第十九章 补体检测及应用

补体结合试验的原理及应用1. 原理介绍补体结合试验是一种常见的实验方法，用于检测血清或体液中的溶菌酶的活性。

其原理基于抗原-抗体反应和补体激活的过程。

在一个完整的补体结合试验中，通常需要包括三个基本步骤：补体激活、免疫复合物的形成和补体结合。

1.1 补体激活补体是一组血浆蛋白，在机体的免疫防御机制中起着关键的作用。

当体内存在抗原时，抗原与特异性抗体结合形成免疫复合物。

这些免疫复合物可以激活补体系统。

补体分为经典途径和替代途径，其中经典途径是由免疫复合物激活补体的主要途径之一。

1.2 免疫复合物的形成免疫复合物是由抗原与抗体结合形成的复合物。

当抗原与抗体结合形成免疫复合物后，免疫复合物会引起补体激活。

1.3 补体结合补体结合是指补体成分与免疫复合物结合的过程。

当补体的C1q成分与免疫复合物结合后，C1q会激活补体的经典途径，进而引发连续的级联反应，最终形成一个膜攻击复合物（MAC），导致细胞膜的破坏。

2. 应用领域补体结合试验在医学检验、疾病诊断等领域具有广泛的应用价值。

以下是一些补体结合试验的应用领域：2.1 免疫疾病的诊断补体结合试验可用于检测自身免疫性疾病和某些免疫缺陷病的诊断。

例如，系统性红斑狼疮患者血清中的补体结合活性通常较低。

2.2 感染性疾病的诊断补体结合试验可用于检测某些感染性疾病的诊断，如流行性感冒、风疹、百日咳等。

在感染过程中，补体会参与抗体介导的免疫反应，通过补体结合试验可以检测到相关抗体和免疫复合物的形成。

2.3 肿瘤标志物的检测补体结合试验对某些肿瘤标志物的检测也具有一定的应用价值。

例如，前列腺特异性抗原（PSA）是早期发现前列腺癌的一个重要指标，通过补体结合试验可以检测血清中的PSA水平。

2.4 药物敏感性的评估补体结合试验可以用于评估药物的敏感性。

例如，某些抗肿瘤药物的疗效可能与补体结合试验的结果相关，通过补体结合试验可以评估药物对免疫复合物的效应。

3. 结语补体结合试验作为一种重要的实验方法，可以应用于医学检验、疾病诊断等多个领域。

第十九章补体检测及应用本章考点1.概述2.补体的活化途径3.有关补体测定的试验4.补体测定的应用补体是存在于人和脊椎动物正常新鲜血清及组织液中的一组具有酶样活性的球蛋白。

补体系统是补体加上其调节因子和相关膜蛋白共同组成一个反应系统，称为补体系统。

补体系统参与机体的抗感染及免疫调节，也可介导病理性反应，是体内重要的免疫系统和放大系统。

第一节补体系统的组成和性质一、命名根据l968年WH0命名委员会对补体系统进行了统一命名。

参与补体激活经典途径的固有成分按其被发现的先后顺序分别称Cl、C2、……C9。

Cl由Clq、Clr、Cls 三种亚单位组成；补体系统旁路激活途径及调节因子中另一些组分以英文大写字母表示，如B因子、D因子、P因子、H 因子等；补体调节成分多以其功能进行命名，如C1抑制物、C4结合蛋白、衰变加速因子等；补体活化后的裂解片段以该成分的符号后面加小写英文字母表示，如C3a、C3b等；具有酶活性的成分或复合物在其符号上划一横线表示，如、，灭活的补体片段在其符号前面加英文字母i表示，如iC3b等；对补体受体以其结合对象命名，如CLrR、C5Ar、对C3片段受体则用CRl、CR2……CR4表示。

二、分类构成补体系统包括30余种活性成分，按其性质和功能可以分为三大类：1.在体液中参与补体活化级联反应的各种固有成分；2.以可溶性形式或膜结合形式存在的各种补体调节蛋白；3.结合补体片段或调节补体生物效应的各种受体。

