2010版药典氨基酸检测方法
- 格式:doc
- 大小:38.50 KB
- 文档页数:4
⽢氨酸检验标准操作规程1. ⽬的建⽴⽢氨酸检验标准操作规程,规范操作。
2. 范围适⽤于⽢氨酸的检验。
3. 依据:中国药典2010版⼆部。
4. 职责4.1 起草:QC 审核:质量保证部负责⼈批准⼈:质量管理负责⼈。
4.2QC实施本规程。
4.3QA监督本规程的实施。
5. 内容5.1 性状本品为⽩⾊⾄类⽩⾊结晶性粉末;⽆臭,味甜。
本品在⽔中易溶,在⼄醇或⼄醚中⼏乎不溶。
5.2 鉴别5.2.1 鉴别(1)5.2.1.1 试液及仪器⼀般实验仪器。
5.2.1.2 分析步骤取本品与⽢氨酸对照品各适量,分别加⽔溶解并稀释制成每1ml中约含10mg的溶液,作为供试品溶液与对照品溶液。
吸取上述两种溶液各2µl分别点于同⼀硅胶G薄层板上,以正丙醇-氨⽔(7:3)为展开剂,展开约10cm,晾⼲,在80℃⼲燥30分钟,喷以茚三酮的正丙醇溶液(1→100),在105℃加热⾄斑点出现,⽴即检视。
供试品溶液所显主斑点的位置和颜⾊应与对照品溶液的主斑点的位置和颜⾊相同。
5.2.2 鉴别(2)5.2.2.1 试液及仪器⼀般实验仪器和红外可见分光光度仪。
5.2.2.2 分析步骤⽤红外分光光度仪检测,采⽤压⽚法,取残渣约1~1.5mg,置玛瑙研钵中,加⼊⼲燥的溴化钾或氯化钾细粉约200~300mg(与供试品的⽐约为200:1)作为分散剂,充分研磨混匀,置于直径为13mm的药⽚模具中,使铺展均匀,抽真空约2min,加压⾄(0.8×106)kPa(约8~10T/㎝2),保持压⼒2min,撤去压⼒并放弃后取出制成的供试⽚,⽬视检测,⽚⼦应呈透明状,其中样品分布应均匀,并⽆明显的颗粒状样品。
亦可采⽤其他直径的压膜制⽚,样品与分散剂的⽤量需相应调整以制得浓度适合的⽚⼦。
测定。
本品的红外光吸收图谱应与对照的图谱(光谱集929图)⼀致。
5.3 检查5.3.1 酸度5.3.1.1 试液及仪器⼀般实验仪器。
5.3.1.2 分析步骤取本品1.0g,加⽔20ml溶解后,依法测定(附录Ⅵ H),pH值应为5.6~6.6。
氨基酸测定方法一、引言氨基酸是构成蛋白质的基本单位,因此对于蛋白质的研究和分析,氨基酸的测定是非常重要的。
目前,常用的氨基酸测定方法主要有色氨酸法、二硫化物法、硫酸铜法、乙醇胺法、二甲基乙二胺法等。
本文将从样品处理、试剂配制、实验步骤和数据处理等方面详细介绍氨基酸测定方法。
二、样品处理1. 样品收集:选择适当的组织或液体样品进行采集,如血清、尿液等。
2. 样品预处理:根据不同样品特点进行预处理,如尿液中可加入少量硝酸使其变为无色透明状态。
3. 样品保存:在低温条件下保存样品以避免其蛋白质降解。
三、试剂配制1. 氢氧化钠溶液:取固体氢氧化钠加入去离子水中搅拌至完全溶解。
2. 硫代乙酰胺溶液:取固体硫代乙酰胺加入去离子水中搅拌至完全溶解。
3. 氨基酸标准溶液:将各种氨基酸按照一定比例加入去离子水中,调节pH值至7.0左右。
4. 还原剂:取固体羟肟酸钠加入去离子水中搅拌至完全溶解。
四、实验步骤1. 样品处理:取适量的样品加入硫代乙酰胺溶液中,混合均匀后放置于60℃恒温水浴中反应20分钟。
2. 加入还原剂:将还原剂加入反应体系中,混合均匀后再次放置于60℃恒温水浴中反应20分钟。
