实验四

实验材料
CML细胞系，抗癌药物，96孔细胞培养板,100ul-1ml/20200ul移液器，1.5ml离心管，MTS, PMS,血细胞计数板，显 微镜，酶标仪等。
实验步骤
两个班分组进展，统计人数，共分13个组。
1.测定抗癌药物对慢性粒细胞白血病细胞系的IC50.
取经梯度药物浓度〔对照,0.078125，0.15625，0.3125，0.625，1.25， 2.5，5，10 uM〕处理72小时后的CML细胞系，每个浓度吸取100ul参加到 96孔细胞培养板中〔每个浓度设置3个复孔〕，同时设置3个空白对照〔培 养基〕，将MTS和PMS解冻后，按MTS:PMS体积比为20：1的比例混匀〔 先数一下有多少孔，再计算需要MTS和PMS的体积，配制时多配3孔〕，每 孔参加20ul，将细胞培养板置于细胞培养箱中培养4个小时后，取出细胞培 养板使用酶标仪测定490nM波长时的吸光度值，以实验对照〔不加药〕为 100%活力，在Excel电子表格中作图〔计算时各组吸光度值均先减去空白对 照的吸光度值再进展计算〕，绘制药物作用曲线，X轴为不同药物浓度，Y 轴为细胞的相对活力，并计算药物的IC50，评价药物的抗肿瘤活性。
酶标仪
实验内容
1.测定抗癌药物对慢性粒细胞白血病(CML)细胞系的IC50. 2.细胞倍比稀释测定细胞活力. 3.细胞计数.
IC50〔 inhibitory concentration 50% 〕：药物抑制细胞活力50%时的浓度。 单位：nM,uM
线粒体超活染色与观察
实验目的 实验原理 实验材料 实验步骤 实验报告
实验原理
细胞活力鉴定的方法： 染色排除法〔最常用〕
台盼蓝法：死细胞染成蓝色，活细胞不着色 苯胺黑法：死细胞染成黑色，活细胞不着色

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实验四 生药的水分测定和砂仁中挥发油的提取
二、实验内容
B. 挥发油测定 1. 称取砂仁30.00g，精密称定 2. 将砂仁至于烧瓶中加水300ml，沸石数颗，振摇混合后，
连接挥发油测定器与球形冷凝管取 3.自冷凝管上端加水使充满挥发油测定器的刻度部分，并溢
流入烧瓶时为止。置电热套中缓缓加热至沸，保持微沸 1.5h，至测定器中油量不再增加为止，停止加热。 4. 放置片刻，读取挥发油量，计算样品中挥发油的含量
水分(%)=(W1－W2)/ (W1－W)×100%
6
注意事项
• 电子天平依照正确步骤操作，贵重仪器，小心操 作，戴手套；
• 粉碎时不得用高速粉碎机，尽量避免水分损失。 • 干燥药品时，应两次称量差异不超过5mg。 • 平行测定3-5次，取均值以减小误差
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生药挥发油测定的意义
挥发油是生药中主要的有效成分之一，其 含量多少直接影响疗效；以挥发油为主要有效 成分的生药可通过测其挥发油含量进行评价品 质，从而达到控制生药质量的目的。
实验4-水分+挥发油
目的要求
• 掌握生药中水分测定的方法和挥发油的提取方法 • 了解水分测定和挥发油测定的意义
2
实验仪器、材料
• 实验仪器：扁形称量瓶，电子天平，干燥管，直 形冷凝管，减压干燥器，电热恒温干燥箱，电热 套，水分测定器，冷凝管，圆底烧瓶。挥发油测 定器，球形冷凝管，圆底烧瓶。
• 材料：葛根粉末（水分），砂仁（挥发油）
3
生药水分测定的意义
水分的测定，是为了保证生物不因所含水分 超过限度而发霉变质、虫蛀，某些有效成分水解。 水分测定的方法常用的有烘干法、甲苯法和减压 干燥法、GC。
供测定用的生药样品，一般先破碎成直径不超 过3mm的颗粒或碎片，直径和长度在3mm以下的 花类、种子类、果实类药材，可不破碎。

状态I
绝热膨胀
状态II
等容吸热
状态III
P1 , V 1 , T 0
P0 , V2 , T1
P2 , V 2 , T 0
图2（a） 实验过程状态分析
空气比热容比
热学实验
图2（b） 实验过程状态分析
状态I至状态II是绝热过程，由绝热过程方程得:
P V1 P0V2 1


(3)
空气比热容比
热学实验
6、每次测出一组压强值 利用公式（4） 计算空气比容热比 。重复6次计算 的平 均值。
p 0， p 1， 故只需等瓶内压强稳定即可记录）p 2，
空气比热容比
热学实验
【数据处理】
P1,P2的换算公式为：
p1 p0 p1 2000；
测量 次数 测量值（mV） 状态I

p2 p0 p2 2000
空气比热容比
热学实验
4.迅速打开放气活塞2，当贮气瓶的空气压强降至 环境大气压强时（这时放气声“嗤”刚消失），迅 速 P0 , T1 关闭活塞2，此时瓶内气体状态为II（ ）。 5.当贮气瓶内空气的温度从T1上升至室温T0，且压 强稳定后，此时瓶内气体状态为III(P2，T0)，记 ( P2 , T 2 ) 下 。（注：因实验过程中室温可能有变化，
（4）由于瓶内气体温度低于室温，瓶内气体慢 慢从外界吸热，直至达到室温为止，此时瓶内气体 压强也随之增大为 p 2,气体状态变为Ⅲ ( P ,V , T ）。
2 2 0
空气比热容比
热学实验
（5）、从状态II至状态III的过程可以看作是一个等容 吸热的过程。
由状态I→状态II →状态III的过程如图2(a)、(b)所示。

BUAA
扭角仪与百分表
材料力学实验 百分表
扭角仪
Hale Waihona Puke BUAA➢ 实验试件
中碳钢实心圆轴试件
材料力学实验
名义尺寸：
材料屈服极限： s 360MPa
实验时应根据屈服极限 确定实验最大载荷
Pmax (0.7 ~ 0.8)Ps
BUAA
材料力学实验
➢ 实验原理与方法 扭角仪测试原理
扭角仪是在小变形前提下，通过测量圆周上一点的切 线位移来得到试件两截面相对扭转角的实验装置。
BUAA
材料力学实验
实验四 材料切变模量G的测定
BUAA
材料力学实验
➢ 实验目的
用扭角仪测定中碳钢材料在比例极限内转角与扭矩的关系； 电测法测定中碳钢材料在比例极限内扭转切应力与切应变的关系 测定中碳钢材料的切变模量G；
➢ 实验设备与仪器
微机控制电子万能试验机 静态应变仪 扭角仪 百分表、游标卡尺
➢ 实验步骤
1、拟定加载方案 2、草拟实验所需各类数据表格 3、测量试件尺寸 4、试验机准备、试件安装和仪器调整 5、确定组桥方式、接线和设置应变仪参数 6、检查及试车 7、进行试验 8、整理各种仪器设备，结束试验
BUAA
材料力学实验
➢ 实验结果处理
1、在坐标纸上建立τ— 坐标系和T—坐标系，描出实验 点，并拟合成直线，得到应力—应变关系和T—关系。
δ
b
扭角仪测试原理
测量的示意图
b
BUAA
材料力学实验
等截面圆轴在比例极限内扭转时，若相距为L的两横截 面之间扭矩为常值，则两横截面间的扭转角为：
TL
GI p
b
TL TLb G
Ip Ip