超临界萃取葡萄籽原花青素的研究进展

原花青素的提取、分离及抗氧化性、稳定性的研究本文以葡萄籽、葡萄叶子为原料，对其原花青素的提取工艺进行了研究。

在提取葡萄籽中的原花青素时采用50％乙醇，料液比1／40，于60℃下热回流浸提2个小时，提取2～3次最优提取工艺，此工艺提取得到的原花青素提取物得率为22.01％，产品纯度为51.17％；提取葡萄叶子时采用70％乙醇，料液比1／50，于80℃下热回流浸提3个小时，提取1～2次的最优提取工艺，此工艺得到的原花青素得率为34.14％，纯度为13.66％。

对上述提取物进一步纯化，葡萄籽提取物选用AB-8大孔吸附树脂，50％乙醇为洗脱剂，流速控制在4mL／min左右，葡萄籽原花青素总的提取得率为9.09％，产品纯度能达到94～95％；葡萄叶子提取物选用D-101大孔吸附树脂，70％乙醇为洗脱剂，流速控制在4mL／min左右，其原花青素提取得率为18.21％，纯度为25.63％。

采用超滤法对大孔吸附后的葡萄籽精提物进行低聚体的提纯，其过膜后的单体儿茶素含量有明显增加，P5000约为过膜前的6.6倍，P1000为过膜前的7.7倍。

其中压力对超滤通量的影响较大，而温度影响较小，一般选择20～30psig，室温下操作即可，避免在操作过程中长时间将过滤液暴露于强光及空气中。

利用Sephadex LH20将P5000样继续分离，使含量较高的一种二聚体得到了富集。

原花青素的抗氧化(FRAP)、清除DPPH自由基实验表明，葡萄叶子原花青素抗氧化、清除自由基活性均强于抗坏血酸，稍强于葡萄叶子提取物，而与原花青素的低聚体、高聚体相差不大。

原花青素在不同温度、光照、氧气的条件下1～2天内具有较好的稳定性。

经长期(10天)紫外光照射不稳定，含量下降甚至消失，溶液颜色逐渐加深，但其抗氧化、清除自由基能力无显著性变化(p＞0.05)。

抗坏血酸对紫外照射引起的原花青素不稳定能起到保护作用，并且存在剂量依赖效应。

类似于口服液等的原花青素溶液产品较适用微波法灭菌。

*基金项目:浙江省中医药管理局资助项目(G2*******)葡萄籽原花青素提取物的研究进展*毕 玲,傅柏平(浙江大学医学院附属第一医院口腔科,杭州310003)[摘要] 葡萄籽原花青素提取物是具有多种重要生物活性和药理作用的天然植物药,有着极强的抗氧化及清除自由基活性,能通过保护血管内皮功能、抗心肌氧化应激损伤及抑制低密度脂蛋白的氧化等多种机制抗心血管疾病,另外包括抗DNA 氧化损伤和脂质过氧化、抗肿瘤、抗炎、抗伤害和镇痛以及预防牙周病、糖尿病和白内障等多种药理作用,对人类健康有着多方面的益处,成为近年研究的热点。

