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•综述•光动力治疗口腔黏膜癌及癌前病变的临床进展**基金项目：国家重点研发计划项目（项目编号：201ZYFB0407204）马"媛 浙江大学医学院附属第二医院口腔内科副主任医师杭州 310002李靖敏通讯作者杭州口腔医院副主任医师杭州310006马"媛李靖敏【摘要】口腔癌是发生在口腔的恶性肿瘤之总称，严重影响人类生命和生活，发病率高，致残率和病死率高。
许多口腔癌由癌前病变发展而来，最常见的是口腔黏膜白斑、扁平苔'等。
目前针对口腔癌一线治疗方案分为：手术切除、放射线治疗、化学治疗以及联合治疗。
特别是高龄口腔癌症患者，传统治疗尚有一定的局限性和毒副作用。
针对癌前病变常用药物和手术治疗，复发率较高，患者精神压力大。
光动力疗法(Photodynamictherapy , PDT)是通过光动力学反应选择性破坏病变组织的微创治疗手段，主要应用于体表和空腔脏器表面肿瘤的非手术治疗。
它具有抗瘤谱广、靶向特异性高、对正常细胞器官损伤小、全身毒副作用低、可以重复治疗等特 点。
在癌症复发或高龄癌症患者不能耐受手术和放化疗的治疗中取得了一定疗效。
PDT 为口腔黏膜病变(特别浅表病变和早期病变)提供了手术或放疗之外的另一种选择。
本文将从PDT 治疗口腔黏膜肿瘤、口腔黏膜癌前病变等疾病的治疗方面进行综述和展望。
关键词：光动力疗法；口腔黏膜病肿瘤；口腔黏膜白斑；口腔扁平苔'［中国图书分类号］R782 ［文献标识码］A DOI&10.19749/.cjgd. 1672-2973.2021.02.012Clinical progress of photodynamic therapy for oral mucosal carcinoma and precancerous lesionsMA Jing —yuan, LI Jing —min. (The Second Affiliated Hospital ofZhejiang University School of M edicine, Hangzhou 310002, China )［Abstract ］ Oral cancer is a general term Abr malignant tumors occurring in the oral cavity, which seriously affects human life. It has a high incidence rate and disability rate ang fatality rate. Many oral cancers develop from precancerous lesions.The common of oral mucosal precancers are oral leukoplakia and oral lichen planus. At present, the first-line treatment for oral cancer is divided into surgical resection, radiotherapy, chemotherapy and combination therapy. Especially for elderly oral cancer patients, traditional treatment has some limitations and toxic side effects. The recurrence rate of precancerous lesions, which used drugs and surgical treatment is higher with commonly treatment. The patient is under great stress.Photodynamic therapy (PDT) is a minimally invasive therapy for selective destruction of diseased tissue through Photodynamic response. It is mainly used for non-surgical treatment of tumors on the surface of the body and the surface of the cavity and viscera. It has the characteristics of wide anti-tumor spectrum, high targeting specificity, little damage tonormal cells and organs, low systemic toxic and side effects. It