超声波提取甘草黄酮及其抑菌活性研究[1]

甘草黄酮的分离鉴定、药效及其指纹图谱研究一、本文概述甘草，作为一种传统的中药材，已被广泛用于治疗多种疾病，其药效成分主要包括甘草酸和甘草黄酮等。

甘草黄酮作为甘草中的一种重要活性成分，具有抗炎、抗氧化、抗肿瘤等多种药理作用，因此对其深入研究具有重要的理论和实践意义。

本文旨在探讨甘草黄酮的分离鉴定方法，研究其药效作用机制，并建立其指纹图谱，为甘草黄酮的质量控制、药效评价和开发利用提供科学依据。

文章首先介绍了甘草黄酮的分离鉴定方法，包括溶剂提取、色谱分离和光谱鉴定等步骤，以及各步骤中需要注意的技术要点。

随后，通过药理实验和分子生物学手段，探讨了甘草黄酮的药效作用机制，包括抗炎、抗氧化、抗肿瘤等方面的研究。

在此基础上，建立了甘草黄酮的指纹图谱，通过对不同来源甘草黄酮指纹图谱的比较分析，为甘草黄酮的质量控制提供了依据。

本文的研究不仅有助于深入了解甘草黄酮的药理作用机制，为甘草黄酮的开发利用提供理论基础，同时也为中药材的质量控制提供了一种新的方法和技术手段。

希望本文的研究结果能为中药材的现代化、标准化和国际化进程提供一定的参考和借鉴。

二、甘草黄酮的分离与鉴定甘草黄酮作为甘草中的主要活性成分，具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤等作用。

为了深入研究甘草黄酮的药效及其指纹图谱，首先需要对甘草黄酮进行有效的分离和鉴定。

甘草黄酮的分离通常采用溶剂提取法、超声波辅助提取法或微波辅助提取法等方法。

在本研究中，我们采用溶剂提取法，以乙醇为溶剂，通过回流提取的方式从甘草中提取黄酮类化合物。

提取后的黄酮粗品经过硅胶柱层析、聚酰胺柱层析等步骤进行分离纯化，得到较为纯净的甘草黄酮。

对于分离得到的甘草黄酮，我们采用现代波谱技术进行鉴定。

通过紫外-可见光谱、红外光谱、核磁共振波谱（NMR）以及质谱（MS）等技术手段，对甘草黄酮的结构进行了详细的分析和鉴定。

结合已有的文献报道和我们的实验结果，我们成功鉴定出了甘草黄酮中的主要成分，包括甘草素、异甘草素等。

均匀设计法优化超声波辅助提取甘草总黄酮
常婧;马雪梅;胡志勇
【期刊名称】《广东化工》
【年(卷),期】2014(041)004
【摘要】目的:优化甘草中总黄酮的提取工艺.方法:在单因素实验基础上,采用均匀设计Ug(85)表设计方法研究甲醇体积分数、料液比、超声时间对总黄酮提取率的影响,并使用Uniform Design 3.0软件建立甘草总黄酮提取的数学模型,并得最佳工艺条件.结果:甘草总黄酮提取的最佳工艺条件为:甲醇浓度为70％、超声时间为30 min/h、固液比为1∶20,甘草总黄酮的最大得率为3.69％.结论:用均匀设计
Ug*(85)法得到的模型方程,可在设立的因素水平范围内给出甘草总黄酮得率极大值,进而探讨各因素对甘草总黄酮得率的影响机制.
【总页数】2页(P7-8)
【作者】常婧;马雪梅;胡志勇
【作者单位】中北大学,山西太原030051;中北大学,山西太原030051;中北大学,山西太原030051
【正文语种】中文
【中图分类】O652.6
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1.均匀设计法优化桦树单宁超声波辅助提取工艺 [J], 崔海峰;郭盛磊;于涛;丁为民;阎秀峰
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3.超声波辅助提取甘草总黄酮及其抗氧化性 [J], 邹玉红;寇小燕;韩秋霞
4.均匀设计法优化桦木醇超声波辅助提取工艺 [J], 丁为民;周丹;于涛;黄靖姝;阎秀峰;王洋
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专利名称：一种复合酶协同双频超声提取甘草黄酮的方法专利类型：发明专利
发明人：刘东锋,杨成东
申请号：CN201410266464.7
申请日：20140616
公开号：CN104069157A
公开日：
20141001
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种从甘草废渣中提取甘草黄酮的方法，具体涉及一种复合酶协同双频超声提取甘草黄酮的方法。

