徒手切片的基本要求
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实验三根茎叶显微观察与徒手切片一、目的要求1、学习植物的徒手切片技术2、了解植物细胞的多样性,积累植物组织的知识,建立组织与功能协调一致的概念。
二、基本原理根茎叶是植物的营养器官,都是由各种细胞和组织组成的。
通过切片,我们可以在不同的切片中分别看到保护组织、机械组织、营养组织、输导组织、分生组织等。
徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片,制成临时的水装片用于观察的植物组织制片技术之一。
所作的切片通常不经染色或经简单染色,也可以通过脱水与染色制成永久制片。
徒手切片的优点是简单、方便,不要复杂的设备,不经化学药物的处理,基本上保留了植物活体的状态。
其操作要点是:在培养皿中放入清水。
用左手大拇指、食指、中指等拿住材料,拇指略低于食指,且拇指要伸直呈反弯状态,中指等在下部稳定材料。
材料切面要高于拇指,但略低于食指,双面刀片放在食指上,只有给它略加一个向下的力时,刀刃才能接触到材料。
右手用食指和大拇指捏住双面刀片的一角,留出所有的刀刃部分,使刀刃近手指的一端首选接触到材料,然后让刀刃在材料上斜切下去,如果把材料切面看作是一个长方形的活,那么刀刃在材料上拉的是长方形的一条对角线,即从左前方向右后方拉切,注意不是垂直切向材料,一片,一片⋯⋯,轻松、快速地切,估计有满意的了,再一起放入盛有清水的培养皿中,挑选最薄的一片,装片观察。
不要试图每一片都很薄,也不要追求切片形状的完整。
其次,一定要注意,切片时不论是站着还是坐着,都要挺胸、放松地进行,是整个手臂在用力,也就是你在切片时,是肩关节在动,而不是肘关节,更不是腕关节。
另外,切片时水是润滑剂,你的手指上、材料上、刀片上随时都应该有水。
三、实验材料、试剂与仪器设备生物显微镜、载玻片、盖玻片、双面刀片、培养皿、滴管、吸水纸、毛笔,根茎叶结构的相关切片、鸢尾Iris tectorum的根、某种合适的双子叶植物的根、蚕豆Vicia faba的茎、蚕豆的叶、南瓜Cucurbita moschata茎、大叶黄杨 Euonymus japonicus的嫩茎、芹菜Apium graveoiens的叶柄、海桐Pittos-porum tobira或大叶黄杨的叶、小麦Triticum aestivum或其他禾本科小草的叶、萝卜的肉质直根,清水、I2-KI水溶液、0.1%番红染液四、实验步骤(一)根的显微结构1、根尖的内部结构取玉米或洋葱根尖纵切永久制片,置于显微镜下,由根的最先端逐渐向上观察根尖的各区,注意各区细胞的特点。
生命科学教学参考资料(初中第二册)上海教育出版社第4章生物的类群第1节植物一、教材分析(一)本节在教材中的地位“植物”与后面的“动物”、“微生物”共同构成生物的三大类群。
本节内容对激发学生学习本学科的兴趣,引起他们的好奇心和求知欲,培养他们的学习能力和探究能力有着比较重要的作用。
教师引导学生学好本节内容,有利于后面教学的开展。
通过对生物类群的介绍将为本章第4节“生物的分类”、第5章“生态系统”、第6章“城市生态”等内容的学习奠定知识基础。
在自然界中,生物是多种多样的,植物只是其中的一员。
瑞典博物学家林奈(Carolus Linnaeus,1707-1778)在18世纪提出动物和植物两界系统,建立得最早,沿用得最广。
以后出现了三界系统,即动物和植物两界之外,另立了原生生物界。
后来又有了四界系统,即动物界、植物界、原生生物界(或真菌界)和原核生物界。
五界系统,即动物界、植物界、真菌界、原生生物界和原核生物界。
根据两界学说,植物界是生物界中相对动物界的一大类生物,包含藻类植物、菌类植物、苔藓植物、地衣植物、蕨类植物和种子植物六大类群。
本节把植物类群中营自养生活方式和具有从低等至高等进化关系的四大类群放在一起,可以帮助学生树立进化的思想。
但教师在教学中切不要让学生造成这样的误解:体形微小的单细胞生物,多细胞生物,高大的乔木等因为都进行光合作用,所以就归入植物界;而细菌、真菌不能进行光合作用,所以也就归在微生物中了,教师在教学中可适当提到生物分界中,三界、四界和五界学说的概念,避免学生产生误解。
