红外光度法测量

红外分光光度法检验标准操作规程目的：建立红外分光光度法标准操作规程，以确保检验结果的正确性与准确性。

范围：本规程适用于红外分光光度法。

职责：检测中心、质量管理部对本规程实施负责。

内容：1.简述化合物受红外辐射照射后，使分子的振动和转动运动由较低能级向较高能级跃迁，从而导致对特定频率红外辐射的选择性吸收，形成特征性很强的红外吸收光谱，红外光谱又称振-转光谱。

红外光谱是鉴别物质和分析物质化学结构的有效手段，已被广泛应用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部的相互作用。

习惯上，往往把红外区分为3个区域，即近红外区（12800～4000cm，0.78～2.5m）。

其中中红外区是药物分析中最常用的区域。

红外吸收与物质浓度的关系在一定范围内服从于朗伯-比尔定律，因而它也是红外分光光度法定量的基础。

红外分光光度计分为色散型和傅里叶变换型两种。

前者主要由光源、单色器（通常为光栅）、样品室、检测器、记录仪、控制和数据处理系统组成。

以光栅为色散元件的红外分光光度计，以波数为线性刻度，以棱镜为色散元件的仪器，以波长为线性刻度。

波数与波长的换算关系如下：波数（cm-1 ）= 104 /波长μm傅里叶变换型红外光谱仪（简称FT-IR）则由光学台（包括光源、干涉仪、样品室和检测器）、记录装置和处理系统组成，由干涉图变为红外光谱需经快速傅里叶变换。

该型仪器现已成为最常用的仪器。

2 红外分光光度计的检定所用仪器应按现行国家质量与核查技术监督局“色散型红外分光光度计检定规程”、“傅里叶变换红外光谱仪检定规程”和《中国药典》附录规定，并参考仪器说明书，对仪器定期进行校正检定。

2.1 波数准确度2.1.1波数准确度的允差范围傅里叶变换红外光谱仪在3000cm-1附近的波数误差应不大于±5cm-1，在1000cm-1附近的波数误差应不大于±1cm-1。

2.1.2波数准确度检定方法2.1.2.1以聚苯乙烯膜校正按仪器使用说明书要求设置参数，以常用的扫描速度记录厚度为50m的聚苯乙烯膜红外光谱图。

红外分光光度法1 简述化合物受红外辐射照射后，使分子的振动和转动运动由较低能级向较高能级跃迁，从而导致对特定频率红外辐射的选择性吸收，形成特征性很强的红外吸收光谱，红外光谱又称振-转光谱。

红外光谱是鉴别物质和分析物质化学结构的有效手段，已被广泛应用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部的相互作用。

习惯上，往往把红外区分为3个区域，即近红外区（12800～4000cm，0.78～2.5μm）。

其中中红外区是药物分析中最常用的区域。

红外吸收与物质浓度的关系在一定范围内服从于朗伯-比尔定律，因而它也是红外分光光度法定量的基础。

红外分光光度计分为色散型和傅里叶变换型两种。

前者主要由光源、单色器（通常为光栅）、样品室、检测器、记录仪、控制和数据处理系统组成。

以光栅为色散元件的红外分光光度计，以波数为线性刻度，以棱镜为色散元件的仪器，以波长为线性刻度。

波数与波长的换算关系如下：波数（cm-1）= 104波长(μm)傅里叶变换型红外光谱仪（简称FT-IR）则由光学台（包括光源、干涉仪、样品室和检测器）、记录装置和处理系统组成，由干涉图变为红外光谱需经快速傅里叶变换。

该型仪器现已成为最常用的仪器。

2 红外分光光度计的检定所用仪器应按现行国家质量与核查技术监督局“色散型红外分光光度计检定规程”、“傅里叶变换红外光谱仪检定规程”和《中国药典》附录规定，并参考仪器说明书，对仪器定期进行校正检定。