将甘草废渣加入8~10倍的70~80%的乙醇溶液，再加入原料重量0.5~2%的复合酶，搅拌均匀，置于双频超声提取器中提取，得到酶解液，高温灭活，离心，取上清液，石油醚萃取；取乙醇层浓缩至原体积的1/10，上经过预处理的大孔吸附树脂柱，5~7BV的80~90%的乙醇洗脱，收集洗脱液浓缩；含盐酸1~10%的乙醇溶液重结晶，得到甘草黄酮。

本发明以甘草废渣为原料，达到了资源合理开发利用的目的，该方法工艺简单、原料易得、收率高，适用于大规模工业化生产。

申请人：南京泽朗医药科技有限公司
地址：210046 江苏省南京市栖霞区尧化街道甘家边108号05幢6楼
国籍：CN
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十种药用植物超声提取物及其抑菌作用研究作者：刘晶瑜薛广厚望秀玲宋明慧王磊范海延来源：《湖北农业科学》2011年第09期摘要：用超声波辅助提取法从１０种药用植物中提取生物活性物质，采用生长速率法进行离体抑菌试验确定其对多种植物病原真菌的抑菌活性，并研究了植物提取物浓度对抑菌效果的影响。

结果表明，丁香、肉桂、大黄、木香、黄芩的提取物对番茄立枯丝核病菌、辣椒炭疽菌、西瓜枯萎菌、甜瓜枯萎菌、番茄镰刀菌和黄瓜枯萎菌的菌丝生长均具良好的抑制作用，其中肉桂和丁香的抑菌作用最为明显，菌丝生长抑制率可高达１００％；大黄和黄芩的抑菌效果受提取物浓度影响较大，且在试验范围内提取物浓度越高抑菌效果越好，而丁香、肉桂、木香的抑菌效果受提取物浓度影响不明显。