can be repeated treatment. Some curative effects have beenachieved in the treatment of cancer recurrence or elderly cancer patients who cannot tolerate surgery and chemoradiotherapy. PDT provides an alternative to surgery or radiation therapy for oral mucosal lesions (especially superficial and early stage lesions). In this paper, the treatment of oral mucosal tumors, precancerous lesions and other diseases of the oral mucosa byPDT will be reviewed and prospected.Key words: Photodynamic therapy; oral mucosal tumors; oral leukoplakia; oral lichen planus光动力疗法thera0y , PDT ）是一种温和、局部和相对安全的临床治疗技术。
口腔癌口腔癌是发生在口腔的恶性肿瘤之总称，大部份属于鳞状上皮细胞癌，所谓的黏膜发生变异。
在临床实践中口腔癌包括唇癌、牙龈癌、舌癌、软硬腭癌、颌骨癌、口底癌、口咽癌、涎腺癌和上颌窦癌以及发生于颜面部皮肤粘膜的癌症等。
口腔癌是头颈部较常见的恶性肿瘤之一。
疾病简介广义的口腔癌是指眼眶以下，颈部以上范围内所发生的癌症，如上颚窦，耳下唾液腺，舌下唾液腺皆属之。
狭义的口腔癌，包括口腔内可以看到的所有组织细胞，包括舌，口底，唇，牙龈，口腔颊膜及颚等。
“口腔癌前病”变癌前并不是癌，是指那些临床及组织学有改变并具有癌变倾向的病变。
公认的有白斑、赤斑、粘膜下纤维变性、粘膜良性淋巴组织增生症、上皮不典型增生以及交界痣等。
口腔粘膜扁平苔藓和慢性非特异性溃疡等也有可能癌变。
其中白斑、口腔粘膜扁平苔藓和慢性非特异性溃疡，为中老年人的多发病。
凡发现上述病变，应及时就诊。
各种口腔癌的好发年龄是40－70岁之间。
这些人中，如果发现口腔内有经久不愈的溃烂，或因吸烟过多等原因而致口腔粘膜局部变白、角化，或已成白斑者，应及时请医生检查。
解剖分区口腔癌主要指发生在口腔粘膜上的上皮癌。
因部位不同而分别称为舌癌、颊粘膜癌、牙龈癌、口底癌和硬腭癌。
1、舌粘膜舌分舌体与舌根，以“∧”字形界沟为分界。
紧贴界沟前方排列着轮廓乳头，于张口、用力伸舌时可见，约7～9个。
界沟前方为舌体，占全舌的2/3，为舌的活动部，分舌尖、舌缘、舌背和舌腹。
舌体粘膜从舌背经舌缘绕至舌腹向中央收缩成环形，然后与口底粘膜相连。
界沟后方为舌根，占全舌的1/3，属口咽部，在此粘膜上发生的舌根癌属口咽癌的一种。
2、颊粘膜颊粘膜包括覆盖口腔前庭颊部和唇部的粘膜以及磨牙后三角区的粘膜。
上下唇自然闭合时两唇相接触后缘之后的口腔前庭部分属颊粘膜，此后缘之前外露唇粘膜称唇红，为皮肤与颊料膜的移行部。
发生在唇红上的癌肿称唇癌。
唇红缘外皮肤上发生的癌肿则称皮肤癌。
颊粘膜内侧经呈马蹄铁形的上下口腔前庭沟与上下牙龈相连接。
第一章一、口腔颌面部发育1. 颌面部常见发育畸形有哪些，其形成背景如何？2．腭部常见发育畸形有哪些，其形成背景如何？3．舌部常见发育畸形有哪些，其形成背景如何？4．口腔颌面部发育的调控机制。
5．口腔颌面部还有哪些发育畸形？第二章牙的发育1. 以乳中切牙为例，试述牙齿发育的全过程。
2. 牙胚包括哪几部分，各形成哪种牙体组织？3. 钟状期成釉器的中间层细胞有哪些功能？高的磷碱性酸酶活性，与釉质形成有关。
4. 牙胚发育异常可导致哪些牙齿形态和数目的异常？双生牙、融合牙、结合牙、畸形中央尖、畸形舌侧尖、巨牙、小牙；少牙或无牙、多生牙5．牙硬组织基质形成及矿化特点。
6．总结牙发育各阶段的基因调控特点第三章牙体组织1. 釉柱的形态、走行方向及其意义。
2. 釉质的超微结构特点。
3. 釉质中有机物含量较多的区域有哪些，各有何形态特点？釉牙本质线、釉板、釉丛、釉梭、生长线4．釉质中的有机物的种类及意义。
3. 解释下列名词：球间牙本质、前期牙本质、修复性牙本质、继发性牙本质、管间牙本质、管周牙本质、罩牙本质、透明牙本质、（牙本质）透明层、托姆斯粒层、死区。
4. 牙髓神经分布特点及其临床意义。
Raschkow层/神经壁层，靠近多细胞层5. 牙骨质的生物学特性及功能。
6. 牙本质的超微结构特点。
第四章四、牙周组织1. 牙龈、牙周膜各有哪几组主纤维束？名称及功能如何？牙龈：胶原纤维（龈牙组，牵引牙龈和牙紧密结合）牙周膜：胶原纤维、弹力纤维（邻近牙骨质最多，承受力大）2. 结合上皮的形态特点及其与牙结合的方式？临床意义如何？半桥粒3. 牙槽骨的生物学特性及其临床意义。
