显微镜的使用、徒手切片法及绘图法

附录一显微绘图法在显微鉴定和研究工作中，对于观察到的物象除了应作文字记录外，也应描绘其图形，以供日后查询和核对之用。

因为图形能更好地表示实物的形态特征，有助于文字叙述的不足。

显微绘图的方法主要有徒手绘图简法、网格绘图法、利用显微描绘器的绘图法和投映绘图法等四种。

现在常用的徒手绘图法及描绘器的绘图法简介如下。

一、徒手绘图简法：欲将所观察的物象记录下来，可采用最简单的按比例绘制的绘图法。

将图纸放在显微镜的右侧，用左眼观察内物象,右眼注视图纸，用绘图铅笔（2H或3H）轻轻描绘物象的轮廓和内部结构注意按比例画，以免失真。

审查图稿,详加修改，最后用削尖的绘图铅笔（2H或3H）描绘，要求线条均匀、清晰.切勿涂抹。

画在绘图纸上的布局，亦应适当安排，如图的内容复杂,图形要求画得大一些，一张绘图纸上就只画一图，可将图安排在绘图纸的中央，略偏左侧，右侧以便注字；如图的内容较为简单，一张绘图纸上可以安排两个画，图形可略画小些。

注字要求平行画横线向右侧引出，所注名称应上下列齐，不要斜线交叉，要求画图均匀整齐。

每个图的下面，应注明图的名称和放大倍数。

二、利用显微描绘器的绘图法：显微描绘器是利用两组光学系统配合，将显徽镜中的物象和图画的象迭合，同时送到观察者眼中，以利准确描绘的装置。

显微描绘器的式样很多，着重对阿培式描绘器加以说明。

（一）阿培式描绘器的结构和使用阿培描绘器由棱座杆和套环以及带长柄的平面镜组成。

使用方法：1.将目镜从镜筒中取出，装上描绘器，用左面的螺丝轻轻夹紧，将棱镜座杆翻到后面，再将目镜插入镜筒。

2 .将反光镜杆从右侧插入描绘器的孔中，注意将孔中的销子和杆上的口对准，推到底。

3 .转动反光镜,使镜轴上的刻线和连接块上的刻线对齐。

4 .调节显微镜使成象清晰。

5 .将棱镜杆翻至前面，调节燕尾使其尽可能靠近目镜，此时即可同时看到物体和旁边的纸张。

注意事项：1 .调节物体视野与绘图纸上的亮度相等是极其重要的。

2 .当物体视野较亮时,可缩小聚光镜光栏，或转动显微镜底部的反光镜，以减少反射光强或用台灯来增加纸上的照明。

实验一普通光学显微镜的使用与生物绘图【目的要求】1. 了解显微镜的构造和各部分的性能，学习并掌握正确的使用技术和保养措施；2. 学会制作临时装片、徒手切片的方法。

3．学会绘制生物图。

【材料和用品】显微镜、微藻培养液【实验内容与方法】（一）普通光学显微镜的基本构造、使用方法及保护1、显微镜的基本结构显微镜构造很复杂，种类很多，但基本结构是由机械和光学两大部分构成，现分述如下：1.1 机械部分它是为光学部分服务的部件，包括以下六部分：(1) 镜座：显微镜最下面呈马蹄形或圆形的部分，起稳定和支持显微镜作用。

