JP-100标准架盘天平

实验一：蛋白质含量测定方法的研究---非蛋白物质的可能干扰及其干扰程度的研究分析摘要：本次实验通过分别利用三种方法（Folin-酚法，考马斯亮蓝（G-250），紫外法）平行测定纯蛋白溶液和生物材料中蛋白的含量，分别计算和比较每种材料通过三种方法测定结果的差异性。

再利用同时进行的11组实验的数据进行整合分析。

最后通过比较两种待测液在三种方法测定下的差异性来分析非蛋白质干扰因素对三种方法的影响及影响程度。

关键字：比色法，蛋白质含量测定，非蛋白质干扰因素，差异比较与分析1.研究背景及目的实验室测定蛋白质含量的方法多种，且依照不同的应用方向，依照不同的原理有多种蛋白质含量的测定方式。

目前蛋白质含量测定的主要应用方法是比色法，但是由于实验操作以及设备存在误差，所以蛋白质溶液的真实浓度难以知晓，因此不能直接恒量各种方法在不同测定环境中的差异性。

同时在实际的测量中，由于生物样品的复杂性，目标溶液中往往存在着诸多非蛋白干扰因素。

因此需要实验者通过多种方法，有一定的数据支持，从可依靠的数据的线性变化中寻求合理的数理参照，从而对非蛋白干扰因素的影响程度做以分析和比较。

2.原理本次实验选取三种实验方法——Folin-酚法，考马斯亮蓝（G-250）法和紫外法：Folin-酚法的原理利用是蛋白质中含有酚基的氨基酸数与蛋白质浓度呈正比，从而对特殊残基的测定来确定蛋白质含量；考马斯亮蓝法的原理是在一定蛋白质浓度范围内，蛋白质与色素结合物在595nm波长下光的吸收与浓度呈正比，故可用于蛋白质的测定；紫外法的原理是：蛋白质在紫外光下，吸收高峰在280nm左右，在此波长范围内蛋白质溶液的光密度值与浓度呈正比。

本次实验测定的对象为纯蛋白溶液（BSA，牛血清白蛋白）和生物材料（绿豆芽下胚轴蛋白的提取液），分别作为无非蛋白质干扰和非蛋白质干扰的两个实验组。

通过分别对两种溶液利用三种方法进行测定。

用数理处理和分析来衡量三种方法在测定中的波动，比较两待测液即纯蛋白和生物组织提取液之间的波动情况的差异。

架盘天平示值误差测量结果的不确定度评定（一）测量过程简述（1）测量依据：JJG156——2004《架盘天平检定规程》。

（2）测量环境条件：常温，周围无明显的振动和气流。

（3）测量标准：F1等级标准砝码。

（4）被测对象：以JPT-2型架盘天平为例，最大秤量为200g，分度值e=0.2g。

（5）测量方法：采用标准砝码直接测量天平各技术参数得出各示值误差。

（6）评定结果的使用：符合上述条件的测量结果，一般可参照使用本不确定度的评定方法。

（二）数学模型△m=P-m式中：△m——架盘天平示值误差；P——架盘天平示值；m——标准砝码值。

（三）各输入量的标准不确定度分量的评定本评定方法以200g天平最大秤量点200g为例，其他秤量点的示值误差测量结果的不确定度可参照本方法进行评定。

1、输入量m的标准不确定度u(m)的评定输入量m的标准不确定度u(m)采用B类方法评定。

（1）测量天平分度值所用标准小砝码引起的标准不确定度u(m r)的评定根据JJG99-2006《砝码检定规程》中给出二等0.2g砝码的扩展不确定度U=0.02mg，包含因子k=2，置信概率p=99.73%，则：u(m r)= U/2=0.02mg/2=0.01mg自由度：v(m r)=∞（2）测量天平全载误差所用标准砝码所引起的标准不确定度u(m B)的评定对该型号天平来说，测天平全载误差时所用的砝码为200g，根据JJG99-2006《砝码检定规程》中给出F1等级200g标准砝码的扩展不确定度U=0.33mg，包含因子k=2，则：u(m B)= U/2=0.33mg/2=0.17mg自由度：v(m r)=∞（3）输入量m的标准不确定度u(m)的计算已知m r和m B互相独立，则u(m)=√u2(m r)+ u2(m B)=√0.012+0.172mg=0.17mgv(m)= = =∞2、输入量P的标准不确定度u（P）的评定输入量P的标准不确定度u（P）来源于天平的示值变动性，即测量重复性。