4. 牙周膜中的细胞种类及其功能。
成纤维细胞——最多，合成、分解胶原蛋白牙周膜干细胞——牙周组织的再生成牙骨质细胞上皮剩余——颌骨囊肿、牙源性肿瘤的来源成骨细胞5. 龈谷的所在部位及其病理意义。
细菌、菌斑聚集地，容易牙龈炎第五章五、口腔粘膜1. 口腔粘膜上皮细胞的种类及部位分布、排列特点。
口腔粘膜的组织结构上皮角质细胞由表入里分为四层1、角化层：细胞核及细胞器消失，均质的角化蛋白（嗜酸性）2、颗粒层:细胞核浓缩,细胞扁平（嗜碱性）3、棘层:细胞体积大，层数最多，细胞内蛋白质合成最活跃（层次最多）4、基底层:是一层立方形或矮柱状细胞，有增殖能力,和深部棘层细胞都称为生发层（增值） 上皮非角质细胞由基底层、棘层、中间层、表层构成。
包括黑色素细胞、梅克尔细胞（位于基底层，触觉感受细胞）、和朗格汉斯细胞（位于基底层和棘层，免疫功能细胞）——因细胞不着色，称为透明细胞口腔粘膜病第一节、口腔粘膜的基本病理变化1、过度正角化 棘层增厚明显，细胞核消失 过度不全角化 增厚的角化层残留细胞核2、角化不良（错角化）含义：在上皮的棘层或基底层出现角化珠可分为两种：一种为良性角化不良，指在棘层高度增生的上皮组织钉突中出现，如白斑；一种为恶性角化不良,见于重度异常增生，见于原位癌或鳞状细胞癌3、上皮异常增生基底核消失；核质增加；上皮钉突呈滴状；细胞多形性；核分裂增多；棘层出现角化团4、棘层松解 棘层细胞桥溶解、张力原纤维断裂，细胞解离，形成裂隙多见于天疱疮5、基底细胞空泡性变及液化 基底细胞内水肿，胞浆呈空泡状，严重时细胞液化、溶解、破碎、消失常见于扁平苔藓、红斑狼疮角质层:上皮的最浅层.细胞扁平,细胞器消失， 胞质内充满角质蛋白,染成红色均质状 正角化:角化细胞中胞核完全消失者 不全角化:角化细胞中胞核固缩而未消失者空泡性变:细胞内水分增多,胞体肿大,胞质清亮,呈空泡状(本质属于水变性). 液化:细胞液化溶解而破碎(本质属于液化性坏死).6、疱粘膜或皮肤内液体的贮存形成半圆形的突起 口腔粘膜其他地方的庖形成后易破裂，不易结痂皮 分类:按内容物（水疱、血疱、脓疱）按大小(5mm 为标准，大疱、小疱)疱疹：小的水疱聚集成簇． 7、糜烂机械刺激或药物烧伤引起上皮浅层破坏，未侵及上皮全层糜烂面一般鲜红，表面平滑而湿润，可有疼痛8、溃疡粘膜或皮肤表层坏死、脱落形成凹陷；完整性发生持续性缺损或破坏溃疡累及上皮层，不留瘢痕，累及粘膜下层，可留瘢痕9、斑 是粘膜或皮肤上的颜色异常，范围局限，大小不一；不高起，不变厚，也无硬度的改变，可为暂时性或永久性如红斑（粘膜固有层的血管充血）、黑斑（基底层的黑色素细胞增多）10、丘疹消失后不留痕迹表现：①上皮增生；②浆液渗出；③炎症细胞浸润肉眼:黏膜或皮肤上突起的小疹，大小不等，针头或粟粒样大，红色或灰白色，质较硬 镜下：上皮增厚，表层可有过度正角化或过度不全角化，固有层有浆液渗出及炎细胞浸润第二节口腔粘膜病一、白斑（P208）癌前病变1、定义：指发生在粘膜表面的白色斑块，不能被擦掉，也不能被诊断为其他任何疾病者。
在我国，口腔颌面部恶性肿瘤以癌最常见，肉瘤较少。
在癌瘤中又以鳞状细胞癌最多见，一般占80%以上；其次为腺性上皮癌（黏液表皮样癌、腺癌、腺样囊性癌、恶性多形性腺瘤、腺细胞癌等）；基底细胞癌及淋巴上皮癌较少见。
口腔颌面癌鳞状细胞癌（squamous cell carcinoma）—鳞癌：多发生于40-60岁的成人，男性多于女性部位以舌、颊、牙龈、腭、上颌窦常见常向区域淋巴结转移，晚期可发生远处转移早期—表现为黏膜白斑，表面粗糙，以后—发展为乳头状或溃疡型，或二者混合出现，以溃疡型最多见，有时呈菜花状，边缘外翻。
鳞癌按病理分化程度分级：I级—分化较好II级—分化一般III级—分化最差未分化癌的恶性程度最高根据发生部位不同，其组织结构、恶化程度、转移部位、治疗方法也有不同一、舌癌（carcinoma of the tongue）—最常见的口腔癌—多为鳞癌按UICC分类—舌前2/3癌（舌体）属口腔癌范畴；舌后1/3（舌根）属口咽癌范畴男性多于女性，近年来女性有增多及发病年龄年轻化舌癌多发生于舌缘，其次舌尖、舌背常溃疡型或浸润型一般恶性程度较高，生长快，浸润性较强，常波及舌肌，至舌运动受限，有时说话、进食、吞咽均发生困难晚期可蔓延至口底及下颌骨，使全舌固定，向后发展可侵犯腭舌弓及扁桃体有继发感染或侵犯舌根常发生剧烈疼痛，疼痛可反射至耳颞部及整个同侧的头面部常发生早期颈淋巴结转移，且转移率较高（舌体具丰富淋巴管‘血液循环+舌机械运动频繁）舌癌淋巴结转移常在一侧，如发生于舌背或舌体中线的舌癌可向对侧颈淋巴结转移舌前部癌—向下颌下及颈深淋巴结上、中群转移舌尖部癌—颏下淋巴结或直接转移到颈深中群淋巴结可发生远处转移—一般转至肺部治疗：以综合疗法为主早期—间质内放射治疗，待原发灶控制后再实施颈淋巴清扫术—为保存舌的功能如放疗不敏感—原发灶切除+颈淋巴清扫术晚期—首选手术治疗—波及口底及下颌骨的—一侧舌、下颌骨及颈淋巴联合清扫术，若对侧有转移应双侧清扫术清扫术一般主张—肩胛舌骨上或功能性颈淋巴清扫术—舌癌颈淋巴结转移率高且早期转移对舌尖、舌背、舌前2/3边缘部分的小而分化良好的肿瘤—采取包括部分正常组织在内的局部手术切除/低温治疗为恢复舌的功能，超过1/2以上的舌体缺损均应行一期舌再造术化学药物治疗—晚期病例手术的术前、术后辅助治疗；也用于有远处转移的病员三、颊粘膜癌（carcinoma