围，生物参考区间。

本文就实验室如何开展验证工作做了以下几点探讨：1 制定验证计划1.1 实验室管理层应制定计划，用于定期监测并证实检测系统已适当校准处于正常功能状态。

同时还应有文件化的预防性维护计划并记录[1]。

1.2 实验室技术负责人和各专业组组长共同负责检测系统分析性能评价实验方法的设计，专业组组长负责组织检测系统的分析性能评价实验并成立工作小组。

2 制定验证方案2.1 确认检测系统：检查一个项目检测所涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序、质量控制程序、保养计划等组组成的检测系统，若手工操作还包括具体操作人员都准备到位。

2.2 确认性能验证的内容：定量项目包含精密度，正确度，分析测量范围，临床可报告范围，生物参考区间；定性、半定量项目包含检测结果符合率，检出限。

2.3 确认验证时机和周期：实验室对新购置的检测系统在正式用于检测标本前，需要对检测系统的主要性能和指标进行验证；系统每运行12个月后，需要重新对检测系统的主要性能和指标进行验证；遇到重大投诉针对检测系统有质疑时，需要有针对性的进行验证；仪器维修后、重要零件更换后、试剂改变后等需要对系统的主要性能指标重新验证；仪器长距离搬动后，需要对检测系统的主要性能和指标进行验证，从而保证检验结果的可靠性，最大程度的满足临床要求。

可报告范围
根据检验目的、预期用途等选择需要验证的性能特征
分析性能验证
生物参考区间
灵敏度/检出限
稀释倍数验证
分析特异性
（含干扰物）
• 实验室的参考区间可依据厂家说明书也可依据权威文献，
如存在地区、人群等差异，应自行验证
某些项目的诊断灵敏度对辅助临床诊断、监测病情、判断
预后有价值
• 对于需要稀释的样本，应对稀释样本进行验证，才可将可报告
验证实验数据计算获得批内不精密度 ，总不精密度1 ；
与厂家声明相比较 or 与实验室质量目标相比较？
➢ 性能验证的目的，是为了确定实验室现行方法能够满足临
床实验室对分析性能的要求。
➢ 在模拟日常操作的情况下，满足实验室质量目标即可。
结果判读——精密度
• CLIA’88 允许总误差或卫生部室间质量评价标准
2.普通干燥管收集，2-8℃可保存7天；-20℃可保存1个月，不可反复冻融。
3. 一次检测标本用量为50uL，每天需150uL，加上日立杯死腔量100uL，再多
预留一些，则每天至少需要300uL样本，总共需1.5mL。因标本量小，且装在
同一子弹头及日立杯中，在操作过程中应避免不必要的蒸发。（此处计算的是
定度，则验证通过。
其中室间质评样品的不
确定度为

=

若参 ＞参考物质的不确
定度，则需计算验证区
间。
结果判读——线性范围
• 用两次均值画图，拟合线性回归线，计算相关系数 2 。
Hale Waihona Puke ➢ 若 2 ＞0.995，则可初步判读厂家声明的线性范围符合要求
➢ 若否，则应根据均值散点图确定，是采用扩大样本数量或重复检测次数