关键词：药用植物；植物病原菌；超声提取；抑菌作用中图分类号：Ｓ４８２．２＋９２文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）09－1809-03Ｓｔｕｄｙｏｎｔｈｅ Antibacterial Activity ｏｆＴｅｎ Ultrasound Extracts from ＭｅｄｉｃｉｎａｌＰｌａｎｔｓＬＩＵＪｉｎｇ－ｙｕ，ＸＵＥＧｕａｎｇ－ｈｏｕ，ＷＡＮＧＸｉｕ－ｌｉｎｇ，ＳＯＮＧＭｉｎｇ－ｈｕｉ，ＷＡＮＧＬｅｉ，ＦＡＮＨａｉ－ｙａｎ（ＳｃｈｏｏｌｏｆＢｉｏｌｏｇｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅａｎｄ Tｅｃｈｎｏｌｏｇｙ，ＳｈｅｎｙａｎｇＡｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ１１０１６１，Ｃｈｉｎａ）Ａｂｓｔｒａｃｔ： Tｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｆｒｏｍ１０ｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓ were obtained through ｕｌｔｒａｓｏｕｎｄ－ａｓｓｉｓｔｅｄｅｘｔｒａｃｔｉｏｎｍｅｔｈｏｄ．Ａｎｄｔｈｅｎ their ｉｎｈｉｂｉｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｏｖａｒｉｅｔｙｏｆｐｌａｎｔｐａｔｈｏｇｅｎｓ and ｔｈｅ inhibition effect ｏｆｄｉｆｆｅｒｅｎｔｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ were tested．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓｏｆｃｌｏｖｅ，ｃｉｎｎａｍｏｍｕｍｃａｓｓｉａ，ｒｈｕｂａｒｂ，ａｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａｄｅｂｉｌｉｓ，ｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａｈａd notable ｉｎｈｉｂｉｔｉｖｅａｃｔｉｖｉｔｉｅｓｔｏＲｈｉｚｏｃｔｏｎｉａｓｏｌａｎｉＫｕｈｎ，Ｇｌｏｅｏｓｐｏｒｉｕｍｐｉｐｅｒａｔｕｍ，Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．Ｎｉｖｅｕｍ，ＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍＳｃｈｌｅｃｈｔｅｎｄ．ｆ．ｓｐ．Ｍｅｌｏｎｉｓ，Ｆｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｕｍｆ．ｓｐ．ＬｙｃｏｐｅｒｓｉｃｉａｎｄＦｕｓａｒｉｕｍｏｘｙｓｐｏｒｉｕｍｆ．ｓｐ．ｃｕｃｕｍｅｒｉｎｕｍ. Tｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅｏｆｃｌｏｖｅａｎｄｃｉｎｎａｍｏｍｕｍｃａｓｓｉａ’ｓｅｘｔｒａｃｔｓｃould ｒｅａｃｈｔｏ１００％．Ｔｈｅｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙｒａｔｅ would ｂｅａｆｆｅｃｔｅｄｓｔｒｏｎｇｌｙｂｙｔｈｅｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｏｆｅｘｔｒａｃｔｓ if ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｓ came ｆｒｏｍｒｈｕｂａｒｂａｎｄｓｃｕｔｅｌｌａｒｉａ，ａｎｄｔｈｉｓｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｓｔｒｅｎｇｔｈｅｎｅｄｗｉｔｈｔｈｅｉｎｃｒｅａｓｉｎｇ of ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｕｎｄｅｒｃｏｎｓｉｄｅｒｅｄｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎｓ；ｂｕｔｔｈｅｒｅ waｓｎｏｏｂｖｉｏｕｓｅｆｆｅｃｔｗｈｅｎｔｈｅsource plant was Aｒｉｓｔｏｌｏｃｈｉａｄｅｂｉｌｉｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ：ｍｅｄｉｃｉｎａｌｐｌａｎｔｓ；ｐｌａｎｔｐａｔｈｏｇｅｎｓ； ultrasound ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ；ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎｅｆｆｅｃｔ植物次生代谢产物是植物在长期协同进化过程中，通过次生代谢途径产生的能抵御病虫害侵入、抑制其他物种生长，从而在竞争生长过程中处于相对有利地位的化学物质，而其成分天然，经过长期的衍化，可以进入天然能量代谢系统，毒性低，对环境污染小［１］。

超声波辅助法提取植物黄酮的工艺研究常波;毛明婷;谭云;叶峻【摘要】为探究植物总黄酮的提取方法,采用热水浸提法、索氏提取法、微波提取法和超声波提取法分别提取了荷叶中总黄酮含量,并优化了超声波辅助法提取甜荞、苦荞、玉米须、荷叶等样品中总黄酮的最佳料液比、提取液体积分数、超声时间、超声温度及超声功率等工艺条件.结果表明:超声波辅助提取法所得植物总黄酮的得率最高,且操作简单;所提取样品总黄酮得率顺序为:荷叶﹥苦荞﹥玉米须﹥甜荞,其中荷叶中总黄酮得率为0.6677％.【期刊名称】《价值工程》【年(卷),期】2018(037)033【总页数】4页(P242-245)【关键词】超声波;甜荞;玉米须;荷叶;苦荞;黄酮【作者】常波;毛明婷;谭云;叶峻【作者单位】成都师范学院化学与生命科学学院,成都611130;成都师范学院化学与生命科学学院,成都611130;成都师范学院化学与生命科学学院,成都611130;成都师范学院化学与生命科学学院,成都611130【正文语种】中文【中图分类】TS2090 引言黄酮类物质广泛存在于蔬菜、药用植物及农产品加工下脚料中的一大类化合物，是植物在生长过程中产生的次级代谢产物。