GB/T19001-2008新标准培训考试题姓名________部门________职务/工种_________分数_______________一、选择题（选择唯一答案填于括号内（），每小题2分，共20分）1、（），国际标准化组织正式发布了ISO9001:2008国际标准。

a、2008年11月14日b、2008年12月30日2、GB/T 19001-2008《质量管理体系要求》，于（）发布a、2008年11月14日b、2008年12月30日3、GB/T 19001-2008《质量管理体系要求》，于（）实施a、2008年12月30日b、2009年03月01日4、GB/T 19001-2008标准（）采用了ISO9001:2008标准a、等同b、等效5、GB/T 19001-2008标准保持了与2000版标准的（）不变a、总体框架b、逻辑结构c、总体框架和逻辑结构6、GB/T 19001-2008标准其结构模式和过程方法与2000版的规定保持（）；a、不同b、相同7、新标准增强了与（）标准的兼容性a、GB/T 24001-2004b、GB175-20078、GB/T 19001-2008标准的内容保持了其通用性，（）的组织；a、仅适用于大中型工业企业b、适用于各种不同类型、不同规模和提供不同产品9、GB/T 19001-2008标准4.2.1注1规定“一个文件可包括对（）程序的要求。

”a、一个b、一个或多个10、GB/T 19001-2008标准中规定：顾客财产可包括（）a、知识产权b、个人信息c、以上都包括二、判断题（对的在括号内打√，错的打х每小题2分，共20分）1、（）GB/T 19001-2008标准鼓励在建立、实施质量管理体系以及改进其有效性时采用过程方法，通过满足顾客要求，增强顾客满意。

2、（）基于适当的教育、培训、技能和经验，从事影响产品要求符合性的人员应是能够胜任的。

3、（）顾客是指接受产品的组织或个人。

实验二萌发麦苗淀粉酶活力及水溶性蛋白含量的测定一．研究背景及目的1.即便是同一种酶，在体外测定酶活性时在不同的测定方法和不同的材料、时期中，实验测定的具体细节设计却大不相同，体外酶活性的测定实验在生化实验中更是经典的实验案例。

本次实验是淀粉酶活性的测定，通过实验进一步体会实验的细节设计。

2.利用酶促反应测定萌发的小麦种子种淀粉酶的活力以及水溶性蛋白质的含量。

二．原理1.淀粉酶是水解淀粉的糖苷键的一类酶的总成，可以分成α-淀粉酶和β-淀粉酶等，α-淀粉酶和β-淀粉酶是其中最主要的两种。

实验中测定萌发的小麦种子的酶活力，因为材料中两种酶都含有，所以要采取一定方法分别测定两种酶活性。

利用两种酶不同的特性，α-淀粉酶不耐酸，pH3.6以下钝化，而β-淀粉酶则不耐高温，高温下易钝化，将β-淀粉酶钝化测得α-淀粉酶活性，再测总酶活性，相减即得到β-淀粉酶活性。

（C6H10O5）n + 0.5nH2O 淀粉酶，40℃0.5nC12H22O11C12H22O11 + 3,5-二硝基水杨酸3-氨基-5-硝基水杨酸淀粉酶活力的大小与产生的还原糖的量成正比。