of the buccal mucosa）—在口腔癌中局第二或第三位—多为分化中等的鳞状细胞癌，少数为腺癌及恶性多形性腺瘤颊黏膜癌区域（UICC规定）：上下颊沟之间，翼下颌韧带之前，包括唇内侧粘膜常发生于磨牙区附近，呈溃疡型或外生型，生长较快，向深层浸润。
口腔黏膜癌前病变及鳞状细胞癌中VEGF的表达及意义高文信;王雷;马宁【期刊名称】《口腔医学研究》【年(卷),期】2002(18)5【摘要】目的 :探讨VEGF在口腔扁平苔藓、口腔白斑、口腔鳞状细胞癌中的表达及其在口腔鳞癌发生、发展过程中的意义。
方法 :应用VEGF多克隆抗体对 10例正常黏膜、2 7例口腔扁平苔藓、2 4例口腔白斑及 30例口腔鳞状细胞癌分别进行免疫组化检测。
结果 :VEGF在口腔鳞状细胞癌组织中高表达 ,与口腔扁平苔藓、口腔白斑、正常口腔黏膜组织存在着显著性差异 (P <0 .0 5 ) ;在口腔扁平苔藓和口腔白斑中VEGF有一定的表达 ,且表达强度强于正常口腔黏膜组 (P <0 .0 5 )。
结论 :VEGF的过表达与口腔鳞癌的发生、发展有关 ,可以将其作为预测口腔黏膜恶变潜能的重要标志物。
【总页数】3页(P319-321)【关键词】VEGF;口腔黏膜癌前病变;口腔鳞状细胞癌;血管内皮生长因子【作者】高文信;王雷;马宁【作者单位】吉林大学口腔医学院【正文语种】中文【中图分类】R739.85【相关文献】1.口腔黏膜癌前病变和口腔鳞状细胞癌中Stat3的表达及意义 [J], 汤根兄;吴国英2.口腔黏膜癌前病变及口腔鳞癌中bFGF的表达及意义 [J], 王雷;高文信;杨萍;马宁;陈丹3.口腔鳞状细胞癌中VEGF与Ki-67的表达及意义 [J], 安义;张椽4.探讨β-catenin、VEGF在口腔鳞状细胞癌中的表达及临床意义 [J], 刘燕;李晓霞;武秀秀5.COX-2和VEGF在口腔黏膜鳞状细胞癌中表达及意义 [J], 蔡劲;施茜;赵妮妮;任大宏;杨静;黎民宇因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
口腔癌前病变和口腔癌前状态名词解释下载提示：该文档是本店铺精心编制而成的，希望大家下载后，能够帮助大家解决实际问题。
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作者单位:100050首都医科大学口腔医学院口腔医学研究所通讯作者:汤晓飞,E 2mail:xftang10@yahoo 1com,电话:010267099311口腔癌和癌前病变细胞中氧化应激相关基因差异表达汤晓飞 张辛燕 张敏 孙正 【摘要】 目的 筛选口腔鳞状细胞癌和癌前病变细胞中与氧化应激相关的差异表达基因,探讨氧化应激损伤与口腔癌发生的相关性及其作用机理。
方法 采用核酸微阵列技术,对口腔鳞状细胞癌细胞株Tca8113、K B 及口腔癌前病变细胞株DOK 细胞的基因表达谱进行比较研究,检测、筛选口腔鳞状细胞癌中与氧化应激相关的差异表达基因。
结果 与氧化应激相关的差异表达基因有28条。
与氧化应激关系较密切的差异表达基因有9条,如过氧化物酶、超氧化物歧化酶、谷胱甘肽合成酶、谷胱甘肽S 2转移酶、硫氧还原酶及硒蛋白等。
另外,细胞角蛋白17、细胞角蛋白10及细胞角蛋白7在Tca8113和K B 细胞中表达明显增高。
结论 氧化应激损伤可能通过某种信号通路引起细胞角蛋白发生变化,从而导致口腔鳞状细胞癌的发生。
氧化应激损伤可能与口腔鳞状细胞癌的发生密切相关。
【关键词】 口腔鳞状细胞癌; c DNA 微阵列; 氧化应激损伤【中图号】 R73918 【文献标识码】 A 【文章编号】 10062673X (2008)0620309203D i fferen ti a l gene expressi on rel a ted to ox i da ti ve stress i n ora l cancer and ora l precancerous lesi on cells TAN GX iao 2fei,ZHAN G X in 2yan,ZHAN G M in,SUN Zheng 1B eijing Institute of D ental Research,Capital M edical U niversity School of S