酶的发酵生产
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酶制剂发酵工艺流程英文回答:Enzyme production through fermentation involves several steps. The overall process can be divided into three main stages: upstream processing, fermentation, and downstream processing.1. Upstream Processing:The first step in enzyme production is the selection and preparation of a suitable microbial strain. This involves screening different strains for their ability to produce the desired enzyme. Once a strain is selected, it needs to be cultured and maintained in a laboratory or industrial setting.The next step is to optimize the growth conditions for the selected strain. This includes determining the optimal temperature, pH, and nutrient composition for the growthmedium. The growth medium may contain carbon sources, nitrogen sources, minerals, and vitamins to supportmicrobial growth.2. Fermentation:Once the strain is prepared and the growth conditions are optimized, the fermentation process begins.Fermentation can be carried out in batch, fed-batch, or continuous mode, depending on the specific requirements.During fermentation, the microbial cells grow and produce the desired enzyme. The fermentation parameters, such as temperature, pH, aeration, and agitation, need tobe carefully controlled to ensure optimal enzyme production. The fermentation process can take several hours to several days, depending on the microbial strain and enzyme being produced.3. Downstream Processing:After fermentation, the next step is to separate andpurify the enzyme from the fermentation broth. Thisinvolves several steps, including cell separation, enzyme extraction, and purification.Cell separation can be done through centrifugation, filtration, or other methods to remove the microbial cells from the fermentation broth. Enzyme extraction is then carried out to release the enzyme from the cells or the extracellular medium. This can be done through cell disruption techniques, such as sonication or homogenization.Finally, the enzyme is purified using varioustechniques such as chromatography, filtration, and precipitation. The purification process removes impurities and concentrates the enzyme to a desired level of purity.中文回答:酶制剂的发酵生产涉及几个步骤。
酶工程•第一章绪论•第二章酶的发酵生产•第三章酶的分离纯化•第四章酶分子修饰•第五章酶与细胞固定化•第六章酶反应动力学•第七章酶的应用第一章绪论•第一节酶的概述•第二节酶工程概述•第三节酶的生产方法•第四节酶的应用前景第一节酶的概述一. 酶(enzyme)的概念二. 酶的研究历史三. 酶的分类与命名四. 酶的活力测定一. 酶(enzyme)的概念1.酶是催化剂(catalyst)所谓催化剂是一类能改变反应速度,但不改变反应性质、反应方向和反应平衡点,而且本身在反应前后也不发生变化的外在因素。
