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（一）H2O2
活性氧包括以自由基形式存在的超氧化物自由基O(－)/(*)2，羟自由基OH·，以及不以自由基形式存在的H2O2、脂质过氧化物ROOH等。活性氧的来源众多，如吸烟、多形核白细胞或单核细胞的激活，内毒素、TNFα的损伤作用很可能也是通过ROS来实现的［1］。ROS是许多病理生理过程中的重要发病介质，如ARDS、缺血再灌注损伤等。
过氧化氢(H2O2）对内皮细胞的毒性效应早为人们所重视，但是以往的研究多着重H2O2的急性毒性效应，而对其急性作用去除后内皮细胞的迟发性改变研究较少。我们以Chen等［2］报道的方法，经改良后培养了PMVEC，观察低浓度H2O2对PMVEC增殖代谢及调亡的影响。
1.过氧化氢处理K562细胞中JWA基因的表达及其与DNA损伤和凋亡的关系
0.01、0.1、1 mmol/L的 H2O2 K562细胞
用0.1 mmol/L H2O2处理不同时间(6 ～ 48 h)和不同浓度(0.5 ～ 1 000 μmol/L)的H2O2处理48 h分别诱导K562细胞凋亡,在低剂量H2O2(0.01 mmol/L)处理时,JWA和热休克蛋白的表达均显著增高;在细胞凋亡模型中,JWA、hsp70、 hsp27和p53的表达均显著增高
2低浓度H2O2对肺微血管内皮细胞的迟发效应——凋亡
H2O2DMEM溶液：0，5，10，20，50，100 μmol/L 肺微血管内皮细胞(PMVEC)
3 H2O2诱导PC12细胞凋亡的作用机制
用终浓度分别为0～400nmol／L H2O2处理PC12细胞8h，随H2O2浓度从25～400nmol／l。增加，PC12细胞存活率逐渐降低（P〈0．05）：
4 H2O2 预处理对PC12 细胞氧化应激损伤的适应性细胞保护作用
PC12 细胞经10μmol·L - 1 H2O2 预处理90 min 后,20～60μmol·L - 1H2O2 对PC12 细胞生长的抑制程度明显下降, H2O2 (20 、30μmol·L - 1) 对PC12 细胞凋亡的诱导作用明显受到抑制,BD2 NF 的表达强度增强
(二) LPS
LPS刺激可诱导巨噬细胞的NF2κB 活化、NO 分泌并最终导致细胞凋亡,而特异性PKC 抑制剂(Cal C) 和NF2κB 阻断剂(PDTC) 能在不同程度上抑制LPS 的生物活性作用。。位于G- 菌外膜中的脂多糖( lipopolysaccharide ,LPS) ,亦称内毒素,是其致病的主要物质基础。LPS通过持续刺激机体单核巨噬细胞系统,使之产生大量的细胞因子、活性氧、溶酶体酶、NO 等生物活性物质,引起细胞损伤和凋亡,最终导致失控性炎症反应
1 ①正常对照组,此组细胞不接受任何刺激; ②LPS(Sigma) 处理组,用1mgPL LPS 作用60 min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h 后测定培养液中NO 含量; ③Cal
C(Sigma) 阻断组(Cal C + LPS) ,以300nmolPL Cal C 预处理30 min 后,再用1mgPL LPS刺激60 min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h后测定培养液中NO 含量; ④ PDTC
(Sigma) 阻断组(PDTC +LPS) ,以200μmolPL PDTC 预处理30 min 后,再用1mgPL LPS 刺激60
min ,检测细胞NF2κB 的核内浓度,培养24 h 后测定培养液中NO 含量。
2 LPS 致大鼠肺泡Ⅱ型细胞凋亡及对Fas 抗原表达的影响
LPS 的浓度为1,10,100g/ mLLPS 刺激后, 肺泡Ⅱ 型细胞Fas mRNA、蛋白质表达均显著增加( P < 0. 01) , LPS可诱导肺泡Ⅱ型细胞凋亡, 并在一定范围内呈量-效关系, 表明LPS 对肺泡上皮的损伤效应, 除直接损伤作用外, 还可能通过诱导Fa s 抗原表达增加, 而致细胞凋亡的方式进行
3 TNF2α为中心的肝细胞凋亡与L PS 所致小鼠肝损伤的关系 小鼠称重后随机分成6 组,每组8 只:正常对照组为腹腔注射RP2MI 1640 培养液,0. 4 ml/ 只,以0 h 表示;3 h 、6 h 、12h 、24 h 、30 h 分别代表小鼠腹腔注射L PS(4 mg/ kg)后3 、6 、12 、24 、30 h ,
TNF-α是迄今为止发现的抗肿瘤作用最强的细胞因子，[1]是所有细胞因子中唯一具有直接杀伤肿瘤细胞的因子。[ TNF能特异性地直接杀伤肿瘤细胞，而对正常细胞无不良影响
(四) 肿瘤坏死因子-α(TNF-α)
是一种主要由单核-吞噬细胞产生的单核因子，不仅具有选择性地杀伤某些肿瘤细胞，而且有多种免疫调节作用。其检测方法主要包括生物学活性测定和免疫学检测方法1 通过TNF受体介导的对肿瘤细胞的直接杀伤作用；2抑制细胞生长和诱导凋亡 3、通过损伤肿瘤的血供系统而导致肿瘤坏死4、通过引起肿瘤局部的炎症反应和机体的免疫系统发挥抗肿瘤作用5、逆转肿瘤细胞的多药耐药，增加对化疗药物的敏感性
1. TNFα诱导KS62／VCR和K562细胞凋亡及逆转其耐药作用的实验研究
TNFα浓度>100U／ml，作用时间>48小时，2株细胞均可见典型凋亡现象，以K562／VCR细胞明显。(2)以TNFα 1000U／m1处理后，K562／VCR和K562细胞凋亡率分别为29．4％和10.7％。(3)K562／VCR经TNFα 1000U／ml处理72小时P-gp表达率从93．6％降至82．4％，bcl-2表达率从32．9％降至7．0％。(4)K562／VCR和K562细胞分别经TNFα 100U／ml和1000U／ml处理后，VCR、Ara-C和VP-16的药物敏感性增加(P<0．05)
2. TNFα诱导人大肠癌Lovo细胞凋亡的时间效应1×108U/L
3 TNF-α对白血病K562及K562/ADM细胞hTERT及mdr1表达的抑制作用5×106U /L