(2) 镜柱：直立于镜座上的短柱，支持显微镜的其它部分。

(3) 镜臂：弯曲成马蹄形的部分，便于手持，下端与镜柱相连接的地方有一个倾斜关节，可使镜臂倾斜，便于观察。

(4) 载物台：自镜臂下端向前伸出，放置标本用的平台，其中央有一个园孔，叫通光孔。

台上有一移动器（老式的左右各有一个压片夹），用以固定和移动标本。

(5) 镜筒：和镜臂上方连接的园筒部分。

有的显微镜镜筒内有一抽管，可适当抽长，一般长度是160-170mm。

镜筒上端装有目镜，下端有一个可转动的园盘，叫物镜转换器（或叫物镜旋转盘），其上装有2-4 个物镜。

(6) 调焦器：为镜壁上两种可转动的螺旋，一大一小，能使镜筒上下移动，调节焦距。

大的叫粗调焦器，升降镜筒较快，用于低倍镜对焦；小的叫细调焦器，升降镜筒较慢。

1.2 光学部分由接目镜、接物镜、反光镜、聚光器等四部件组成。

(1) 接目镜：装于镜筒上方，由两组透镜构成，接目镜的作用是把接物镜所形成的倒立实像再放大成为一个虚像。

接目镜上刻有5×，8×，10×，15×，25×等符号，表示放大倍数。

我们所观察到的标本的物像，其放大倍数是接物镜和接目镜放大倍数的乘积。

如接物镜是10×，接目镜是8×，其物像的放大倍数是10×8＝80 倍。

实验一光学显微镜的使用及植物绘图法一、目的与要求1、了解光学显微镜的结构和成像原理2、掌握光学显微镜的使用和保养方法3、学习植物绘图法二、材料和用品绘图用品（绘图纸、橡皮、HB或２H铅笔）显微镜、擦镜纸、纱布、二甲苯、蒸馏水、洋葱鳞叶表皮永久装片。

三、实验内容1、显微镜的结构与成像原理2、显微镜的使用与保养方法3、植物绘图方法四、实验方法与步骤1、显微镜的结构与成像原理显微镜的结构复式显微镜的结构较复杂，由两组以上的透镜所组成，其类型虽然很多，但基本结构和原理是相同的，在结构上分为机械部分和光学部分。

机械部分：显微镜的金属部分即为其机械部分，用于装置光学部分及其它用途，包括以下几部分：（1）镜座：镜座位于显微镜的最下方，是显微镜的底座，与桌面相接触，支持显微镜的全部重量，并使之平稳。

（2）镜臂：镜臂是搬取显微镜的执手，与镜筒、载物台及镜座相连接，分固定式和可倾斜式两种类型。

（3）镜筒：镜筒是镜臂前方的中空圆筒，呈倾斜状态，上端放置目镜，下端连接物镜转换器。

有的显微镜的镜筒与镜臂连接处有齿刻，通过调焦螺旋可以上下升降镜筒，也就是通过镜筒的升降来调焦的。

（4）物镜转换器：物镜转换器固定在镜筒下端的圆盘状结构，有3—4个物镜螺口，装置不同放大倍数的物镜。

旋转物镜转换器时，物镜可以一个换一个地转到正确的位置使用，转动时当听到一声轻微的响声，表示位置已对好。

（5）载物台：载物台又叫镜台或工作台，是位于镜臂前方的一个方形装置，为安放玻片标本用，其中心有一个通光孔，台上还装有安装玻片的夹。

（6）调焦装置：在镜臂上装有粗调焦螺旋（大的一对齿轮）和细调焦螺旋（小的一对齿轮），转动调焦螺旋可使镜筒或载物台上升或下降，从而调节物镜与标本间的距离，达到调焦的目的，使物像清晰。

粗调焦螺旋调节幅度大，用于低倍镜下调焦，细调焦螺旋调节幅度小，用于高倍镜下调焦。

光学部分：是由几组透镜彼此相隔一定的距离，由机械装置把它们连成一个整体，作用是利用光线使实验物体造成放大像。

实验一显微镜的使用及生物绘图法一、实验目的：了解一般光学显微镜的构造，初步掌握显微镜的使用方法。

掌握生物学绘图的基本方法。

二、实验内容：观察显微镜的基本构造，了解显微镜的基本性能。

通过对永久装片的观察，学习使用显微镜的方法。

学会并使用生物绘图法绘制生物图。

三、材料与用具：复式光学显微镜、杨树三年茎永久装片、椴树二年茎永久装片、玉米茎横切、水稻茎横切、铅笔（2H、HB各一只）、绘图橡皮、直尺、绘图纸。

四、操作及观察：(一) 显微镜的使用方法：1.安放镜座：用右手握镜臂，左手托镜座，将显微镜放置在自己身体的左前方，镜筒向前，镜臂向后。

2.对光：使用低倍物镜对准通光孔，调节反射镜，在目镜中能看见大片白色视野为佳。

3.低倍镜的使用：将永久装片放置于载物台上，将标本与通光孔重合，转动粗准焦螺旋，使镜筒下降到一定高度，在目镜中可见一模糊实像，继续使用粗准焦螺旋调节镜筒高度，使目镜中的像清晰可辨。

