当前位置：文档之家 › 第十九章补体检测及应用

第十九章补体检测及应用

  • 格式：ppt
  • 大小：1.35 MB
  • 文档页数：84

下载文档原格式

  / 84

合集下载

5.补体检测及应用

5.补体检测及应用
* 若补体激活发生在脂质双层上,则可形成
C5b～9(膜攻击复合物，MAC）。
* 若补体激活发生在没有靶细胞的血清中,则有
关的补体成分可同S蛋白形成亲水的、无溶细 胞活性的SC5b～7、SC5b～8及SC5b～9。 1. MAC的组装
2. MAC的效应机制
补体系统三条激活途径的不同点
比较项目 激活物质 经典途径 Ag与Ab (IgM 、 IgG3、 IgG1、gG2) 形成的复合物 C1--C9 MBL途径 炎症期产生 的蛋白与病 原体结合之 后 旁路途径 细菌脂多糖 凝聚的IgG4 IgA等
C反应蛋白也可与C1q结合并使之激活，然后 依次激活补体其他成分。
补体活化的旁路途径
* 不经C1、C4、C2途径,而由C3、B因子、
D因子参与的激活过程 * 某些细菌、革兰氏阴性菌的内毒素、酵母多 糖、葡聚糖、凝聚的IgA和IgG4以及其他哺乳 动物细胞，均可不通过C1q的活化，而直接"激 活"旁路途径。 * 这种激活方式可不依赖于特异性抗体的形成。
0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.5
0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1
全溶 全溶 全溶 全溶 大部分溶 微溶 不溶 不溶 不溶
────────────────────────────
• 温育反应后，完全溶血的试管内液体红色透 明，不溶血的管内液体浑浊；放置后可见红 细胞沉淀，上清无色透明。按照以上标准， 以产生完全溶血的最高稀释管的溶血素稀释 倍数为溶血素的效价。例如表19-6中的溶血 素效价应为1:4000。 以豚鼠血清作补体来源时，应考虑到个体差异。 为了确保血清中补体的有效活性，必须取3只 以上豚鼠的血清混合后使用。

补体结合试验的原理及应用

补体结合试验的原理及应用

补体结合试验的原理及应用1. 原理介绍补体结合试验是一种常见的实验方法，用于检测血清或体液中的溶菌酶的活性。

其原理基于抗原-抗体反应和补体激活的过程。

在一个完整的补体结合试验中，通常需要包括三个基本步骤：补体激活、免疫复合物的形成和补体结合。

1.1 补体激活补体是一组血浆蛋白，在机体的免疫防御机制中起着关键的作用。

当体内存在抗原时，抗原与特异性抗体结合形成免疫复合物。

这些免疫复合物可以激活补体系统。

补体分为经典途径和替代途径，其中经典途径是由免疫复合物激活补体的主要途径之一。

1.2 免疫复合物的形成免疫复合物是由抗原与抗体结合形成的复合物。

当抗原与抗体结合形成免疫复合物后，免疫复合物会引起补体激活。

1.3 补体结合补体结合是指补体成分与免疫复合物结合的过程。

当补体的C1q成分与免疫复合物结合后，C1q会激活补体的经典途径，进而引发连续的级联反应，最终形成一个膜攻击复合物（MAC），导致细胞膜的破坏。

2. 应用领域补体结合试验在医学检验、疾病诊断等领域具有广泛的应用价值。

以下是一些补体结合试验的应用领域：2.1 免疫疾病的诊断补体结合试验可用于检测自身免疫性疾病和某些免疫缺陷病的诊断。

例如，系统性红斑狼疮患者血清中的补体结合活性通常较低。

2.2 感染性疾病的诊断补体结合试验可用于检测某些感染性疾病的诊断，如流行性感冒、风疹、百日咳等。

在感染过程中，补体会参与抗体介导的免疫反应，通过补体结合试验可以检测到相关抗体和免疫复合物的形成。

2.3 肿瘤标志物的检测补体结合试验对某些肿瘤标志物的检测也具有一定的应用价值。

例如，前列腺特异性抗原（PSA）是早期发现前列腺癌的一个重要指标，通过补体结合试验可以检测血清中的PSA水平。

2.4 药物敏感性的评估补体结合试验可以用于评估药物的敏感性。

例如，某些抗肿瘤药物的疗效可能与补体结合试验的结果相关，通过补体结合试验可以评估药物对免疫复合物的效应。

3. 结语补体结合试验作为一种重要的实验方法，可以应用于医学检验、疾病诊断等多个领域。

第十九章 补体检测及应用

第十九章 补体检测及应用

第十九章补体检测及应用补体是一组存在于人和脊椎动物血清中具有酶样活性、不耐热的糖蛋白。

补体不是单一成分，其在功能效应上是以连续反应程序进行的，故又称补体系统。

补体的存在与抗原性异物的刺激无关，在正常人血清中，其含量相对稳定，但在某些疾病发生时，补体的含量及其活性可发生改变。

第一节概述一、补体成分的含量与理化特性（一）补体成分的含量补体大多为糖蛋白，属于β球蛋白，C1q、C8等为γ球蛋白，C1s、C9为α球蛋白。

正常血清中补体各组分含量相差较大，其中C3含量最高。

补体活化后的裂解片段以该成分的符号后加小写英文字母表示，通常a为小片段，b为大片段，但C2a 为大片段，C2b为小片段。

体内合成补体成分的部位和细胞有多种，以肝脏、脾脏、小肠等组织和巨噬细胞、上皮细胞、血小板等细胞为主。

（二）补体的理化特性补体的性质不稳定，易受各种理化因素的影响，加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。

在-10℃活性保持3～4天，冷冻干燥可较长时间保持其活性，加热56℃30分钟灭活（灭能），故补体活性检测应尽快进行。

标本保存应置于-20℃以下。

二、补体的活化途径1.经典途径是以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活的途径，最早被人们所认识，故又称第一途径或传统途径，是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。