to m atology,B eijing 100050,China【Abstract 】 O bjecti ve To identify differentially exp ressed genes related t o oxidative stress in oral squa mous cell carcinoma and oral p recancer ous lesi on cells and investigate the mechanis m and relati onshi p bet w een oxidative da mage and oral cancer devel opment 1M ethods c DNA m icr oarray analysis was used t o exa m ine the differences in gene exp ressi on bet w een oral carcinoma cell lines Tca8113,K B and oral p recancer ous lesi on cell line DOK 1Results T wenty 2eight differentially exp ressed genes related t o oxidative stress were detected in oral squa mous cell carcinoma and oral p recancer ous lesi on cells 1Among the m,9genes were separately up 2regulated fr om t w o f olds t o six f olds,including PRDX,S OD,GSS,GST,TXNRD,SEPX1,etc 1H igh exp ressi on of cyt okeratin 10,17and 7were als o observed in the cells of oral squa mous cell carcinomas 1Conclusi on Oxidative da mage may be related t o the carcinogenesis of oral cancer,and oxidative stress da mage may activate s ome signal path way related t o cyt okeratinizati on which leads t o carcinogenesis 1【Key words 】 O ral squamous cell carcinoma; c DNA m icr oarray; Oxidative stress da mage 由于口腔癌发病机理不甚清楚,至今尚无理想的治疗方法。
口腔癌癌前病变症状
（1）口腔颜色改变：如果变成白色、褐色或黑色，意味着黏膜表皮细胞发生了变化。
尤其是口腔黏膜变粗糙、变厚或呈硬结，出现口腔黏膜白斑、红斑，很可能已发生癌变。
（2）溃疡不愈：口腔溃疡的病程一般不超过两周，如果烧灼感、疼痛等症状超过两周仍不见好，需警惕口腔癌的可能。
因为，口腔癌常表现为溃疡的形式，四周边缘隆起，中央凹凸不平，并有坏死组织覆盖，疼痛明显。
（3）疼痛明显：早期一般无痛或仅有局部异常摩擦感，溃破后疼痛明显，随着肿瘤进一步侵犯神经，可引发耳部和咽喉痛。
（4）淋巴结肿大：口腔癌多向附近的颈部淋巴结转移，有时原发病灶很小，甚至症状还不明显，但颈部淋巴结却发现了转移的癌细胞。
因此，颈部淋巴结如突然肿大，需检查口腔。
（5）功能障碍：肿瘤可能侵犯张闭口肌肉和下颌关节，导致开闭口运动受限。
上述内容由总结发布。
口腔粘膜癌前病变及口腔鳞状上皮细胞癌p53、p16蛋白和PCNA的表达Ξ钟良军1ΞΞ,袁 芳2,张 薇3(新疆医科大学第一附属医院1口腔科,3病理科,新疆 乌鲁木齐 830054;2新疆乌鲁木齐市口腔医院,新疆 乌鲁木齐 830002)摘要:目的:探讨口腔粘膜癌前病变及口腔鳞状细胞癌发生与发展过程中,p53蛋白、p16蛋白和PCNA的表达及意义。
方法:应用免疫组织化学方法对20例口腔扁平苔藓、20例口腔白斑、20例口腔鳞状细胞癌分别进行检测。
结果:(1)口腔鳞状细胞癌组织中突变型p53蛋白阳性率为90.0%,明显高于口腔白斑(10.0%)和口腔扁平苔藓(0.0%)(P<0.005)。
(2)口腔鳞状上皮细胞癌组织中p16蛋白阳性率为35.0%,明显低于口腔白斑(70.0%)和口腔扁平苔藓(90.0%)(P<0.005)。
(3)PCNA的阳性率在口腔鳞状细胞癌组织中为90.0%,明显高于口腔白斑(10.0%)和口腔扁平苔藓(0.0%)(P<0.005)。
结论:p53基因突变使p53蛋白过度表达、p16蛋白表达缺失和PCNA的过度表达在口腔鳞状上皮细胞癌的发生与发展过程中起着十分重要的作用。