3. 加入氢氧化钠溶液:将氢氧化钠溶液加入反应体系中,混合均匀后放置于60℃恒温水浴中反应30分钟。
4. 加入试剂:取适量的氨基酸标准溶液和待测样品分别加入反应体系中,混合均匀后放置于室温下静置10分钟。
5. 测定吸光度:使用分光光度计在570nm波长下测定反应体系的吸光度值。
五、数据处理1. 绘制标准曲线:将不同浓度的氨基酸标准溶液分别测定吸光度值,绘制标准曲线。
2. 计算待测样品中氨基酸含量:根据待测样品的吸光度值和标准曲线计算其中氨基酸含量。
3. 数据统计分析:对实验数据进行统计分析,如平均值、方差等。
六、注意事项1. 实验过程中要注意卫生和安全,避免试剂进入眼睛和口腔。
2. 样品处理时要避免过度稀释或过度浓缩,以保证实验结果的准确性。
4。
1 光度分析法[5] [6]β-氨基丙酸和茚三酮溶液在弱酸的条件下可以生成蓝紫色物质[7],其颜色深浅主要与β-氨基丙酸的浓度有关。
因此可利用此显色反应采用比色法定量测量β—氨基丙酸。
我在实验中发现很多因素如浓度、pH 值、反应温度、以及反应时间等对此显色反应有很大的影响.如忽视这些因素会使实验产生很大的误差.就此显色反应的最佳条件我做了初步的探究.4.1。
1试剂的配制:缓冲液的配制:配制pH= 6。
00的NaAc -HAc 缓冲溶液β—氨基丙酸标准溶液的配制:用电子天平准确称取1。
020 g β-氨基丙酸(生化纯),溶于250ml pH=6.00缓冲溶液中,得到C = 4.080 g/L 标准溶液.茚三酮试剂的配制:称取0.5g 茚三酮溶于100ml 蒸馏水中,得到5g/L 的茚三酮水溶液。
4.1。
2标准曲线的确定分别准确移取0.30ml 、0。
40ml 、0。
50ml 、0.60ml 、0.70ml 、0。
80ml 、0.90ml 、1。
00ml 标准液于8个比色管中,用pH=6.00的缓冲溶液稀释到5.00ml 再加入1ml 茚三酮水溶液充分摇匀,将其放在沸水浴中加热10min 。
冷却到室温,用7230型分光光度计在569nm 下测其吸光度.以吸光度和浓度作一个标准曲线。
4。
1。
3样品的测定稀释待测液于0.24mg/ml-0.73mg/ml,调pH 值到6.00,以相同的反应条件,测其吸光值并与上面的标准曲线对照查出稀释液的浓度,再乘以稀释倍数即为β-氨基丙酸的浓度。
4.1.4 标准曲线的测定结果β-氨基丙酸浓度在0.24mg/ml —0.73mg/ml 范围内与茚三酮水溶液反应,颜色表现出由浅蓝到深蓝的递增变化。
用茚三酮比色法测得的一组数据得到的标准曲线如图1:吸光度加入标液体积(ml)图 1 标准曲线的测定Fig 1 Determination of the standard curve注:在沸水中加热10min ,β—氨基丙酸标准溶液5ml 、茚三酮水溶液1ml 、缓冲溶液pH=6.004.1。
氨基酸检测方法药典
氨基酸的检测方法在药典中有多种,其中包括电位滴定法、高效液相色谱法等。
具体方法的选择取决于氨基酸的种类和检测要求。
对于某些氨基酸,如酪氨酸和组氨酸,药典中提供了详细的电位滴定法进行含量测定。
这种方法需要精密称取一定量的样品,溶解在特定的酸中,然后使用高氯酸滴定液进行滴定,并通过空白试验校正结果。
