肾活检病理组织染色

肾组织masson染色实验步骤一、实验前准备1.准备工作台和必要的实验用具。

2.准备好嵌入的组织切片。

3.将切片浸泡在脱水、透明化、蜡包埋、切片、脱蜡等溶液中进行处理。

二、固定和脱水1.将组织切片置于4的多聚甲醛中，固定时间约为24小时。

2.取出固定后的组织切片，先放入70的乙醇中脱水，随后放入95的乙醇中进行脱水处理。

三、透明化1.将脱水后的组织切片放入甲醇中透明化。

2.从甲醇转移到二甲苯中进行透明化处理。

四、蜡包埋1.将透明化后的组织切片置于液态石蜡中，进行蜡包埋处理。

2.在包埋前，确保石蜡的温度适中。

五、切片1.将包埋后的组织切片切割成4-6微米的薄切片，准备进行染色。

2.使用切片机进行切割，注意切片的厚度要一致。

六、脱蜡1.将薄切片放入脱蜡热盒中进行脱蜡处理。

2.确保脱蜡的时间和温度控制得当，以保证切片中的蜡全部被脱除。

七、染色1.准备好Masson染色试剂盒，按照说明书中的配方将试剂配置好。

2.将脱蜡后的切片浸泡在甲醇中5分钟，以去除残留的蜡质。

3.将切片放入伊红染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。

4.将切片放入酸性橙G染液中浸泡5分钟，随后用蒸馏水洗净。

5.将切片放入甲苯中进行脱水处理，然后覆盖玻片，施加封片剂，完成Masson染色。

八、镜检1.将染好色的切片放置在显微镜下进行观察。

2.检查切片中的细胞核、细胞质、胶原纤维等成分的染色情况。

九、结果分析1.根据观察结果，分析肾组织中的胶原纤维、细胞核、细胞质的染色情况。

2.对比正常组织和异常组织的染色情况，进行结果分析和总结。

十、实验总结1.总结本次实验的操作步骤和所得结果。

2.对实验中可能存在的问题和改进方法进行总结和反思。

以上就是对肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，希望可以帮助到需要进行此项实验的科研工作者。

对于肾组织Masson染色实验步骤的详细介绍，实验中的每一步都至关重要，它们共同构成了一项完整的实验流程。

接下来，我们将对每一步进行更详细的讲解，以便读者更好地理解和掌握实验的操作技巧和要点。

微波在肾活检组织染色中的应用
肾活检组织病理(光镜)检查在肾活检病理诊断中具有重要价值，通过特殊染色可以显现标本中特殊的物质如基底膜、免疫复合物等，然而，常规的特殊染色制作比较费时，尤其是过碘酸六胺银（Periodic Acid-Silver Methenamine，PASM）染色，控制不好往往失败。

我们将微波辐射技术应用于肾活检组织的过碘酸Schiff反应（Periodic Acid-Schiff Reaction，PAS）及PASM染色中，证明具有快速省时，染色效果好，不易脱片等优点，现介绍如下：
1 材料和方法
1．1 材料肾组织(肾穿刺获得)，58℃纯净石蜡；松下NN-5208型微波炉（输出功率600W）。

1．2 试剂
1．2．1 Schiff液：同常规Schiff液配制。

1．2．2 环六亚甲基四胺-硝酸银液(贮备液)：
5%硝酸银20.0ml
3%环六亚甲基四胺液400.0ml
环六亚甲基四胺-硝酸银液(工作液)：
环六亚甲基四胺-硝酸银液(贮备液)45.0ml，5%硼砂液5.0ml 1．2．3 混合红染液：
变色酸2R（chicmolocps 2R）0.6g
亮绿SF 0.3g
蒸馏水100ml
磷钨酸0.8g
冰醋酸 1.0ml
1%酸性品红少许(需染片后确定)
1．3 方法
1．3．1 制片肾穿刺组织经升汞-苦味酸混合固定液固定后，常规酒精脱水、氯仿透明、石蜡浸透、包埋，切片厚2μm。