关键词:p53蛋白;p16蛋白;PCNA;口腔粘膜癌前病变;口腔鳞状上皮细胞癌中图分类号:R73918;Q344113 文献标识码:A 文章编号:100925551(2002)0120012203 p53基因是一种肿瘤抑制基因,其产物p53蛋白对肿瘤的发生起抑制作用,但p53基因突变后的产物——突变型p53蛋白则丧失抑癌功能,反而具有促进恶性转化的活性1。
增殖细胞核抗原(p ro lif2 erating cell nuclear an tigen,PCNA)是DNA聚合酶的辅酶,它的合成和表达与DNA复制和细胞分裂增殖直接相关2。
p16基因是近年发现的一种新型抑癌基因,定位于9p21,编码由148个氨基酸组成,分子量为16kd的蛋白质,其对细胞的生长起负性调控作用3。
研究发现,约75%的癌细胞株有p16基因的缺失和突变,而p53仅有50%的缺失和突变率,其编码产物p16蛋白与p53不同,它是直接作用于细胞周期的抑癌基因,将细胞周期控制和癌基因两个曾经独立的研究领域连接在一起,有可能成为癌症基因治疗中新的目的基因1,4。
我们应用免疫组织化学技术对口腔扁平苔藓(o ral lichen p lanu s, OL P)、口腔白斑(o ral leukop lak ia,OL)和口腔鳞状细胞癌(o ral squam ou s cell carcinom a,O SCC)组织中p53蛋白、p16蛋白和PCNA的表达进行检测,探讨这些因素与OL P、OL和O SCC发生与发展之间的关系。
1 材料和方法1.1 标本 收集新疆医科大学第一附属医院口腔科1996～2000年手术切除及活检后的石蜡包埋病理诊断明确的存档标本,共60例,其中OL P20例,OL20例,O SCC20例,所有患者术前均未接受放疗和化疗。
1.2 试剂一抗为鼠抗人p53蛋白单克隆抗体(DO27),兔抗人p16蛋白多克隆抗体(N220),由美国San ta C rue公司出品,鼠抗人PCNA单克隆抗体(PC210);二抗为生物素标记的羊抗鼠抗体和羊抗兔抗体;三抗为链霉素标记的SP复合物,二抗和三抗均由美国DA KO公司出品。
1.3 方法 5Λm厚的连续切片,常规脱蜡水化,微波炉枸橼酸盐缓冲液抗原修复,用免疫组化L SAB 法,鼠抗人p53蛋白单克隆抗体(DO27),1∶50稀释;兔抗人p16蛋白多克隆抗体(N220),1∶40稀释;鼠抗人PCNA单克隆抗体(PC210),1∶80稀释。
A EC显色,苏木素复染,甘油明胶封片。
以PB S 代替一抗做阴性对照,并设立正常阳性对照。
阳性结果判断:阳性细胞数≥10%为阳性,无阳性细胞或阳性细胞<10%为阴性。
1.4 资料统计 采用ς2检验。
2 结果2.1 p53蛋白和PCNA表达的免疫形态特征 p53蛋白和PCNA阳性表达定位于细胞核内,呈棕红色颗粒,局灶或弥散分布,胞浆为阴性。
阳性细胞的着色轻重不同,有的颗粒粗大,颜色深,有的着色浅(图1)。
2.2 p16蛋白阳性细胞绝大多数表现为胞浆内弥21新疆医科大学学报 JOU RNAL O F X I N J I AN G M ED I CAL UN I V ER S IT Y 2002M ar.,25(1)ΞΞΞ作者简介:钟良军(1964-),女,广东五华县人,副主任医师,博士,研究方向:牙周病、粘膜病的病因及防治。
基金项目:新疆维吾尔自治区卫生厅青年医学科学研究基金(新卫科青字98003号)漫性棕红色颗粒,少数表现为胞核着色,呈散在分布(图2)。
2.3 口腔上皮不同病变组织中p53蛋白、p16蛋白及PCNA的表达 见表1。
O SCC组织中p53蛋白表达及PCNA表达的阳性率明显高于OL及OL P, p16蛋白表达的阳性率明显低于OL和OL P,三者之间有显著性差异(P<0.005),但OL与OL P之间的差异无显著性(P>0.05)。
图1 p53蛋白免疫染色阳性定位在细胞核, 呈棕红色颗粒状,L SAB×400 图2 p16蛋白阳性细胞胞浆内弥漫性棕 红色颗粒,L SAB×400表1 口腔上皮不同病变组织中p53蛋白、p16蛋白与PCNA的表达病变类型病例数p53蛋白阳性数阳性率(%)p16蛋白阳性数阳性率(%)PCNA阳性数阳性率(%)口腔扁平苔藓2000.01890.000.0口腔白斑20210.01470.0210.0口腔鳞状细胞癌201890.0735.01890.0 注:O SCC∶OL∶OL P,p53蛋白和PCNAς2均为43.80,p16蛋白ς2=13.63,P<0.005;O SCC∶OL,p53蛋白和PCNAς2均为25.60,P<0.005;p16蛋白ς2=4.91,P<0.05,O SCC∶OL P,p53蛋白和PCNAς2均为32.73,p16蛋白ς2=12.91,P<0.005;OL∶OL P,p53蛋白和PCNAς2均为2.11,p16蛋白ς2=2.50,P<0.053 讨论p53基因定位于人17号染色体短臂1区3带(17p13.1)5。