4.高倍镜的使用：在低倍镜中观察不清，分辨不明的可以在高倍镜中观察。

将要观察的部位调节至视野正中，转动镜头转换器，换成高倍镜，转动细准焦螺旋，使目镜中的像清晰。

高倍镜的视野小，光线暗，观察时可以适当调节进光量，使视野清晰。

(二) 使用显微镜的注意事项：1.取用显微镜时必须使用左手握镜臂，右手托镜座，以免碰撞及目镜脱落。

2.放置显微镜时要轻，防止剧烈震动。

3.目镜、物镜上落有灰尘时严禁用手指擦拭，防止汗水污损镜头。

镜头有专用的擦镜纸擦拭，严禁使用其他纸张与手帕擦拭。

4.放置装片时，应将有盖玻片的一面向上，否则会压坏标本或物镜。

5.严禁自行拆卸显微镜，防止零件丢失及损坏。

6.调节准焦螺旋时要慢、轻，防止损坏齿轮。

7.观察时双眼都要睁开，左眼观察，左手调节，右眼右手用于绘图和调整标本。

8.实验完毕后必须取出装片，降下镜筒，使物镜轻触载物台，盖上防尘罩，放入镜箱。

(三) 生物绘图法：1.作图前先了解本次作图的要求，确定好各图之间的比例，如本次实验要作两幅图，那么每个图就占一幅绘图纸的一半，即合理分配纸张大小，不可只在一侧作图。

临时装片的制作方法和徒手切片法以及植物细胞、组织观察一、实验目的1、掌握临时装片的制片方法、掌握徒手切片的方法2、了解植物细胞结构。

二、实验材料显微镜、载玻片、盖玻片、镊子、刀片、吸水纸、解剖针、培养皿、毛笔、滴管、纱布、0.9%的NaCl溶液；洋葱、马铃薯、芹菜、番茄三、实验内容和实验方法（一）临时装片的制作1、擦净载玻片和盖玻片（1）擦载玻片用左手的拇指和食指捏信载玻片的边缘，右手用纱布将载玻片上下两面包住，然后反复擦拭，擦好后放在干净处备用。