三、理化性质补体的大多数组分都是糖蛋白，且多属于β球蛋白，约占血清球蛋白总量的l0%；Clq，C8等为γ球蛋白；Cls，C9为α球蛋白。

正常血清中各组分的含量相差较大，C3含量最多，C2最低。

各种属动物间血中补体含量也不相同，豚鼠血清中含有丰富的补体，故实验室多采用豚鼠血作为补体来源。

补体性质不稳定，易受各种理化因素影响，如加热、机械振荡、酸碱、酒精等均可使其失活；在0℃～10℃下活性只保持3～4天，冷冻干燥可较长时间保持其活性；加热56℃30min可使血清中绝大部分补体组分丧失活性，称为灭活或灭能。

临床医学检验技术(士)：补体检测及应用1、单选对某处理后的复合地基进行现场竖向抗压载荷试验，实测得三个测点的复合地基承载力特征值分别为：170kPa、178kPa、184kPa。

试问，该复合地基承载力特征值（江南博哥）（kPa）应为下列（）项。

（）A.170B.177.3C.178D.188正确答案：B2、单选形成有嗜细胞作用的攻膜复合物，参与机体的特异性和非特异免疫应答的途径为（）A.经典途径B.替代途径C.共同通路D.MBL途径E.外源途径正确答案：C参考解析：补体的激活主要有经典、替代和MBL三种途径。

经典途径是以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂，补体C1～C9全部参与的激活过程；替代途径由病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3，然后完成C5～C9的激活过程；MBL途径由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动的激活过程；三种途径均会通过共同的末端通路，形成有嗜细胞作用的攻膜复合物，参与机体的特异性和非特异免疫应答。

3、单选总补体活性测定试验中，试验结果判定终点为（）A.不溶血B.25%溶血C.50%溶血D.75%溶血E.100%溶血正确答案：C参考解析：总补体活性通过溶血试验测定，因溶血程度与补体活性呈"S"曲线，50%溶血时，补体活性变化对溶血程度影响最大，试验最敏感。

因此，采用50%溶血作为试验结果判定终点。

4、单选由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素与病原体结合后启动的激活过程为（）A.经典途径B.替代途径C.共同通路D.MBL途径E.外源途径正确答案：D参考解析：补体的激活主要有经典、替代和MBL三种途径。

经典途径是以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂，补体C1～C9全部参与的激活过程；替代途径由病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3，然后完成C5～C9的激活过程；MBL途径由急性炎症期产生的甘露糖结合凝集素(MBL)与病原体结合后启动的激活过程；三种途径均会通过共同的末端通路，形成有嗜细胞作用的攻膜复合物，参与机体的特异性和非特异免疫应答。

2017 第十九章补体检测及应用一、A11、总补体活性测定试验的原理属于A、溶血反应B、凝集反应C、沉淀反应D、补体结合反应E、中和反应2、不属于血清学反应的是A、凝集反应B、溶血反应C、溶菌反应D、补体结合反应E、Ⅳ型变态反应3、检测总补体活性，采用50%溶血试验是因为（）。

A、50%溶血试验比100%溶血试验简单B、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更敏感C、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点可节约时间D、以50%溶血作为终点较100%溶血作为终点更为节省成本E、50%溶血作为终点好判断4、以免疫黏附作用清除免疫复合物的补体活性片段是（）。

A、C3aB、C2aC、C3bD、C5bE、Clq5、在总补体活性测定时，所测定的是（）。

A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合的能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力6、在经典激活途径中，补体识别的亚单位是（）。

A、C1B、C2C、C3D、CAE、C97、补体受体4（CR4）是哪一种受体（）。

A、C4bB、C4aC、iC3bD、C5aE、C1q8、关于补体旁路激活途径的叙述，错误的是（）。

A、激活物质是细胞壁成分B、从C3激活开始C、发挥效应比经典途径早D、亦有激活效应的扩大E、旁路途径在感染后期发挥作用9、补体结合试验的指示系统包括（）。

A、特异性抗体和补体B、特异性抗原和补体C、红细胞和溶血素D、加热灭活的病人血清E、特异性抗原和抗体10、补体结合试验的叙述，下列哪项是错误的（）。

A、新鲜豚鼠血清作为补体B、补体、SRBC和溶血素应预先定量C、出现溶血反应即为反应阴性D、不出现溶血反应即为反应阳性E、待测定系统中的抗原与抗体相对应，形成复合物激活补体，出现溶血11、以下哪项与补体结合试验无关（）。