另外,高效液相色谱法也被广泛应用于氨基酸的检测。
例如,可以采用Waters C18色谱柱,以磷酸二氢钾溶液-甲醇为流动相,在280nm波长下进行检测。
这种方法可以高效、精准地检测酪氨酸的含量。
对于组氨酸的检测,除了电位滴定法外,还可以采用其他方法如茚三酮法、Pauly显色法、伏安法等,或者采用实验室组装的离子交换色谱分析仪和柱后衍生的高效液相色谱法等。
以上信息仅供参考,如需获取更准确的信息,建议查阅药典或咨询相关专家。
氨基酸检测方法1. 氨基酸色谱法氨基酸色谱法是一种常用的氨基酸检测方法。
该方法是利用氨基酸的特性,在具有特定氨基酸浓度梯度的柱子中流动时,各种氨基酸会按照一定的顺序在柱子中被分离出来。
利用这种分离技术加上不同的检测方法,可以精确地测量样品中各种氨基酸的含量。
该方法准确度高,响应灵敏,但需要高昂的仪器和耗材。
2. 离子交换色谱法离子交换色谱法也是一种常用的氨基酸检测方法。
该方法是在离子交换柱中,将混合的氨基酸样品与柱内的离子交换树脂进行交换,实现各种氨基酸的分离和测量。
该方法测量精度高,但某些疏水性氨基酸分离效果不佳。
3. 毛细管电泳法毛细管电泳法是一种高效而准确的氨基酸检测方法。
其基本原理是将氨基酸样品在带电的毛细管中进行分离,利用质量分析仪器对氨基酸进行检测。
毛细管电泳法能够在非常短的时间内对混合氨基酸进行快速、准确的测量。
4. 气相色谱法气相色谱法是一种相对快速而精确的氨基酸检测方法。
在气相色谱法中,氨基酸样品首先通过氨基酸衍生化反应使其变得易于气相分析,然后在气相色谱仪中将氨基酸进行分离和测量。
该方法准确度较高,同时也提供了氨基酸的结构信息。
5. 氢化技术法氢化技术法是一种经典的氨基酸检测方法。
该方法是将氨基酸样品加入到盛有氢气的高压釜中,加热反应,利用氢化反应将氨基酸转化为氨基酸替代物,然后对替代物进行定量测量。
该方法简单易行,但需要高压釜及氢气供应等耗材。
6. 高效液相色谱法高效液相色谱法是一种可靠的氨基酸检测方法。
其基本原理是使混合样品在高效液相色谱柱中分离,使各种氨基酸有序地流过柱中吸附剂,并使用各种检测方法获得氨基酸含量的定量信息。
该方法测量范围广,准确度高,但仍需要较昂贵的仪器和耗材。
7. 红外光谱法红外光谱法是一种非常方便和易行的氨基酸检测方法。
该方法利用分子中各个化学键的振动所导致特定波长的吸收光谱来区分各种氨基酸。
虽然红外光谱法不能直接定量测量氨基酸,但是可以通过特定的计算和数据分析方法来获得氨基酸的含量和结构信息。
1. 分光光度法氨基酸检测: 主要是利用氨基酸与衍生剂发生化学反应,产生蓝紫色化合物,该化合物在某一波长处有最大吸收峰,根据吸收值大小得到氨基酸含量。
常用的衍生剂为茚三酮。
分光光度法具有操作方便、仪器要求简单、成本低、应用范围广以及适用于芳香族氨基酸检测等特点。
2. 毛细管电泳法氨基酸检测: 根据分离原理的不同,可分为毛细管区带电泳、毛细管凝胶电泳、毛细管等电电泳、毛细管等速电泳以及胶束电动力学毛细管电泳。
其中,毛细管区带电泳和胶束电动力学毛细管电泳可用于氨基酸检测。
毛细管电泳法具有分离效率高、分析时间短、溶剂用量少、无须梯度洗脱以及适用于氨基酸的手性分离等特点,但该方法分析结果重现性较差。
