徒手切片制作方法

、目的与要求1、学习并掌握临时装片的制作方法和步骤。

2、学习徒手切片技术。

3、了解细胞基本结构和厚角组织的特点。

二、材料和用品1、自备材料：解剖器（镊子、解剖针、单面刀片或双面刀片）；洋葱鳞茎、青红椒、芹菜叶柄、女贞叶片或其它植物的叶片、胡萝卜块等。

2、其它材料和用品：显微镜、盖玻片、载玻片、纱布、蒸馏水、吸水纸、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、纯甘油、碘—碘化钾稀溶液、培养皿、吸管。

三、实验内容1、临时装片的制作方法2、徒手切片方法四、实验方法要观察、研究植物细胞、组织和器官的微细结构，以及一些很微小的藻、菌植物等，这些用肉眼是无法看到的，必须借助于显微镜来观察，要用显微镜观察，首先必须制成各种制片，放在显微镜下才能观察。

制片的方法很多，这里着重介绍临时装片法和徒手切片的方法技术。

1、临时装片的制作方法临时装片法是用少量的新鲜植物材料，如单个细胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料（如丝状或叶状的藻类、菌类、蕨类的原叶体和孢子囊、纤细的苔藓植物等等），把这些材料放在载玻片的水滴中，再盖上盖玻片做成玻片标本的方法。

这种方法制成的标本，可以保持材料的生活状态和天然的色彩。

此法一般多做为临时观察使用，也可根据需要选择适宜的染料染色，制成永久制片或用某些化学试剂作组织化学反应。

临时装片的制作方法和步骤如下：（1）清洁玻片：将盖玻片和载玻片用清水洗净，再用纱布擦干，擦玻片时用左手食指和拇指夹住玻片的两边，右手食指和拇指包住纱布，同时擦到的玻片的两面，用力要均匀。

注意：由于盖玻片很薄，所以擦盖玻片时要特别小心，用力要轻，右手食指和拇指要轻轻捻动，以免把盖玻片捏破。

（2）放置材料：先将载玻片平放在桌面上，于载玻片中央滴一滴蒸馏水或稀甘油，然后用镊子镊取或吸管吸取少量要观察的材料（如洋葱鳞叶表皮或水绵……），放在载玻片中央的水滴或甘油中，再用镊子和解剖针将材料展平或分散开，勿使材料折叠或干燥。

（3）加盖玻片及其它处理：为了避免产生气泡，盖盖玻片时，应该以大拇指和食指拿着盖玻片的两个角或用镊子夹住其一端，使盖玻片的一边先与载玻片上的水滴边缘接触，而后徐徐放下另一边，当盖玻片被夹持的一边将贴近载玻片时，则可放手或抽出镊子，使其自然轻轻复盖，这样可以使盖玻片下的空气挤出，免生气泡。

细胞生物学实验报告细胞生物学实验报告篇一实验教师：xxx所在学校：xxx中学目的要求：1练习徒手切片2认识叶片的结构3画叶片的表皮细胞和保卫细胞材料用具：新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。

方法步骤方法与步骤要点注意事项（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片1将新鲜的叶片平放在小木板上。

2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。

3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。

要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。

4用毛笔蘸出较薄的一片，制成临时切片。

叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。

刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。

为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得较薄的一片用来观察。

（二）观察叶片的结构1．用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。

2．观察时注意分清时的表皮、叶肉和叶脉。

仔细观察上、下表皮细胞的`区别（三）观察叶片的下表皮1．用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。

2．用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。

注意观察气孔的结构。

（四）画图在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。

画图时，要真实、实事求是。

讨论与交流1．保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？2．从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？细胞生物学实验报告篇二一、实验目的1. 初步学会观察植物细胞质壁分离和复原的方法。

2. 理解植物细胞发生渗透作用的原理。

二、实验原理当细胞液的浓度小于外界溶液的浓度时，细胞液中的水分就透过原生质层进入外界溶液中，使细胞壁和原生质层都出现一定的收缩。

实验二临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察一、实验目的1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法2、了解植物细胞结构。

二、实验材料显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄三、实验内容和实验方法（一）临时装片的制作1、擦净载玻片和盖玻片（1）擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻片上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。

（2）擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。

2、取样用滴管滴一点水或其他溶液（根据需要）于载玻片的中央，把观察物放于载玻片上的液滴中，展开或摇匀。

3、盖盖玻片右手持镊子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触，然后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。

如盖玻片下的液体过多，可用吸水纸将多余的液体吸掉。

（二）徒手切片法徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。

1、选材选择软适度的材料，先截成适当的段块。

一般直径大小以3~5mm、长度以20~30mm为宜。

若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。

2、切片用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口损伤手指。

材料和刀刃上蘸水，使其湿润。

右手拇指和食指横向平握刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置，以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。