A、抗原B、抗体C、补体D、溶血素E、酶12、补体结合试验结果阴性时出现（）。

A、血凝B、血凝抑制C、溶血D、不溶血E、沉淀13、可抑制MAC形成的补体膜调节因子是（）。

补体测定的临床应用补体系统及其单个成分的活性与浓度单位，在参与机体的各种生理、病理状态中发挥重要的生物学效应。

检测补体的单个成分及补体的活性测定对于机体免疫系统的功能评价，疾病的诊断与治疗，流行病学调查等均有重要作用。

同时，根据补体具有的溶细胞活性和联级反应的性质，还可利用补体作为一种试剂，参与很多实验反应，用以鉴定抗原、抗体和各种病原体。

补体的检测技术已成为免疫实验技术中的重要组成部分。

补体检测技术可应用于下述情况。

1．检测补体的功能，如CH50和AH50试验。

2．补体单个成分及其裂解产物的测定，如C1q、C 3、C4、C 3a和补体受体的测定等。

3．相关疾病时补体的检测（1）免疫性疾病：如自身免疫病时C1、C2 、C3、C4 和Hf 等缺陷；变态反应如Ⅲ型超敏反应为免疫复合物型，其中C3a、C5a 等过敏毒素，C567等趋化因子的作用导致组织损伤。

（2）与补体有关的遗传性疾病：如C3缺陷导致严重感染，C1抑制物缺陷与遗传性血管性水肿，细胞表面CR1缺陷与CIC清除障碍（SLE），If、Hf 缺陷与肾小球肾炎，DAF缺陷与阵发性夜间血红蛋白尿等。

（3）补体含量显著降低的疾病：如消耗增多见于SLE、活球蛋白血症、自身免疫性溶血性贫血、类风湿性关节炎、移植排斥反应；细菌感染，特别是革兰阴性菌感染时，常常由于补体替代途径的活化使补体水平降低；大量丧失见于大面积烧伤、大出血和肾病综合征等；合成不足则见于急慢性肝炎、肝硬化、肝细胞癌患者和营养不良等。

（4）高补体血症：少见。

主要见于感染恢复期和某些恶性肿瘤患者，常为C4、C2、C3 和C9 的升高。

在一些急性期反应时补体升高常伴随其他血浆蛋白的改变，如补体和C反应蛋白升高，而转铁蛋白降低。

此外，急性病毒性肝炎、心肌梗死、糖尿病，甚至正常妊娠也可观察到补体值增高。

4．补体参与的试验即利用补体作为试剂而设计的实验，例如HLA 分型的补体依赖性细胞毒试验（complement－dependent cellular cytotoxicity，CDcC）。