文中对近几年葡萄籽原花青素提取物在药理作用和应用方面的研究进展做一综述。

[关键词] 葡萄籽原花青素提取物;生物活性;药理作用[中图分类号]R282.71 [文献标识码]A [文章编号]1003-3734(2008)17-1478-04Advances i n research of grape seed proanthocyani di n extractsB I L i n g ,F U Ba i ping(Depart m ent of S to m atology,The F irst Affiliated H os p ital ,Colle g e of M ed icine ,Zhejiang University ,H angzhou 310003,Ch ina)[Abstract] G rape seed proanthocyan i d in ex tracts (GSPE )consist o f m any polypheno ls or pheno li c co mpounds w ith mu lti p l e i m portant b iolog ical activ ities .GSPE possess potent antiox i d ant ability ,free rad ica l scaven ging pr operties and a w i d e variety of phar m aco log ic acti o ns ,i n cluding car d i o protection ,reduci n g ox i d ized LDL ,i n h i b iti n g ox i d ati v e da m age of DNA and lipid perox i d ation ,an ti carc i n ogenic and anti infla mm atory activ ities ,anti n o ciceptive effec,t as w ell as preventive effects on periodonta l disease ,diabetes ,and catarac.t It is beneficial for hu m an hea lth ,and has beco m e one of the hot spo ts currently .This artic le summ arized ne w researches on its phar m a co log ic actions and app li c ations .[Key w ords] Grape seed proanthocyanidin ex tracts (GSPE);b i o acti v ities ;phar m acolog ic actions 20世纪50年代至今,人们已从葡萄果实、叶和其他部位分离、鉴定的多酚化合物、脂肪酸、维生素、酶、碳水化合物、氨基酸、多肽和蛋白质、萜烯与挥发油成分以及脂类、果胶和蜡等物质达100多种,在众多成分之中,葡萄的医疗功效大都与原花青素(PC)的药理活性有关,PC 是自然界中广泛存在的聚多酚类混合物,主要由儿茶素或表儿茶素的单体、二聚体、三聚体、 、十聚体等组合而成。

葡萄籽中的原花青素能延缓衰老众所周知，氧在生命活动中至关重要，但是氧化问题也会给我们带来一些困扰。

在自然界中，它与铁发生反应会形成铁锈，与此相类似，机体内部也会氧化产生大量的自由基，最终导致身体也开始“生锈”衰老。

据研究表明，自由基是造成机体器官老化及诸多疾病的重要原因之一，据估计大约80%～90%的老化性、退化性疾病都与自由基有关。

现代研究发现，葡萄籽提取物中有一种叫原花青素的物质，具有超强的抗自由基的氧化功能，是维生素E的50倍、维生素C的20倍，有延缓衰老、预防动脉血管硬化的作用，被誉为体内自由基清除剂。

强大的抗衰老作用污浊的空气、紫外线、化学制剂等因素活化了自由基。

自由基攻击细胞，摧毁细胞膜，导致细胞死亡和细胞膜变性，使细胞不能从外部吸收营养，也排泄不出细胞内的代谢废物，长期积累人体就会加速衰老。

葡萄籽的提取物原花青素能清除人体内有害的自由基，保护人体细胞组织免于被自由基的氧化损伤，从而达到延缓衰老的功效。

正是基于这一作用，葡萄籽又被誉为“皮肤维生素”和“口服化妆品”。

它能恢复胶原蛋白活力具有美白、保湿、祛斑功效，改善皮肤弹性与光泽，清除痤疮、愈合疤痕。

葡萄籽还是天然的“防晒霜”，能够阻止紫外线侵害皮肤，增强皮肤抵抗力、免疫力，防治皮肤过敏及各类皮肤病。

在阳光充沛的地方，宜多摄入这类产品，以预防皮肤癌的发生。

食用 ...目前，葡萄籽常见的食用 ... 一般都是采用新科技“超临界流体萃取法”，再 ... 成胶囊，温水送服。

其实，日常生活中，酿完葡萄酒或者吃完葡萄剩下的葡萄籽可以放在一起洗净晾乾，炒熟，磨粉冲水喝，每天喝1次，美容保健效果也较好;另外，葡萄籽还可以榨油，其营养价值和医疗作用均得到国内外医学界及营养学家的充分肯定。

需要注意的是，有出血倾向者，或者凝血功能有障碍者不能食用这类产品;孕妇或准备怀孕者，以及正在进行母乳喂养者，还有儿童，也最好不要吃。

葡萄籽原花青素的药理学研究进展段国平;刘晓利;赵丕文【摘要】Proanthocyanidins is a collective name of a class of polyphenolic compounds widely found in the plant kingdom, of which the richest content is the grape seed. The research shows that GSPE has the pathological functions like scavenging free radicals, antioxidation, antitumor, anti atherosclerosis and resistance to radiation and therapeutical functions to diseases of many systems. As a natural antioxidant. GSPE conforms to modern people’s demand for high efficient and low-toxicity drugs, which has wide devel-opment prospects. This essay makes a review of the research advances of GSPE in Cardiovascular system diseases, cancer, and male reproductive system diseases and eye disease and discusses its mechanisms re-lated to resisting oxidation and free radicals so that it can provide reference for its further development and utilization.%原花青素是一类广泛存在于植物界的多酚化合物的总称，其中以葡萄籽的含量最为丰富。