实验室检验项目性能验证和分析后质量保证-271-2019年华医网继续教育答案2019年华医网继续教育答案-271-实验室检验项目性能验证和分析后质量保证备注:红色选项或后方标记“[正确答案]”为正确选项(一)全面质量管理体系的概念和要求1、按照IS建议质量手册目录中关于分析后质量保证的是（）A、第8条、第9条B、第14条、第15条C、第16条、第17条D、第19条、第20条、第22条[正确答案]E、以上都不是2、按照IS：2003（E）《医学实验室质量和能力的专用要求》的规定，检验项目的标准操作规程（即SOP）编写的最基本要求是（）A、实验室所有使用的检验方法都应该有操作手册B、外文说明书必须译成中文C、每一检验项目都应有相应的操作规程，必须与当前的检测方法与操作步骤相一致[正确答案]D、按照检测项目编写E、以上都不是3、质量体系最终要符合（）A、顾客要求B、质量控制要求C、质量保证要求D、实验室认可的要求[正确答案]E、以上都不是4、按照IS建议质量手册目次中关于分析前质量保证的是（）A、第8条、第9条B、第14条、第15条[精确答案]C、第16条、第17条D、第19条、第20条、第22条E、以上都不是5、质量管理分五个层次，最上面的是（）A、全面质量管理[正确答案]B、质量管理C、质量体系D、质量保证E、质量控制6、标准化操纵规程又称标准化操纵程序（SOP文件）中第9条是关于（）A、操纵性能概要[精确答案]B、质控品的使用水平和频率C、危急值D、超出可敷陈范围结果的处理E、以上都不是7、分析中质量保证不包孕（）A、执行实验B、尝试选择[精确答案]C、结果回顾D、结果解释E、以上都不包孕8、质量办理分五个层次，最下面的是（）A、全面质量管理B、质量管理C、质量体系D、质量控制[精确答案]E、以上都不是9、全面质量办理的原动力是（）A、新的管理理念B、最大限度满足顾客要求[正确答案]C、质量控制D、经济因素E、以上都是10、质量保证将临床检验分为（）过程A、三[正确答案]B、四C、五D、六E、七(二)检验项目性能验证的要求和方法（一）1、下列研究方法中准确度最高的是（）A、决定性方法[正确答案]B、参考方法C、可比较的方法均值D、参考尝试室均值E、同组的均值2、可溯源到决定性方法的（）A、决意性方法B、参考方法[精确答案]C、可比较的方法均值D、同组的均值E、以上都不是3、准确度研究取决于（）A、研究方法[精确答案]B、校准方法C、随机处理能力D、质控方法E、以上都是4、与方法或仪器性能有关的特征不包括（）A、准确度B、分析范围C、分析灵敏度、分析特异度D、适用度[正确答案]E、精密度5、下列研究方法中准确度最低的是（）A、决定性方法B、参考方法C、可比较的方法均值D、同组的均值[精确答案]E、参考实验室均值6、关于参考方法叙述错误的是（）A、是在工业和临床实验室由有经验的工作人员执行的更高精度的方法B、由决意性方法考证的一级参考物质被用于参考方法的开发和校准C、参考方法的结果可溯源到决定性方法D、NRSCL从事开发分析物可溯源的准确度库-已有证书的参考系统有15个分析物[正确答案]E、许多组织已参与开发临床上分析物的准确度7、临床实验室人员如何客观地选择和评价分析方法的技术，应当从以下几个方面入手（）A、与方法学选择和评价过程密不可分的B、选择候选方法的程序C、性能标准的讨论D、不用于可接受方法标准的描述[正确答案]E、渐渐描述若何评价候选的方法8、关于性能验证的叙述错误的是（）A、性能验证是对候选产品或者新产品在使用前必须进行的一项质量保证工作B、只有经由过程了性能考证才能正式进入使用C、性能考证不同于临床考证，要求必须使用临床标本对检测体系进行考证[精确答案]D、可使用标准品或质控品对产品说明书标示的性能进行验证E、A+B9、性能验证时分析项目准确度表达方式是（）A、用真值表示B、使