补体的检测及应用补体是一种由肝脏产生的蛋白质，具有重要的免疫功能，包括参与溶菌作用、免疫介导细胞毒性和加强细胞杀菌作用等。

由于其在免疫系统中的重要作用，补体检测和应用已广泛应用于许多领域。

一、补体的检测：1. 补体蛋白含量检测：通过血液样本分析检测补体蛋白的含量来评估补体系统的功能。

这个方法可以简单地通过测量血清中C3、C4、C5、C6、C7和C9等成分的含量来进行。

2. 补体激活检测：可以通过补体激活的程度来评估补体系统的功能。

这个方法可以通过检测血清样本特定的补体激活产物（如C3b）或测量补体激活后的补体活性来进行。

3. 补体功能检测：通过测量血浆免疫复合物的裂解能力来评估补体系统的功能。

最广泛的方法是溶菌试验，补体可以通过特定细菌溶解来确认其功能。

二、补体的应用：1. 临床诊断：补体检测可以用于存粹定义疾病的定义、确定疾病的严重性和监测疾病的发展。

例如，C1抑制物缺乏或C1抑制物的功能障碍会导致血清中C4水平下降且导致严重的免疫复合物疾病。

另外，二十percent的SLE患者会有C1q水平下降导致疾病发展。

2. 药物研发：补体调节剂（CRs）是一类可以调节机体免疫反应的药物。

CRs可以在自然免疫原和抗体免疫原触发下调节和抑制补体剂量的形成。

最近的补体调节剂升华是Eculizumab，用于治疗补体介导的疾病（如干燥性年龄相关性黄斑变性）。

补体调节剂的研发和应用使得可以预防、治疗和管理炎症性疾病及其相关的严重及病症。

3. 细胞治疗：补体介导的免疫细胞杀菌作用是广泛应用于器官移植、抗肿瘤疗法、血液病学的细胞治疗的方法。

例如，火棘蛋白是细胞杀菌作用的重要成分，通过介导免疫介导的细胞毒性细胞可以对肿瘤细胞进行杀菌作用。

4. 生物防治：一些化外的细菌分泌一定的天然杀菌分子（如锈色素），从而在补体的介导下实现对常规文化法无法有效处理的耐药菌的杀菌作用。

总的来说，补体的检测和应用在现代生物学生物医学研究中起着重要的作用。

补体的实验原理及应用1. 补体的概述补体是一组在免疫反应中发挥重要作用的蛋白质，其功能涉及细胞毒性、溶菌、炎症反应等多个方面。

本文将详细介绍补体的实验原理及其在医学和生物研究中的应用。

2. 补体的实验原理补体实验通常涉及体外实验和体内实验，下面将分别介绍。

2.1 体外实验•补体激活途径：补体激活途径包括经典途径、选择性途径和替代途径。

具体实验中可以通过添加适当的实验物质或刺激条件来激活补体。

•补体活性检测：常用的补体活性检测方法包括补体结合试验、补体溶菌试验、补体炎症反应检测等。

2.2 体内实验•补体缺陷小鼠模型：通过基因敲除技术或基因突变技术产生补体缺陷小鼠模型，以研究补体在疾病发生发展中的作用。

•补体活性测定：通过测定血清或组织中的补体活性水平，评估体内补体系统的功能状态。

•免疫组化：通过免疫组化技术，检测组织中特定的补体蛋白表达情况。

3. 补体的应用补体在医学和生物研究中有多种应用，下面将分别介绍。

3.1 补体在免疫学研究中的应用•免疫检测：补体可以作为检测免疫应答和炎症反应的指标。

通过补体结合试验等方法，可以评估免疫功能的状态。

•自身免疫病研究：补体在自身免疫疾病的发生发展中起到重要作用。

研究补体与自身免疫疾病的关系，有助于了解疾病的发病机制和寻找潜在的治疗靶点。

3.2 补体在炎症反应研究中的应用•炎症反应模型：补体参与调节炎症反应过程，研究补体在不同炎症条件下的变化，可以帮助我们了解炎症的发生机制。

•炎症治疗靶点：补体在炎症疾病的治疗中有一定潜力。

通过研究补体与炎症相关的机制，可以为炎症治疗的靶点开发提供新的思路。

3.3 补体在肿瘤免疫研究中的应用•抗肿瘤免疫疗法：补体在抗肿瘤免疫疗法中发挥了重要的作用。

一些新型的肿瘤免疫疗法通过激活和增强补体系统的功能，来达到增强免疫杀伤作用的目的。

3.4 补体在感染病研究中的应用•感染病模型：通过补体参与的感染病模型的建立，可以研究感染病的病理生理过程，寻找抗感染药物的靶点。

补体结合实验的原理及应用1. 原理补体结合实验是一种常用的实验方法，用于检测抗原与抗体之间的结合情况。

补体是一种由血浆中的多种蛋白质组成的体液免疫系统的重要组成部分，参与了机体的非特异性防御反应和特异性免疫反应。

补体结合实验主要包括补体结合免疫沉淀实验和补体结合裂解实验两种常见方法。

1.1 补体结合免疫沉淀实验补体结合免疫沉淀实验是通过观察抗原与抗体结合后，补体与免疫复合物结合并沉淀的现象来判断结合是否发生。

该实验常用于检测血清中的抗体，可以用于诊断某些疾病和监测免疫应答。

具体步骤如下： - 将待测抗原添加到含有抗原特异性抗体的试管中； - 孵育一段时间，使抗原与抗体发生结合； - 加入新鲜补体，孵育一段时间，补体与免疫复合物结合，形成沉淀； - 观察是否有沉淀产生，证明抗原与抗体发生了结合。