切片时要用臂力而不用腕力，手腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。

每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。

二、显微标本片的制作方法生药的显微鉴定是使用显微镜检查药材内部构造特征,因此必须将药材制作成适当的显微标本片，才能在显微镜下进行观察。

显在鉴别根据观察对象、目的、要求的不同，制作不同的标本片，一般可分为徒手切片、石蜡切片、表面装片、粉末制片、组织解离片等。

一、徒手切片徒手切片法可以直接而又准确地观察和了解药材组织的本来面目，其设备简单、操作方便，不需经过复杂的处理，但是，此法对微小、柔软、硬型或水分过多及肉质药材不易切成薄片以供观察。

］、基本操作⑴取材：选取材料时要注意有一定的坚韧性，材料不宜太硬或太软。

⑵切片：先将材料的断面削平，用左手的姆指和食指夹住材料，材料上端伸出1〜2111111的长度，右手执刀，刀口向里（刀片可用单面刀片或剃刀），刀口与材料的断面平行，切时自左方向右方斜滑，亦可自内向外切，同时挥刀要快，用力要均匀，不可拉锯样切割。

每切1〜2片，用毛笔蘸水取下切片放于水中或50〜70%乙醇中，同时用水湿润材料的切面和刀口，不可使之干燥。

如材料较薄或较小，可用萝卜或向日葵茎等解剖一切口将材料在切口内夹住再切。

选取较好的切片备用或直接放置在载玻片上，在显微镜下观察。

2、制片临时观察的切片，可自水或乙醇中取出切片，放置在载玻片上，加一滴水或甘油或先滴水或甘油，再放入材料，盖上盖玻片，置显微镜下观察。

二、永久制片法（略）三、粉末标本片粉末标本片主要用作粉末、丸、散、膏、丹等成药材料的观察，所用材料不宜有粗颗粒混入，否则可将盖玻片顶起，不便观察，故须将材料用三号筛（60目）筛筛过。

1、临时性粉末标本片用解剖针尖挑取少量粉末药材放置在载玻片的中央偏右一些，根据需要加入适宜的试液1~2滴，用解剖针或细玻棒（试液为酸或碱时）轻轻搅匀，然后用小镣子（或盖片镒）夹住盖玻片的一边，使相对一边与液面接触，将盖玻片轻轻放下（注意放盖玻片时动作要轻而慢，以免产生气泡或使材料溢出），盖玻片放好后，若有液体溢出，可用滤纸吸去溢出的液体，最后在载玻片左端做上标记。

玉米茎秆徒手切片制作
材料：玉米植株开花期地上第三茎节
仪器：光学显微镜
方法：
（1）固定材料：取材料材料固定于由无水乙醇与冰醋酸组成的固定液（无水乙醇:冰醋酸=3:1）中固定10h，后转移于70%乙醇保存。

（2）材料洗涤：将材料依次在梯度乙醇溶液（70%、50%、30%、10%）中洗涤各1h，后在清水中洗涤材料2-3h。

（3）切片：用双面刀片徒手切茎秆横截面，制茎秆新鲜切片约20μm厚，放于清水中，在显微镜下观察，选择细胞结构完整、厚度均匀的切片进行试验。

（4）染色：用1%番红液染色30min，后将材料置于清水中洗涤，然后将材料置于固绿中染色30s，后将材料在清水中洗涤。

注意：蕃红染料最好用配制半年以上的溶液
（5）观察和分析：将切片置于载玻片中央赶上盖玻片，在光学显微镜下观察茎秆解剖结构，比较茎秆表皮厚壁细胞厚度及维管束差异。

实验一组织制片技术（一）【实验原理】显微鉴定法就是利用显微镜、显微技术及显微化学方法等对中药进行分析鉴定的方法。

可以确定中药的真伪、纯度、品质以及建立鉴别标准。

目前多数用于品种鉴定，部分用于定量分析。

在鉴定过程中，以采用显微镜观察动、植物的组织构造、细胞形状、内含物的特征以及矿物的光学特性等为主要内容。

按照鉴定的方法可分为组织鉴定、粉末鉴定、显微常数测定和显微定量等。

组织鉴定是粉末鉴定的基础，以粉末鉴定应用最为广泛。

显微鉴定是一项专门技术，需要有植物(动物)解剖学、矿物学的晶体光学、植物显微化学等基本知识，并掌握显微制片、显微观察和描述、显微摄影和绘图、显微测量等基本技术。

显微鉴定的主要仪器有各类光学显微镜和电子显微镜等，通常使用光学显微镜。

【目的要求】1.掌握显微制片方法2.掌握显微测量的方法和放大倍数的使用3.掌握显微特征的观察与描述方法和显微绘图技术4.熟悉掌握显微测定尺的使用方法5.了解显微摄影技术与方法【仪器、试剂、材料】1.仪器生物显微镜，目镜测微尺，镜台测微尺，显微描绘器，镊子，解剖针，载玻片，盖玻片，酒精灯，单面刀片，粉碎机，绘图板，铅笔等。