用标准浓度的麦芽糖溶液制作标准曲线，用比色法测定淀粉酶作用于淀粉后生成的还原糖的量，以单位重量样品在一定时间内生成的麦芽糖的量表示酶活力。

2.利用Folin-酚法测定萌发小麦种子中水溶性蛋白的含量。

在碱性条件下，蛋白质中的肽键与铜结合生成复合物。

Folin—酚试剂中的磷钼酸盐—磷钨酸盐被蛋白质中的酪氨酸和苯丙氨酸残基还原，产生深蓝色（钼兰和钨兰的混合物）。

在一定的条件下，蓝色深度与蛋白的量成正比。

[1]三．仪器与试剂1.仪器：离心机（飞鸽牌系列离心机，TDL-40B），722-型分光光度仪（上海分析仪器总厂），DK-SR四型电热恒温水浴锅（上海精密实验设备有限公司），双列八孔电热恒温水浴锅（天津市中环实验电炉有限公司），冰浴微量可调手动移液器（大龙牌），研钵，容量瓶天平（上海精密科学仪器邮箱公司，双杰牌JP-100架盘药物天平）2．试剂萌发的小麦种子，3，5—二硝基水杨酸溶液，1%淀粉溶液，柠檬酸缓冲液0.4MNaOH溶液，麦芽糖标准液,A液，B液，试剂甲，试剂乙四．操作步骤1.制备酶液：2g萌发小麦种子研磨，用蒸馏水浸提，稀释成50ml，一部分3500转/分离心20min，取上清液备用，另一部分过滤，取滤液备用。

实验二-萌发麦苗淀粉酶活性的测定实验二萌发麦苗淀粉酶活性的测定生物112 周泓兆 1102040226一、研究背景及目的酶作为生物体内最重要的催化剂，其活性尤其受到关注。

在这次实验中，我们将对一些经典经典酶活力测定实验进行分析，对比其思路与设计差异，了解测定酶活力的基本方向和实验技巧。

完成小麦萌发过程中淀粉酶活力的测定并分析测定结果是否合理。

二、原理淀粉在淀粉酶的催化作用下生成麦芽糖。

本实验便是通过测定淀粉酶在一定时间内分解淀粉所产生的麦芽糖总量来测定酶的活性。

根据其催化产物的特点和现有测定方法规定酶活力单位为：每分钟每克鲜重麦种所催化生成的麦芽糖毫克数（毫克麦芽糖*克-1鲜重*分-1）。

本实验涉及α-淀粉酶与β-淀粉酶，我们可通过钝化β-淀粉酶的方法单独测定α-淀粉酶的活性。

本实验所使用的3,5－二硝基水杨酸法是一种对还原糖定量测定的方法。

还原糖和碱性二硝基水杨酸试剂一起共热，产生一种棕红色的氨基化合物，在一定的浓度范围内，棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。

因此，我们可以测定样品中还原糖以及总糖的量。

麦芽糖是还原性糖，可用该方法对其含量进行测定。

三、仪器与试剂1.仪器：TDL-40B 离心机（上海安亭科学仪器厂），722 光栅分光光度计（上海精密科学仪器有限公司），DK-S24 型电热恒温水浴锅（上海精宏实验设备有限公司），JP-100 架盘药物天平（常熟市双杰测试仪器厂），HCTP12A1 架盘药物天平（北京医用天平厂）2.试剂：麦芽糖标准液，pH5.6 的柠檬酸缓冲液，3,5-二硝基水杨酸溶液，0.4M NaOH，Folin-酚试剂甲，Folin-酚试剂乙，标准牛血清白蛋白溶液（1mg/ml ）3.材料：萌发的小麦种子（芽长约1cm）四、实验方法/操作步骤1、酶液的制备：称取两克萌发的小麦种子（芽长一厘米左右），置研钵中加少量石英砂，以蒸馏水作为匀浆液，研磨成匀浆，转移到50ml容量瓶中至40ml左右，室温浸提15-20分钟，浸提充分后定容至刻度，混匀后3500r/min离心20min，取上清液备用（初始酶液）。