研究表明：黄酮类化合物具有抗氧化、抗肿瘤、抗炎和免疫调节、抗病毒、解毒护肝和细胞保护、影响心血管疾病与内分泌代谢等药理作用[1-6]，具有极高的应用和科研价值，在医药、食品等领域具有广阔的应用前景[7]，并已开发出黄酮类的药品及保健食品。

传统植物黄酮的提取方法主要有：索氏提取法、热水浸提法、碱液提取法等，存在溶剂使用量大，操作繁重以及高温使黄酮类物质变质等缺点[8]，而具有能耗低、效率高等优点的超声技术应用较少。

许刚等[8-15]利用超声波产生的强烈振动、高的加速度、强烈的空化效应、搅拌作用等，可加速植物材料中的黄酮成分进入溶剂，从而增加提取率，缩短提取时间，节约溶剂，并可避免高温对提取成分的影响。

本研究以具有降压保健作用的甜荞、苦荞、玉米须、荷叶等为研究对象，采用乙醇浸提和超声波辅助方法提取黄酮类化合物，探究了各样品中黄酮提取的最佳工艺条件；并以芦丁标准品为对照品，用紫外分光光度法对提取物进行了测定与比较，为植物黄酮的综合开发、应用提供参考。

甘草黄酮提取方法及抗氧化活性研究(一)作者：汪河滨周忠波罗锋杨玲【摘要】目的比较不同提取方法对甘草黄酮含量和抗氧化活性的影响。

方法采用常规法、超声波、微波、超声-微波协同萃取4种不同提取方法提取甘草黄酮，用分光光度法测定其含量；用活性氧法测定黄酮粗品的抗氧化活性。

结果4种方法提取的甘草黄酮含量分别为1.78%，1.85%,1.92%,2.04%。

抗氧化活性为常规水浴提取法＞微波提取法＞超声波提取法＞超声-微波协同萃取法。

结论超声-微波协同萃取法提取甘草黄酮效果好。

4种提取方法所得的甘草黄酮粗品均具有较强的抗氧化作用。

【关键词】甘草黄酮超声-微波协同萃取抗氧化性Abstract：ObjectiveTocomparetheeffectofdifferentextractionmethodsonthecontentofflavonoidsandantioxid antactivityfromGlycyrrhiza.MethodsWaterbathmethod,ultrasonic,microwaveandultrasonic-micro wavesynergisticextractiontechnologywereusedintheflavonoidsextraction,andcolorimetrywasused todeterminethecontent.Activeoxygencontentwasusedtodetermineitsantioxidantactivity.ResultsTh econtentofflavonoidswere:1.78%,1.85%,1.92%,2.04%respectively.Antioxidantactivityofdifferentm ethodswere:waterbathextraction＞microwaveextraction＞ultrasonicextraction＞ultrasonic-microwavesynergisticextraction.ConclusionUltrasonic-microwavesynergisticextractiont echnologyappliedinextractingflavonoidsfromGlycyrrhizaisbetterthantheothers.Theextractgotfrom thefourmethodsallhavegreatanti-oxidation.Keywords：Glycyrrhizaflavonoids；Ultrasonic-microwavesynergisticextraction;Anti-oxidation甘草是豆科植物乌拉尔甘草GlycyrrhizauralensisFisch.、胀果甘草G.inflataBat.或光果甘草G.glabra.L.的干燥根和根茎，是临床最常用的中草药品种〔1〕，其主要有效成分为甘草酸和甘草黄酮。