(二)本节教材内容分析本节内容是讲述植物学的基础知识,为力求它的教学性,在加强基本知识和基本技能学习的基础上,在“信息库”栏目适当增加了拓展的知识。
教师在教学过程中应注意学生基本知识的掌握和基本技能的培养,拓展的知识可根据具体情况选讲。
整节内容按照本教材的体例,分四个部分的内容安排如下:“你知道吗”模块选择了“我国有哪些珍稀植物”这样一个带有知识性、趣味性和爱国主义教育的内容作为学生第二册教材首先学习的内容,可以激发学生对了解祖国丰富的珍稀植物资源的学习兴趣,进而引起对学习植物学的兴趣,以激发学生的爱国热情。
、目的与要求1、学习并掌握临时装片的制作方法和步骤。
2、学习徒手切片技术。
3、了解细胞基本结构和厚角组织的特点。
二、材料和用品1、自备材料:解剖器(镊子、解剖针、单面刀片或双面刀片);洋葱鳞茎、青红椒、芹菜叶柄、女贞叶片或其它植物的叶片、胡萝卜块等。
2、其它材料和用品:显微镜、盖玻片、载玻片、纱布、蒸馏水、吸水纸、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、纯甘油、碘—碘化钾稀溶液、培养皿、吸管。
三、实验内容1、临时装片的制作方法2、徒手切片方法四、实验方法要观察、研究植物细胞、组织和器官的微细结构,以及一些很微小的藻、菌植物等,这些用肉眼是无法看到的,必须借助于显微镜来观察,要用显微镜观察,首先必须制成各种制片,放在显微镜下才能观察。
制片的方法很多,这里着重介绍临时装片法和徒手切片的方法技术。
1、临时装片的制作方法临时装片法是用少量的新鲜植物材料,如单个细胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料(如丝状或叶状的藻类、菌类、蕨类的原叶体和孢子囊、纤细的苔藓植物等等),把这些材料放在载玻片的水滴中,再盖上盖玻片做成玻片标本的方法。
这种方法制成的标本,可以保持材料的生活状态和天然的色彩。
此法一般多做为临时观察使用,也可根据需要选择适宜的染料染色,制成永久制片或用某些化学试剂作组织化学反应。
临时装片的制作方法和步骤如下:(1)清洁玻片:将盖玻片和载玻片用清水洗净,再用纱布擦干,擦玻片时用左手食指和拇指夹住玻片的两边,右手食指和拇指包住纱布,同时擦到的玻片的两面,用力要均匀。
注意:由于盖玻片很薄,所以擦盖玻片时要特别小心,用力要轻,右手食指和拇指要轻轻捻动,以免把盖玻片捏破。
(2)放置材料:先将载玻片平放在桌面上,于载玻片中央滴一滴蒸馏水或稀甘油,然后用镊子镊取或吸管吸取少量要观察的材料(如洋葱鳞叶表皮或水绵……),放在载玻片中央的水滴或甘油中,再用镊子和解剖针将材料展平或分散开,勿使材料折叠或干燥。
(3)加盖玻片及其它处理:为了避免产生气泡,盖盖玻片时,应该以大拇指和食指拿着盖玻片的两个角或用镊子夹住其一端,使盖玻片的一边先与载玻片上的水滴边缘接触,而后徐徐放下另一边,当盖玻片被夹持的一边将贴近载玻片时,则可放手或抽出镊子,使其自然轻轻复盖,这样可以使盖玻片下的空气挤出,免生气泡。
一、教学目标1. 让学生掌握徒手切片的基本步骤和方法。
2. 培养学生的观察能力和实验操作能力。
3. 培养学生严谨的科学态度和团队合作精神。
二、教学重点与难点1. 教学重点:徒手切片的基本步骤和方法。
2. 教学难点:如何正确操作切片刀,使切片达到均匀、薄厚适宜。
三、教学过程1. 导入新课(1)展示切片制作的成品,引起学生兴趣。
(2)提出问题:切片是如何制作的?如何保证切片的均匀和薄厚适宜?2. 讲解切片制作的基本步骤(1)选取材料:选取新鲜的植物或动物组织作为切片材料。
(2)固定材料:将材料用固定液浸泡,使其保持原状。
(3)切片:用切片刀将固定好的材料切成薄片。
(4)染色:用染色液对切片进行染色,以便观察。
(5)封片:将染色后的切片封存,以便保存和观察。
3. 展示切片制作的视频或图片,让学生了解切片制作的全过程。
4. 实验操作(1)分组:将学生分成若干小组,每组4-6人。
(2)分配任务:每组选取一个实验员,负责切片制作;其他成员负责观察、记录实验过程。
(3)实验操作:按照切片制作的基本步骤进行实验操作。
(4)观察与讨论:观察切片效果,讨论切片制作过程中遇到的问题及解决方法。
