下载文档原格式
最新：卵胞质内单精子注射(ICS1)技术中国专家共识(2023年)摘要人类卵胞质内单精子注射(intracytop1asmicsperminjection,ICSI)技术开展至今已有30余年。
其最初主要应用于针对严重少、弱、畸形精子症导致的男性不育患者的治疗，但随着未成熟卵体外培养、卵子冷冻、胚胎植入前遗传学检测等辅助生殖技术的开展，ICSI使用比例已大幅提升。
虽然目前ICSI技术相对成熟，但仍有很多细节值得关注和完善。
为规范与优化人类辅助生殖技术从业者的ICS1操作，由中国医师协会生殖医学专业委员会发起，并联合全国多家生殖医学中心共同编撰了本共识。
20世纪90年代首例卵胞质内单精子注射(intracytop1asmicsperminjection,ICSI)婴儿的诞生［1］,标志着对男性不育的治疗取得了突破性进展。
如今该技术已常规应用于全球各生殖中心，并且随着未成熟卵体外成熟培养(invitromaturation,IVM),卵子冷冻、胚胎植入前遗传学检测(preimp1antationgenetictesting,PGT)等辅助生殖技术(assistedreproductivetechno1ogy,ART)的广泛开展，ICSI的使用比例也大幅增加［2］。
因此，能够熟练、高效、安全地进行ICS1操作是每一个胚胎学家应具备的基本技能。
虽然ICSI技术比较成熟，基本流程也具有较高的标准化，但仍有部分细节值得关注或有待完善。
本共识将从ICSI的适应证、正常及常见异常形态卵子、卵子的显微注射、受精观察、ICS1特殊情况的应对及其他细节、ICS1技术的质控及培训等几个方面进行阐述并提出相应推荐意见，旨在为人类ART实验室从业者提供实用性参考，从而为广大不孕患者提供更高质量的服务。
-.ICSI的适应证虽然ICSI技术成功解决了一些严重男性因素导致的不孕问题，但在部分非男性因素不孕的治疗方面，其有效性和安全性仍不明确［3-4］o因此，ICS1技术的使用需更加谨慎。
单精子卵胞浆内注射(ICSI)操作常规显微操作糸统显微操作系统是由NIKON-TE2000倒置显微镜、NARISHIGE显微操作系统、Eppendorf液压显微注射臂和NARISHIGE气压持卵臂组成。
显微操作系统配备恒温台，其设置温度应使ICSI注射器中的液滴保持37℃。
显微注射针和持卵针内的压力由操作器控制，显微注射臂连接的管中充满矿物油．使整个管路中不含空气，持卵臂连接的管中为空气。
显微注射针ICSI显微注射针对于成功的ICSI是非常重要的，采用的是Origio公司生产的Humagen ICSI针和Holding针。
精子处理1. 将Isolate“upper”和“lower”和sperm washing medium平衡至室温。
2. 制备梯度：在离心管中各加入1.5 ml -2.0 ml“upper”和“lower”，“upper”在上，“lower”在下，注意加样时动作轻柔，避免产生气泡及将二者充分混匀，两者之间应形成明显的界面。
在制好的密度梯度上加1.5 ml -2.0 ml的液化的精液。
3. 离心300g×15min。
4. 弃上清液，用吸管将离心管底层的白色沉淀转移至另一支含2 ml -3 ml sperm washing medium的离心管中，转移沉淀时应避免过多地将洗液吸上来，同时还要保证能尽量多地吸取沉淀。
5. 离心200g×10min。
6. 弃上清液，留沉淀0.3ml-0.5 ml备用，同时取样镜检。
卵细胞准备，颗粒细胞（放射冠）去除（拆蛋）：1. 选用透明质酸酶和PVP均为商品化试剂，提前预温，透明质酸酶需在使用前1小时放置于二氧化碳培养箱中平衡。
2. 拉制口径200～300μm毛细管数根。
准备两个3037皿，分别标上ICSI前和ICSI后以及患者姓名和日期。
两个3037皿中间均加入1ml G1并覆盖矿物油，移入培养箱备用。
3. 在已预热的4孔板1、2和3号孔、中间孔中加入G-MOPS液各1ml。