1.2 补体结合裂解实验补体结合裂解实验是通过观察抗原与抗体结合后，是否能引起补体的激活与溶解来判断结合是否发生。

该实验常用于研究免疫复合物的免疫学特性和机制。

具体步骤如下： - 将待测抗原添加到含有抗原特异性抗体的试管中； - 孵育一段时间，使抗原与抗体发生结合； - 加入补体，并孵育一段时间，观察有无溶解现象； - 观察是否有溶解现象产生，证明抗原与抗体发生了结合。

2. 应用补体结合实验在临床实践中广泛应用于免疫学研究和临床诊断，具有以下应用价值：2.1 诊断疾病补体结合实验可以用于诊断多种疾病。

例如，在乙型肝炎病毒感染的诊断中，可以通过补体结合实验检测血清中的抗原与抗体的结合情况，进而发现是否存在病毒感染。

2.2 监测免疫应答补体结合实验可以用于监测机体的免疫应答情况。

补体是免疫反应的关键组成部分，参与了机体的免疫防御和免疫调节过程。

通过补体结合实验，可以评估机体的免疫功能是否正常，从而提供临床诊断和治疗的参考依据。

2.3 研究免疫复合物的特性及机制补体结合实验也可以用于研究免疫复合物的特性及机制。

通过观察抗原与抗体结合后补体的激活与溶解情况，可以深入了解免疫复合物与机体免疫系统的相互作用过程，为研究免疫学机制提供重要的实验手段。

补体实验的实验原理及应用补体是一种存在于血液中的分子，是人体免疫系统中的重要组成部分。

补体由多种蛋白质分子组成，包括C1至C9等成分，它们能够通过一系列的反应，产生一系列的效应，发挥重要的生理功能。

为了检测补体的活性和功能，在实验室中开展了一系列的补体实验，其原理和应用在医学、生物学等领域被广泛应用。

补体实验通常基于一系列的反应机制，这些反应机制包括补体级联反应、抗原/抗体反应以及炎症过程等。

在补体级联反应中，初始激活C1的补体酶产生C4b2a复合物，破坏血细胞膜表面的蛋白质和多糖，并吸引其他补体蛋白质的加入，形成复合体，从而导致细胞破裂和溶解。

在抗原抗体反应中，抗体能够结合特定的抗原，激活补体系统，形成补体-抗原-抗体复合物，从而引发一系列的生化反应，诱导炎症和细胞毒性作用。

补体实验在医学、生物学等诸多领域中得到广泛运用。

医学研究中，补体实验被用来研究免疫反应、病毒感染、自身免疫性疾病、感染性疾病、肝功能等，帮助医生诊断和治疗这些疾病。

生物学研究中，补体实验被用来研究生物膜的破坏机制、免疫细胞的激活与调节机制、表面抗原的识别与结合等，为疾病的治疗和药物研发提供了重要的科学参考。

补体实验涉及到多个标准实验方法和技术。

例如，补体溶血实验是检测血清对外源红细胞溶血作用的实验方法，可以测定补体的细胞溶解能力；补体结合实验是基于抗原抗体反应中的补体结合作用，测定补体能否与特定的抗原-抗体复合物结合；补体凝集实验是一种直观的图像化技术，测定补体是否能够串联反应形成凝集物等。

综上所述，补体实验时一种重要的实验技术，其原理和应用在医学、生物学等多个领域中得到广泛应用。

随着科技的不断发展，新的实验方法和技术也不断涌现，帮助科学家们更加深入地研究补体和免疫系统，为疾病的治疗和预防提供了更为可靠的理论依据和实验数据。

第十九章补体检测及应用一、A11、在总补体活性测定时，所测定的是（）。

A、红细胞与补体结合的能力B、补体溶解红细胞的活性C、补体溶解致敏红细胞的活性D、溶血素与补体结合的能力E、特异性抗体与红细胞结合的能力2、CH50试验测定的是（）。