5. 教师点评与总结(1)点评实验过程,指出学生在实验操作中存在的问题。
(2)总结切片制作的基本步骤和注意事项。
(3)强调实验操作的严谨性和团队合作精神。
6. 课后作业(1)完成实验报告,记录实验过程和结果。
(2)思考:如何提高切片质量?如何改进实验操作?四、教学评价1. 实验操作:观察学生在实验过程中的操作是否规范、熟练。
2. 观察与讨论:评价学生在实验过程中的观察力和团队合作精神。
3. 课后作业:检查实验报告的质量,了解学生对实验内容的掌握程度。
五、教学反思1. 教学过程中,关注学生的个体差异,因材施教。
2. 引导学生积极参与实验操作,培养学生的动手能力。
3. 注重培养学生的观察能力和科学思维,提高学生的综合素质。
生物徒手切片实验报告实验介绍本实验旨在通过徒手切片的方式,观察和研究生物标本的细胞结构和组织构成。
通过徒手切片可以更直观地了解生物体内的微观结构,加深对生物学知识的理解。
实验材料- 鲜嫩的青蛙腿肌肉标本- 显微镜- 切片刀- 目镜- 盖玻片- 甘油实验步骤1. 将鲜嫩的青蛙腿肌肉标本取出,用切片刀将标本切成适当大小的薄片。
注意刃口要保持锋利,以免损伤组织。
2. 将切好的标本放入盖玻片上。
3. 用显微镜调节好焦距,将盖玻片卷曲部分朝下放在显微镜视野中央。
4. 使用低倍镜首先观察切片的形态特征,找到一个适合观察的区域。
5. 切换到高倍镜,细心观察切片中的细胞结构和组织构成。
6. 观察完毕后,在切片上滴上一滴甘油,并将盖玻片轻轻放在切片上,以防止切片干燥和变形。
实验结果在观察过程中,我发现青蛙腿肌肉切片中存在着许多肌纤维,肌纤维间有空隙,这些空隙中有许多饼状的结构,这是肌小节。
在肌小节中,可以看到许多长条状的结构,这是肌纤维中的肌纤维束。
通过放大观察,还能看到每个肌纤维束中有无数条薄丝状的结构,这是肌纤丝。
同时,我还发现肌纤维上有许多染色更深的颗粒状物质,这是肌小球。
肌小球是构成肌肉组织的基本功能单位,其中含有肌球蛋白,参与了肌肉的收缩过程。
此外,肌纤维周围有一层淡紫色的薄膜,这是肌外膜。
肌外膜被认为具有保护和支持肌肉组织的作用。
实验总结通过本次实验,我深切体会到直接观察生物标本的重要性和意义。
徒手切片让我更直观地了解到生物组织的微观结构,加深了对生物学知识的理解。
然而,在进行实验的过程中也发现了一些问题,如切片过程中有时可能会对样本进行损伤,需要更加细心和谨慎操作。
同时,目前观察到的细胞结构还不够全面和深入,需要进一步提高观察技巧和选取合适的标本。
总的来说,徒手切片实验是一种简单有效的研究生物组织结构的方法,在今后的学习中,我将进一步探索和学习更多的生物实验技巧,以提高生物学知识的掌握程度。
全国中医药高职高专卫生部规划教材(供中药等专业用)《中药鉴定学》实训指导书主编彭志芬副主编王小平周铁文编者彭志芬王小平周铁文陈文吴卫江西中医药高等专科学校2007年7月前言《中药鉴定学》是阐述中药鉴定基本理论和技能的一门学科,为中药学、医药营销、中药制药技术、中药材栽培技术等专业的一门重要专业课,在中药学各专业学科中占有极为重要的地位。
根据卫生部教材办公室《全国中医药高职高专卫生部规划教材编写要求》、七院校教材编写委员会《全国中医药高职高专教材编写基本原则》和《中药鉴定学》教学大纲的要求,本实训指导书在编写过程中,以就业为导向,以培养技术应用能力为主线,力求与专业培养目标相一致,与国家药品标准、中药现代化要求相统一,与《药用植物学》、《中药化学》、《中药制剂分析》等相关学科的内容相衔接,注重吸收中药鉴定发展的最新研究成果,注重教材整体内容的优化,力求内容充实、简明扼要、重点突出。
全书内容包括总论、植物药类、动物药类、矿物药类、中成药类的实验指导5大篇,共40项实验。
由于编写时间仓促,业务水平有限,不足之处在所难免,希望广大师生在使用过程中提出宝贵意见,以便修订和完善。
《中药鉴定学》编写组2007.7《中药鉴定学》实验指导实验一显微镜的使用和组织制片【实验时数】2学时【实验地点】中药鉴定学实验室【实验器具准备】显微镜、培养皿、毛笔、刀片等;稀甘油、甘油醋酸试液、水合氯醛试液。