卵胞浆内单精子注射在受精基础研究中的应用
陈秋菊;朱伟杰
【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》
【年(卷),期】2003(11)3
【摘要】卵胞浆内单精子注射 (ICSI)近十年来广泛应用于人类辅助生育。
作为一种旁路受精方式 ,精子绕过了自然受精的多个环节 ,如精子与卵透明带的结合、顶体反应以及精子与卵胞膜融合等 ,丰富了经典的受精理论 ,也为研究受精机制提供了一个有效的实验模型。
本文概述了ICSI受精后的精子变化、顶体反应、活化卵细胞的分子机制、不同发育阶段精子及生精细胞受精潜力等方面的进展。
【总页数】3页(P122-124)
【关键词】卵胞浆内单精子注射;受精
【作者】陈秋菊;朱伟杰
【作者单位】暨南大学生殖免疫研究中心
【正文语种】中文
【中图分类】R321.33
【相关文献】
1.早期补救性卵胞浆内单精子显微注射在可疑受精障碍患者中的应用 [J], 王琰;王志强;柴三明;倪亚莉;安锦霞;冯帆
2.卵胞浆内单精子注射在常规体外受精失败病例中的应用 [J], 史哲;黄敏珍;陈创奇
3.早期补救及后续卵胞浆内单精子显微注射在常规体外受精受精失败及低受精率周
期的应用 [J], 赵志明;曹金凤;杜元杰;崔娜;郝桂敏;徐素欣
4.卵胞浆内单精子注射在前次常规体外受精失败病例中的应用价值 [J], 李脉;靳镭
5.早期补救卵胞浆内单精子注射在常规体外受精不受精或低受精周期中的应用 [J], 殷慧群;姜宏;何瑞冰;汪存利
因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
卵胞浆内单精子注射（ICSI）简介ICSI是一项技术，可以帮助接受IVF的夫妻增强所取卵的受精能力。
它于1992年推出，现在已成为世界上大多数成熟的IVF中心的常规程序。
使用这种技术已经诞生了全世界成千上万的孩子。
如果需要ICSI，我们的工作人员将为您提供咨询，并在进行下一步操作之前共同做出决定。
以下信息对希望了解有关ICSI的夫妇很有帮助。
什么是ICSI？ICSI是一种侵入性程序，其中选择单个精子，然后直接穿过卵壳（透明带）和卵菌膜（卵的外膜）注入卵中以增强受精能力。
ICSI的好处是什么？ICSI有助于精子数量少或精子活动性和形态（即睾丸精子）差的患者受精。
还建议对蛋壳有缺陷的患者使用，以防止精子进入卵子。
或那些有常规试管婴儿受精失败的病史。
如果没有受精，则意味着精子无法独自完成受精。
ICSI或IVF的妊娠结局是否有所不同？ICSI后的妊娠结局与IVF相似。
研究表明，ICSI孕妇的流产，死产或产前死亡率没有更大的提高。
使用此程序受孕的儿童是否有异常风险？研究表明，IVF和ICSI所生的孩子之间没有重大区别。
正常妊娠也可能发生胎儿异常的风险很小。
还可能存在与程序本身无关的其他风险；例如精子携带染色体异常和遗传缺陷的传播。
为什么需要ICSI？受精失败可能是由于卵子，精子或两者兼而有之。
在很大程度上，ICSI有助于克服此问题。
在以下情况下，ICSI可能对您有帮助：（a）精子数量极少（b）精子活力极低（c）从睾丸或附睾中手术切除的精子，它们不能穿透卵壳并受精（d）由于受精不良或没有受精而导致先前的失败周期（e）取到的卵子很少所有的卵子都可以做ICSI吗？可以对所有卵子进行ICSI。
但是，如果您取到大量卵子，则可以将卵子分为两组。
如果您有无法解释的生育状况，在与您和您的伴侣讨论后，可以分别进行常规IVF和ICSI。
经过ICSI的胚胎在胚胎移植过程中有什么区别吗？胚胎移植过程或胚胎移植没有任何区别，无论您的胚胎是否通过了ICSI或IVF。
经皮附睾穿刺取精术结合单精子卵细胞质内显微注射技术背景1985年丹麦C. Y. G. Nordling首次报告了通过经皮附睾穿刺（PESA）技术成功取出精子的情况，这一发现为不育症患者提供了新的治疗方式。