尊敬的客户：在本文中，我将为您撰写一篇关于“masson 染色肾组织的描述”的文章。

我将以从简到繁、由浅入深的方式来探讨这一主题，以便您能更深入地理解。

1. masson 染色肾组织的描述让我们来了解一下什么是masson染色以及它在肾组织中的应用。

masson染色是一种组织染色方法，主要用于分辨胶原纤维和肌纤维，并且可用于观察肾小球间质的纤维化情况。

在肾脏疾病的诊断中，masson染色可以帮助医生准确评估患者的肾脏病变程度，对疾病的诊断和治疗具有重要的指导意义。

2. masson 染色肾组织的应用在肾脏病变的研究中，masson染色被广泛应用于观察肾小球间质的纤维化程度。

肾小球间质的纤维化是很多肾脏疾病的共同表现，包括慢性肾炎、糖尿病肾病等。

通过masson染色，可以清晰地观察到肾小球周围的胶原纤维沉积情况，以及肾小管间质的纤维化情况，从而评估肾脏病变的程度和类型。

3. masson 染色肾组织的意义根据masson染色结果，医生可以更准确地判断患者肾脏病变的类型和程度，为后续的治疗方案提供重要参考。

通过观察纤维化程度，可以及时采取有效的治疗措施，延缓疾病的进展，保护肾功能。

masson 染色在肾脏疾病的诊断和治疗中具有非常重要的意义。

4. 个人观点和理解在我看来，masson染色对于肾脏疾病的诊断和治疗具有重要的意义。

通过对肾组织进行染色观察，可以从纤维化的角度全面评估病变情况，为医生制定个性化的治疗方案提供重要依据。

masson染色的应用也为科学研究提供了重要的技术支持，有助于深入了解肾脏疾病的发病机制和进展规律。

总结回顾通过本文的介绍和解释，相信您已经对masson染色肾组织的描述有了更深入的了解。

这种染色方法在肾脏疾病的诊断和治疗中扮演着重要角色，帮助医生更准确地评估病变情况，制定有效的治疗方案。

也为科学研究提供重要的技术支持，推动肾脏疾病的深入研究和治疗进展。

希望本文能够帮助您更全面、深刻和灵活地理解masson染色肾组织的描述。

肾活检的病理方法和注意事项北京大学医学部病理学系 北京大学人民医院肾内科 邹万忠 董葆肾活检病理诊断有赖于多种方法的综合分析，不同的病理诊断结合临床有助于肾脏疾病的诊断。

肾脏活体组织检查基本属于组织病理学的范畴，但有其独特的特点。

一、免疫病理学、光学显微镜和透射电子显微镜检查并举很多肾脏疾病是由于变态反应引起的， 因此， 必须应用免疫病理学方法区分肾小球肾炎还是非免疫介导的肾病。

常用的免疫病理学方法有免疫荧光法和免疫组织化学法。

如一位肾病综合征患者的肾活检病理显示膜性肾病，肾组织中查到免疫复合物中的抗原为乙型肝炎病毒抗原，则可确诊为乙肝病毒相关性肾炎（图1）。

图1，乙肝病毒相关性肾炎，乙型肝炎病毒核心抗原沉积于肾小球基底膜和系膜区（免疫组化图2，HE染色，狼疮性肾炎，各种细胞清晰可见（HE×400）图3，PAS染色，系膜增生性肾小球肾炎，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈粉红色（PAS×400）2008.05.10肾脏泌尿专业讨论版gub70725数字签名者：gub70725DN：cn=gub70725, o=www.dxy.cn, ou, email=gub70725@yahoo., c=<无>日期：2008.05.10 18:56:22 +08'00'×200）光学显微镜检查是肾活检病理检查的基本方法，但要求切片要薄，应薄于3μ，染色方法应包括HE、PAS、PASM和Masson等多种染色，以便观察肾脏的细胞成份、基底膜的状态和特殊的蛋白沉积（图2－5）。

图4，PASM染色，膜性肾病，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈黑色，对基底膜的显示尤为精细（PAS×400）图5，Masson染色，膜性肾病，肾小球基底膜、肾小管基底膜和系膜间质呈兰绿色，上皮下可见嗜复红蛋白沉积（PAS×400） 透射电镜可以观察到细胞和组织的微细结构，而且可以显示免疫复合物沉积的精确定位（图6，7）。