【实验要求】掌握显微镜的使用方法,掌握徒手制片的制作和永久制片的制作过程,注意事项【实验内容】熟练显微镜的使用,采用徒手切片法制作药材的横切片或纵切片,操作简便,迅速,制成的切片能保持其细胞内含物的固有形态,便于进行各种显微化学反应。
熟悉永久制片的制作过程【实验内容方法】(一)徒手切片法徒手切片法主要用于临时制片,制片迅速,更为重要的是制片过程中没有复杂的化学处理,可以观察到植物的天然色彩,真实地反映植物细胞组织的本来面目,也利于显微化学的观察,因而必须熟练掌握。
植物形态解剖学实验实验一显微镜的使用和生物绘图一、目的要求了解显微镜的构造和成像原理;掌握显微镜的使用方法,学习生物绘图的基本技术。
二、材料用品洋葱表皮细胞永久装片、显微镜、载玻片。
三、内容和方法(一)显微镜的构造和使用方法在植物学实验课中,经常需要使用光学显微镜,观察植物体内的各种结构。
因此,在实验课开始之前,必须先了解显微镜的构造和使用方法。
1、显微镜的构造显微镜的种类不尽相同,但目前使用的多是复式显微镜,其构造可以分为光学部分和机械部分(图1-1)。
光学部分:物镜、目镜、聚光镜、反光镜;机械部分:镜座、镜柱、倾斜关节、镜臂、镜筒、物镜、转换器、粗调节器、细调节器和载物台。
2、显微镜的成象原理光学显微镜是利用光学的成象原理观察植物体结构的。
显微镜的目镜和物镜各由若干透镜组成,但可看成是一个凸透镜。
(图1-2)3、显微镜的使用显微镜的使用主要包括二个方面:一是光度的调节,另一个是焦距的调节。
具体方法分叙于后。
(1)取镜和放镜取镜时应右手握住镜臂,左手平托镜座,保持镜体直立,不可歪斜,安放时,动作要轻。
一般应放在座位的左侧,距桌边5—6厘米处,以便观察。
(2)对光扭转转换器,使低倍镜对准载物台上的通光孔,打开聚光器的光圈,然后左眼对准接目镜注视,右眼睁开,用手翻转反光镜,是镜面向着光源,光强时用平面镜,光弱时用凹面镜。
并利用聚光器或虹彩光圈调节光的强度,使视野内的光线既均匀明亮,又不刺眼。
(3)放玻片将需观察的玻片标本,放在载物台上,用压片夹压住玻片二端,将玻片中的标本正对通光孔的中心。
(4)低倍镜使用观察任何标本,都必须先用低倍镜,因为低倍镜视野范围大,容易发现和确定需要观察的部位。
A、调整焦点使用低倍镜时,两眼从侧面注视物镜,旋转粗调节器。
使物镜停留在距离载物台约5毫米处。
接着用左眼在目镜中观察,同时按反时针方向,向后向内转动粗调节器,使镜筒缓缓上升,直到看到标本物象为止。
B、低倍镜的观察焦点调节好后,可根据需要移动玻片,把要观察的部分移动到最有利的位置上,找到物象后,还可以根据材料的厚薄,颜色,成象的反差强弱等情况进行调节,如视野太亮,可降低聚光器或缩小虹彩光圈,反之,则升高聚光器或放大虹彩光圈。
一、实验目的1. 了解植物细胞的基本结构;2. 掌握植物徒手切片技术;3. 通过观察植物细胞切片,了解植物细胞的结构特点。
二、实验原理植物细胞是植物的基本单位,具有复杂的结构。
通过徒手切片观察,可以直观地了解植物细胞的基本结构,如细胞壁、细胞核、细胞质、液泡等。
三、实验材料与仪器1. 实验材料:洋葱鳞片叶、显微镜、解剖针、镊子、双面刀片、载玻片、吸管、蒸馏水、I-KI溶液、苏丹溶液、酒精灯、纱布、绸布、毛笔刷等。
2. 实验仪器:显微镜、解剖镜、刀片、载玻片、盖玻片、镊子、吸水纸、培养皿、表面皿、染色碟、吸管、酒精灯、纱布、绸布、毛笔刷等。
四、实验步骤1. 选材:选择新鲜的洋葱鳞片叶作为实验材料。
2. 切片:将洋葱鳞片叶纵向切一窄条(宽0.5 cm),然后用刀片在鳞片叶内表皮处与窄条垂直的方向轻切两刀(划破表皮即可),两刀距离0.5 cm左右。
3. 制片:将切片放在载玻片上,加入一滴蒸馏水,用镊子将盖玻片的一边先与载玻片的水滴边沿接触,再慢慢地放下另一边,将盖玻片下的空气挤出,以免产生气泡。
4. 染色:用毛笔刷蘸取I-KI溶液,均匀涂抹在盖玻片上,染色时间为1-2分钟。
5. 观察与记录:在显微镜下观察植物细胞切片,观察细胞壁、细胞核、细胞质、液泡等结构特点,并做好记录。
五、实验结果与分析1. 观察到植物细胞具有以下结构:(1)细胞壁:细胞壁位于细胞的最外层,具有支持和保护作用。
在显微镜下观察到细胞壁呈半透明状,有明显的纹理。
(2)细胞核:细胞核位于细胞的中央,是细胞的遗传物质储存和复制场所。
在显微镜下观察到细胞核呈圆形或椭圆形,有明显的核膜和核仁。