2.MBL途径是甘露聚糖结合凝集素（MBL）结合至细菌启动的途径。

其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋白产生的MBL和C反应蛋白等，后者与病原体结合而启动绕过C1的MBL途径。

3.旁路途径是通过微生物表面等膜性物质，从C3开始，由B因子、D因子参与激活过程，也称第二途径、旁路途径。

这种激活方式不依赖于特异性抗体的形成，在感染早期可为机体提供有效的防御机制。

第二节补体总活性测定已应用于科研和临床的方法包括：基于经典途径的CP-CH50和应用于C3旁路检测的AP-CH50。

CP-CH50是临床常规进行的补体总活性检测项目，AP-CH50尚未列入检验常规。

补体检测及应用

补体检测及应用

1:4
4444 4 4 3
2
0
1:8
4444 4 3 2
1
0
1:16
4444 3 3 2
±
0
1:32
4444
3
2
±
0
0
1:64
4444 2 1 0
0
0
1:128
4210 0 0 0
0
0
1:256
3100 0 0 0
0
0
1:512
0000 0 0 0
0
0
抗原对照
0000 0 0 0
0
0
注:1、2、3、4分别表示补体结合反应强度 ; 0表示全溶血,补体结合试验阴性
（二）试验方法
1.2%-5%绵羊红细胞（SRBC）的配置
2.溶血素：抗绵羊红细胞抗体，是以SRBC免疫 家兔所得的兔抗血清。试验前要进行溶血素的 稀释和滴定。
3.稀释缓冲液:PH7.2-7.4磷酸盐缓冲液 Ca+2、Mg
+2
不同稀释度溶血素的配置
最终稀释度 稀释液(ml) 稀释度
溶血素（ml）
3
0.20
1.30
4
0.25
1.25
5
0.30
1.20
6
0.35
1.15
7
0.40
1.10
8
0.45
1.05
9
0.50
1.00
10
0,00
1.50
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5
0.5

临床免疫学补体检测及应用

临床免疫学补体检测及应用

第十九章补体检测及应用本章考点1.概述2.补体的活化途径3.有关补体测定的试验4.补体测定的应用补体是存在于人和脊椎动物正常新鲜血清及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白。

补体系统是补体加上其调节因子和相关膜蛋白共同组成一个反应系统，称为补体系统。

补体系统参与机体的抗感染及免疫调节，也可介导病理性反应，是体内重要的免疫系统和放大系统。

第一节补体系统的组成和性质一、命名根据l968年WH0命名委员会对补体系统进行了统一命名。

参与补体激活经典途径的固有成分按其被发现的先后顺序分别称Cl、C2、……C9。

Cl由Clq、Clr、Cls 三种亚单位组成；补体系统旁路激活途径及调节因子中另一些组分以英文大写字母表示，如B因子、D因子、P因子、H 因子等；补体调节成分多以其功能进行命名，如C1抑制物、C4结合蛋白、衰变加速因子等；补体活化后的裂解片段以该成分的符号后面加小写英文字母表示，如C3a、C3b等；具有酶活性的成分或复合物在其符号上划一横线表示，如、，灭活的补体片段在其符号前面加英文字母i表示，如iC3b等；对补体受体以其结合对象命名，如CLrR、C5Ar、对C3片段受体则用CRl、CR2……CR4表示。

二、分类构成补体系统包括30余种活性成分，按其性质和功能可以分为三大类：1.在体液中参与补体活化级联反应的各种固有成分；2.以可溶性形式或膜结合形式存在的各种补体调节蛋白；3.结合补体片段或调节补体生物效应的各种受体。

三、理化性质补体的大多数组分都是糖蛋白，且多属于β球蛋白，约占血清球蛋白总量的l0%；Clq，C8等为γ球蛋白；Cls，C9为α球蛋白。

正常血清中各组分的含量相差较大，C3含量最多，C2最低。

各种属动物间血中补体含量也不相同，豚鼠血清中含有丰富的补体，故实验室多采用豚鼠血作为补体来源。

补体性质不稳定，易受各种理化因素影响，如加热、机械振荡、酸碱、酒精等均可使其失活；在0℃～10℃下活性只保持3～4天，冷冻干燥可较长时间保持其活性；加热56℃30min可使血清中绝大部分补体组分丧失活性，称为灭活或灭能。

补体检测及其应用安徽理工大学

补体检测及其应用安徽理工大学
补体检测及其应用安徽理工大学
安徽理工大学医学院
（教案续页）
基本内容辅助手段和时间分配备注
第一节补体系统的性质与活化途径
一、补体系统的组成与性质
补体(complement，C)是存在于人和脊椎动物血清及组织中的一组具有酶样活性、不耐热和功能上连续反应的球蛋白，是抗体 发挥溶细胞作用的必要补充条件，故称为补体系统。补体并非单一成分，而是由补体及其调节因子和相关膜蛋白以及补体受体 共同组成的补体系统。补体系统广泛参与机体的抗感染防御反应，具有介导细胞溶解、调理吞噬、免疫黏附以及参与炎症反应 引起机体免疫损伤等作用，是体内具有重要生物学功能的免疫效应和放大系统。
补体系统由30多种活性成分组成，按其性质和功能可以分为三大类：①补体系统的固有成分；②以可溶性或膜结合形式存在的 补体调节蛋白；
③结合补体片段或调节补体生物学效应的补体受体受体(complement receptor，CR)。
由于由于补体系统组成和功能的复杂性，其命名较为复杂，一般有以下规律可循：参与补体经典邀活途径的固有成份，按其被 发现的先后次序命名为C1、C2、……C9，其中Cl由Clq、Clr、Cls三种亚单位组成；补体系统的其他成分以英文大写字母表 示，如B因子、D因子、P因子、H因子；补体调节蛋白多以功能命名，如Cl抑制物、C4结合蛋白和膜协同因子蛋白等；补体 活化后的裂解片段，以该成分的符号后面附加小写英文字母表示，如C3a、C3b等；具有酶活性的成分或复合物，在其符号上 划一横线表示，如Ci、C—3bB—b等；灭活的补体片段，在其符号前加英文字母i表示，如iC3b。补体性质不稳定，易受各种 理化因素影响，加热、紫外线照射、机械振荡或某些添加剂等理化因素均可能破坏补体。在0-10℃补体活性可保持3～4天， 冷冻干燥可较长时间保持其活性，加热56℃30 min即被灭活，所以补体活性检测标本应尽快进行测定。