用系统误差或总误差概念[正确答案]C、用重复性表示D、使用精密度观点E、以上都不是10、关于准确度的叙述错误的是（）A、IFCC将准确度定义为分析项目测定值与其“真值”之间的一致性B、分析项方针真值可以使用不同的参考方法技术取得C、通过使用系统误差或总误差概念来确定方法的准确度D、准确度研究取决于随机处理能力[正确答案]E、由它评价分析项目真值与其测定值之间一致性(三)检验项目性能验证的要求和方法（二）1、与准确度无关的评价指标是（）A、分析特异性B、回收率C、干扰试验D、精密度[正确答案]E、以上都是2、同时评价批内和批间不精密度时，下列叙述错误的是（）A、每天做2个批次的测试B、每批测试时，对同一样品作双份测量，共做20天C、评价结束时共有40对，80个测试结果D、从40批次测定中双份结果的差值求出批间精密度，从所有80个数据中计算出批内精密度[正确答案]E、每一批次测定时，必须同时测量质控品，以保证结果是可靠的3、只评价批内不精密度时，在一批内对样本进行至少（）次重复测定A、5B、10C、15D、20[正确答案]E、304、下列关于精密度的叙述错误的是（）A、是分析方法对同一样本产生重复测量相同值的能力B、也称为随机分析误差C、用不精密度表示D、依赖于空白读数大小[正确答案]E、分为批内不精密度和批间不精密度5、当分析参考方法和参考物质受到局限或不可获得时，（）可以说是评价准确度的唯一实际的方法A、回收试验[正确答案]B、空白测定C、分析范围D、检出限E、以上都不是6、在测量程序过程中由于试剂和样本成分而观察到的响应被认为是（）A、分析范围B、空白测量[精确答案]C、检出限D、干扰E、以上都不是7、因为精密度受很多身分影响，在敷陈精密度时，下列说法错误的是（）A、同时报告批内标准差及其95%置信区间、批内变异系数B、同时报告批间标准差及其95%置信区间、批间变异系数C、不用敷陈尝试进行的工作日数[精确答案]D、同时报告检验批次数、每个批次重复检验数和总检验数E、同时报告试剂、校准品的种类、批号；适用仪器的种类和型号8、关于检验项目性能验证新方法成功评价的关键点叙述错误的是（）A、整个任务使用临床观点B、在开始之后，要设定目标，分析目标[正确答案]C、执行正确的试验，收集所需的数据D、正确地使用统计工具，以便正确地估计误差E、做出方法客观的结论9、关于分析范围叙述错误的是（）A、指的是方法使用未经点窜样本的浓度范围或其他量B、理想情形下，校准曲线应该是线性并经由过程原点C、如果曲线是线性，检测范围被称为方法的线性范围D、方法的分析范围应足够的宽包括没有预稀释期望样本的90％至95％[正确答案]E、如果无法获得线性响应，校准程序应使用较高校准溶液数量来足够地确定响应曲线10、分析灵敏度的确切定义是（）A、最低检出限B、检测的敏感度C、校准曲线的斜率及对于规定量的变化分析程序产生信号的变化[正确答案]D、线性最低值E、以上都不是(四)分析后质量保证（一）1、在定量分析中目前主要采用Levey-Jinnings质控图这一方法，应用的前提不包括()A、质控图必须由专人负责[精确答案]B、其上下控制界限范围必须小于或等于临床允许误差C、根据Westgard多规则判断无失控现象D、质控图应符合“办理用质控图”的要求E、送检患者标本的质量是保证的2、特殊项方针检验结果及一些干系重大的检验结果,需有尝试室主任复核无误并签名前方可收回，除外（）A、抗HIV阳性的检验结果B、出现严重超标，无法解释的检验结果[正确答案]C、初次诊断为白血病的检验结果D、发现罕见病原体的检验结果E、初次诊断为恶性肿瘤的检验结果3、关于检验敷陈中的基本信息叙述错误的是（）A、清楚、明确的检验标识B、检验申请者的姓名及申请日期C、发布报告实验室的名称，最好有实验室的联系方式D、检验项目可以以任意单位报告结果[正确答案]E、检验结果