(3)细胞质:细胞质位于细胞核和细胞壁之间,是细胞内各种细胞器的基质。
在显微镜下观察到细胞质呈半透明状,有明显的颗粒和网状结构。
(4)液泡:液泡位于细胞质中,是细胞内储存水分、营养物质和废物的地方。
在显微镜下观察到液泡呈圆形或椭圆形,大小不一。
2. 通过观察植物细胞切片,可以了解到植物细胞的基本结构特点,为后续的生物学研究提供基础。
初中徒手切片教案模板课时安排:2课时教学目标:1. 了解徒手切片的概念和制作过程。
2. 掌握徒手切片的制作技巧。
3. 培养学生的观察能力和实验操作能力。
教学重点:1. 徒手切片的制作过程。
2. 徒手切片制作技巧的掌握。
教学难点:1. 徒手切片制作过程中的技巧。
2. 观察和分析切片的能力。
教学准备:1. 实验室用具:显微镜、切片刀、镊子、载玻片、盖玻片、显微镜片、样本(如植物叶片、动物组织等)。
2. 教学课件和教材。
教学过程:第一课时:一、导入(5分钟)1. 引导学生思考:什么是徒手切片?为什么需要制作徒手切片?2. 学生回答后,教师总结并引入本课。
二、理论学习(10分钟)1. 讲解徒手切片的概念和制作过程。
2. 讲解徒手切片制作技巧,如如何正确使用切片刀、如何保持切片厚度均匀等。
三、实践操作(15分钟)1. 学生分组,每组领取实验用具和样本。
2. 学生在教师的指导下,进行徒手切片制作。
3. 教师巡回指导,解答学生疑问,纠正操作错误。
四、观察和分析(10分钟)1. 学生用显微镜观察切片,记录观察到的特征。
2. 学生相互交流观察结果,讨论切片的特点。
五、总结(5分钟)1. 教师引导学生总结本节课的学习内容,巩固知识点。
2. 学生分享制作徒手切片的感受和收获。
第二课时:一、复习(5分钟)1. 复习上节课的学习内容,检查学生对徒手切片制作技巧的掌握情况。
2. 学生回答问题,教师点评并引导。
二、实践操作(20分钟)1. 学生独立进行徒手切片制作,选择不同的样本进行实践。
2. 教师巡回指导,解答学生疑问,纠正操作错误。
三、观察和分析(20分钟)1. 学生用显微镜观察切片,记录观察到的特征。
2. 学生相互交流观察结果,讨论切片的特点。
四、总结(10分钟)1. 教师引导学生总结本节课的学习内容,巩固知识点。
2. 学生分享制作徒手切片的感受和收获。
教学评价:1. 学生徒手切片的制作质量。
2. 学生观察和分析切片的能力。
《植物与植物生理》课程教学大纲一、课程性质、目的和任务:高职院校的培养目标是为社会输送一批德才兼备,具有一定知识能力的高技能型应用型人才。
本课程作为园林、生物技术等专业必修的专业基础课,通过教学使学生掌握有关植物科学的基本知识、基本理论和基本技能,其知识是否扎实、技能是否熟练,对后续课程如:园林植物栽培、植物病虫害防治、园林树木、花卉学等产生极大的影响,因此,在制定教学计划时,强调内容的基础性、科学性、知识性、地方性和前沿性。
本大纲规定的教学内容包括植物形态与解剖,植物分类,植物生理等,其中形态与解剖是基础,分类是实践并应加强的内容,生理是核心。
实验实习除验证理论外,必须加强学习和掌握一般的植物学技术,分类检索表的应用及生理常用测定技术。
教学实习是运用学过的理论知识和实验技术进行综合的技能训练,进一步巩固所学的知识和技能,给专业生产实习打下基础。
通过本课程的教学,培养学生“认知植物,调控植物生长发育”所必须的知识和技能,学生能“从局部到整体,从形态到结构”全面认识植物,描述植物;能正确认知本地区常见的至少200种植物;能认知植物的主要生理过程,测定植物的主要生理指标;能使用植物生长调节剂调节植物的生长发育;使学生具备考取种苗工、绿化工、花卉园艺工等职业资格证书的基本知识和基本技能;同时培养学生分析问题和解决问题的能力,为后续课程的学习起一个重要支撑作用。
二、教学的重点、难点及解决办法本课程为专业基础课,各专业由于培养目标不同、专业课要求不同,教学的侧重点也有所不同。
但就课程本身而言,植物学部分的重点是:植物细胞的基本结构,营养器官和生殖器官的外部形态、解剖结构、生理功能及与外界环境条件的关系;植物分类部分的重点是:认知常见的园林植物、农田杂草;生理部分的重点是:植物对水分、矿质的吸收、运输、分配,植物缺素症状、光合与呼吸机理,植物生长发育和同化物的分配规律,植物的激素调节、植物成花、开花、结实和衰老生理,提高植物抗逆性的措施。