甘草活性成分提取及抑菌活性研究杨静;常小强;王霞;孙德梅;王新灵【摘要】Glycyrrhiza was used as raw material and purified by water and the solvating method.The product was purified by separation of macroporous resin D 101.The extracted product was tested for bacteriostasis.The results showed that the content of total flavonoids in Glycyrrhiza was 18.4％,and the total flavonoids of Glycyrrhiza had antibacterial activity.Liquiritigenin and Licochalcone A are the main antibacterial ingredients in Glycyrrhiza.%以甘草饮片为原料,通过水煎煮,溶剂化法提取,用大孔树脂D 101分离,制备薄层纯化得到产物.将提取的产物进行抑菌性试验.结果表明,分离提取得草酸三钾盐、甘草酸、甘草总黄酮,70％乙醇提取甘草渣得甘草总黄酮,含量为18.4％,经抑菌试验确定甘草总黄酮有抑菌活性,甘草素、甘草查尔酮A为主要抑菌成分.【期刊名称】《河南科学》【年(卷),期】2017(035)010【总页数】5页(P1587-1591)【关键词】甘草饮片;甘草酸;甘草总黄酮;抑菌【作者】杨静;常小强;王霞;孙德梅;王新灵【作者单位】河南中医药大学药学院,郑州450016;河南中医药大学药学院,郑州450016;河南中医药大学药学院,郑州450016;河南中医药大学药学院,郑州450016;河南中医药大学药学院,郑州450016【正文语种】中文【中图分类】O29甘草来源于豆科甘草属植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根及根茎，具有补脾益气、祛痰止咳、缓急止痛、清热解毒、调和诸药的功效，历代皆为重要药物［1］.大量研究表明，甘草主要的生物活性物质是三萜皂苷类和黄酮类［2-5］.其中甘草酸已应用于临床，治疗慢性肝炎等疾病，甘草黄酮具有美白功效应用于化妆品行业.但以甘草素、甘草查尔酮等甘草有效成分作为抑菌剂，防除生活中有害细菌的研究尚未见文献报道.因此，通过分离提取甘草有效成分，探究其对生活中常见细菌的抑菌活性［6-9］，将可能成为发展甘草资源的一个新方向，为甘草资源的进一步开发利用提供一定的理论参考.甘草饮片（甘肃；批号：151002；亳州市张仲景中药饮片有限公司）；大孔吸附树脂D 101（上海国药集团）；制备薄层（青岛海洋化工厂产硅胶GF254），以0.8%CMC-Na铺板，110℃活化0.5 h；展开剂系统：V（乙酸乙酯）∶V（乙酸）∶V（甲酸）∶V（水）=15∶1∶1∶2；其他试剂均为分析纯.紫外分析仪ZF-1（上海科升仪器有限公司）；紫外可见分光光度计UV-1600PC （上海翔艺仪器有限公司）；旋转蒸发仪OSB-2100（上海爱朗仪器有限公司）；电热真空干燥箱DZF-6050AB（郑州生元仪器有限公司）；分析天平BS224S（北京赛多利斯仪器系统有限公司）；微生物培养箱、超净工作台等.1.3.1 甘草酸三钾盐的提取称取甘草饮片，大者用手掰碎，放入圆底烧瓶，电热套120℃条件下煎煮3次，依次加纯水5倍量、5倍量、3倍量，煎煮2 h、1 h、0.5 h.过滤（四层纱布），合并滤液，浓缩，加热纯水稀释，滴加浓H2SO4至无沉淀生成，过滤.沉淀少量纯水水洗3次.将沉淀置于恒温干燥箱中，56℃干燥.研粉，加丙酮56℃条件下回流3次，过滤.