3. 近红外光谱法氨基酸检测: 利用有机化合物的含氢基团在特定波长区域跃迁,产生光谱的变化,结合统计学方法间接地实现氨基酸的定量检测。
近红外光谱法具有高效、无污染、无破坏性以及可同时检测多组分等特点。
4. 气相色谱法氨基酸检测:将氨基酸衍生化处理变为容易气化的物质,根据气态样品中各组分在流动相和固定相中的分配系数的不同,实现对氨基酸的定量分析。
GC法不仅能检测氨基酸含量,还可以发现新氨基酸,但缺点在于操作复杂、干扰因素多,专一性差。
5. 高效液相色谱法氨基酸检测: 是最常用的一种氨基酸检测方法。
由于大多数氨基酸本身没有紫外吸收和荧光反应,因此需要对样品进行衍生化处理将其转化为有紫外吸收和发射荧光的物质,衍生可分为柱前衍生和柱后衍生。
1)柱前衍生:是样品在进入色谱柱之前,氨基酸经衍生化转变为适合反相高效液相色谱检测的物质,常用的衍生剂有丹酰氯、邻苯二甲醛、萘二甲醛等。
实验常用的色谱柱有C8柱、C18柱和CN柱,检测方法有HPLC-UV、HPLC-ELSD、HPLC-FLD、HPLC-MS等。
2)柱后衍生:是样品经离子交换柱分离,分离后的氨基酸再进行衍生化处理。
常用的柱后衍生化试剂有茚三酮和荧光胺,其中荧光胺的灵敏度比茚三酮高大约 3个数量级。
氨基酸测定方法一、引言氨基酸是构成蛋白质的基本组成单位,对于生命体的生长和发育起着重要的作用。
因此,准确测定氨基酸的含量和组成对于研究蛋白质结构和功能具有重要意义。
本文将介绍一些常用的氨基酸测定方法,包括色谱法、光谱法和化学法等。
二、色谱法测定氨基酸2.1 气相色谱法气相色谱法是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过将氨基酸样品转化为易挥发的衍生物,然后使用气相色谱仪进行分析。
气相色谱法具有分离效果好、灵敏度高和操作简便等优点。
2.1.1 衍生化反应在气相色谱法中,常用的氨基酸衍生化反应包括酯化、酰化和取代反应等。
这些反应能够将氨基酸转化为易挥发的衍生物,便于后续的气相色谱分析。
2.1.2 气相色谱仪气相色谱仪是进行气相色谱分析的关键设备。
它由进样系统、色谱柱和检测器等部分组成。
进样系统用于将样品引入色谱柱,色谱柱用于分离氨基酸衍生物,检测器用于检测分离后的化合物。
2.2 液相色谱法液相色谱法也是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过将氨基酸样品溶解在溶剂中,然后使用液相色谱仪进行分析。
液相色谱法具有分离效果好、灵敏度高和选择性强等优点。
2.2.1 色谱柱选择在液相色谱法中,选择合适的色谱柱对于分离氨基酸非常重要。
常用的色谱柱包括离子交换柱、反相柱和手性柱等。
不同的色谱柱具有不同的分离机理和选择性,可以根据需要选择合适的色谱柱。
2.2.2 梯度洗脱条件在液相色谱法中,通过调整洗脱溶剂的组成和流速等参数,可以实现对氨基酸的有效分离。
梯度洗脱条件可以根据氨基酸的亲水性和极性等特性进行优化。
三、光谱法测定氨基酸3.1 紫外-可见光谱法紫外-可见光谱法是测定氨基酸含量和组成的常用方法之一。
该方法通过测量氨基酸在紫外-可见光波段的吸收特性,来推断其含量和组成。
紫外-可见光谱法具有操作简便、灵敏度高和选择性强等优点。
3.1.1 吸收峰特征不同氨基酸在紫外-可见光谱中具有不同的吸收峰特征。