必须以中文形式报告4、下列关于检验报告基本信息叙述错误的是（）A、委托实验室发出的报告应有申请实验室提供的其他唯一性标识和申请者地址B、原始样品采集的日期和时间，还应申明尝试室接收样品的时间D、检验结果如有修正，直接供给修正后的结果[精确答案]E、需要时对结果进行解释，诊断性的检验敷陈应有必要的描述及有“印象”、“初步诊断”或“诊断”意见5、根据IS的要求分析后阶段指的是检验后的所有过程，其中不包括（）A、授权者应系统性地评审检验结果B、标本的处理与实验的执行[正确答案]C、评价其与可使用的患者有关临床信息的符合水平，并授权发布D、结果、原始样品及其他实验室样品的保存应符合经批准的政策E、不再用于检验样品的平安处置应符合当地关于废弃物处置法规和有关废弃物办理的建议6、关于检验报告单的签发审核制度中检查的基本内容叙述错误的是（）A、临床医师所申请的检验项目是否已全部检验、有无漏项B、书写错误可以忽略[正确答案]C、检验结果的填写是否清楚、正确D、检验报告单上所有内容是否全部填写完整E、有无非常异常的、难以解释的结果7、关于建立严格的检验敷陈单的签发审核制度的叙述错误的是（）A、检验报告单发出前，除主要操作人员签字外，还应有另一有资格的检验人员核查并签名B、在危急情况下或单独一人值班时除外，但必须有相应的规定，如值班人员资格认定C、诊断性的检验敷陈单必须由具有执业医师资历的检验人员签发D、实学员可单独签发检验结果报告单[正确答案]E、特殊项目的检验结果及一些关系重大的检验结果需有实验室主任或由实验室主任授权的检验人员复核无误并签名后方可发出8、异常结果要建立复核或复查制度，其中不包括（）A、单纯指高于参考区间上限或低于参考区间下限的那些检验结果[正确答案]B、检验结果异常偏高或偏低C、与临床诊断不符的检验结果D、与以往结果相差过大的检验结果E、与相关试验结果不符的检验结果9、按照IS的规定，分析后质量保证工作不包孕()A、检验结果的精确收回B、咨询服务C、检验样品的保存D、标本唯一性识别[正确答案]E、检验样品的处理10、检验敷陈单的收回至少应建立下列几项基本制度，除外（）A、建立严格的检验报告单的签发审核制度B、建立检验敷陈单可否收回的制度C、危急值报告制度、检验报告回报时间的规定D、检验敷陈单可由别人签收[精确答案]E、保证患者隐私权制度、标本的留验规定(五)分析后质量保证（二）1、有些特殊检查，结果应直接报送检验申请者本人，除外（）A、抗HIV阳性的结果B、梅毒回响反映阳性C、淋病双球菌阳性结果D、一般检查结果[正确答案]E、肝炎血清标志物阳性的结果2、危急值报告结果必须（）A、按照急诊敷陈规定履行B、当面敷陈患者或其家族C、迅速将结果报告给临床医师[正确答案]D、尽快将报告单发给临床医师E、以上都是3、由具有执业医师资历的检验人员签发的检验敷陈是（）A、危急值报告B、检验结果异常偏高或偏低的报告C、诊断性的检验敷陈[精确答案]D、有争议的结果的报告E、以上都是4、关于危急值报告与急诊报告叙述错误的是（）A、出现危急值时也必须迅速敷陈B、急诊检验结果不论正常或异常必须立即敷陈C、危急值的工程一定是急诊检验[精确答案]D、危急值与医学决意水平有联系但不完整等同E、只有危及患者生命的检验数值才称为危急值5、动脉血氧分压的危急值是（）mmHgA、15B、25C、35D、45[正确答案]E、556、血清中血钾的危急值高值是（）mmol/LA、6.2[精确答案]B、6.5C、6.7D、7.0E、7.27、静脉血、末梢血中，血小板计数的危急值是每升（）亿个A、300B、400C、500[正确答案]D、700E、9008、仪器校准规定：至少每（）个月进行一次校准A、三B、四C、五D、六[精确答案]E、七9、新生儿血清中淀粉酶的危急值为正常参考值上限的（）倍以上A、2B、3[精确答案]C、4D、5。