《普通生物学实验》简明讲义植物部分山东理工大学生命科学学院前言普通生物学是我院生物工程本科专业的必修专业基础课程。
本课程的任务是使学生学习必要的普通生物学实验方法,掌握基本的实验技能和技术,提高学生的科学思维能力。
通过实验课的学习,掌握生物切片、制片等方法和技术;训练科学的思维方法;培养实事求是的科学态度与独立工作的能力,增强创新意识,为今后的学习和工作奠定基础。
实验含有植物学和动物学两部分。
本讲义是结合普通生物学实验教学大纲和植物生物学、动物生物学实验讲义编写的,以突出实验能力的培养为主线,对传统的实验教学内容重新进行了优化组合。
本实验课通过八个实验项目的实验,目的在于训练基本的操作技能,提高综合实验能力,加强理论与实践的联系,训练科学的思维方法,培养实事求是的科学态度和独立科研能力,增强创新意识。
本讲义属于初稿,只包含实验课内容,不包括第二课堂等拓展和创新内容,其中部分教学内容还需要结合教学改革的不断完善加以补充和修改,谨望同行多提宝贵意见和建议。
山东理工大学生命科学学院普通生物学实验基本要求1生物学实验是生物学专业的必修课程,是进行基本技能训练,训练科学思维,培养观察能力,加强理论联系实际等必须的教学过程和学习内容,必须严肃认真地上好实验课。
2 上实验前,必须认真预习实验指导,明确实验的目的、要求、内容和方法,保证实验的顺利进行。
3 实验课至少提前5分钟进入实验室,做好实验准备,不许迟到或早退,实验室要保持安静,不许到处走动。
实验时要按照指导的要求仔细观察、正确、规范地操作。
实验报告按照要求独立完成。
绘图要准确、科学、实事求是,不许抄袭他人或版图,文字描述要简明扼要,表述清楚。
4 实验室的一切仪器、设备、药品、材料等用后放回原处,不许带出实验室。
5 要爱护国家财产,各种仪器在使用前要认真检查,用时要严格遵守操作规则,保持仪器整洁,如有损坏必须报告指导老师并说明原因,按照仪器使用管理规则酌情处理。
、目的与要求1、学习并掌握临时装片的制作方法和步骤。
2、学习徒手切片技术。
3、了解细胞基本结构和厚角组织的特点。
二、材料和用品1、自备材料:解剖器(镊子、解剖针、单面刀片或双面刀片);洋葱鳞茎、青红椒、芹菜叶柄、女贞叶片或其它植物的叶片、胡萝卜块等。
2、其它材料和用品:显微镜、盖玻片、载玻片、纱布、蒸馏水、吸水纸、10%甘油水溶液、50%甘油水溶液、纯甘油、碘—碘化钾稀溶液、培养皿、吸管。
三、实验内容1、临时装片的制作方法2、徒手切片方法四、实验方法要观察、研究植物细胞、组织和器官的微细结构,以及一些很微小的藻、菌植物等,这些用肉眼是无法看到的,必须借助于显微镜来观察,要用显微镜观察,首先必须制成各种制片,放在显微镜下才能观察。
制片的方法很多,这里着重介绍临时装片法和徒手切片的方法技术。
1、临时装片的制作方法临时装片法是用少量的新鲜植物材料,如单个细胞、薄的表皮或切成的薄片以及其它小的或扁平的材料(如丝状或叶状的藻类、菌类、蕨类的原叶体和孢子囊、纤细的苔藓植物等等),把这些材料放在载玻片的水滴中,再盖上盖玻片做成玻片标本的方法。
这种方法制成的标本,可以保持材料的生活状态和天然的色彩。
此法一般多做为临时观察使用,也可根据需要选择适宜的染料染色,制成永久制片或用某些化学试剂作组织化学反应。
临时装片的制作方法和步骤如下:(1)清洁玻片:将盖玻片和载玻片用清水洗净,再用纱布擦干,擦玻片时用左手食指和拇指夹住玻片的两边,右手食指和拇指包住纱布,同时擦到的玻片的两面,用力要均匀。
注意:由于盖玻片很薄,所以擦盖玻片时要特别小心,用力要轻,右手食指和拇指要轻轻捻动,以免把盖玻片捏破。
(2)放置材料:先将载玻片平放在桌面上,于载玻片中央滴一滴蒸馏水或稀甘油,然后用镊子镊取或吸管吸取少量要观察的材料(如洋葱鳞叶表皮或水绵……),放在载玻片中央的水滴或甘油中,再用镊子和解剖针将材料展平或分散开,勿使材料折叠或干燥。
(3)加盖玻片及其它处理:为了避免产生气泡,盖盖玻片时,应该以大拇指和食指拿着盖玻片的两个角或用镊子夹住其一端,使盖玻片的一边先与载玻片上的水滴边缘接触,而后徐徐放下另一边,当盖玻片被夹持的一边将贴近载玻片时,则可放手或抽出镊子,使其自然轻轻复盖,这样可以使盖玻片下的空气挤出,免生气泡。