补体含量测定的临床应用

补体含量测定的临床应用补体系统是人体免疫系统中的一个重要组成部分，对于维持机体的免疫平衡和抵御外界病原体的侵袭起着至关重要的作用。

补体含量测定作为检测补体系统功能的重要手段，在临床应用中具有广泛的价值和意义。

一、补体系统概述补体系统是一组血清蛋白，在机体的天然免疫和获得性免疫防御中起着关键作用。

其主要功能包括参与炎症反应、溶解和清除抗原抗体复合物、促进吞噬作用和调节免疫细胞的活化等。

正常情况下，补体系统处于平衡状态，但一旦发生疾病或免疫功能异常，补体系统的活性也会发生相应的改变。

二、补体含量测定的原理和方法补体含量测定是通过检测血清中不同的补体成分的浓度和活性水平，来评估机体补体系统的功能状态。

目前常用的方法包括CH50、AP50、C3、C4等指标的检测，通过免疫沉淀法、酶联免疫吸附测定法等技术手段进行。

三、补体含量测定在临床应用中的意义1. 诊断自身免疫性疾病：补体含量测定可帮助医生鉴别类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等自身免疫性疾病，为临床诊断提供重要参考。

2. 监测炎症和感染状态：炎症和感染状态下，补体系统活性常常发生改变，通过补体含量测定可以及时发现炎症性疾病和感染，指导治疗和预后评估。

3. 评估器官移植排斥反应：补体含量测定可帮助评估器官移植患者是否存在排斥反应，及时调整免疫抑制治疗，提高移植成功率。

4. 指导免疫治疗方案：一些免疫相关疾病需要使用免疫调节药物进行治疗，补体含量测定可以帮助医生确定治疗方案和调整药物剂量。

四、补体含量测定的注意事项补体含量测定是一项辅助临床诊断的手段，结果需结合临床症状和其他检查结果来综合分析和判断。

同时，在进行检测前应妥善处理血清标本，避免出现干扰因素，确保检测准确可靠。

综上所述，补体含量测定在临床应用中具有重要的意义和价值，对于指导疾病诊断、治疗和预后评估都具有重要作用。

在未来的临床实践中，补体含量测定将继续发挥其重要的作用，为患者的健康和医学进步做出积极贡献。

医学免疫学：第5 第6 第19 章 补体、补体检测及细胞因子 (2)


C4bp的抑制作用（C4 Binding Protein)
结合C4b，抑制C4b与C2的结合，防止C3转化酶的组装。 促进I因子对C4b的蛋白水解
四. 补体的生物学作用
在细胞表面激活并形成 MAC，介导溶细胞效应； 激活过程中产生的水解片段，介导各种生物学效应
1. 溶菌、溶解病毒和细胞的细胞毒作用
CH50(U/ml)=1/血清用量*稀释倍数
取10只试管，分别编号，按照下表加入各试剂
试管号 BBS 1：20稀释血清 2％SRBC 2U溶血素
补体溶血活性
1 1.40
0.10
0.5
0.5
200
2 1.35
0.15
0.5
0.5
133
置
3 1.30
0.20
0.5
0.5
100
37℃
4 1.25
0.25
2. 调理作用 C3b、C4b
3. 免疫粘附 C3b
4. 炎症介质作用 过敏毒素 C3a、C5a 趋化因子 C5a
第十九章 补体检测及应用
补体总活性测定
• 补体最主要的活性是溶细胞作用 • 特异性抗体+红细胞→激活补体→溶血 • 在适当的、稳定的反应体系中，溶血反应
对补体的剂量依赖呈一特殊的S形曲线
阳性
阴性
阴性
阳性
二、方法评价
➢优 点
灵敏度高、所测定的抗体水平可达0.05μg/ml ， 出现交叉反应的机率较小， 可检测的抗原或抗体范围广泛， 无需特殊设备、结果容易观察、试验条件要求不高
➢现 状
影响的因素多、各种制剂需要繁琐的稀释和滴定等， 现代化、自动化抗原抗体检测方法的不断涌现，补体结合试验逐 渐被遗弃 补体结合试验作为一种经典的免疫方法类型，其设计和原理仍对 新型免疫方法的建立有着启迪和指导作用