定量检验方法学的分析性能验证浅析王青依据卫生部《医疗机构临床实验室管理办法》第三十条款和CNAS-CL02：2008《医学实验室质量和能力认可准则》（IOS15189:2007）第5.5条款的相关要求，实验室应对方法学进行评价，以检查其分析性能和对预期用途的适用性。

近年来，医学实验中心在实验室认可的工作中，进行了大量的性能验证试验，累积了较丰富的实践经验，本文从“5W+1H”六个方面，对定量检验方法学的性能验证进行汇总，供大家探讨和交流。

一、为什么要做性能验证？性能验证是为了确保实验室开展的检验项目，所应用的检测系统的分析性能或检验项目的方法学能够满足检测及临床要求，从而保证患者标本检测结果准确可靠。

二、进行性能验证的场所？按照实验室管理办法和认可准则的要求，医疗机构临床实验室应承担所开展检验项目的性能验证工作。

三、何时需要做性能验证？1 以下情况应完成初次性能验证：新安装的仪器拟开展的项目；新开展项目；同一项目的试剂变更厂家或检验方法发生变更时；仪器校准、发生故障维修后或更换主要的配件后，可能对结果产生较大的影响时，可选择其所开展的部分检验项目进行分析性能证。

2 何时需要做性能评估/评价?初次验证后，对精密度、正确度及可报告范围等性能参数至少每12个月进行一次评估，可通过评估如CV、均值等室内质控数据的变化趋势（批间精密度）、室间质评项目的结果的可接受性（正确度）、临床医护人员对结果的反馈（可报告范围）、小样本的验证等多种方式进行。

若评估的结果不可接受，则需重新进行性能验证。

四、哪些人员可以进行性能验证试验?性能验证试验应由实验室有资质的检验人员完成，必要时可由技术支持人员协助完成试验；而性能验证报告必须由资深的检验人员完成，并经科室主任审核后归档保存。

五、性能验证包括哪些方面？定量项目性能验证的内容包括但不限于：精密度（批内、批间）；正确度；检测低限（灵敏度）；携带污染率；线性范围；可报告范围；生物参考区间；检验结果量值溯源；测量不确定度；等。

医学实验室ISO 15189认可性能验证实验方案为了满足目前医学实验室认可的需求保证实验室检测结果的准确性，特制定本方案。

适用于强生VITROS产品的试验项目的性能验证，包括V250/V350/V950/FS5.1//V3600/V5600上所能开展的所有定性检测项目。

本方案从准确度、精密度、参考范围、线性范围以及方法学比对5个方面对各个试验项目进行评价。

一、精密度（Precision）：精密度是指在规定条件下所获得的检测结果的接近程度，表示测定结果中随机误差大小程度的指标。

精密度通常用不精密度表示。

可以分别评价连续精密度（批内精密度）、重复性不精密度（中间精密度，包括批间、日间精密度等）和再现性精密度。

本方案采用批内和天间两种方法对各个试验项目的精密度进行评价。

全部实验过程使用同批号试剂和质控品，并且保证检测当日质控在控。

1、批内精密度（连续精密度）：方法：在检测患者标本过程中，连续运行高低水平质控品各20次，记录检测结果。

计算批内精密度的CV值和SD值。

结果评价（1）厂家评价标准：计算精密度指数=验证SD/厂商SD，精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。

（2）按照国际推荐标准：批内精密度应在CLIA88允许误差的1/4以内，见美国CLIA’88能力比对检验的分析质量要求。

2、天间精密度（中间精密度）：方法：同样使用两个水平的质控品，若需复溶冻干质控品做实验，要注意选择产品的稳定性和瓶间差。

要严格控制每次复溶冻干品时的操作手法。

连续测试20天，每天检测1次。

在次过程中不能更换试剂批号及质控品批号，是否需要重新定标则取决于实验室。

测试完成后记录检测结果。

结果评价（1）厂家评价标准: 计算天间的SD及CV值，并计算精密度指数=验证SD/厂商SD。

精密度指数要求小于等于1，或者实测CV小于等于厂家要求的CV，两者符合其一即可。

具体见《精密度评价》表格。