注意载玻片中央的液滴要适中,既要使其充满盖玻片,又要不会使盖玻片浮动或使液滴从盖片下外溢,假如水不够,可用吸管小心地从盖玻片的边上再滴入一小滴水,使它和盖玻片下面的水相接触;如果水太多,溢出盖玻片,则可用吸水纸吸去,盖玻片的上面,一定不能被水浸湿,如果发生这种情况,应该小心地取下盖玻片,擦干以后,再按上述方法重新盖上。
这样做好的装片,便可在显微镜下进行观察。
根据需要,临时水装片做好后还可以进行简单的染色(例如用碘—碘化钾或番红等来染色),其方法是直接在盖玻片的一侧加一滴染液,用吸水纸条在盖玻片的另一侧吸水,引入染液,以使盖片下的材料染上色。
注意:临时装片根据需要可以水封片或以甘油封片,凡用以临时观察,不欲久留的装片均可用水封片,制成水装片;需要提前半天或一天就备出的装片或者观察后须保留一定时间的装片,为防止水分蒸发,出现材料收缩现象,则适宜用甘油封片,制成甘油封片,用甘油封片时,保留时间短者,可用10%甘油水溶液,保留时间长者则须从10%甘油中再转入50%甘油水溶液中或在此液中浸一小时后再转入纯甘油中封片。
用甘油做临时装片的优点是不仅封片保留时间长,且有加强材料透明的作用。
本实验以洋葱(或大葱)鳞茎内表皮为材料,通过撕皮法做临时装片,用碘—碘化钾做染色剂,在观察做片效果时同时了解细胞的基本结构,如细胞壁、细胞质、液泡、细胞核等。
2、徒手切片法徒手切片法简称手切片法,即手拿刀片将材料切成能在显微镜下观察其内部结构的薄片的方法。
是植物形态解剖学实验及研究中最简单和最常用的方法,也是最重要的基本技能之一。
徒手切片的材料一般是新鲜的,有时也可用预先固定好的。
这种切片方法虽然有其缺点,如:不易做到将整个切面切得薄而完整,往往切出的片子厚薄不一;过软过硬的材料比较难切。
但其优点很多,如:工具简单,只要有一把锋利的剃刀或双面刀片就够了;方法简便,容易学会;节省时间,只要有现成材料,可以立刻用刀片切成薄片,当即观察,即便要染色,时间也不长;还有一个独特的优点就是可以看到组织细胞内的自然结构和天然颜色。
徒手切片的方法见图2—2。
一般材料的徒手切片方法(1)将材料切成长约2~3厘米的小段,削平切面。
(2)左手大拇指和食指的第一关节指弯夹住材料,使之固定不动摇。
为防止刀伤,拇指应略低于食指,并使材料上端超出手指2~3毫米,不可高出过多,否则切片时材料容易动摇,也不容易切薄。
(3)右手大拇指和食指捏住刀片的右下角(刀片要非常锋利,双面刀片必须是新用的),刀口向内,并与材料切面平行,切片前先将材料和刀口上蘸些水,使之切时滑润。
(4)切的方法,以刀口自外侧左前方向内侧右后方拉切,这样可以边切边看清切片的进展情况,同时切起来也比较顺手。
切片时只用臂力而不要用腕力及握刀指关节的力量,左手保持不动,不要两手同时拉动,两手不要紧靠身体或压在桌子上,并且动作要敏捷,材料要一次切下,切忌中途停顿或推前拖后作“拉锯”式切割。
关键是要切得薄而平。
如此连续切片,切下数片后,用湿毛笔将切片轻轻移入培养皿的清水中备用。
(5)在切片过程中刀口和材料要不断蘸水,以保持刀口锋利和避免材料失水变形。
所切的材料和刀片一定要保持水平方向,不要切斜,如果切斜,即使很薄,但由于细胞切面偏斜,同样影响观察。
(6)切下足够多的切片后,挑选薄而平的切片做成临时装片供镜检,必要时也可以制成永久装片。
挑选切片时,不一定要材料切得很完整,只要切得很薄就行,有时只要有一小部分就可以看清其结构了,如玉米茎横切片,只要有四分之一或者更少的小片,就可以看出内外维管束的大小、多少及每个维管束的构造。
因此切下的切片不是每一片都适用,也不是只有全面切得薄的才能用,要根据需要进行选择,一次可多选几片置于载玻片上,制成临时装片,通过镜检再进一步选择理想的材料用以观察。
柔软和坚硬材料的徒手切片方法过于柔软的材料,如植物的叶片或其他薄而微小的材料,难以直接执握手切,则须夹入坚固而易切的夹持物中切。
常用的夹持物有胡萝卜根(用胡萝卜时可将中间硬心即木质部切去用其余部分)、土豆块茎、接骨木的髓部及通草髓等。
但须要注意的是通草髓遇水既变软,可将其保存在酒精中备用。