通过测量氨基酸的吸收峰强度和位置,可以推断其含量和组成。
茚三酮显色法测定氨基酸的含量一.原理:凡含有自由氨基的化合物,如蛋白质、多肽、氨基酸的溶液与水合茚三酮共热时,能产生紫色化合物,可用比色法进行测定。
氨基酸与茚三酮的反应分两个步骤。
第一步是氨基酸被氧化形成CO2、NH3和醛、茚三酮被还原成还原型茚三酮;第二步是所形成的还原型茚三酮与另一个茚三酮分子和NH3缩合生成有色物质。
二.仪器:721型分光光度计台天平减压蒸馏器干燥容量瓶移液枪烧杯试管架试管水浴锅。
三.药品:(1)标准氨基酸溶液:配制成0.3 mmol/L 溶液(2)pH5.4,2mol/L 醋酸缓冲液:量取86mL 2mol/L 醋酸钠溶液,加入14mL 2mol/L 乙酸混合而成。
用pH 检查校正。
(3)茚三酮显色液:称取170mg 茚三酮和30mg 还原茚三酮,用20mL 乙二醇甲醚溶解(4)60%乙醇。
(5)样品液:每毫升含0.5~50μg 氨基酸。
茚三酮若变为微红色,则需按下法重结晶:称取5g 茚三酮溶于15~25mL 热蒸馏水中,加入0.25g 活性炭,轻轻搅拌。
加热30min 后趁热过滤,滤液放入冰箱过夜。
次日析出黄白色结晶,抽滤,用1mL 冷水洗涤结晶,置干燥器干燥后,装入棕色玻璃瓶保存。
还原型茚三酮按下法制备:称取0.5g 茚三酮,用12.5mL 沸蒸馏水溶解,得黄色溶液。
将0.5g 维生素C 用25mL 温蒸馏水溶解,一边搅拌一边将维生素C 溶液滴加到茚三酮溶液中,不断出现沉淀。
滴定后继续搅拌15min,然后在冰箱内冷却到4℃,过滤、沉淀用冷水洗涤3 次,置五氧化二磷真空干燥器中干燥保存,备用。
乙二醇甲醚若放置太久,需用下法除去过氧化物:在500mL 乙二醇甲醚中加入5g 硫酸亚铁,振荡1~2h,过滤除去硫酸亚铁,再经蒸馏,收集沸点为121~125℃的馏分,为无色透明的乙二醇甲醚。
四、操作步骤1.标准曲线的制作分别取0.3mmol/L 的标准氨基酸溶液0,0.2,0.4,0.6,0.8,1.0mL 于试管中,用水补足至1mL。
《中国药典》2010年版(二部)概况河北省药品检验所2010年11月石家庄主要内容O 总体情况凡例的增修订情况© 各论的增修订情况举例附录增修订情况◎ y药典(药品标准)一点个人体含10年版与05年版二部增修订情况比较表10版二部各类品种的增修订情况标准中有较大变化的部分制剂品种(1)(主要是有关物质、含量测定项目)-乙酰半胱氨酸颗粒,乙酰哇胺片,二轻丙茶殓片、注射液,己烯雌酚注射液,己酮可可殓注射液,马来酸氯苯那敏注射液、片、滴丸,五氟利多片,贝诺酯片,牛磺酸颗粒,双氯芬酸钠肠溶片,双喀达莫片、注射液,丙戊酸钠片,甘露醇注射液,左氧氟沙星片,布美他尼注射液、片,丙谷氨片、胶囊,布洛芬片、胶囊,扑米酮片,标准中有较大变化的部分制剂品种(2)•卡马西平片、胶囊,卡托普利片,卡维地洛片、胶囊,甲芬那酸片、胶囊,甲氧氯普胺片,盐酸甲氧氯普胺注射液,甲氧节旋注射液,甲硝哇片、泡腾片、栓、胶囊、注射液,甲磺酸培氟沙星片、胶囊,甲磺酸酚妥拉明注射液,司坦哇醇片,尼莫地平片、分散片、胶囊,尼可刹米注射液,标准中有较大变化的部分制剂品种(3)•尼美舒利片,尼索地平片,对乙酰氨基酚片、胶囊、注射液,地高辛片,地西泮片, 