免疫学及免疫学检验学题库答案

一、名词解释第1章概论1.免疫学：2.免疫分子：3.补体：4.临床免疫学：第2章抗原抗体反应5.抗原抗体反应：6.抗原抗体反应特异性7.可逆性8.比例性9.抗原抗体反应的等价带zoneofequivalence10.最适比optimalratio11.带现象zonephenomenon第3章免疫原和抗血清的制备12.免疫原immunogen13.半抗原14.免疫佐剂15.多克隆抗体polyclonal antibody, pcAb第5章凝集反应16.凝集反应17.直接凝集反应18.间接凝集反应19.明胶凝集试验第6章沉淀反应20.沉淀反应21.絮状沉淀试验22.免疫浊度测定23.凝胶内沉淀试验24.单项扩散试验25.双向扩散试验26.免疫电泳技术27.对流免疫电泳28.火箭免疫电泳29.免疫电泳30.免疫固定电泳第19章补体检测及应用31.补体32.免疫溶血法33.补体结合试验第22章感染性疾病与感染免疫检测34.感染第23章超敏反应性疾病及其免疫检测35.超敏反应36.Ⅰ型超敏反应37.Ⅱ型超敏反应38.Ⅲ型超敏反应39.Ⅳ型超敏反应第24章自身免疫性疾病及其免疫检测40.自身耐受41.自身免疫42.自身免疫病43.自身抗体44.抗核抗体第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测45.免疫增殖性疾病46.免疫球蛋白增殖病47.本周蛋白48.血清区带电泳49.免疫电泳50.免疫固定电泳第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验51.免疫缺陷病52.获得性免疫缺陷综合征第27章肿瘤免疫与免疫学检验53.肿瘤免疫学54.肿瘤抗原55.肿瘤标志物第28章移植免疫及其免疫检测56.移植57.主要组织相容性复合体58.移植排斥反应59.移植物抗宿主反应GVHR60.血清学分型法二、填空题;第1章概论1.推动现代生命科学前进的三架战车：分子生物学、免疫学、细胞生物学;2.免疫学的发展历史可分为三个时期：经验时期、免疫学科形成时期、现代免疫学时期;3.为保持机体内环境稳定,免疫系统的三大生理功能分别是：免疫防御、免疫自稳、免疫监视;4.免疫应答的过程主要分为：识别阶段、活化阶段、效应阶段5.免疫系统的组成包括三部分,分别是：免疫器官、免疫细胞、免疫分子;6.补体的三条激活途径分别是：经典途径、甘露糖结合凝集素途径、旁路途径;第2章抗原抗体反应7.在抗原抗体反应中,主要的结合力有：静电引力、范德华力、氢键、疏水作用力;8.在抗原抗体反应中,主要的特点有：特异性、可逆性、比例性、阶段性;第3章免疫原和抗血清的制备9.组织细胞或培养细胞可溶性抗原的制备过程中,常用的方法有：反复冻融法、超声破碎法、自溶法、酶处理法、表面活性剂处理法任写出二种均可得分;10.在免疫原和抗血清的制备过程中,可溶性抗原的纯化方法：超速离心法、选择性沉淀法、凝胶过滤法、离子交换层析法、亲和层析法等任写出二种均可得分;11.在免疫原和抗血清的制备过程中,纯化抗原的鉴定的内容主要有：蛋白含量测定、分子量测定、纯度鉴定、免疫活性鉴定;12.在免疫原和抗血清的制备过程中,抗血清的鉴定内容有：抗体特异性的鉴定、抗体效价的鉴定、抗体纯度的鉴定、抗体亲合力的鉴定;第5章凝集反应13.在凝集反应中,间接凝集反应的类型主要有：正向间接凝集反应、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应、协同凝集反应;14.抗球蛋白试验,又称Coombs试验,是检测抗红细胞不完全抗体的一种方法;第6章沉淀反应15.免疫电泳技术类型主要包括：对流免疫电泳、火箭免疫电泳、免疫电泳、免疫固定电泳;第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.在外周血单个核细胞分离实验中,对分离介质的基本要求有：对细胞无毒、基本等渗、不溶于血浆或分离物质、有一定密度;17.在淋巴细胞分离过程中,其中的单核细胞去除方法有：贴壁黏附法、吸附柱过滤法、磁铁吸引法、Percoll分层液法; 第15章免疫细胞功能检测技术18.在免疫细胞功能检测技术方面,针对T细胞功能检测方法有：T细胞增殖试验、 T细胞分泌功能测定、T细胞介导的细胞毒试验、体内试验;第19章补体检测及应用第22章感染性疾病与感染免疫检测19.目前公认的肝炎病毒至少有5种：甲型肝炎病毒HAV、乙型肝炎病毒HBV、丙型肝炎病毒HCV、丁型肝炎病毒HDV、戊型肝炎病毒HEV;20.在乙肝病毒检测的过程中,主要检测的五项指标有：HBsAg、抗HBs、抗HBc、HBeAg、抗HBe;21.在先天性感染中,临床上将以上4种病原菌称为“TORCH”,为产前检查的重点项目,分别是：弓形体、巨细胞病毒、风疹病毒、单纯疱疹病毒;第23章超敏反应性疾病及其免疫检测22.根据免疫反应的速度和组织损伤的机制不同,将超敏反应分为四种类型,分别是：第 I 型速发型超敏反应、第II 型细胞毒或溶细胞型超敏反应、第III型免疫复合物型超敏反应、第IV 型延缓型或迟发型超敏反应;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测23.