p53基因有野生型和突变型两种形式,因野生型p53蛋白半衰期极短仅5～20m in,故实验中查见的p53蛋白为半衰期长的突变型p53蛋白。
在人类许多肿瘤存在p53抑癌基因的突变和过度表达6。
本研究结果显示:O SCC组织中p53蛋白表达的阳性率为90.0%,OL组织中p53蛋白表达的阳性率为10.0%,与M atsuda等7的报道基本一致。
值得注意的是:尽管p53蛋白的阳性表达在OL与OL P中的差异无显著性,但是OL中p53蛋白的阳性表达,可能提示OL存在向恶性转化发展为恶性病变的危险,这与OL癌变的生物学特征相一致。
因此,p53蛋白过度表达可能是O SCC发生的早期事件,并且在其整个发生发展过程中起十分重要的作用。
真核细胞的分裂必须经过两个关键环节:G1→S期和G2→M期。
依赖细胞周期蛋白的激酶(cy2clin2dep enden t k inase,CD K)是细胞周期调节中心,迄今已发现有4种CD K(CD K225)与G1→S期的调节有关,CD K4和D型周期蛋白形成的复合物能促进G1→S期的转变,从而促进细胞的增生,并可能是肿瘤发生的主要因素3。
p16蛋白能与CD K4结合,抑制CD K4 周期蛋白D复合物的催化活性,从而抑制细胞增生和恶性转化8。
有学者将野生型p16基因导入p16基因缺失的肿瘤细胞系中,能明显抑制肿瘤细胞的生长9,因此人们普遍认为p16基因是一个重要的多重肿瘤抑制基因。
本研究结果显示:在OL P、OL和O SCC组织中均有p16蛋白表达,但O SCC组织中的p16蛋白表达的阳性率为35.0%,明显低于OL组织的70.0%和OL P组织的90.0%(P<0.005)。
提示:O SCC组织中存在明显的p16蛋白表达缺失,它的减少引起了细胞调控失衡,使细胞生长抑制作用减弱,发生癌变,从蛋白质水平证明了p16基因失活在O SCC发生发展过程中起的重要作用。
p16蛋白表达的阳性率在OL组织中低于OL P组织中,尽管没有达到统计学差异,但仍可提示在OL组织中可能存在部分p16蛋白表达缺失,这与OL癌变的生物学特征相一致。
由于采用的是p16多克隆抗体,其特异性和敏感性如何,需31新疆医科大学学报 JOU RNAL O F X I N J I AN G M ED I CAL UN I V ER S IT Y 2002M ar.,25(1)结合分子水平的检测加以证实。
PCNA是DNA多聚酶的辅助蛋白,是细胞DNA合成必不可少的因子,含有增殖细胞的组织,可检出PCNA的阳性表达,而处于静止状态的细胞PCNA则为阴性,因此PCNA的检测可间接反映局部细胞的增生状态2。
PCNA量的变化反映了细胞的增殖状态,许多研究证明,PCNA的表达能反映肿瘤的恶性程度10。
本研究结果显示:从OL P→OL →O SCC,PCNA的阳性表达逐渐递增,三者之间存在显著性差异(P<0.005),表明细胞增殖活性是逐渐增高的,这与口腔上皮病理发展过程及临床观察是一致的。
提示:PCNA的检测有助于认识癌前病变的本质并指导临床治疗,对口腔肿瘤的诊断及预后的评价有重要参考价值。
参考文献:1 M arx J.N ew tumo r supp resso r m ay rival p53J.Science, 1994,264:3442355.2 W akui S,Furusata M,Itoh T,et al.T umo r angi ogenesis in p ro static carcinom a w ith and w ithout bone m arrow m etasta2 sis:a mo rphom etric study[J.J Patho l,1992,168:2572262.3 Scrrano M,H annon GJ,Bench D.A new regulato ry mo tif in cell cycle contro l causing specific inh ibiti on of cyclin D cdk4[J.N ature,1993,366:7042707.4 N obo ri T,M lure K,W u DJ,et al.D eleti on of the cyclin2de2 pendent k inase24inh ibito r gene in m ulti p le hum an cancers[J.N ature,1994,368:7532756.5 M iller C,M ohandas T,W o lf D,et al.H um an p53localized to sho rt arm of ch rom som e17J.N ature,1986,319:7832784. 