切前先将夹持物切成长方小体,上端与纵轴垂直面削平,若被切材料属叶状体一类的薄片,将夹持物从上至下纵切一缝,材料夹于其中即可,如不是叶状体,即将材料夹于其中,或根据材料不同在缝里挖一个和材料形状相似、大小相同的凹陷,把材料夹在凹陷里。
然后用手握住夹持物,采用上述方法将夹持物和其中的材料一齐切成薄片,除去夹持物的薄片,便得到材料的薄片。
坚硬的材料要经软化处理后再切。
软化的方法:一种是对于比较硬的材料,先把材料切成小块,后进行煮沸,经3~4小时煮沸后,再浸入软化剂(50%酒精∶甘油=1∶1)中数天至更长些时间,而后再切。
另一种,对于已干或含有矿物质,比较更硬的材料,要先在15%氢氟酸的水溶液中浸渍数周,充分浸洗后,再置入甘油里软化后再切。
本实验主要以青红椒、芹菜叶柄为材料做徒手切片练习。
并通过青红椒切片结果装镜观察来了解细胞基本结构中叶绿体和有色体;(提示:青椒切片细胞内绿色的小颗粒为叶绿体,红椒切片细胞内红色的小颗粒为有色体。
)通过芹菜叶柄切片结果装镜观察来了解厚角组织的结构特点。
(提示:芹菜切片在显微镜下观察,在棱角处稍靠内方有一团具有珠光色彩的组织即为厚角组织。
在高倍镜下观察,可见其细胞壁厚为角隅处,其细胞壁的性质是初生壁性质,主要成分为纤维素,有强烈的吸水性,故显微镜下有珠光色彩。
)五、综合分析1、临时装片和徒手切片的特点和适用范围各是什么?2、做临时装片盖盖玻片时应注意什么?3、徒手切片法切取柔软和坚硬材料时应怎样进行?六、实验报告自选材料制做几种不同材料的临时装片和徒手切片,写出你所做装片的步骤和要点。
学案六实验一可溶性还原糖脂肪蛋白质的鉴定一、解读两纲1.识记鉴定实验所用的材料,懂得选材的要求。
2.掌握实验原理、步骤,理解实验目的、方法。
3.学会制备生物组织样液,正确选用鉴定试剂,并能按规范的要求操作,独立完成鉴定工作。
4.明确观察对象,正确说出鉴定过程中样液的颜色变化,并能用准确的语言解释实验现象,作出实验结论。
5.能熟练制作徒手切片,临时装片和使用低倍显微镜,了解高倍显微镜的使用方法。
6.具备验证相关生物学事实的能力,并能对实验现象和结果进行解释、分析和处理;能对一些生物学问题进行初步的探究性研究。
二、高考热线1.题型以选择题为主,也可能以简答题出现,重点是以对比的方式考查相关实验的异同点。
2.以教材实验为依据,设置实验设计题是今后考查的重点,如“设计实验证明淀粉酶是蛋白质”,就是依据教材中的实验3的原理和步骤。
三、学法指点1.运用对比的方法认识三种物质的鉴定原理、过程及注意事项。
2.对比三种物质鉴定过程中的相同点和不同点,重点掌握试剂使用上的区别。
3.根据所学的原理鉴定类似物质,设计相应的实验程序。
四、教材梳理(一)实验原理生物组织中含有可溶性还原糖(如_______、_______、________)、脂肪、蛋白质等化学成分,可分别与某些化学试剂作用产生特定的_____________。
(1)可溶性还原糖+__________试剂—→砖红色沉淀可溶性还原糖+班氏糖定性试剂—→__________(2)脂肪+__________________染液—→染成橘黄色脂肪+苏丹Ⅳ染液———————→染成______(3)蛋白质+________________试剂—→溶液呈紫色(二) 实验目的1.初步掌握鉴定可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的基本方法。
(三) 实验材料(四)方法步骤1. 可溶性还原糖的鉴定(1)制备组织样液:苹果切块、研磨、________。
(2)鉴定组织样液:1 支试管+2mL_____________+2mL________________,振荡试管,(溶液_______色?),________2min左右,观察溶液颜色变化。
(________色→棕色→_________色)。
2.脂肪的鉴定(1)切片制作:用花生子叶作徒手切片。
(2)染色:1块载玻片+切片+ 3滴________染液,3min后吸去染液+ 2滴50%________溶液去浮色,吸去后+ 2滴__________,盖盖玻片。
(3)镜检鉴定:先用低倍镜观察,找到子叶最薄处,再用高倍镜观察。
(圆形的脂肪颗粒为_____色)。
3. 蛋白质的鉴定(1) 制备样液:大豆切片、________、_______。