在抗核抗体ANA检测方法中,常见的ANA荧光图形有：周边型核膜性、均质性、斑点性、核仁型、着丝点型;第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测24.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有：多发性骨髓瘤、原发性巨球蛋白血症、重链病、轻链病、良性单克隆免疫球蛋白病;25.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有：血清区带电泳、免疫电泳、免疫固定电泳、血清免疫球蛋白定量、本周蛋白的检测;第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验26.在免疫缺陷性疾病中,常见的免疫缺陷病一般特征包括：反复感染、恶性肿瘤、伴发自身免疫病、遗传倾向、多系统病变;27.在免疫缺陷性疾病中,原发性免疫缺陷性疾病主要有：原发性B细胞缺陷病、原发性T细胞缺陷病、原发性联合免疫缺陷病、原发性吞噬细胞缺陷病、原发性补体系统缺陷病;28.在免疫缺陷性疾病中,继发性免疫缺陷性疾病主要有：继发性T细胞功能缺陷、继发性低丙球蛋白血症、继发性吞噬细胞功能缺陷、继发性补体缺陷;第27章肿瘤免疫与免疫学检验29.在常见肿瘤标志物中,胚胎抗原类肿瘤标志物主要有：甲胎蛋白、癌胚抗原;30.在常见肿瘤标志物中,酶类肿瘤标志物主要有：前列腺特异性抗原PSA 、神经元特异性烯醇化酶NSE、α-L-岩藻糖苷酶测定AFU;31.在常见肿瘤标志物中,激素类肿瘤标志物主要有：人绒毛膜促性腺激素 hCG、降钙素calcitonin, CT;32.在常见肿瘤标志物中,蛋白质类肿瘤标志物主要有：β2-微球蛋白β2M 、铁蛋白;第28章移植免疫及其免疫检测33.在移植免疫实验中,排斥反应类型主要包括四种,分别是：超急性排斥反应、急性排斥反应、慢性排斥反应、移植物抗宿主反应GVHR;34.常见的组织或器官移植有：肾脏移植、肝脏移植、心脏移植与心肺联合移植、骨髓与其他来源的干细胞移植;三、单项选择题1.免疫应答是一个复杂的连续过程,依次分为哪几个阶段AA. 识别阶段、活化阶段、效应阶段B. 效应阶段、识别阶段、活化阶段C. 活化阶段、效应阶段、识别阶段D. 活化阶段、识别阶段、效应阶段2.抗原抗体反应形成明显沉淀物的最佳条件为CA. 抗体略多于抗原B. 抗原略多于抗体C. 抗原抗体比例合适D. 抗体显着多于抗原3.用已知抗原或抗体检测相应的抗体或抗原,是根据抗原抗体反应的AA. 特异性B. 比例性C. 可逆性D. 阶段性4.弗氏不完全佐剂的组成包括 BA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗5.沉淀反应中的钩状效应是因为BA. 抗体过量B. 抗原过量C. pH浓度过高D. pH浓度过低6.细胞活力测定常用的简便方法是BA. 伊红染色B. 台盼蓝染色C. HE染色D. 美蓝染色7.正常人外周血T淋巴细胞转化率为CA. <40%B. 40%～50%C. 60%～80%D. 80%8.在CH50试验中,溶血程度和补体含量之间的关系为 BA. 直线B. S形曲线C. 抛物线D. 正态分布曲线9.正常血清中,补体含量最高的是CA. C1B. C2C. C3D. C410.发生III型超敏反应性疾病的始动环节是 BA. 大分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜B. 中等大小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜C. 小分子免疫复合物沉积在毛细血管基底膜D. 补体激活11.用免疫荧光法检测ANA有多种核型,不正确的是DA. 周边型B. 均质型C. 斑点型或颗粒型D. 原生质型12.血清中检测到M蛋白不提示下列疾病DA. 多发性骨髓瘤B. 巨球蛋白血症C. 重链病或轻链病D. 肾病13.本-周蛋白的本质是BA. 尿中微球蛋白B. 尿中游离的免疫球蛋白轻链C. 尿中游离的白蛋白D. 尿中游离的管型物14.多发性骨髓瘤属于哪种细胞异常CA. T细胞B. B细胞C. 浆细胞D. 单核细胞15.血清中免疫球蛋白含量缺乏,一般应考虑何种病 CA. 轻链病B. 重链病C. 免疫缺陷病D. 免疫增殖病16.切除胸腺的新生动物的淋巴结中缺乏何种细胞 BA. B淋巴细胞B. T淋巴细胞C. 粒细胞D. 巨噬细胞17.沉淀反应中抗体过量的现象称为AA. 前带B. 后带C. 等价带D. 带现象18.弗氏完全佐剂的组成包括AA. 液状石蜡、羊毛脂、卡介苗B. 液状石蜡、羊毛脂C. 液状石蜡、卡介苗D. 羊毛脂、卡介苗19.直接Coombs试验检测的抗体是AA. 结合在红细胞表面的IgGB. 游离的IgGC. 结合在红细胞表面的IgMD. 游离的IgM20.单项扩散试验出现双环的沉淀线是因为DA. 两种抗原B. 两种抗体C. 抗体为多克隆抗体D. 抗原为性质相同的两个组分扩散率不同21.Ficoll液单次密度梯度离心后外周血细胞分布由上至下依次为CA. 单个核细胞、血小板和血浆、粒细胞、红细胞B. 血小板和血浆、粒细胞、单个核细胞、红细胞C. 血小板和血浆、单个核细胞、粒细胞、红细胞D. 血小板和血浆、单个核细胞、红细胞、粒细胞22.淋巴细胞转化为淋巴母细胞后,其形态学特征为BA. 