6 Ho listein M,Sidranky D,V ogelstein B,et al.p53m utati ons in hum an cancers[J.Science,1991,253:49253.7 M atsuda H,Konish i N,H iasa Y,et al.A lterati ons of p16 CD KN,p53and ras genes in o ral squamous cell carcinom asand p rem alignant lesi ons[J.J O ral Patho l M ed,1996,25:2322238.8 Kam b A,Gruis NA,Feldhaus W J,et al.A cell cycle regula2 to r po tentially invo lved in genesis of m any tumo r types[J.Science,1994,264:4362440.9 M arx J.A challenge to p16gene as a m aj o r tumo r supp resso r [J.Science,1994,264:184621848.10 周柄荣,张永福.口腔鳞癌增殖细胞核抗原检测的意义[J.中华口腔医学杂志,1996,31(6):325.[收稿日期:2001203219Study on the expression of p53、p16prote i n and PCNA i nora l precancerous lesion and ora l squam ous cell carc i nomaZHONG L i ang-jun,Y UAN Fang,ZHANGW e i(D ep a rt m en t of S to m a tology,F irst A f f ilia ted H osp ita l,X inj iang M ed ica l U n iversity,U rum qi830000,Ch ina)Abstract:Objective:To investigate the relati on sh i p of exp ressi on betw een p53、p16p ro tein and PCNA and their sign ificance du ring the developm en t and p rogressi on of o ral p recancerou s lesi on,and squam ou s cell carcinom a.M ethods:Exp ressi on of p53、p16p ro tein and PCNA w ere detected in o ral lichen p lanu s(OL P) 20cases,o ral leukop lak ia(OL)20cases and o ral squam ou s cell carcinom a(O SCC)20cases by i m m uno2 h istochem ical techn iques.Results:(1)T he po sitive rate of p53p ro tein w as h igher in O SCC(90.0%)than in OL(10.0%)and OL P(0.0%)(P<0.005),(2)T he po sitve rate of p16p ro tein w as low er in O SCC (35.0%)than in OL(70.0%)and OL P(90.0%)(P<0.005).(3)T he po sitive rate of PCNA w as h igh2 er in O SCC(90.0%)than in OL(10.0%)and OL P(0.0%)(P<0.005).Conclusion:p53gene m u ta2 ti on resu lting in over2exp resi on of p53p ro tein,the low2exp ressi on of p16p ro tein and over2exp ressi on of PC M A m ay p lay i m po rtan t ro les in o ral squam ou s cell carcinom a developm en t and p rogressi on.Key words:p53p ro tein;p16p ro tein;PCNA;o ral p recancerou s lesi on;o ral squam ou s cell carcinom a 41新疆医科大学学报 JOU RNAL O F X I N J I AN G M ED I CAL UN I V ER S IT Y 2002M ar.,25(1)。