2.试剂水合氯醛试剂，苏丹Ⅲ试液，稀甘油试剂，盐酸，硝酸，碘化铋钾试剂，氯化锌碘试液，硫酸，α-萘酚浓硫酸试液，碘试液，间苯三酚试液，钌红试液，硝酸汞试液，乙醚，石油醚，90%乙醇，70%乙醇，α-萘酚乙醇溶液，稀盐酸，稀醋酸等。

3.药材样品：牛膝、薄荷4.药材粉末：大黄、肉桂、山药【实验内容】一、显微鉴定1.组织鉴定组织鉴定是通过观察中药的组织构造特征来达到鉴定目的，主要用于个体较小的完整药材鉴别。

通常用以鉴别药材性状特征不明显或外形相似而组织构造不同的类似品、混淆品、代用品、伪品，或用于多来源药材的对比鉴别，也可用于确定某种化学成分的存在部位，以考查质量。

一般地说，组织鉴定对不同科属来源的药材鉴别比较容易，对于相同科属来源的药材鉴别比较困难。

2021年山西省太原市中考生物试卷一、选择题（每小题2分,共30分。

每小题只有一个选项符合题意。

）1．下列各种生产实践活动中，与植物蒸腾作用有关的是（）A．中耕松土、及时排涝B．冬天在蔬菜大棚内燃烧煤球C．合理密植、间作套种D．移栽植物时，去除部分叶片2．在制作叶片横切面临时切片时，应从多次切割所得到的薄片中选取（）A．最大的一片B．最整齐的一片C．最薄的一片D．颜色最深的一片3．小丽用显微镜观察人血永久涂片时，看到如图所示状态。

其中的①②依次是（）A．红细胞、血小板B．红细胞、白细胞C．白细胞、红细胞D．白细胞、血小板4．在“观察蚯蚓”实验中，要经常用浸水的湿棉球轻擦蚯蚓体表，主要目的是（）A．防止蚯蚓窒息死亡B．有利于蚯蚓的运动C．保持蚯蚓身体的柔韧性D．防止蚯蚓体壁干裂5．在“观察酵母菌”实验中，用碘液对酵母菌染色是为了更清楚地观察（）A．细胞壁和细胞膜B．细胞核和细胞膜C．细胞核和淀粉粒D．细胞质和细胞壁6．人体肾单位的部分结构如图所示，其中对血液起过滤作用的是（）A．①和②B．③和④C．①和③D．②和④7．生物社团同学们把如图所示实验装置放在黑暗处24小时后移至光下照射几小时，然后采用一定的方法检验两装置中的叶片是否遇碘变蓝色（注：氢氧化钠溶液能够吸收二氧化碳）。

你认为同学们探究的问题是光合作用（）A．是否产生了氧气B．是否需要光C．是否需要二氧化碳D．是否分解了有机物8．在如图所示探究种子呼吸作用的演示实验中，可得出的结论是种子进行呼吸作用（）A．利用了氧B．释放了热量C．生成了水D．释放了二氧化碳9．在显微镜下观察小鱼尾鳍内血液的流动时，寻找小动脉最简便而准确的方法是（）A．寻找血液含氧量高、颜色鲜红的血管B．寻找其中血液来自心脏的血管C．寻找其中的血液流向分支的血管D．寻找血液流速较快的血管10．如图为光合作用和呼吸作用关系概念图，图中①、②、③处应依次填写（）A．叶绿体、线粒体、有机物和氧气B．线粒体、叶绿体、有机物和氧气C．线粒体、叶绿体、二氧化碳和水D．叶绿体、线粒体、二氧化碳和水11．如图是人体心脏各腔及相连血管示意图，图中血管a的名称及其中流动的血液分别是（）A．肺动脉，鲜红色的动脉血B．肺动脉，暗红色的静脉血C．肺静脉，鲜红色的动脉血D．肺静脉，暗红色的静脉血12．人体内形成尿的过程中，当原尿流经肾小管时（）A．全部葡萄糖、大部分水和部分无机盐被重新吸收B．全部水、大部分葡萄糖和无机盐被重新吸收C．全部的水和无机盐、大部分葡萄糖被重新吸收D．全部的葡萄糖、无机盐和水被重新吸收13．如图为家鸽的呼吸系统结构示意图，下列相关描述正确的是（）A．①是气囊，②是肺B．①和②之间是不相通的C．①和②都能进行气体交换D．②可辅助①进行呼吸14．2021年入侵中国12省的红火蚁（如图）是全球公认的百种最危险入侵物种之一，被咬会有火灼感，严重者可能丧命。