细胞大小由大变小B. 出现核仁1～4个C. 胞浆内空泡逐渐消失D. 细胞伪足消失23.溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能BA. T细胞B. B细胞C. NK细胞D. 吞噬细胞24.Boyden小室常用于测定 BA. 白细胞吞噬功能B. 中性粒细胞趋化功能C. 白细胞杀伤功能D. 淋巴细胞抑制功能25.在溶血反应中检测试剂中,加入少量钙、镁离子的目的是CA. 使反应液保持等渗B. 抑制补体的活性C. 有助于补体激活D. 维持反应液的pH值26.乙型肝炎感染后最早出现的病毒标志物是AA. HBsAgB. HBeAgC. HBcAgD. 抗-HBs27.新生儿溶血症发生的条件是CA. 母亲Rh+、胎儿Rh+B. 母亲Rh+、胎儿Rh-C. 母亲Rh-、胎儿Rh+D. 母亲Rh-、胎儿Rh-28.造成系统性红斑狼疮病人免疫损伤的主要机制是 CA. I超敏反应B. II超敏反应C. III超敏反应D. IV超敏反应29.人类MHC位于第几对染色体上 CA. 第12对染色体短臂B. 第12对染色体长臂C. 第6对染色体短臂D. 第6对染色体长臂30.HLA交叉配型的目的是 BA. 检测供者血清有无抗受者HLA抗体B. 检测受者血清有无抗供者HLA抗体C. 检测供者淋巴细胞表面的HLA抗原D. 检测受者淋巴细胞表面的HLA抗原四、简答题第1章概论1.T淋巴细胞、B淋巴细胞和NK细胞的主要功能分别是什么2.在临床免疫学与免疫检验中,现代免疫学检验技术包括哪些方法第2章抗原抗体反应3.抗原抗体反应有哪些影响因素4.什么是标记免疫技术标记免疫技术按检测现象可分为哪些类型第3章免疫原和抗血清的制备5.常用的细胞破碎方法有哪些6.连接半抗原的载体有哪些制备半抗原性免疫原的方法有哪些7.免疫佐剂有哪些种类其作用机制是什么8.动物采血有哪些方法9.抗血清的鉴定包括哪些内容第5章凝集反应10.什么叫直接凝集反应什么叫间接凝集反应它们之间有何不同11.叙述抗球蛋白试验的类型、特点以及临床应用第6章沉淀反应12.单向扩散试验的概念和应用13.平板法双向免疫扩散试验的概念和应用14.免疫固定电泳的概念及临床应用15.抗原性质分析出现哪三种结果现象结果解释第14章免疫细胞的分离及其表面标志检测技术16.外周血单个核细胞分离,其分离介质的基本要求是什么17.外周血单个核细胞悬液富含淋巴细胞,但又混杂有单核细胞、红细胞和血小板,请问去除单核细胞的方法有哪些第15章免疫细胞功能检测技术18.T细胞功能检测内容有哪些19.B细胞功能检测内容有哪些20.NK细胞活性测定方法有哪些21.在检测T细胞的功能时,可选择T细胞增殖试验,请回答其基本原理第19章补体检测及应用22.在补体总活性测定中,一般采用CH50测定法,请说明其基本原理;23.在单个补体成分的测定中,一般采用免疫溶血法,请简述其概念及原理;24.请简述补体结合试验的概念、实验原理及结果解释第22章感染性疾病与感染免疫检测25.请列出目前公认的肝炎病毒种类26.乙型肝炎的诊断标志物主要检测指标有哪些27.在临床中,乙肝病毒检测常见的指标俗称：两对半有哪些28.什么叫先天性感染常见的病原菌“TORCH”只要只的是哪些病毒第23章超敏反应性疾病及其免疫检测29.试比较Ⅰ～Ⅳ型超敏反应特点30.使用青霉素可能引起哪些类型超敏反应简述其发病机制; 答：青霉素临床应用时有可能引起的超敏反应类型有：I、II、III、IV型;1I 型超敏反应：指青霉素过敏性休克,其发病机制是青霉素本身并无免疫原性,其降解产物为半抗原,与体内蛋白质结合而产生免疫原性,刺激机体产生特异性IgE,使机体处于致敏状态;当机体再次使用青霉素时,可发生过敏性休克;2II 型超敏反应：指青霉素过敏性血细胞减少症,其发病机制是青霉素降解产物能与血细胞膜蛋白或血浆蛋白结合获得免疫原性,从而刺激机体产生抗体;这种抗体与和药物结合的红细胞、粒细胞和血小板作用,引起药物性溶血性贫血、粒细胞减少症和血小板减少性紫癜;3III型超敏反应：指使用大剂量青霉素等药物可引起类似血清病样的反应,其发病机制是因为患者体内已产生特异性抗体,而大剂量药物尚未完全排除,两者结合形成中等大小免疫复合物所致;4IV型超敏反应：指青霉素引起的接触性皮炎,其发病机制是青霉素小分子半抗原与体内蛋白质结合成完全抗原,使T细胞致敏;当机体再次接触青霉素时,可发生接触性皮炎;31.血清病与血清过敏性休克分属哪型超敏反应比较发病机制;第24章自身免疫性疾病及其免疫检测32.自身免疫病都具有哪些共同特性33.什么叫自身抗体,其主要特点有哪些第25章免疫增殖性疾病及其免疫检测34.在免疫增殖性疾病中,常见的单克隆免疫球蛋白病有哪些35.在免疫增殖性疾病中,免疫球蛋白异常增生常用的免疫检测方法有哪些第26章免疫缺陷性疾病及其免疫检验36.请列出免疫缺陷病的一般特征37.原发性免疫缺陷性疾病有哪些38.继发性免疫缺陷病有哪些39.什么叫获得性免疫缺陷综合征其临床特点及典型特征是什么第27章肿瘤免疫与免疫学检验40.什么叫肿瘤抗原,其产生的可能机制有哪些41.什么叫肿瘤标志物,理想的肿瘤标志物具有哪些特性第28章移植免疫及其免疫检测42.什么叫移植排斥反应,根据排斥反应发生的时间、免疫损伤机制和组织病理改变,如何进行分类43.常见的组织或器官移植有哪些44.排斥反应的免疫监测包括哪些方面。