达那异烟耕片、粉针,地塞米松磷酸钠注射液,西米替丁氯化钠注射液,达非哇胶囊,曲安奈德注射液,肌昔葡萄糖注射液,注射用肌昔,米非司酮片,安乃近片,异戊巴比妥片,异烟耕片,芬布芬片、胶囊,克霉哇乳膏、药膜、栓,咲喃妥因肠溶片,标准中有较大变化的部分制剂品种(4)-咲廛米注射液,毗哌酸胶囊、片,口引喙美辛肠溶片、乳膏,利福平注射液,谷氨酸钾注射液,泛酸钙片,阿司匹林肠溶片,阿普噪仑片,环扁桃酯胶囊,苯巴比妥钠片,注射用苯妥英钠,非诺贝特片、胶囊, 罗通定片,洛莫司汀胶囊,辛伐他汀片、胶囊,非诺贝特胶囊,标准中有较大变化的部分制剂品种(5) •复方十一烯酸复方磺胺唏喘片,盐酸依诺沙星片、胶苯海明片,苯殓缓释片,枸橡酸他莫昔芬片,枸椽酸芬太尼注射液,枸椽酸喷托维林片,氟康哇氯化钠注射液,氢化可的松注射液,氢氯廛嗪片,氢漠酸东萇君殓注射液,重酒石酸间轻胺注射液,复方卡托普利片,复方克霉噪乳膏,复方盐酸阿米洛利片,复方磺胺甲噁哇注射液,标准中有较大变化的部分制剂品种(6)•胆苯殓片,美洛昔康片、分散片、胶囊,洛莫司汀胶囊,盐酸乙胺丁醇片,枸椽酸喷托维林片,氢化可的松注射液,氢氟廛嗪片,氢漠酸东芨蓉殓片、注射液,水仙殓片,复方甘草片,复方卡托普利片,复方甲苯咪哇片,复方克霉哇乳膏,复方莪术油栓,复方铝酸钮胶囊、片,标准中有较大变化的部分制剂品种(7)•度米芬滴丸,盐酸马普替林片,盐酸布比卡因注射液,注射用盐酸甲氯芬酯,盐酸尼卡地平片,盐酸地芬尼多片,盐酸多巴胺注射液,盐酸多巴芬丁胺注射液,盐酸多塞平片,盐酸异丙肾上腺素注射液,盐酸异丙嗪片、注射液,盐酸利多卡因胶浆, 盐酸妥拉噪林片、注射液,盐酸阿米替林片,盐酸苯乙双肌片,盐酸苯海索片,盐酸奈福泮片、注射液,标准中有较大变化的部分制剂品种(8)•盐酸罗通定片,盐酸哌哇嗪片,盐酸哌替喘片、注射液,盐酸氟奋乃近片、注射液, 盐酸美沙酮片、注射液,盐酸倍他司汀片, 盐酸胺碘酮片、注射液、胶囊,盐酸麻黄碱注射液、滴鼻液,盐酸维拉帕米缓释片, 盐酸氯西那林片,盐酸氯米帕明片,盐酸氯胺酮注射液,盐酸普鲁卡因注射液,标准中有较大变化的部分制剂品种(9)•盐酸雷尼替丁注射液,盐酸漠己新片,格列齐特片(II),核黄素磷酸钠注射液,盐酸丁丙诺啡注射液,盐酸己氟拉嗪片,盐酸去氯轻嗪片,盐酸左氧氟沙星片、胶囊,盐酸布桂嗪片、注射液,盐酸甲氧明注射液,盐酸甲氯芬酯胶囊,盐酸曲吗多胶囊,盐酸伐昔洛韦片、胶囊,标准中有较大变化的部分制剂品种(10)•盐酸多沙普仑注射液,盐酸安他噪林片,盐酸利多卡因注射液,盐酸环丙沙星片、胶囊.滴眼液,盐酸帕罗西汀片,盐酸美西律注射液,盐酸莫雷西嗪帕酮注射液,氧氟沙星片、胶囊、滴眼液, 氨甲环酸片、注射液,烟酸占替诺注射液, 酒石酸美托洛米片、注射液、胶囊,标准中有较大变化的部分制剂品种(11)•盐酸消旋山萇蓉殓注射液,诺氟沙星软膏、滴眼剂,蔡普生片、栓、胶囊、颗粒,咖片,径基眼片,维A酸片,维生素B1片、注射液,维生素C 注射液(草酸检査),维生素E软胶囊,维生素K1注射液,联磺甲氧节旋片,葡萄糖酸亚铁片.胶囊、糖浆,硝西泮片,硝苯地平片、胶囊,标准中有较大变化的部分制剂品种(12)•硝酸甘油片、注射液,硝酸异山梨酯乳膏, 硝酸益康乳膏、栓、喷雾剂、溶液,硫酸亚铁片,氯硝西泮片、注射液,氯氮平片,氯氮片,氯磺径哇乳膏,奥沙西泮酮洛芬肠溶胶囊,酮康噪片、片* 9 bn m乳膏、胶囊,标准中有较大变化的部分制剂品种(13)•澳丙胺太林片,熊去氯胆酸片,醋酸甲径孕酮片,醋酸地塞米松片,醋酸曲安奈德注射液,磺胺咳呢片、混悬液,磷酸川茸嗪片、胶囊、注射液,磷酸可待因片,磷酸苯丙哌林颗粒、片、胶囊,磷酸氯唾片、注射液,螺内酯片、胶囊。