而1992年，Schlegel和Li在经皮睾丸穿刺（TESE）的基础上发明了一种新的技术，经皮附睾穿刺（PESA）技术，成功地把这种普遍用于精液常规检查中的方法开发成为一个新的治疗方案。
在此基础上，单精子卵细胞质内显微注射（ICSI）技术便顺理成章地产生了。
PESA技术PESA技术指的是通过经皮穿刺睾丸或附睾，使用注射器抽出精液，针对一些因为输精管堵塞或其他原因无法正常射精的男性进行治疗。
该技术具有无创伤性、轮廓美观且更加安全的优势，常被用于一些不育症的治疗中。
PESA技术成功地抽出的精子可以很方便的用于辅助生育技术如单精子注射（ICSI）等。
ICSI技术传统的人工授精仅利用精子与卵子在体外的自然结合，但因为许多原因，某些男性患者的精子数量、活力或形态可能不合格，这些情况都不能用传统的人工授精方式实现受孕。
ICSI技术是目前应用最广泛的辅助生殖技术之一，ICSI技术相对于人工授精技术而言，其前期的操作难度相对较大，所以也有人们把它看做是一项“精密手术”。
ICSI技术操作过程中需要使用显微操作系统，医生使用非常精密的显微针将一只精子注入到卵子内，并在注入后使其结合。
结合成功后，置入孵化器中，待24-48小时孵化后，获得有发育潜力的胚胎，胚胎以后可以用于移植等下一步操作。
PESA/ICSI技术的应用PESA技术和ICSI技术的结合，在某些不孕症案例中得到了良好的结果。
该技术可以用于几乎所有精子无法正常射出的男性，如睾丸和附睾切除、先天性纯粹性无精子症、宫颈粘液抗体阳性。
单精子ICSI技术现在是不孕症治疗的热门选择之一。
PESA/ICSI技术的风险由于PESA/ICSI技术涉及到大量的操作，操作结束后可能会出现一些副作用和风险。
卵泡内精子显微注射治疗弱精子症中华泌尿外科杂志CHINESE JOURNAL OF UROLOGY1999年第2期434001湖北省荆州市第三人民医院泌尿外科黄强韩见知同济医科大学同济医院泌尿外科章咏裳弱精子症是男性不育的常见原因，自然妊娠率低。
Palermo 等［1］首先报道的卵泡内精子显微注射（ICSI），是一种新发展起来的辅助授精技术，方法是将获得的精子直接注入卵泡内完成受精［1-3］。
本技术精子无需发生顶体反应，明显提高了弱精子症的受精率和妊娠率，故可用于常规体外授精治疗后仍无正常受精或受精率低于5%、活力精子数目在5×105/ml以下，近端精路梗阻者［3］。
李蓉等［4］采用ICSI授精技术治疗严重男性不育患者也获得成功。
一、促卵巢排卵从治疗前一个月经周期的黄体期开始，每天经皮下注射1mg 醋酸利普安使垂体处于脱敏状态。
在月经的第1天开始卵巢被药物刺激，以促进卵泡发育，此时血清雌二醇水平低于0.22nmol/L，经阴道的超声波检查无卵泡生长，卵巢呈静止状态。
在卵巢药物刺激的第1、2天，每天给予150IU的人绝经期促性腺激素（HMG）和150IU纯化的卵泡刺激素（FSH），在卵巢药物刺激的第3、4、5天，每天只给予150IU的HMG。
从卵巢刺激的第6天开始，根据人体血清雌二醇水平和经阴道超声波检查图像决定HMG的注射量。
当血清雌二醇≥2.94nmol/L，B超检查有两个或更多的直径在1.9cm以上的卵泡时,给予10 000IU HCG促使排卵。
在HCG 注射后，停止给予醋酸利普安和HMG［3］。
二、取卵及分离(一)卵子的收集［5］1.通过腹腔镜穿刺卵泡取卵。
用腹腔镜检查卵巢状况后，插入特制的双腔针穿刺卵泡，以负压小于14kPa，吸出卵细胞及卵泡液，并即刻在显微镜下检查以确定吸出完整的卵子。
必要时可进行第二次抽吸，抽吸出的卵子转移至培养液中。
2.B超引导下穿刺取卵。
其途径有经腹部和经阴道二种。
卵内精子输入法 (ICSI)
什么是卵内精子输入法？
卵内精子输入法是体外受孕的一种专门形式，用于治疗某些由于男性因素而导致的不孕症。
具体做法是将一个精子直接注射到一个成熟的卵子里。
什么时候使用卵内精子输入法？