肾活检光镜制片、切片、染色技术规范一、取材快速取材，取皮质（小红点，相对较粗）或皮质-髓质组织，一般大于10个肾小球。

二、制片1.固定：A. Bouin液固定4小时。

B.福尔马林液固定1-2小时。

2.随常规组织脱水，透明，浸蜡，包埋。

3.切片①恒温恒湿：温度20℃-22℃，相对湿度60°（温度计和湿度计控制）。

②连续切片，厚1微米。

③贴片：每张玻片保持2-3条组织。

④烤片温度60度，30分钟左右，PASM再90度烤40分钟以上。

注意事项：1.取材要快，避免挤压。

2.定期更换试剂。

3.包埋平整。

三、染色（一）HE 染色1.切片常规脱蜡至水。

2.苏木素染细胞核10分钟，水洗。

3.1%盐酸分化1秒，水洗，蓝化液促蓝。

4.0.5%伊红染细胞浆5分钟。

5.逐级酒精脱水，TO透明，中性树胶封片。

（苏木素2.5克+纯酒精10毫升+硫酸铝钾25克+蒸馏水330毫升+碘酸钠0.25克+甘油150毫升+冰醋酸5毫升）（二）PAS染色1. 切片常规脱蜡至水。

2.1%高碘酸氧化15分钟，水洗。

3. Schiff 氏液37℃10分钟（镜下控制），水洗。

4. 1%偏重亚硫酸钠分化1分钟，水洗。

5. 苏木素染核，盐酸分化，水洗。

6. 脱水，透明，封片。

（碱性品红1克+1N盐酸20毫升+偏重亚硫酸钠2克+蒸馏水200毫升+活性炭2克）（三）PASM-Masson染色1.切片常规脱蜡至水。

2.Bouin液微波2分钟，水洗。

3.1%高碘酸氧化20分钟，水洗，蒸馏水洗。

4.1%偏重亚硫酸钠1分钟，水洗，蒸馏水洗。

5.六胺银液10-20分钟（根据病变镜下观察确定时间）。

6.2%硫代硫酸钠2分钟，水洗（必要时氯化金分化2秒），吹干。

7.Masson复染。

8.快速脱水，透明，封片。

（预温六胺银储备液20毫升+蒸馏水10毫升+5%四硼酸钠5毫升）（四）Masson-Trichrome染色1.切片常规脱蜡至水。

2.Bouin液微波2分钟，水洗。

肾穿刺活检病理结果报告描述
肾穿刺活检是一种常见的临床检查方法，用于诊断肾脏疾病。

根据病理结果报告描述，通常会包括以下几个方面的内容：
1. 标本信息，报告会包括标本的采集日期、送检单位、病人姓
名等基本信息。

2. 标本镜检结果，这部分会详细描述镜下所见的情况，包括肾
小球、肾小管、间质等结构的病变情况，比如是否有炎症细胞浸润、坏死、纤维化等情况。

3. 免疫荧光结果，如果进行了免疫荧光染色，报告会描述各种
免疫球蛋白、补体和其他免疫反应物质在肾脏组织中的沉积情况，
这对于一些免疫性肾病的诊断非常重要。

4. 电镜结果，电镜检查可以更加详细地观察肾小球基底膜、足
细胞等超微结构的变化，报告会描述这些结构的情况，有助于诊断
一些特殊类型的肾小球疾病。

5. 最后诊断，报告最后会根据镜检、免疫荧光和电镜的结果，
给出对肾脏病变的最终诊断，比如肾小球肾炎的类型、病变的严重程度等。

总的来说，肾穿刺活检病理结果报告会从组织学、免疫学和超微结构学等多个方面全面描述肾脏病变的情况，有助于临床医生制定合理的治疗方案。

当然，具体的报告内容会根据具体的病理学检查方法和病变情况而有所不同。

*作者：座殿角*作品编号48877446331144215458创作日期：2020年12月20日实用文库汇编之一、常规染色技术（HE 染色）苏木素-伊红染色简称HE 染色，是最常用的染色方法，苏木素是一种碱性染料，可将细胞核和细胞内核糖体染成蓝紫色，伊红是一种酸性染料，能将细胞质染成红色或淡红色。

HE 染色可以显示肾小球的细胞增生、炎细胞浸润。

还能很好的显示肾小管上皮细胞的损伤和肾间质水肿情况。

（一）需要试剂①苏木素染液；② 1% 盐酸乙醇液；③氨水；④ 1% 伊红液。

（二）具体染色步骤1.切片常规脱蜡入水。

2.苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。

3.入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。

4.氨水返蓝数秒。

5.流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色。

6.1% 伊红染数秒，水洗。

7.梯度乙醇脱水，二甲苯透明，树胶封片。

染色结果：胞核呈蓝色，胞浆呈红色，红细胞呈橘红色，其他成分呈深浅不同红色。

（三）注意事项1.组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色，影响观察。

2.伊红染色的时间需严格控制。

过长胞浆染色红色过深。

3.染色后的组织切片要将组织四周的污染物痕迹擦掉。

二、特殊染色技术（一）过碘酸- 希夫氏染色（PAS 染色）PAS 染色可以显示肾小球内的细胞增生、浸润和系膜基质等，并能很好地显示基底膜，是显示糖原和糖蛋白的基本染色。