实验室常用标准1.GB21549-2008实验室玻璃仪器玻璃烧器的安全要求；2.GB/T21784.2-2008实验室玻璃器皿通用型密度计第2部分：试验方法和使用；3.GB/T21298-2007实验室玻璃仪器试管；4.GB/T21297-2007实验室玻璃仪器互换锥形磨砂接头；5.GB/T11414-2007实验室玻璃仪器瓶；6.GB/T12804-2011实验室玻璃仪器量筒；7.GB/T12805-2011实验室玻璃仪器滴定管；8.GB/T12806-2011实验室玻璃仪器单标线容量瓶；9.GB/T28211-2011实验室玻璃仪器过滤漏斗；10.GB/T28212-2011实验室玻璃仪器冷凝管；11.GB/T28213-2011实验室玻璃仪器培养皿；12.GB/T22362-2008实验室玻璃仪器烧瓶；13.GB/T22067-2008实验室玻璃仪器广口烧瓶；14.GB/T11165-2005实验室pH计；15.GB/T30431-2013实验室气相色谱仪；16.GB4793.7-2008测量、控制和实验室用电气设备的安全要求第7部分：实验室用离心机的特殊要求；17.GB12803-1991实验室玻璃仪器：量杯；18.GB12807-1991实验室玻璃仪器：分度吸量管；19.GB12808-1991实验室玻璃仪器：单标线吸量管；20.GB21549-2008实验室玻璃仪器：玻璃烧器的安全要求；21.GBT11414-2007实验室玻璃仪器瓶；22.GBT12804-2011实验室玻璃仪器：量筒；23.GBT12805-2011实验室玻璃仪器：滴定管；24.GBT12806-2011实验室玻璃仪器：单标线容量瓶；25.GB/T12807-1991实验室玻璃仪器：分度吸量管；26GB/T12808-1991 实验室玻璃仪器：单标线吸量管；27.GBT12809-1991实验室玻璃仪器：玻璃量器的设计和结构原则；28.GBT12810-1991实验室玻璃仪器：玻璃量器的容量校准和使用方法；29.GBT14149-1993实验室玻璃仪器：互换球形磨砂接头；30.GBT15723-1995实验室玻璃仪器：干燥器；31.GBT15724-2008实验室玻璃仪器：烧杯；32.GBT15725.4-1995实验室玻璃仪器：双口、三口球形圆底烧瓶；33.GBT15725.6-1995实验室玻璃仪器：磨口烧瓶；34.GBT21297-2007实验室玻璃仪器：互换锥形磨砂接头；35.GBT21298-2007实验室玻璃仪器：试管；理化仪器类1.GBT1914-2007化学分析滤纸；2.GB24789-2009用水单位水计量器具配备和管理通则；3.GBT11007-2008电导率仪试验方法；4.GBT11165-2005实验室pH计；5.GBT12519-2010分析仪器通用技术条件；6.GBT13743-1992直流磁电系检流计；7.GBT13979-2008质谱检漏仪；8.GBT16631-2008高效液相色谱法通则；9.GBT17764-2008密度计的结构和校准原则；10.GBT18809-2002空气离子测量仪通用规范；11.GBT21186-2007傅立叶变换红外光谱仪；12.GBT21187-2007原子吸收分光光度计；13.GBT21191-2007原子荧光光谱仪；14.GBT21388-2008游标、带表和数显深度卡尺；15.GBT26792-2011高效液相色谱仪；16.GBT27500-2011pH值测定用复合玻璃电极；17.GBT30099-2013实验室离心机通用技术条件；18.GBT30430-2013气相色谱仪测试用标准色谱柱；19.GBT30431-2013实验室气相色谱仪；20.GBT4946-2008气相色谱法术语；21.GBT6040-2002红外光谱分析方法通则；22.GBT6041-2002质谱分析方法通则；23.GBT6315-2008游标、带表和数显万能角度尺；24.GBT8322-2008分子吸收光谱法：术语；25.GBT9008-2007液相色谱法术语：柱色谱法和平面色谱法；26.QBT1676-1992手动脂肪测定仪；微生物类1.GBT22056-2008显微镜，物镜和目镜的标志；2.GBT22058-2008显微镜，体视显微镜的标志；3.GBT22059-2008显微镜，放大率；4.GBT2609-2006显微镜，物镜；5.GBT2985-2008生物显微镜；6.GBT9246-2008显微镜，目镜；7.GBT9247-2008显微镜，聚光镜；8.QBT2296-1997培养皿；天平1.GBT25106-2010扭力天平；2.GBT4167-2011砝码；3.GBT4168-1992非自动天平杠杆式天平；4.QBT2087-1995架盘天平；实验室安全篇GB/T27476.1-2014检测实验室安全第1部分：总则GB/T27476的本部分规定了检测实验室（以下简称实验室）安全的通用要求。

架盘天平检定规程代替JJG156-74JJG156-83Verification Regulation of Table Balance本检定规程经国家计量局1983年10月26日批准，自1984年10月1日起施行。