2010年版新增的''氨基酸检测方法"如下:新增附录附录XX 氨基酸分析法氨基酸分析法是指用于测定蛋白质、肽及其他药物制剂的氨基酸组成或含量的方法。
根据氨基酸组成分析可以对蛋白质及肽进行鉴别,氨基酸分析法可用于确定蛋白质、肽及氨基酸的含:及测定可能存在于蛋白质及肽中的非典型氨基酸。
进行氨基酸分析前,必须将蛋白质及肽水解成单个氨基酸,具体水解方法由各品种项下规定。
蛋白质及肽水解后,其氨基酸分析过程与用于其他药物制剂中游离氨基酸的分析过程相同。
本法包括四种柱前衍生法,分別为异硫氛酸苯酯(PITC)法、6-氨基唾咻一N—疑基琥珀酰亚氨基氨基甲酸酯(AQC)法、邻苯二醛(OPA)和9-茹甲基氯甲酸甲酯(FMOC)法、2, 4- 二硝基氟苯(DNFB)法,以及一种苗三酗柱后衍生法。
不同的品种应针对自身所含的氨基酸种类及各氨基酸的含量选择适宜的氨基酸分析方法并做相应的方法学验证。
由于本法衍生过程中衍生溶液量较少,且容易挥发,外标法极易出现较大的误差,建议采用内标法进行测定,内标的确定由各品种项下规定。
在本法中,由于半胱氨酸或胱氨酸的衍生产物不稳定,因此对于含半胱氨酸或胱氨酸的样品衍生后应尽快测定,或者在衍生前对半胱氨酸或胱氨酸进行适当的处理,使其转化为稳定地产物(如磺基丙氨酸或半胱氨酸-硫代丙酸)后再衍生测定, 具体方法由各品种项下规定。
在测定过程中,可根据所用的仪器、色谱柱品牌、色谱柱的长度及要分离的氨基酸种类,对流动相的有机溶剂和洗脱梯度作适当调整以获得较好的分离度。
第一法PITC柱前衍生氨基酸分析法本法系根据氨基酸与异硫亂酸苯酯(PITC)反应,生成有紫外响应的氨基酸衍生物苯氨基硫甲酰氨基酸(PTC-氨基酸),PTC-氨基酸经反相髙效液相色谱分离后用紫外检测,在一定的范币内其吸光值与氨基酸浓度成正比。
本方法的线性浓度范围为0.025〜1.25pmol/ml。
试剂(1)流动相A 0.1mol/L醋酸钠溶液(取无水醋酸钠8.2g,加水900ml溶解,用冰醋酸调pH至6.5,然后加水至1000 ml)-乙睛(93:7)。
中国药典氨基酸测定方法
嘿,你知道中国药典的氨基酸测定方法吗?那可是相当厉害呢!先说说步骤吧,就像搭积木一样,一步一步来。
首先得准备好样品,这就好比做饭前要准备食材一样。
然后进行一系列的操作,比如提取、纯化啥的。
注意事项也不少呢!比如操作过程中要小心,别弄洒了样品,这就像端着宝贝瓷器,可得小心轻放。
测定过程中的安全性那是杠杠的!就像有个坚固的盾牌保护着你。
只要按照规范操作,基本不会有啥危险。
稳定性也没得说,就像一座稳稳的大山。
那应用场景可多了去了!制药、食品行业都能用得上。
优势也很明显呀,准确、可靠,就像一个靠谱的小伙伴。
咱再来看看实际案例。
有个制药厂,用这个方法测定氨基酸,效果那叫一个好!产品质量有了保障,市场竞争力也大大提升。
这难道不是很厉害吗?