酶在化学反应中就是充当这样的角色。
2.酶是一种特殊的催化剂3.酶是生物催化剂酶在催化反应时,具有与一般非酶催化剂不同的特点。
其具有催化的高效性、高度专一性及化学本质是蛋白质的特点。
(1)酶具有催化的高效性酶能在温和条件下(常温、常压和近中性PH),极大地提高反应速度,与非酶催化剂相比,酶的催化效率可高出107~1012倍。
如:2H2O2 2H2O + O2该反应的催化剂可以有Fe+、血红素和过氧化氢酶,其催化反应的速度分别是:5.6×10-4mol/mol Fe+.S、6.0×10-1mol/mol血红素.S、3.5×106mol/mol过氧化氢酶.S(2)酶具有催化的高度专一性(specificity)酶作用的的专一性是指酶在催化反应时,通常只作用一种或一类反应物发生相应的反应的特性。
酶作用的专一性主要表现在以下几个方面:a. 绝对专一性:酶只能催化一种反应物发生反应的特性如:谷氨酸脱氢酶只能催化L-谷氨酸脱氢,对其他氨基酸没有作用,其具有绝对专一性。
b. 相对专一性:酶在催化反应时,允许底物分子有一些变化,即可以催化一类反应物发生反应。
如:酯酶催化酸与醇缩合成酯,但对反应物分子的侧链基团专一性不强。
淀粉酶、蛋白水解酶也具有这种专一性。
c. 异构专一性:酶对反应物分子的立体异构体和顺反异构体具有高度的选择能力。
第二章酶的生物合成与发酵生产酶工程就是将酶所具有的生物催化功能,借助工程手段应用于社会生活的一门科学技术。
酶制剂是如何生产的呢?我们知道,酶是活细胞产生的具有催化作用的生物大分子,广泛存在于动植物和微生物体内。
酶的生产方法有三种:提取分离法、生物合成法、化学合成法。
生物合成法又包括:微生物细胞发酵产酶、植物细胞发酵产酶和动物细胞发酵产酶第一节酶生物合成及调节一、酶的生物合成先从遗传信息传递的中心法则谈起(1958年,Crick提出)遗传信息传递的中心法则:生物体通过DNA复制将遗传信息由亲代传递给子代,通过RNA 转录和翻译而使遗传信息在子代得以表达。
DNA具有基因的具有基因的所有属性。
基因是DNA的一个片段,基因的功能最终由蛋白质来执行,RNA控制着蛋白质的合成。
核酸是遗传的物质基础,蛋白质是生命活动的体现者。
1970年Temin和Baitimore发现了逆转录酶,是对中心法则的补充。
即:细胞能否合成某种酶分子。
首先取决于细胞中的遗传信息载体-DNA分子中是否存在有该酶所对应的基因。
DNA分子可以通过复制生成新的DNA,再通过转录(transcription)生成所对应的RNA,然后再翻译(translation)成为多肽链,经加工而成为具有完整空间结构的酶分子。
(一)RNA的生物合成--转录(transcription)P102DNA分子中的遗传信息转移到RNA分子中的过程,称为转录。
转录:见课件附图,书P102定义:以DNA为模板,以核苷三磷酸为底物,在RNA聚合酶(转录酶)的作用下,生成RNA分子的过程。
模板链(template strand):又称反意义链(antisense strand),指导转录作用的一条DNARNA的转录过程:转录过程分为三步:起始、延长、.终止补充:原核生物的RNA聚合酶(DDRP)-见课件附图E.coli的RNA聚合酶是由四种亚基组成的五聚体(α2、β、β′、)全酶(holoenzyme)包括起始因子σ和核心酶(core enzyme)。
发酵法生产酶的原理
发酵法生产酶的原理是利用微生物在特定条件下通过发酵过程生产酶。
发酵生产酶的一般步骤如下:
1. 选取适当的微生物:根据所需的酶的类型和性质,选择合适的微生物菌株。
2. 培养微生物种子菌:将选定的微生物菌株接种进含有适宜营养物质和适宜温度、pH值的培养基中,进行预培养。
3. 大规模培养:将预培养的微生物菌液接种进大规模的发酵罐中,提供足够的营养物质和良好的培养条件,如温度、pH值和氧气供应等。
4. 酶的产生和积累:在培养过程中,微生物菌株通过代谢产生有益酶的合成。
合成的酶可被菌体细胞外排出,也可积累在菌体内。
5. 分离和提取酶:发酵结束后,通过离心、过滤或其他分离方法,将菌体与培养液分离。
然后,从菌体或培养液中提取酶。
发酵法生产酶的原理是基于微生物的生物代谢能力。
微生物通过合适的营养物质和培养条件,利用糖类、脂肪和蛋白质等有机物进行代谢,产生酶作为催化剂。
这些酶能够在特定的温度、pH值和底物浓度等条件下,促进生物化学反应的进行,从而转化底物为所需的产物。
发酵产酶的工艺流程
1. 菌种培养
- 从种菌库中取出保种菌,在无菌条件下接种到培养基中
- 控制好温度、pH等培养条件,进行活化培养
- 进行传代扩大培养,获得足够数量的种子液
2. 发酵
- 将活化后的种子液按一定的接种量接种到发酵罐中
- 控制好温度、pH、通气量、搅拌速率等发酵条件
- 监测并维持发酵过程中的营养物质供给
- 发酵一定时间后终止发酵
3. 分离提取
- 将发酵液经过离心或过滤等操作,从菌体中分离出粗酶液
- 如有需要,可进行盐析、有机溶剂沉淀等进一步纯化
- 将纯化后的酶液浓缩或干燥,制成酶制剂产品
4. 检验包装
- 对酶制剂进行活性、纯度、杂质等各项指标检测
- 将合格产品包装、贮存,准备出厂
需要注意的是,具体的工艺流程和参数因酶种类和生产者而异,以上只是一个通用的概括流程。
在实际生产中还需根据具体情况对工艺进行优化和调整。