原花青素提取方法的研究进展【摘要】原花青素是一种具有重要生理活性的多酚类化合物。

本文综述了天然原花青素的提取方法，其中包括有机溶剂提取、微波提取、超声波提取、超临界CO2萃取以及酶法等，以期为开发利用原花青素提供依据。

【关键词】原花青素；提取方法；研究进展原花青素（简称PC）是植物界中广泛存在的一大类多酚类化合物。

植物化学家通常将从植物中分离得到的一切无色的、在无机酸存在和加热处理下能产生红色的花青素（Cyanidin）的一类多酚化合物统称为原花青素。

许多研究表明，原花青素是清除自由基很强的抗氧化剂，其抗氧化、清除自由基的能力是VE的50倍、VC的20倍，它能防治80多种因自由基引起的疾病，包括心脏病、关节炎等，还具有改善人体微循环功能。

目前，原花青素已广泛应用于食品、药品、化妆品等领域。

全世界对原花青素的研究越来越深入，其中对原花青素提取方法的研究是一大重点。

原花青素传统的提取方法是有机溶剂提取法，但这种方法存在着对有效成分损失大、周期长、工序多、提取率不高等缺点，因此近10年来，在植物有效成分的提取方面出现了许多新技术、新方法，如超临界CO2萃取技术、超声波提取技术、微波萃取技术以及酶解技术等。

现将原花青素提取方法综述如下。

1原花青素的分类及分布原花青素是一大类多酚化合物的总称，起初统称归于缩合鞣质或黄烷醇类。

最简单的原花青素是儿茶素、表儿茶素或儿茶素与表儿茶素形成的二聚体。

此外，还有三聚体、四聚体等直至十聚体。

按聚合度的大小，通常将二～四聚体称为低聚体（ProcyanidolicOligomers，简称OPC），将五聚体以上的称为高聚体（ProcyanidolicPolymers，简称PPC）。

OPC为水溶性物质（PPC水溶性较差）、极易吸收；OPC消除自由基的能力与分子结构、聚合度有关。

二聚体中，因两个单体的构象或键合位置的不同，可有多种异构体，易分离鉴定的8种结构形式分别命名为B1～B8，其中，B1～B4是由C4～C8键合，B5～B8是由C4～C6键合。

超临界萃取葡萄籽有效成分的研究摘要葡萄籽油的传统提取工艺是压榨法和溶剂萃取法，提取的产品质量较差、纯度低,有异味和溶剂残留,严重影响了葡萄籽油的推广和应用，超临界CO2萃取法最佳，不仅油脂提取率高，而且对原花青素的破坏作用最小，原花青素质量较好。