2.1 波数准确度2.1.1波数准确度的允差范围傅里叶变换红外光谱仪在3000cm-1附近的波数误差应不大于±5cm-1，在1000cm-1附近的波数误差应不大于±1cm-1。

2.1.2波数准确度检定方法2.1.2.1以聚苯乙烯膜校正按仪器使用说明书要求设置参数，以常用的扫描速度记录厚度为50μm的聚苯乙烯膜红外光谱图。

测量有关谱带的位置，其吸收光谱图应符合《药品红外光谱集》所附聚苯乙烯图谱的要求，并与参考波数（表1）比较，计算波数准确度。

红外分光光度法测定操作规程目的：为了规范红外分光光度法测定操作，保证检验结果的准确性，制定本规程。

范围：适用于物质的定性鉴别、物相分析和定量测定，并用于研究分子间和分子内部结构的相互作用。

依据：《中国药典》2020年版四部40页0402“红外分光光度法”《中国药典》2020年版四部375页4002“包装材料红外光谱测定法”《包装材料红外光谱测定法》YBB00262004-2015《中国药典分析检测技术指南》《药品红外图谱集》责任：检验员对本规程的实施负责内容：1. 简述：红外分光光度法是在4000～400cm-1波数范围内测定物质的吸收光谱，用于化合物的鉴别、检查或含量测定的方法。

除部分光学异构体及长链烷烃同系物外，几乎没有两个化合物具有相同的红外光谱，据此可以对化合物进行定性和结构分析；化合物对红外辐射的吸收程度与其浓度的关系符合朗伯-比尔定律，是红外分光光度法定量分析的依据。

2.仪器及其校正：可使用傅里叶变换红外光谱仪或色散型红外分光光度计。

用聚苯乙烯薄膜（厚度约为0.04mm)校正仪器,绘制其光谱图,用 3027cm—1,2851 cm—1，1601 cm—1，1028 cm—1，907 cm—11处的吸收峰对仪器的波数进行校正。

傅里叶变换红外光谱仪在 3000 cm—11附近的波数误差应不大于土5 cm—1，在1000cm—1附近的波数误差应不大于±lcm—1。

用聚苯乙烯薄膜校正时，仪器的分辨率要求在 3110〜 2850 cm—1范围内应能清晰地分辨出7个峰，峰2851 cm—1与谷 2870cm—1之间的分辨深度不小于18% 透光率，峰 1583cm—1与谷1589cm—1之间的分辨深度不小于12%透光率。

仪器的标称分辨率，除另有规定外，应不低于2cm—1。

3.供试品的制备及测定：通常采用压片法、糊法、膜法、溶液法和气体吸收法等进行测定。

对于吸收特别强烈或不透明表面上的覆盖物等供试品，可采用如衰减全反射、漫反射和发射等红外光谱方法。

・环境科技・红外分光光度法测定水中石油类时应注意的几个关键技术问题Ξ鸟成祥,窦筱艳(青海省环境监测中心站,青海　西宁　810007) 摘　要:红外分光光度法测定水中石油类时,样品的采集、测试条件的选择、试剂的选用等对测定结果的准确性有很大的影响,在实际工作中应把握几个关键技术环节,保证监测结果的准确可靠。

关键词:红外分光光度法;石油类;技术问题中图分类号:X830.2 文献标识码:B 文章编号:100722454(2008)0120039203 水环境中石油类主要来自工业废水和生活污水的污染。

工业废水中石油类(各种烃类的混合物)污染物主要来自原油的开采、加工、运输以及各种炼制油的使用等行业。

石油类碳氢化合物漂浮于水体表面,将影响空气与水体界面氧的交换;分散于水中以及吸附于悬浮微粒上或以乳化状态存在于水中的油,它们被微生物氧化分解,将消耗水中的溶解氧,使水质恶化。