中国药典的氨基酸测定方法真的超棒!它就像一个魔法棒,能为各个行业带来准确的结果,让我们的生活更有保障。
关于《中国药典》2010年版盐酸组氨酸及谷氨酸中其他氨基酸项下系统适用性要求的商榷程速远;张慧;梁成罡【期刊名称】《中国药品标准》【年(卷),期】2013(014)003【摘要】盐酸组氨酸和谷氨酸是《中国药典》2010年版二部收载的氨基酸类药物,且二者均收载于《英国药典》和《欧洲药典》。
盐酸组氨酸收载于《美国药典》,《日本药局方》未收载这两个品种。
《中国药典))2005年版二部收载的这两个品种的其他氨基酸检查项下均无系统适用性要求,2010年版增加了系统适用性要求。
但是,系统适用性试验结果都存在一些问题,前者的系统适用性结果是脯氨酸的斑点不够清晰,加大上样量后斑点清晰度提高;后者系统适用性结果是门冬氨酸的斑点不显色,无法判定系统适用性是否符合要求,增加门冬氨酸浓度后斑点显色明显,为此笔者认为对系统适用性溶液的配制及点样量提出商榷。
【总页数】2页(P168-169)【作者】程速远;张慧;梁成罡【作者单位】中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050;中国食品药品检定研究院,北京100050【正文语种】中文【中图分类】R921.2【相关文献】1.2010年版《中国药典》中动物药质量标准商榷 [J], 高晓晨;孙佳明;刘冬;杜婷婷;张辉2.《中国药典》2000年版二部中有关颗粒剂项下值得商榷的问题 [J], 邵建强3.关于在《中国药典》2010年版一部儿茶[检查]项下增加水中不溶物检查的建议及含量测定的探讨 [J], 曾德成4.关于《中国药典》2005年版二部阿昔洛韦含量测定项下系统适用性试验溶液配制的商榷 [J], 杨兴明;黄慧芬5.中国药典(2000年版,一部)人参健脾丸项下当归的检验标准商榷 [J], 刘志荣;姜文茹;杨志伟;郭颖;冯榜超因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
甘氨酸全面介绍甘氨酸科技名词定义中文名称:甘氨酸英文名称:glycine;Gly定义:学名:2-氨基乙酸。
非手性分子,最简单的天然氨基酸。
L-甘氨酸是蛋白质合成中的编码氨基酸,哺乳动物非必需氨基酸,在体内可以由葡萄糖转变而来,因具有甜味而得名。
符号:G。
应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科);氨基酸、多肽与蛋白质(二级学科)以上内容由全国科学技术名词审定委员会审定公布甘氨酸(Glycine)又名氨基乙酸,为非人体必需氨基酸。
名称缩写:Gly 甘氨酸是氨基酸系列中结构最为简单,人体非必需的一种氨基酸,在分子中同时具有酸性和碱性官能团,在水溶液中为强电解质,在强极性溶剂中溶解度较大,基本不溶于非极性溶剂,而且具有较高的沸点和熔点,通过水溶液酸碱性的调节可以使甘氨酸呈现不同的分子形态。
目录成分及性质1.基本信息2.性能描述3.物理参数4.用途说明5.危险说明6.物化性质7.甘氨酸的生理作用8.甘氨酸的合成9.极性药物分析用途1.食品级甘氨酸2.医药级甘氨酸3.饲料级甘氨酸4.工业级甘氨酸2010版中国药典内容展开成分及性质1.基本信息2.性能描述3.物理参数4.用途说明5.危险说明6.物化性质7.甘氨酸的生理作用8.甘氨酸的合成9.极性药物分析用途1.食品级甘氨酸2.医药级甘氨酸3.饲料级甘氨酸4.工业级甘氨酸2010版中国药典内容展开成分及性质基本信息甘氨酸产品编号:FZS118中文名称:甘氨酸中文别名:甘氨酸;氨基乙酸,氨基醋酸英文名称:Aminoacetic acid英文别名:Gly ;Amino acetic acid;Aminoethanoic acid;Glycine 线性分子式:NH2CH2COOH分子结构式[1]等级:ARCAS号:56-40-6分子式:C2H5NO2分子量:75.07相对密度1.595[2]熔点182℃[2]性能描述外观描述:白色结晶或结晶性粉末。
味甜。
溶于水,微溶于吡啶,不溶于乙醚。