关键词葡萄籽超临界萃取有效成分1 引言葡萄籽是葡萄酒厂和饮料厂在榨汁生产过程中的一种副产品，过去没有得到合理利用。

我国葡萄栽培地域广阔，产量随着酿酒业和饮料业的发展而逐年增加，而副产物葡萄籽亦将逐年相应增加。

葡萄籽浑身都是宝，亟待开发利用，这是一项很重要的天然资源。

葡萄籽油具有适宜的润肤作用，并且与洗净剂和表面活性剂有良好的配伍性，可广泛用于化妆品行业。

用于头发护理，造型，赋予头发丝般光泽，并促进毛发生长。

此外，葡萄籽油富含亚油酸，亚油酸含量在食用油中含量较高，而亚油酸是一种必需的脂肪酸，人体自身不能合成，必须由食物摄入。

在降低血液胆固醇方面，亚油酸是最好的脂肪。

用富含亚油酸的脂肪，替代是物种的饱和脂肪，血液胆固醇的水平可以下降20%以上。

原花青素的多羟基结构使它具有特殊抗氧活性和清除自由基的能力,已成为科学家关注的热点,也为其在化妆品领域的应用开辟了广阔前景。

近10年来低聚原花青素在欧美、日等国家的保健品、化妆品领域得到广泛应用,年销售超过1亿美元。

我国关于原花青素的研究较晚,化妆品中的应用就更少。

所以,充分利用我国丰富植物资源,开发含原花青素的纯天然、高效、无毒,且具有抗皱、美白防晒、保湿、抗辐射、养颜等功能的化妆品,更具有广阔的前景和应用价值。

2 国内外同一研究领域的现状与趋势分析葡萄籽油的传统提取工艺是压榨法和溶剂萃取法。

目前,国内外葡萄籽油的提取一般采用有机溶剂萃取法。

但该法提取的产品质量较差、纯度低,有异味和溶剂残留,严重影响了葡萄籽油的推广和应用。

现在原花青素的植物来源主要源于葡萄籽、皮以及松树皮中。

葡萄籽壳中原花青素含量比仁中要高得多，目前，普遍采用的工艺是先脱脂的方法包括压榨法、溶剂法、超临界CO2萃取法，其中，超临界CO2萃取法最佳，不仅油脂提取率高，而且对原花青素的破坏作用最小，原花青素质量较好。

葡萄籽原花青素的提取技术研究概况葡萄籽原花青素的提取技术研究概况摘要：原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物，葡萄籽被认为是提取原花青素的最正确原料。

随着科技的开展和进步，提取技术不断被突破，本文分析和整理近年来国内外期刊有关的文献，对葡萄籽原花青素的提取技术进行综述，为葡萄籽原花青素的工业生产研究提供参考。

关键词：葡萄籽，原花青素，提取原花青素是植物界广泛存在的一类多酚类化合物。

葡萄籽作为葡萄酒及葡萄汁生产的下脚料，是原花青素的主要来源，具有明显的本钱优势，被认为是提取原花青素的最正确原料。

原花青素由不同数量的单体黄烷-3-醇缩合而成，黄烷醇结构上可以连接不同的酰基或糖酰基，最常见的是没食子酸与-表儿茶素C3羟基缩合形成的酯。

由于单体组成及单体间连接键的不同，每种聚合体还可能包含许多同聚异构体，形成复杂的混合物。

通常将聚合度2～4的称为低聚体，将聚合度5以上的称为高聚体。

随着科学技术的快速开展和进步，传统提取方法不断被突破，超临界流体萃取、微波辅助提取以及动态罐组式连续逆流提取等新的提取方法和技术不断完善。

这些新技术具有提取率高、提取物纯度高、提取速度快等优点，具有十分广阔的应用前景。

1 提取技术1.1 超临界流体萃取超临界流体萃取是以超临界流体代替常规有机溶剂，对中草药中有效成分进行萃取和别离的新技术。

气体在超临界状态下兼有气液两相的双重特点，既具有与气体相当的高扩散系数和低黏度，又具有与液体相近的密度和对物质良好的溶解能力。

将处于超临界状态下的流体与待别离的中药材接触，选择性地溶解其中的某种成分，然后通过减压，使超临界流体迅速挥发，被溶解的物质以固态或液态形式析出，从而实现所需组分的提取与别离。

国内外均有运用CO2超临界流体萃取法制备葡萄籽原花青素的报道。

胡佳兴【1】利用甲醇为夹带剂的超临界萃取法提取葡萄籽中的原花青素；Chafer等【2】也是采用乙醇作为夹带剂提取原花青素，并用HPLC法测定提取物中的成分；Pinelo等【3】比较了超临界流体萃取法与固液萃取法，发现前者提取的原花青素具有更好的抗氧化性。