石油类中所含的芳烃类虽然烷烃类少,但其毒性要大的多。

国标分析方法中规定对石油类的分析方法视其样品浓度的不同,有重量法、红外分光光度法、非分散红外分光光度法,红外分光光度法最为常用。

1　红外分光光度法方法原理红外分光光度法是指在规定的条件下,经四氯化碳萃取而不被硅酸镁吸附,在波数为2930cm-1、2960cm-1和3030cm-1全部或部分谱带处有特征吸附的物质。

该方法不受油品种的影响,能比较准确的反映水中石油类的污染程度。

用四氯化碳萃取水中的油类物质,测定总萃取物,然后将萃取液用硅酸镁吸附,去除动、植物油等极性物质后,测定石油类。

总萃取物和石油类的含量均由波数分别为2930cm-1(CH2基团中C—H键的伸缩振动)、2960cm-1(CH3基团中C—H键的伸缩振动)和3030cm-1(芳香环中C—H 键的伸缩振动)谱带处的吸光度A2930、A2960和A3030进行计算。

动、植物油的含量为总萃取物与石油类含量之差。

2　方法的适用范围本方法适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中石油类和动、植物油的测定。

一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。

二、范围：本操作规程适用于红外分光光度法的检验操作。

三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。

四、内容：1、原理：红外分光光度法是在4000〜400cm-1波数范围内测定物质的吸收光谱，用于化合物的鉴别、检查或含量测定的方法。

除部分光学异构体及长链烷烃同系物外，几乎没有两个化合物具有相同的红外光谱，据此可以对化合物进行定性和结构分析；化合物对红外辐射的吸收程度与其浓度的关系符合朗伯-比尔定律，是红外分光光度法定量分析的依据。

2、仪器及其校正：2.1可使用傅里叶变换红外光谱仪或色散型红外分光光度计。

用聚苯乙烯薄膜(厚度约为0.04mm)校正仪器，绘制其光谱图，用3027cm-1、2851cm-1、1601cm-1、1028cm-1、907cm-1处的吸收峰对仪器的波数进行校正。

傅里叶变换红外光谱仪在3000cm-1附近的波数误差应不大于±5cm-1以内，在1000cm-1附近的波数误差应不大于±1cm-1。

2.2用聚苯乙烯薄膜校正时，仪器的分辨率要求在3110～2850cm-1范围内应能清晰地分辨出7个峰。

峰2851cm-1与谷2870cm-1之间的分辨深度不小于18%透光率，峰1583cm-1与谷1589cm-1之间的分辨深度不小于12%透光率。

仪器的标称分辨率，除另有规定外，应不低于2cm-1。

3、供试品的制备及测定：通常采用压片法、糊法、膜法、溶液法和气体吸收法等进行测定。

对于吸收特别强烈或不透明表面上的覆盖物等供试品，可采用如衰减全反射、漫反射和发射等红外光谱方法。

对于极微量或需微区分析的供试品，可采用显微红外光谱方法测定。

3.1原料药鉴别：3.1.1除另有规定外，应按照国家药典委员会编订的《药品红外光谱集》各卷收载的各光谱图所规定的方法制备样品。

陕西香菊药业集团有限公司GMP管理文件1.目的：本标准规定了红外分光光度法的测定方法和操作要求。

2.范围：本公司检品的红外分光光度法的测定。

3.责任人：QC检验员、QC主任。

4. 引用标准：《中华人民共和国药典》2010版二部附录ⅣC5.内容:5．1 仪器：红外分光光度计、电子分析天平5．2 简述:物质分子吸收波数位于4000~400cm-1范围的红外光而产生的吸收光谱称为红外吸收光谱。

基本原理是由分子的振动转动能级引起的光谱，振动过程中，若分子的偶极矩发生变化则相应的振动称为红外活性振动，红外活性振动产生吸收峰，没有偶极矩变化振动称为红外非活性振动，红外非活性振动不产生吸收峰，振动过程中，若分子的偶极矩变化越大，产生的红外吸收越强。