归口单位：上海市标准计量管理局起草单位：上海市计量技术研究所本规程技术条文由起草单位负责解释。

本规程主要起草人：郑洧之(上海市计量技术研究所)参加起草人：惠程智(上海市计量技术研究所)陈树基(上海市计量技术研究所)架盘天平检定规程本规程适用于新制造、使用中和修理后的双盘、单杠杆、等臂式架盘天平的检定。

一、技术要求1 架盘天平的各项计量性能应符合表1的规定。

表1注：精度高于表1规定的架盘天平，其各项允差须按比例缩小。

2 符合表1各项规定的架盘天平所配备的砝码为五等砝码，高于表1精度的架盘天平所配备的砝码为四等砝码，其要求按砝码检定规程执行。

配备组合砝码的总质量值(包括天平标尺的最大计量值)不得小于天平的最大秤量。

3 天平放在水平台上应平稳，不摇动、不偏斜。

其外形应光洁整齐，没有毛刺、裂纹和明显的砂眼。

4 刀子应垂直地紧固在杠杆上，三把刀子应相互平行，工作部位的刀刃应平直，刀子两端面与刀刃应成70°～80°的夹角。

5 刀子在两挡刀板之间的轴向移动不应超过表2的规定。

6 天平的刀子、刀承、拉带和挡刀板均应进行热处理，其工作部位的硬度要求：刀子为HRC58～62；刀承和挡刀板为HV0.3kg766以上；拉带为HV0.3kg480～700。

7 拉带与重力架连杆和拉带支架连接后，连接销为得松动。

表28 刀承应紧固于重力架和杠杆支架上，其夹角工作部位应成圆弧形，光洁度不应低于6级，相对角顶应成一直线。

9 刀刃和刀承的接触部位不应少于刀承全长的2/3。

注：对于具有固定刀承的架盘天平斩不考核。

10 平衡螺杆应紧固在杠杆上，旋动平衡螺母应松紧适宜。

当天平平衡时，平衡螺母应位于螺杆的中部位置，并能调节松紧。

普通混凝土用砂试验规程一、依据标准：JGJ52-2006《普通混凝土用砂、石质量及检验方法标准》。

二、检验项目：筛分析、表观密度、堆积密度（紧密密度）、含泥量、泥块含量。

三、使用仪器：砂方孔筛、JP-A 型架盘天平、电热鼓风干燥烘箱、容量瓶、浅盘、铝制料勺、漏斗、直尺、秤、容量为1L 的筒、 四、取样：按同产地，同规格、同一进场时间，每400m 3或600t 为一验收批。

不足400m 3或600t 时亦为一验收批。

天然砂取22kg ，人工砂取52kg 。

五、方法与步骤：5.1、筛分析：5.1.1用于筛分析的试样，其颗粒的公称粒径不应大于10.0mm 。

试验前应先将来样通过公称直径为10.0mm 的方孔筛，并计算筛余。

称取经缩分后样品不少于550g 两份，分别装入两个浅盘，在（105±）℃的温度下烘干到恒重。

冷却至室温用。

5.1.2准确称取烘干试样500g （特细砂可称250g ），按筛孔大小顺序排列（大孔在上、小孔在下）的套筛的最上一只筛（公称直径为5.00mm 的方孔筛）上；将套筛装入摇筛机内固紧，筛分10min ，然后取出套筛，再按筛孔由大到小的顺序，在清洁的浅盘上逐一进行手筛，直至每分钟的筛出量不超过试样总量的0.1%为止；通过的颗粒并入下一只筛子，并和下一只筛子中的试样一起进行手筛，这样依次进行，直至所有的筛子全部筛完为止。

注：1当试样含泥量超过5%时，应先将试样水洗，然后烘干至恒重，再进行筛分；2无摇筛机时，可改用手筛。

5.1.3试样在各只筛子上的筛余量均不得超过按式4.1.3计算得出的剩留量，否则应将该筛的筛余试样分成两份或数份，再次进行筛分，并以其筛余量之和作为该筛的筛的筛余量。

300dA m r式4.1.3 式中m r ― 某一筛上的剩留量（g ）； d ―筛孔边长（mm ）； A ―筛的面积（mm 2）。

5.1.4称取各筛筛余试样的质量（精确到1g ），所有各筛的分计筛余量和底盘中的剩余量之和与筛分前的试样总量相比，相差不得超过1%。