大约30%的不孕症是由男性问题所引起的，卵内精子输入法的出现彻底改变了男性不孕症的治疗。
在1992年首宗成功的怀孕个案之前，男性不孕的夫妇除了选用捐精之外，并无它计可施。
较有可能受惠于卵内精子输入法的包括普通体外授精法效果不佳的夫妇以及有下列情况的男性：
精子輸入之後
精子輸入
卵内精子输入法是怎么做的？
在能够进行卵内精子输入法之前，我们首先得通过普通的体外受精法取得成熟的卵子。
男伴侣的精液在实验室里经过处理，尽量分离出多个健康的、有活力的精子。
卵子在实验室里休息了4-6个小时之后，我们会将它们的硬外膜除去，从而鉴定出它们是否成熟，不成熟的卵子不能接受输入。
我们会用一个特殊的仪器将卵子固定，仪器小到它的尖端肉眼几乎看不见。
我们再用一根更细小的针（输入针）将一个外表正常的精子吸起，以极高的准确性将针穿过卵子的外壳（透明带）直达卵子的内部。
精子被慢慢地注射到卵子里头，针管被拔出来，精子被留在卵子里。
输入后的卵子被放在保温箱里过夜，第二天早上我们会检查看有没有受精的迹象。
再过24小时之后我们便能断定有多少受精卵已经分裂，并进一步形成胚胎。
并非每个卵子都会受精，也并非每个受精卵都会形成胚胎。
跟标准的体外受精法一样，植入多少个胚胎取决于几个因素包括妇女的年龄。
如果胚胎看上去健康的话，用剩的胚胎可用于冷藏。
●
精子形态差 ●
精子活力差 ●
精子数目过低 ●
睾丸或附睾阻塞，妨碍精子的释放。
● 体内出现抗精子抗体，妨碍精子的正常
功能。
● 输精管结扎后重新接驳，但不成功，或
接驳后导致精子的数量和质量极低。
可能的风险
卵内精子输入法所产生的婴儿已有成千上万，目前为止，没有证据显示卵内精子输入法或体外受精法所产生的婴儿的的生理缺陷率高于自然怀孕的生理缺陷率。
母亲分娩时的年龄、家族健康史、以及妊娠并发症仍是新生儿身体健康的最主要预知素。
然而，一小部分通过卵内精子输入法所诞生的男婴可能会遗传他们父亲的生育毛病。
某些男性的精子问题是后天造成的，不会遗传（例如输精管阻塞、脊髓外伤等），然而其他男性的精子问题却可能是与生俱有的。
这些问题会被遗传给下一代，因为染色体会出现重新排列，或Y染色体中的一小部分会被删去。
再者，男性精虫数目极低或输精管阻塞都可能是多囊性纤维化的基因携带者。
除了将精子问题遗传给下一代之外，他们也有更高的机会生下一个患有该病的孩子，尤其是如果他们的伴侣也携带这种基因的话。
正如母亲的年龄影响婴儿罹患生理缺陷的机会一样，精子数目极低的男性也有更大的机会（约1%）生下一个染色体数目异常的男孩（例如XXY或XYY而不是通常的XY）。
这些儿童外表正常，智商也与常人无异，但他们日后会出现学习困难、行为问题、或不孕症。
夫妻一方或双方可以去验血来筛检出许多（但不是全部）这方面的问题，例如染色体排列异常和多囊性纤维化的基因等等。
可以做遗传咨询，以及在妊娠期间做基因检测（例如羊膜穿刺或胎盘组织活检）来查出这方面的问题。
卵内精子输入法有多成功？
目前世界上很多人工受孕诊所都用过了卵内精子输入法，在Genesis诊所，平均70-80%的成熟卵子会正常受精。
除此之外，有些卵子在注射过程中会被损坏（最多不超过2%），其它则会非正常受精。
使用卵内精子输入法的夫妇超过90%以上至少会有一个胚胎可以移植。
但即使使用了卵内精子输入法，仍有少许的机会一个卵子都不会受精。
怀孕的成功率跟标准体外受精法近似，随妇女年龄的不同而不同。
每一具体年龄的怀孕率请参阅我们的网站。
心理咨询
不孕症及其治疗都可以给人带来压力。
除了医疗照顾之外，尚有一个半小时的免费心理咨询也包括在治疗费当中。
提供这一服务的是一群分布于B.C.省各地的心理辅导员，他们擅长生育方面的心理治疗。
费用多少？
卵内精子输入法每一次的疗程费用是$6000，外加$2000到$3000的药费。
卵内精子输入法的费用所有保险公司都不包，但可以用于报税。
有的保险公司则会包药费。
请与你的保险公司打听清楚，看他们是否包药费，包多少，及包几个疗程。