向滤液中加2%KOH乙醇溶液，调pH至8～9，静置12 h，析出黄色沉淀，过滤，沉淀自然干燥，即为甘草酸三钾盐.1.3.2 甘草酸的提取称取甘草饮片，大者用手掰碎，放入圆底烧瓶，电热套120℃条件下煎煮3次，依次加纯水5倍、5倍量、3倍量，煎煮2 h、1 h、0.5 h.过滤（四层纱布），合并3次滤液，浓缩.加热纯水稀释.上大孔树脂D 101，水洗去杂质，用40%乙醇洗脱，合并洗脱液［7-10］.回收乙醇，得固体.将固体溶于纯水，加浓H2SO4至不再生成沉淀，静置，过滤，用活性炭脱色，干燥即得甘草酸粗品.1.3.3 甘草总黄酮的提取称取煎煮后的甘草渣，加入20倍量75%乙醇（v/v），85℃条件下回流提取3 h，过滤，回收乙醇，得浓缩液，上大孔树脂D 101，水洗除杂后，用70%乙醇洗脱，收集洗脱液，旋转蒸发仪蒸干，刮取所得固体即为甘草总黄酮.1.3.4 甘草酸的纯化采用制备薄层法纯化甘草酸粗品，选用乙酸乙酯-乙酸-甲酸-水（15∶1∶1∶2）为展开剂，展开后在紫外灯下观察，刮取与标准对照品相同Rf 值的条带，甲醇洗脱，回收甲醇，得固体纯品.采用滤纸片法［15-23］探究甘草酸三钾盐、甘草酸、甘草总黄酮是否对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、双歧杆菌、绿脓杆菌有抑制作用.采用甘草苷为对照品［11-14］，10%KOH作显色剂，甲醇做溶剂，在最大吸收波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线，求线性回归方程.精密配制甘草总黄酮样品溶液.精密吸取甘草总黄酮样品溶液，甲醇定容，在最大吸收波长处测定吸光度.水煎煮粗提，经溶剂化法将甘草酸转变成甘草酸三钾盐，与理论产量相比较低（表1）.欲进一步精制经冰醋酸重结晶得到甘草酸单钾盐，发现溶解后呈果冻状无法析出结晶.水提醇沉，经溶剂化法得粗甘草酸，用大孔树脂D 101分离纯化得甘草酸产物（表2）.产物浅黄色，经薄层色谱检识发现仍含有两到三个杂质.活性炭脱色，产物颜色减弱至微黄色，但由于活性炭吸附作用，产率降低.1）水煎煮后的甘草渣中有含量可观的总黄酮（表3）.2）甘草总黄酮含量测定：采用甘草苷为对照品，10%KOH作显色剂，于190～600 nm进行波长扫描，确定最大吸收波长为335 nm（图1，图2）.精密配制1 mg/mL甘草苷对照品溶液.精密吸取甘草苷对照品溶液20、40、60、80、100、120μL，分别加入甲醇1 mL，再加入10%KOH溶液0.5 mL，静置5 min，甲醇定容至10 mL，在335 nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线（图3），求得线性回归方程y=54.886x-0.024 9，R2=0.999 9具有极好的线性.精密配制1 mg/mL甘草总黄酮样品溶液.精密吸取甘草总黄酮样品溶液，加入甲醇1 mL，再加入10%KOH溶液0.5 mL，静置5 min，甲醇定容至10 mL，在335 nm波长处测定吸光度.精密吸取甘草总黄酮样品溶液300 μL，与上述操作相同，在最大吸收波长335 nm处测定吸光度为0.278，处于标准曲线线性范围内.计算得样品中甘草总黄酮含量为18.4%.1）供试菌种由河南中医药大学基础医学院实验中心提供，双歧杆菌用专属培养基，36℃厌氧培养48 h，其他3种细菌用LB培养基，36℃培养24 h，观察试验结果（表4）.2）从表4可知，甘草总黄酮有明显抑菌作用，所以针对甘草黄酮类成分做抑菌测定，所用药物质量浓度均为1 mg/mL，双歧杆菌用专属培养基，36℃厌氧培养48 h，其他3种细菌用LB培养基，36℃培养24 h（表5）.甘草经水提醇沉，加浓硫酸游离出甘草酸粗品，经大孔树脂D 101分离纯化，所得甘草酸产率高纯度好，再通过制备薄层色谱，可得到甘草酸纯品.