A、总补体量B、总补体浓度C、总补体溶血活性D、总补体体积E、单个补体3、补体活化过程中，产生具有趋化因子活性的片段是（）。

A、C3aB、C5aC、C4aD、C4bE、ic3b4、补体结合试验的指示系统包括（）。

A、特异性抗体和补体B、特异性抗原和补体C、红细胞和溶血素D、加热灭活的病人血清E、特异性抗原和抗体5、在经典激活途径中，补体识别的亚单位是（）。

A、C1B、C2C、C3D、CAE、C96、补体结合试验的叙述，下列哪项是错误的（）。

A、新鲜豚鼠血清作为补体B、补体、SRBC和溶血素应预先定量C、出现溶血反应即为反应阴性D、不出现溶血反应即为反应阳性E、待测定系统中的抗原与抗体相对应，形成复合物激活补体，出现溶血7、梅毒确诊试验为（）A、RPRB、USRC、TRUSTD、FTA-ABSE、VDRL8、下列补体组分中参与吞噬调理作用的是（）。

A、C1qB、C1C、C3b+C4bD、C5E、C1γ9、C1多聚体复合物形成时，必须有下述哪种无机离子参与（）。

A、Ca2+B、Mg2+C、Cu2+D、Fe3+E、Fe2+10、可抑制MAC形成的补体膜调节因子是（）。

A、S蛋白B、H因子C、DAFD、MCPE、HRF11、关于补体的叙述，下列哪项是正确的（）。

A、血清中大多数补体成分均以无活性的酶前状态存在B、多数补体分子属于γ球蛋白C、补体固有成分对热稳定D、补体的含量因抗原刺激而增加E、补体各成分均由肝细胞合成12、补体成分灭活的标准温度和时间是（）。

A、0℃，24小时B、4℃，2小时C、37℃，30分钟D、56℃，30分钟E、100℃，15分钟13、检测总补体活性，采用50%溶血试验是因为（）。

第十九章补体检测及应用补体是一组存在于人和脊椎动物血清中具有酶样活性、不耐热的糖蛋白。

补体不是单一成分，其在功能效应上是以连续反应程序进行的，故又称补体系统。

补体的存在与抗原性异物的刺激无关，在正常人血清中，其含量相对稳定，但在某些疾病发生时，补体的含量及其活性可发生改变。

第一节概述一、补体成分的含量与理化特性（一）补体成分的含量补体大多为糖蛋白，属于β球蛋白，C1q、C8等为γ球蛋白，C1s、C9为α球蛋白。

正常血清中补体各组分含量相差较大，其中C3含量最高。

补体活化后的裂解片段以该成分的符号后加小写英文字母表示，通常a为小片段，b为大片段，但C2a 为大片段，C2b为小片段。

体内合成补体成分的部位和细胞有多种，以肝脏、脾脏、小肠等组织和巨噬细胞、上皮细胞、血小板等细胞为主。

（二）补体的理化特性补体的性质不稳定，易受各种理化因素的影响，加热、紫外线照射、机械振荡、酸碱和酒精等因素均可破坏补体。

在-10℃活性保持3～4天，冷冻干燥可较长时间保持其活性，加热56℃30分钟灭活（灭能），故补体活性检测应尽快进行。

标本保存应置于-20℃以下。

二、补体的活化途径1.经典途径是以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活的途径，最早被人们所认识，故又称第一途径或传统途径，是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。

2.MBL途径是甘露聚糖结合凝集素（MBL）结合至细菌启动的途径。

其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋白产生的MBL和C反应蛋白等，后者与病原体结合而启动绕过C1的MBL途径。

3.旁路途径是通过微生物表面等膜性物质，从C3开始，由B因子、D因子参与激活过程，也称第二途径、旁路途径。

这种激活方式不依赖于特异性抗体的形成，在感染早期可为机体提供有效的防御机制。

第二节补体总活性测定已应用于科研和临床的方法包括：基于经典途径的CP-CH50和应用于C3旁路检测的AP-CH50。

CP-CH50是临床常规进行的补体总活性检测项目，AP-CH50尚未列入检验常规。