2017年主管检验技师考试临床免疫学和免疫检验练习题第十九章补体检测及应用

2017 第十九章补体检测及应用一、A11、总补体活性测定试验的原理属于A、溶血反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、中和反应2、不属于血清学反应的是A、凝集反应B、溶血反应C、溶菌反应D、补体结合反应E、Ⅳ型变态反应3、检测总补体活性，采用50%溶血试验是因为（）。

A、50%溶血试验比100%溶血试验简单B、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更敏感C、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点可节约时间D、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更为节省成本E、50%溶血作为终点好判断4、以免疫黏附作用清除免疫复合物的补体活性片段是（）。

A、C3aB、C2aC、C3bD、C5bE、Clq5、在总补体活性测定时，所测定的是（）。

A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合的能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力6、在经典激活途径中，补体识别的亚单位是（）。

A、C1B、C2C、C3D、CAE、C97、补体受体4（CR4）是哪一种受体（）。

A、C4bB、C4aC、iC3bD、C5aE、C1q8、关于补体旁路激活途径的叙述，错误的是（）。

A、激活物质是细胞壁成分B、从C3激活开始C、发挥效应比经典途径早D、亦有激活效应的扩大E、旁路途径在感染后期发挥作用9、补体结合试验的指示系统包括（）。

A、特异性抗体和补体B、特异性抗原和补体C、红细胞和溶血素D、加热灭活的病人血清E、特异性抗原和抗体10、补体结合试验的叙述，下列哪项是错误的（）。

A、新鲜豚鼠血清作为补体B、补体、SRBC和溶血素应预先定量C、出现溶血反应即为反应阴性D、不出现溶血反应即为反应阳性E、待测定系统中的抗原与抗体相对应，形成复合物激活补体，出现溶血11、以下哪项与补体结合试验无关（）。

A、抗原B、抗体C、补体D、溶血素E、酶12、补体结合试验结果阴性时出现（）。

A、血凝B、血凝抑制C、溶血D、不溶血E、沉淀13、可抑制MAC形成的补体膜调节因子是（）。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。

经典途径
2、补体激活的替代途径

替代途径的激活剂：某些细菌、革兰氏阴 性菌的内毒素、细菌的脂多糖、肽聚糖、 葡聚糖、酵母多糖、凝聚的IgG4和IgA聚 合物等。


激活过程：C3是启动替代途径并参与其 后级联反应的关键分子。 经典途径产生或自发产生的C3b与B因子 结合，血清D因子的作用，形成C3转化 酶（ C3bBb ）， 不稳定，与血 清 P 因 子 结 合 则 形 成 稳 定 的 C3 转 化 酶 （ C3bBbP ）； C3转化酶水解C3，形 成C5转化酶（ C3bnBb 或 C3bnBbP ）；
免疫调节作用 C3可参与捕捉并固定抗原，通过与抗原提呈细 胞上的CR1及CR2受体结合，使抗原易被APC处 理和提呈 作用于多种免疫细胞，调节细胞的增殖分化： C3b与B细胞表面CR1结合，促进B细胞增殖分 化 参与调节多种免疫细胞效应功能：NK结合C3b 增强ADCC作用

第二节 补体总活性测定

激活的特点： 可以识别自己与非己：C3b的中止与 激活 替代途径是补全权系统重要的放大机 制：替代途径C3转化酶对经典途径补 体的活化是一种放大机制。
3、MBL途径

激活物：病原微生物感染所诱导产生的急性期蛋白 ，如 MBL、CRP等。

激活过程：MBL与细菌的甘露糖残基结合；再与丝氨酸蛋 白 酶 结 合 ， 形 成 MBL 相 关 的 丝 氨 酸 蛋 白 酶 （ MASP-1 、 MASP-2），MASP具有与活化的C1q同样的生物学活性，可 水解C4和C2，形成C3转化酶；其后过程与经典途径相同。

甘 露 聚 糖 结 合 凝 集 素 （ mannan binding tectin，MBL） 途 径 ， 简 称 MBL途径：MBL结合至细菌而启动激 活的途径，此途径不依赖于抗原抗体 复合物的形成，在感染的早期就能发 挥免疫防御效应，为急性期蛋白途径。
1、补体激活的经典途径

主要激活物：IgG3、 IgG1 、IgG2和IgM 类抗体与相应抗原形成的免疫复合物。 此外还发现有许多因子可以激活此途径， 如细菌脂多糖、dsDNA、C-反应蛋白和 心肌线粒体等。
第十九章 补体检测及应用
第一节
一、补体的性质
概
述
1、补体的概念与来源

补体（complement，C）又称补体系统，是 一组存在于人和脊椎动物血清与组织液中具 有酶样活性、不耐热和功能上连续反应的糖 蛋白，包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白, 是抗体发挥溶细胞作用的必要补充条件。
体内多种组织细胞均能合成补体成分，其中 肝细胞和巨噬细胞是补体的主要产生细胞。



补体 成分
分子量
电泳 区带
血清含量参考值 （μg/ml）
补体 成分
分子量
电泳 区带
血清含量参考值 （μg/ml）
C1q C1r C1s C2
390 95 85 117
γ2 β α β1
70 35 35 20~30
C9 B D P
C1INH
79 95 25 220
α β α γ2
240 210~240 2 25

2、补体系统的组成

补体并非单一成分，是由30余种活性成分 组成的补体系统，是体内最复杂的一个限 制性蛋白酶解系统（limited proteolysis system）。 按其生物学功能分为三类：

1、补体系统的固有成分：指存在于体液中参与 补体激活过程的补体成分。 经典激活途径： C1q、C1r、C1s、C4、C2； 甘露聚糖结合凝集素激活途径：MBL、丝 氨酸蛋酶； 旁路激活途径：B因子、P因子、D因子； 共同末端通路：C3、C5、C6、C7、C8、C9。
激活特点：MBL途径开始于急性期蛋白与病原体的结合， 而不是抗原抗体复合物形成。

6、三种激活途径的比较 4、共同末端效应

C5转化酶裂解C5是补体级 联反应中最后一个酶促步骤。 若补体激活发生在脂质双层 上，则形成MAC； 若补体激活发生在没有靶细 胞的血清中则有关补体成分 可同S蛋白形成亲水的无溶 细胞活性的SC5b～7、 SC5b～8及SC5b～9。
3、补体系统的命名原则