（2）擦盖玻片先用左手拇指和食指轻轻捏住盖玻片的一角，再将右手拇指和食指用纱布把盖玻片包住，然后从上下两面隔着纱布慢慢地进行擦试。

2、取样用滴管滴一点水或其他溶液（根据需要）于载玻片的中央，把观察物放于载玻片上的液滴中，展开或摇匀。

3、盖盖玻片右手持镊子，轻轻夹住盖玻片的一角，使盖玻片的边缘与液滴的边缘接触，然后慢慢倾斜下落，最后平放于载玻片上，避免气泡的产生。

如盖玻片下的液体过多，可用吸水纸将多余的液体吸掉。

（二）徒手切片法徒手切片法不需要任何的机械设备，只需要一把锋利的刀片就可以完成切片的制作，方法简单，也容易保持物的生活状态，有很大的实用价值。

1、选材选择软适度的材料，先截成适当的段块。

一般直径大小以3~5mm、长度以20~30mm为宜。

若材料太软，如幼叶等，不能直接拿在手中进行切片，可用适当大小的马铃薯块茎或萝卜块根等作支持物，将材料夹入其中，一起切片。

2、切片用左手拇指、食品指和中指夹住材料，使其稍突出在手指之上，拇指略低于食指，以免刀口损伤手指。

材料和刀刃上蘸水，使其湿润。

右手拇指和食指横向平握刀片，刀片要与材料断面平行，刀刃放在材料左前方稍低于材料断面的位置，以均匀的力量和平稳的动作从左前方向向右后方拉切。

切片时要用臂力而不用腕力，手腕不要动，靠肘、肩关节的屈伸来切片，拉切要快，中途不要停顿，更不能用拉锯方式进行切片。

每切2~3片就要把刀片上的薄片用湿毛笔移入盛有清水的培养皿中暂存备用。

附录《显微镜的使用》1、取送显微镜时，应右手握住镜臂，左手托住镜座，轻拿轻放。

切勿用一只手斜提，前后摆动，防止目镜滑出跌落。

使用时，显微镜应放在距实验台边缘7厘米左右处，略偏左。

2、保护好镜头，揩试目镜、物镜上的灰尘或污物，必须使用专用的擦镜纸。

切勿用手指、手帕、纱布和普通纸擦。

3、物镜镜头的切换一定要使用转换器，以免使镜头脱落和损坏。

4、转动粗、细准焦螺旋时，不要用力过猛，以防止机件损伤，调节失灵。

5、镜检时，坐姿端正，一般用左眼观察物象，用右眼看着实验报告纸画图。

两眼须同时睁开，以减少疲劳。

6、切忌一面从目镜进行观察，一面使镜筒下降，这样容易使物镜与玻片标本碰撞而损坏。

7、载物台要保持清洁干燥。

如使用新鲜材料做临时装片，必须在载玻片上加盖盖玻片。

切勿让材料、水滴、试剂接触物镜和载物台。

如沾上，应立即揩擦干净，以免镜头等被污染和腐蚀。

8、在高倍镜下调节焦距时，切勿使用粗调节器，以免压坏标本，损坏物镜。

9、高倍镜使用完毕，必须先上升镜筒，移开镜头后再取出玻片标本，以免取玻片时擦损镜头的镜面。

10、绝对禁止随意取出目镜或拆下显微镜的其他部件，以免灰尘掉入镜筒、部件失落或损坏。

附录《生物图的画法和注意事项》1、图的大小要适当，在纸上的位置要适中。

一般稍偏左上方，以便在右侧和下方留出注字和写图名的地方。

2、先用削尖的铅笔，根据观察到的物像（不能抄书），轻轻地画出轮廓，经过修改，再正式画好。

务必使图形真实。

3、图中比较暗的地方，用铅笔点上细点来表示（越暗的地方，细点越密集。

不能以涂阴影表示暗处）4、字尽量注在图的右侧。

用尺引出水平的指示线，然后注字。

5、在图的下方写上所画图形的名称，并标注物像的放大倍数。

显微镜的使用、徒手切片法及绘图法一．实验目的⑴掌握徒手切片、表面制片方法⑵熟悉显微镜使用方法及作图要领二．实验内容1．显微镜的使用生物显微镜由光学部分和机械部分组成⑴光学部分——目镜、物镜、聚光器、可变光栏、反射镜※两次放大，即物镜将标本做第一次放大，目镜将第一次放大的像做第二次放大，两者相乘即是观察到的放大倍数⑵机械部分包括镜坐、镜臂、镜筒、载物台、粗细调节手轮及推动器⑶操作：①将显微镜防置离桌缘约10厘米处②对光：上升聚光镜至载物台水平，打开光栏，将低倍镜转至镜筒的正下放（用转盘听到“得”一声）转动反光镜，同时从接目镜向下看，直至明亮均匀在视野。

③装片：将观察的标本片从镜前方横置于载物台上④调节焦距：向外旋转粗调节手轮，使镜筒慢慢下降，注意镜头与标本的距离，自目镜向下观察直至物像清楚为止。

（向外物镜下降，向内物镜上升）另外：高倍镜应先在低倍镜下选择物像，移至视野中心，转动转盘使高倍镜转至镜筒正下方，应能看到欲观察之物像，用细调节手轮使之图象清晰。

⑷注意点：①取拿显微镜时，一手握镜臂，一手托镜坐，轻取轻放。

②先用低倍镜观察，看清物象后再换高倍镜，③在用高倍镜观察时，注意物镜与所观察标本的间距，以防错误操作，而损坏镜头，压碎标本片④注意保持显微镜的干燥和清洁，不得随意拆卸镜头，镜头要用擦镜纸擦拂，要防止水或药液外溢而污染镜头及其他部位。

2．徒手切片法系用刀片或徒手切片器将材料切成薄片，可在显微镜下观察组织构造、细胞特征的制片法。

材料：新鲜应除净泥沙、干燥须经软化，优点：简便快速能保持植物原有结构的真像，色彩和内含物缺点：厚薄不一，不利于长期保存。

①方法a：取材，固定与切片：选取易软化的中药材适当部位，切成2-3厘米的小段，用拇指及食指和中指夹住材料，下端用无名指托住，另手持刀片自左向右移动手腕，牵拽切片，动作要轻要快，切禁不能是拉锯式，在切的同时经常用水湿润，对于叶或柔软的材料，须用材料夹住。