C=O键伸缩振动时键的偶极矩变化较大，因此在红外光谱中产生特征的强吸收峰，而C=C C C键伸缩振动过程中键的偶极矩变化较小，因此红外吸收峰较弱甚至不出现。

5.3仪器结构光源吸收池单色器检测器收据记录和处理5.3.1 光源：理想的红外光源应是能发射高强度、连续红外辐射的物体。

常用的有能斯特灯和硅碳棒等。

5.3.2样品室用于放置气、液、固态的待测样品，样品室应对透过的红外光无吸收，固体样品多以溴化钾压片。

5.3.3单色器作用是将入射的复合红外光色散为单色光再逐一由出射狭缝射出。

色散元件目前主要用光栅。

5.3.4 检测器用于将红外单色光信号转变为电信号。

目前常用的检测器有真空热电偶、高莱池等。

5.4．仪器使用5.4.1仪器校正：可使用傅立叶变换红外光谱仪或色散型红外分光光度计，用聚苯乙烯薄膜（厚度约为0.04mm）校正仪器，绘制其光谱图，用3027cm-1,2851cm-1,1601cm-1,1028cm-1,907cm-1处的吸收峰对仪器的波数进行校正。

傅立叶变换红外光谱仪在3000cm-1附近的波数误差应不大于±5cm-1,在1000cm-1附近的波数误差应不大于±1cm-1，仪器的分辨率要求在3110~2850-1范围内，应能清晰的分辩7个峰，峰2851cm-1与谷2870-1之间的分辨深度不小于18%透光率，峰1583cm-1与谷1589cm-1之间的分辨深度不小于12%透光率。

一、目的：制订详尽的工作程序，规范检验操作，保证检验数据的准确性。

二、范围：本操作规程适用于参考美国药典标准检验品种红外分光光度法的测定。

三、职责：1、检验员：严格按操作规程操作，认真、及时、准确地填写检验记录；2、化验室负责人：监督检查检验员执行本操作规程。

四、内容：1、分光光度主要用以鉴别大多数一般化学物质。

以下的步骤适用于能吸收红外及紫外射线的物质（参见分光光度法和光散射<851>）2、一个物质的红外吸收光谱，在与从对应的USP标准品处获得的光谱图进行比较后，或许提供了从任何单一检验中所能获得的关于该物质的鉴别的最具决定性的证据。

而另一方面，紫外吸收图谱则并未展示出高度的特异性。

如大部分药典专论中所要求的，用于供试样品符合红外吸收和紫外吸收检验标准，鉴别几乎不会导致任何质疑。

3、总共有7种方法用以制备分析用的预干燥的样本和标准品。

3.1 197K：待测物质与溴化钾充分混合。

3.2 197M：待测物质细磨并与矿物油均匀混合。

3.3 197F：待测物质均匀悬置于适当的压片板之间（比如NaCl或者KBr）。

3.4 197S：特定浓度的溶液按专论规定的溶剂制备，除非专论指定不同的光程的洗收池，则该溶液在0.1mm的吸收池中检测。

3.5 197A：待测物质与内部反射元件紧密接触，做衰减全反射比（ATR）分析。

3.6 197E：将待测物质压成薄片做IR的显微分析。

3.7 197D：待测物质与不吸收红外的物质重复混合并转移到样品容器做漫反射分析。

4、当检测是定性的，且标准品的光谱图可用相似方法获得，那么ATR<197A>和<197E>分析方法可代替<197K>,<197M>,<197F>和<197S>。

5、除非另有规定，则应在2.6微米至15微米（3800cm-1至650cm-1）范围内记录被测样品的光谱和相应的USP标准品光谱。

水中石油类的测定—红外分光光度法1．把握红外分光光度法测定水中石油类的原理和办法。

2．娴熟把握萃取、过滤等预处理操作技能。

3．娴熟把握分光光度计的操作。

（二）试验原理用萃取样品中的总油，然后用举行总油中可能存在的动植物油类等极性物质的吸附去除后，测定石油类。

在2930cm-1(CH2基团中C-H键的伸缩振动）、2960cm-1(CH3基团中C-H键的伸缩振动）、3030cm-1（芬芳环中C-H键的伸缩振动）三个波数下测定吸光度，根据响应计算水中石油类浓度。