1.需要试剂① 1% 过碘酸；② schiff 氏液染；③苏木素染液；④氨水。

2.具体染色步骤（1）切片常规脱蜡入水。

（2）入1% 过碘酸氧化10 ～15 min，水洗。

（3）入schiff 氏液染10 ～30 min，水洗。

（4）苏木素染细胞核1 ～2 min，水洗。

（5）入1% 盐酸乙醇分化数秒，水洗。

（6）氨水返蓝数秒。

（7）流水冲洗，镜下观察细胞核成蓝色，基底膜染成粉红色。

（8）梯度乙醇脱水、二甲苯透明、树胶封片。

3.染色结果PAS 阳性物质（多糖和糖原）呈红色，核呈蓝色。

4.注意事项（1）组织切片的脱蜡步骤应彻底，否则组织无法着色。

第三章第10节肾活检组织标本的制作前言肾活检病理是诊断肾脏疾病的重要手段，许多疾病的命名主要源于肾活检组织学改变，如局灶节段性肾小球硬化和膜性肾病。

肾活检病理诊断的正确性与肾组织标本制作质量关系密切，质量不过关（如切片不够薄，染色不清晰）将直接造成诊断错误，因此，应重视肾活检标本处理（取材、固定、包埋、切片到染色）的各个环节，以保证病理诊断的正确性。

肾脏病理包括尸检和活检标本，对于肾脏疾病而言，主要是活检标本，本章主要介绍肾活检标本的处理。

目前常规肾活检标本来源有两类：一类为切割式活检，一类为穿刺抽吸式活检，前者所取组织较多，但对肾脏损伤较大，不便在临床推广，临床常采用穿刺抽吸式活检。

一、肾组织取材肾活检穿刺时病理技术员必须到场，以便对肾组织标本进行正确的处理，在技术员不能到场的情况下，必须按以下要求对标本处理者进行培训：①处理穿刺所获组织应轻柔，避免牵拉或用力钳夹组织；②分取组织时应在蜡板上进行，用锋利的刀片快速切割，避免用力挤压组织；③尽量用含固定液（光镜或电镜）和生理盐水的专用镊子把分割好的组织块移入固定瓶内；用镊子时避免钳夹组织过度而造成组织受挤压；④要求穿刺者尽量取两条组织。

穿刺所获第一条含皮质组织送光镜检查，第二条组织在肉眼观察下进行分割，尽量切取皮质区1mm组织送电镜检查，余下组织送免疫荧光检查。

如果穿刺仅获一条组织，所取组织有三种情况（图3-10-1）：整条均为皮质，皮髓组织和皮-髓-皮质组织，髓质区血供丰富，颜色略红，皮质区组织略白，分布的红色小点是肾小球，根据穿刺获取不同组织的情况，如图3-10-1所示进行分取。

也有人建议纵切后，一半送光镜检查，一半分割后分送免疫荧光和电镜检查，但存在组织太细，不易观察的缺点，临床较少使用。

⑤分送免疫荧光检查的组织用无菌的TRIS或PBS溶液浸湿的沙布轻轻包裹，置于培养皿中，避免直接置于冰块上，以免局部组织因冷冻收缩，造成结构破坏[1,2]。

肾脏病理染色你知多少？
来源：中洪博元熊技术
淀粉样变是特殊蛋白质在细胞外形成具β样折叠结构、不可溶的纤维丝沉积在特定脏器而引起器官功能损害的疾病，常累及多个器官，临床表现多样，起病隐袭，误诊率较高，预后较差。

肾脏是淀粉样变这种全身性疾病最常受累的器官之一，肾活检组织的病理学检查是诊断淀粉样变性最可靠的手段之一，阳性率可达85%以上，刚果红染色更成为诊断该病的金标准。

1.酸化甲醇刚果红染色法
（1）石蜡切片脱蜡入水；
（2）5%高猛酸钾与0.3%硫酸等比例混合滴片3 min，水洗；
（3）1%草酸漂白数秒，水洗；
（4）1%甲醇刚果红染色15 min；
（5）氢氧化钾酒精分化数秒，流水洗2 min×3次；
（6）苏木素浅染；
（7）脱水、透明、封固。

2.酸化 Bennhold's 刚果红染色法
（1~3）方法同酸化甲醇刚果红染色法；
（4）1%刚果红室温30 min，水洗；
（5）饱和碳酸锂15 s；
（6）80%乙醇分化，水洗15 min；
（7）苏木素复染；
（8）脱水、透明、封固。

3.酸化 Alkaland's 刚果红染色法
（1~3）方法同酸化甲醇刚果红染色法；
（4）苏木素 5min，分化，水洗；
（5）0.01%氢氧化钠 20 min；
（6）0.5%碱性刚果红（0.5 g 刚果红 0.2 g氯化钠 80%酒精100 ml使用前加1 ml 1%氢氧化钠）20 min；
（7）无水乙醇3缸每缸洗5次；
（8）脱水、透明、封固。