制备薄层色谱中制备薄层板最佳条件为，硅胶GF254加3倍量0.8%CMC-Na研磨15 min铺板，自然晾干，105℃活化30 min；最佳展开条件为，展开剂V（乙酸乙酯）∶V （乙酸）∶V（甲酸）∶V（水）=15∶1∶1∶2，湿度48%，温度25 ℃.水煎煮提取过甘草酸的甘草渣，经70%乙醇回流提取，大孔树脂分离纯化，所得产品中甘草总黄酮含量18.4%.甘草总黄酮对大肠杆菌、双歧杆菌、绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌均有抑制作用，甘草酸和甘草酸三钾盐对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、双歧杆菌、绿脓杆菌没有明显抑制作用.甘草苷、甘草素、异甘草素、甘草查尔酮A，均为甘草总黄酮中的抑菌成分，其中甘草素、甘草查尔酮A较甘草苷和异甘草素抑菌效果强.（编辑张松林）【相关文献】［1］曾启华.从甘草中提取甘草酸和甘草次酸的工艺研究［J］.遵义师范学院学报，2006（1）：62-64.［2］罗祖良，李倩，覃洁萍，等.光果甘草的研究进展［J］.中草药，2011，42（10）：2154-2158.［3］刘铭，贾东升，赵江丽，等.甘草废渣中总黄酮提取工艺研究［J］.食品研究与开发，2015（23）：73-76.［4］崔永明，余龙江，敖明章，等.甘草总黄酮的提取技术及其抑菌活性研究［J］.中药材，2006（8）：838-841.［5］罗锋，刘珍.甘草渣中总黄酮的提取工艺研究［J］.塔里木大学学报，2006（2）：61-63. ［6］范云鸽，史作清，何炳林.甘草酸、甘草次酸的提取分离及应用概况［J］.天然产物研究与开发，1996（4）：93-99.［7］王彦芳，赵海燕，马永平，等.甘草中总黄酮提取工艺的优化［J］.安徽农业科学，2011（26）：15956-15959.［8］刘飞，赵莹.大孔吸附树脂及其在天然产物分离纯化中的应用［J］.齐鲁药事，2008（11）：679-681.［9］陈水英，孙彩华.大孔吸附树脂在天然药物有效成分分离、富集中的应用［J］.中国药业，2007（18）：63-64.［10］高萍，杨国林.大孔吸附树脂在天然药物分离纯化中的应用［J］.天津药学，2006（2）：63-66.［11］李艳宾，张琴，陶呈宇，等.微生物发酵提高甘草渣中黄酮类物质提取率的研究［J］.食品研究与开发，2010，31（9）：156-159.［12］崔誉蓉，陈朋，刘军花，等.4种甘草黄酮类化合物抗氧化构效关系研究［J］.时珍国医国药，2010，21（12）：3041-3043.［13］冯薇，王文全，赵平然.甘草总黄酮含量测定方法研究［J］.时珍国医国药，2007，18（11）：2608-2610.［14］杨琳，车庆明，毕诚，等.甘草废渣中黄酮成分的研究［J］.中草药，2007，38（5）：671-673.［15］邓丽.甘草渣中黄酮类化合物的提取纯化、分离鉴定及其抑菌活性研究［D］.兰州：兰州理工大学，2011.［16］王娜.中药黄芪、黄芩有效成分的体外抑菌作用研究［D］.北京：燕山大学，2009.［17］郭嘉昒，马慧，何伟明，等.地黄中活性成分的提取及抑菌实验研究［J］.上海化工，2013（12）：6-10.［18］李桂玲，刘刚.甘草酸提取及抑菌活性研究［J］.现代商贸工业，2013（8）：187-188. ［19］管仲莹，赵金明，林巧智.金银花提取物抑菌作用的实验研究［J］.中国现代医生，2009（15）：150-153.［20］赵良忠，蒋贤育，段林东，等.金银花水溶性抗菌物质的提取及其抑菌效果研究［J］.中国生物制品学杂志，2006（2）：201-203.［21］刘一.甘草提取物及有效成分的抗菌活性研究［D］.延吉：延边大学，2013.［22］申凤鸽.甘草查耳酮A抗金黄色葡萄球菌生物被膜的分子机制初步研究［D］.长春：吉林大学，2013.［23］赵虹，蒋江涛，郑秋生.甘草查耳酮A药理作用研究进展［J］.中国中药杂志，2013，22（38）：3814-3818.。