当样品体积为1000mL，萃取液体积为25mL，用法4cm比色皿时，检出限为0.01mg/L，测定下限为0.04mg/L；当样品体积为500mL，萃取体积为50mL，用法4cm比色皿时，检出限为0.04mg/L，测定下限为0.16mg/L。

（三）仪器①红外分光光度计能在3400-2400cm-1之间举行扫描，并配有lcm和4cm带盖石英比色皿。

②旋转振荡器振荡频数达300次／min。

③分液漏斗1000mL、2000mL，聚四氟乙烯旋塞。

④玻璃砂芯漏斗40mL、Gl型。

⑤锥形瓶100mL，具塞磨口。

⑥样品瓶500mL、1000mL，棕色磨口玻璃瓶。

⑦量筒1000mL、2000mL。

⑧其他试验室常用器皿和设备。

（四）试剂①或同等纯度实验用水。

②（HCl)ρ=1.19g/mL，优级纯。

③光谱纯。

④异辛烷光谱纯。

⑤苯光谱纯。

⑥在2800-3100cm-1之间扫描，不浮现锐锋，吸光度值不超过0.12(4cm比色皿、空气池作参比）。

⑦无水硫酸钠550℃下加热4h，冷却后装入磨口玻璃瓶中，置于干燥器中储藏。

⑧硅酸镁60-100目。

取硅酸镁于瓷蒸发皿中，置于马弗炉中550℃下加热4h，在炉内冷却至约200℃后，移入干燥器中冷却至室温，于磨口玻璃瓶内保存。

用法时，称取适量的硅酸镁于磨口玻璃瓶中，按照硅酸镁的质量，按6%(m/m）比例加入适量的蒸馏水，密塞并充分振荡数分钟，放置约12h后用法。

浅谈红外分光光度法测油校正系数的测定与检验本文介绍了用红外分光光度法测油的原理，校正系数的测定与检验。

标签：红外分光测油校正系数环境水中的石油类污染物含量是反映水质状况的重要指标。

水体如被石油污染，水的颜色、味道和溶解氧均有较大变化。

水体表面漂浮着油类物质，水中所含氧气无法与空气中的氧进行交换；油浮游在水体表面，或以乳化状态存在于水体中，或是吸附于悬浮微粒表面，都会被微生物氧化分解，溶解在水体中的大量的氧直接参与氧化过程，造成水质恶化。

矿物油是由烷烃、环烷烃及芳香烃组成的混合物。

目前业界广泛采用荧光分光光度法、紫外分光光度法、红外光度法、重量法等方法检测油质。

红外光度法是全国通用的唯一一种定性、定量油质检测方法。

红外分光光度法相比非分散红外光度法，由于充分考虑了烷烃和芳香烃的共同影响，如规定一种混合油品为标准油品，则待测样品中各烃类的组成变化不会过多扰动油的检测数据，当前已得到普遍应用。

国标GB/T 16488-1996中含油浓度的计算公式中，可知其计算出的浓度值是根据仪器校正系数来计算的。

仪器校正系数的准确性直接影响到国标GB/T 16488-1996标准方法的准确性。

而新版JJG950-2012《水中油分浓度分析仪检定规程》只是对仪器校准后的检定工作，未提及校正系数的任何概念，故本人参照《GB/T 16488-1996 水质石油类和动植物油的测定红外光度法》，用实例来介绍如何测定与检验校正系数。

3 总结将测定值与配制标准值进行比对，因为混合烃系列溶液测定值的回收率在90%～110%，则通过检验，测定的校正系数符合采用标准。

参考文献：[1]GB/T16488-1996，水质石油类和动植物油的测定红外光度法[S].[2]JJG950-2012，水中油分浓度分析仪检定规程[S].[3]IR Prestige 21傅立叶变换红外光谱仪使用说明书[Z].。