参与补体经典激活途径的固有成分,按其被发 现的先后分别命名为:C1(q、r、s)、C2、…C9； 补体系统的其他成分则以因子命名，用英文 大写字母表示：如B因子、D因子、P因子； 补体活化后的裂解片段以该成分的符号后加 小写英文字母表示，通常a为小片段，b为大 片段，但C2a为大片段，C2b为小片段;

正常血清中补体含量相对稳定，补体 蛋白约占总蛋白量的10%左右，补体 各组分含量相差较大，其中C3含量 最高，达1-2mg/ml，Df最低。 补体的性质不稳定，较其他蛋白质对 理化因素更为敏感，加热、紫外线照 射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均 可破坏补体。


在0～10 ℃补体活性保持3-4天， -20 ℃以下冷冻 或真空干燥可使其活性保持较长时间，标本保 存应臵于-20 ℃以下。 补体灭活：加热56℃30min可使血清中绝大部分 补体失去活性，故补体活性检测应尽快进行。 补体代谢主要在血液和肝脏中进行，代谢率快， 每天约更新一半。 各种属动物间血中补体含量不同，豚鼠血清中 含量丰富，故实验室多采用豚鼠血清作为补体 来源。
C3
C4 C5 C6
190
180 190 128
β1
β2 β2 β2
1300
430~600 75 60
150
1100 93 159
α
180
250
C4bp I因子 H因子
β β
50 400~480
C7
C8
120
163
β2
γ1
55
200
S因子
88
α
500
二、补体的活化途径

生理情况下，血清中大多数补体蛋白以酶原形式存 在于体液中，一旦被活化物质激活，补体各组分便 产生连锁酶促反应即级联（cascade）反应，表现出 相应的生物活性。

三、补体的生物学功能

补体系统的生物学作用分为两大类： 补体在细胞膜表面激活并形成MAC，介导细胞溶解； 补体裂解片段介导的各种生物学效应。
补体系统的生物学功能： 补体介导的细胞溶解作用


调理吞噬和免疫粘附作用：是机体抗感染的主要 防御机制。 补体的调理吞噬：补体裂解片段C3b、C4b、 iC3b等可与细菌、病毒等颗粒性物质结合，促 进吞噬细胞对其吞噬； 免疫粘附作用：C3b与病毒或IC等结合后，可 介导后者与具有C3b受体的人RBC、PLT等结合， 从而有利于吞噬细胞捕获和清除。
2、补体调节蛋白：指参与调控补体活化的抑制 因子或灭活因子，多以其功能命名。 C1抑制物（C1 inhibitor，C1INH）、 C4结合蛋白（C4BP）、I因子、H因子、S蛋白 和膜协同因子蛋白（membrane cofactor protein，MCP）。 3、补体受体（complement receptor，CR）：指 介导补体活性片段或调节蛋白生物学效应的各 种受体，以其结合对象来命名，如C1rR 、 C5aR/C3aR、C1qR，对C3片段的受体则用CR1CR5表示，调节蛋白的受体。

始动环节：C1q与IC中抗体分子的补体 结合位点相结合。IgG分子必须要两个 或以上，而IgM一个分子 即可激活C1q。

激活过程：补体C1-C9共11种成分全部参与的 活化途径。经典途径的活化过程可分为识别、 活化和膜攻击三个阶段。 识别阶段：C1q识别免疫复合物至C1酯酶 形成（小片段C1s）。 活化阶段：活化的C1s依次裂解C4和C2， 形成具有酶活性的C3转化酶（ C 4b 2b ） 和C5转化酶（C 4b2b3b ）的过程。


H因子： 竞争性抑制B因子与C3b的结合，阻止C3转 化酶的形成 促进I因子灭活C3b I因子：在C4bp和H因子的协同作用下可使C4b 和C3b裂解。 S蛋白：与C5b67结合，阻止其插入细胞脂膜而 抑制MAC形成。



同种限制因子（HRF）：与C8蛋白结合而干扰 C9和C8相结合，使自身细胞膜上不能形成MAC。 衰变加速因子（DAF）： 竞争性抑制B因子与C3b的结合，阻止C3转 化酶的形成； 促进 C 4b 2b 分解，从中臵换出C2b使C3转 化酶失活；
（一）CH50测定法的实验原理

补体最主要的活性是溶细胞作用。特异性抗 体与红细胞结合后可激活补体，导致红细胞 表面形成跨膜小孔，使胞外水分渗入，引起 红细胞肿胀而发生溶血。


具有酶活性的成分或复合物在其字符上画一 横线表示，如 C3bBb 等； 灭活的补体片段在其字符前加英文字母i表示， 如失活的C3b称为iC3b;
补体调节蛋白多以其功能命名：C1抑制物、 C4结合蛋白等。


4、补体的性质

补体大多为糖蛋白，其中C1q分子量最大， D因子最小；

血清蛋白电泳中，补体大多位于β球蛋白区， 少数位于γ 或α球蛋白区，如C1q、C8等为γ 球蛋白，C1s、C9为α球蛋白。
调节蛋白的调节：
补体激活启动阶段的调节； 对单一补体蛋白转化酶的调节； 对MAC形成的调节； 某些细胞表面存在的补体受体分子也参与补体 活化的调节。


C1抑制物（C1INH）：以共价结合C1r、C1s，防止 C1的自发激活，亦可使C1酯酶失去裂解C4和C2的能 力。 C4结合蛋白（C4bp）： 竞争性抑制C4b与C2的结合，阻止C3转化酶的形 成； 促进 C 4b 2b 分解，从中臵换出C2b使C3转化酶 失活； 辅助I因子裂解游离的C4b。

补体总活性测定是对激活后补体最终效 应的检测方法，可借此反映补体的整体 功能。 补体总活性测定方法是以红细胞的溶解 为指示，以50%溶血为判断终点，称为 CH50。