（如用胡萝卜、马铃薯等）b：装片：将切好的薄片用毛笔小心移入盛有清水的培养皿中，取载玻片滴加甘油和试液，用镊子或毛笔将切片移于其上。

徒手切片法特点不需要机械设备，能保持活体的情况。

主要用在组织化学、生药鉴定、石蜡切片选材等。

方法要领切片最要紧是平而薄，无需切成完整的。

例如茎的横切面，无须切成整圆形，只需一角就足够了。

步骤①一般用左手的大拇指、食指和中指这三个手指拿住材料，使材料突出在指尖上面，使刀片不会割伤它们。

用右手拿刀片。

两只手应该可以自由活动，不要使它们靠紧身体，或压在桌子上。

②刀片刀口放在切面上，从刀片刀口下方起，斜向后拉切，切时要用臂力，不用腕力。

不必太用力，否则就不易切薄。

③连续切几片后，取下切片，转移到载玻片上的一滴水中，放在低倍显微镜下检查。

假如切片充分透明，细胞重叠不明显，就可使用。

否则得重切。

④过于柔嫩的植物器官，如叶片，难以直接拿住，可以用坚固而易切的材料夹后再切，如胡萝卜片。

⑤作临时观察的话，直接用水或甘油封片就行。

如果要更清楚地显示细胞结构及其化学成分，则可以进一步染色。

徒手切片法▪实验材料：印度橡皮树叶片；芹菜叶柄；柳树枝条▪实验用具：双面刀片，镊子，毛笔，培养皿，载片和盖片，吸水纸，光学显微镜▪药品：蒸馏水，95％叔丁醇，甘油细胞内含物观察——橡皮树叶片▪材料：橡皮树叶片▪方法：徒手切片▪观察重点：复表皮、钟乳体–钟乳体：碳酸钙结晶–形态：呈桑葚状–问题：若在盖玻片一侧滴入盐酸，钟乳体如何变化？结晶体——背景知识▪种类：–草酸钙晶体：针状、晶簇状等–碳酸钙晶体：桑葚状–二氧化硅结晶：禾本科▪细胞化学检验方法：–酸检法：醋酸（－）；浓盐酸/硫酸（＋）–醋酸铜－硫酸铁法：▪醋酸铜溶解草酸钙，形成草酸铜；▪加硫酸铁：黄色结晶机械组织——芹菜叶柄▪实验材料：芹菜叶柄▪观察重点：–芹菜叶柄：厚角组织植物茎的次生结构——柳树茎▪观察重点：–多年生植物茎的次生结构；–年轮，周皮等植物组织染色–番红——固绿对染。

实验指导一 简易植物制片、细胞的结构观察和生物绘图一、目的学会徒手切片法，简易装片法和生物绘图法。

二、用品显微镜、植物学盒（内装刀片、小剪、镊子、解剖针各l把；载玻片、盖玻片各6片）、培养皿、滴管、纱布、毛笔、吸水纸、蒸馏水、75%乙醇、染色液（1％番红、碘液、龙胆紫）。

三、材料玉米幼茎或蚕豆幼茎、洋葱鳞叶、胡萝卜（或萝卜、马铃薯块茎）、小麦叶片或其它叶片。

四、方法步骤（一）简易装片法1. 擦拭玻片 载玻片和盖玻片用前均要擦拭干净。

正确方法是用左手拇指和食指夹住玻片的两边，右手拇指和食指衬两层纱布夹住玻片的一半，进行擦拭，然后再擦拭另一半，使整个玻片干净为止，如玻片太脏，可用纱布蘸些水或酒精擦拭，再用干纱布擦干。

2. 取材 用镊子撕下洋葱鳞叶的内表皮．剪成长约5mm宽约3mm的小片。

3. 装片 在载玻片上滴一滴清水，将剪好的表皮浸入水滴内，并用解剖针挑平，再加盖玻片。

加盖玻片时先使一边接触水滴；另一边用针托住慢慢放下，以免产生气泡。

如盖玻片内的水未充满，可用滴管吸水从盖玻片的一侧滴入，如果水太多溢出盖玻片外，可用吸水纸将多余的水吸去。

这样装好的的片子就可以进行镜检。

（二）徒手切片法徒手切片是制作切片中的一种简单的方祛。

制作时只需要一把刀片和一个培养皿即可开展工作。

对草本植物器官的观察一般都可以用徒手切片法进行，甚至于木本植物较细的嫩枝也可用此法。

1. 用植物茎（或其它器官）做徒手切片取一小段（长约2cm）的玉米或蚕豆幼茎，用左手的拇指、食指和中指夹住材料，材料要稍高于拇指0.5-1mm左右，右手执刀、刀要锋利，刀口向内，自左前向右后水平拉切。

刀片与材料垂直切时最好用臂力而不用腕力，用力要均匀，材料与刀成垂直，切片时只动右手，左手不动，更不要来回拉切。

不论切什么材料，在切前，刀片及材料要蘸水。

每切几片后，用毛笔蘸水将材料蘸到有水的培养皿中，然后选择最薄的进行染色装片。

将薄片放在载玻片上，滴上一滴1%番红液或碘液、龙胆紫，约1分钟，用吸水纸将番红液吸去，再滴二滴蒸馏水，稍微摇动，再用吸水纸吸去多余的水分，盖上盖玻片后，便可镜检。