Transwell

transwell实验原理及步骤
Transwell实验是一种常见的物理隔离实验，它可以检测细胞分子的通透性，
定量测定细胞的迁移习性。

它具有优异的实验特性，可以在固定的薄膜上完成细胞迁移过程。

因此，Transwell实验实际上可以应用于多种疾病的研究和药物筛选等
研究领域。

Transwell实验是在薄膜上进行细胞迁移特性测定的实验，它的主要步骤分为
三个步骤：准备样品、实验和数据处理。

第一步，准备样品，首先要选择一种不同的膜作为载体，膜的选择取决于要用到的分子的大小；其次，细胞株必须首先分离和培养；最后，加入可能影响细胞迁移的化学物质（如化合物、药物、特定酶或细胞因子）作为实验要素。

第二步，实验阶段，包括将膜放置在实验容器中，并将细胞分离出来放入上腔，用培养液洗刷，细胞从上腔渗透进下腔，移动距离便是细胞迁移距离，借助于荧光染料示踪，通过荧光显微镜观察细胞，进而计算细胞的迁移距离。

第三步，数据处理阶段，则需要统计和分析细胞迁移的定量和分布信息，这就需要使用数据处理软件进行分析与统计，如生物信息学的软件pacbase、minitab等，将细胞的迁移情况进行统计和处理，最终求出迁移距离和数量。

Transwell实验因其快速、高效、无损及准确等特点，已被广泛用于分析细胞
迁移、免疫反应、肿瘤转移、信号转导等生物学过程中分子性能及功能的研究。

Transwell侵袭实验总结第一节概念这里想明确两个概念，一个是Transwell，另一个是肿瘤细胞侵袭模型。

1.Transwell关于Transwell这个词该如何解释，查了很多资料也未见准确的注解，我觉得可以这么理解吧，trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。

更准确地说，Transwell应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。

但无论是何种外形，其关键部分都是一致的，那就是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。

这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。

下图是一个Transwell装置的纵切面将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。

我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

下面参考guxuefeng战友和cosmosci战友的帖子具体来谈谈孔径的选择，当然不同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。

一、Transwell共培养介绍Transwell共培养是一种常用的体外细胞培养技术，通过使用Transwell孔膜插入式细胞培养皿，可以模拟细胞间相互影响的情况，从而更好地研究细胞间信号传导、细胞迁移和细胞间相互作用等生物学过程。

本文将结合Transwell共培养的原理、应用和操作步骤，对该技术进行详细介绍。

二、Transwell共培养的原理Transwell共培养的原理是利用Transwell孔膜插入式细胞培养皿，使得上下室中的细胞可以通过孔膜进行相互作用。

孔膜的直径通常在3-12微米之间，可以根据实验需要选择不同直径的孔膜。

上下室中的细胞可以分别种植在孔膜的两侧，从而实现细胞间的共培养。

三、Transwell共培养的应用1. 模拟体内细胞间相互作用：Transwell共培养可以实现不同类型细胞之间的相互作用，如免疫细胞与肿瘤细胞、上皮细胞与间质细胞等，从而更好地模拟体内情况。

2. 研究细胞迁移和浸润：通过在孔膜上涂覆ECM或采用Transwell迁移实验可以模拟细胞的迁移和浸润过程，对细胞迁移机制进行研究。

3. 评价药物渗透性：可用于评价药物在肠道、肾小球等组织中的渗透性，以预测其在体内的分布和代谢情况。

四、Transwell共培养的操作步骤1. 准备Transwell孔膜：选择合适直径的Transwell孔膜，并在使用前进行灭菌处理。

2. 细胞培养：分别将上下室的细胞分别种植在Transwell孔膜的两侧。

3. 培养条件：放置Transwell共培养皿于细胞培养箱中，保持适宜的pH值和温度，并定期更换培养基。

4. 实验操作：根据实验的目的，可进行细胞迁移实验、信号传导实验等操作。

5. 结果分析：对实验结果进行统计分析，观察上下室细胞的形态及细胞指标的变化。

五、Transwell共培养技术的发展趋势随着生物医学研究的不断深入，Transwell共培养技术也在不断发展。

未来，Transwell共培养技术有望应用于疾病模型的构建、靶向药物筛选等领域。

transwell原理Transwell原理是一种先进的分离技术，它由美国Eastman Kodak 公司的Peter Petrelli发明，在生物科学研究中大量应用，以传输活细胞和分离物质的传递孔作为核心。

由于其容易使用的特性，Transwell原理已成为实验室常用的分离技术，广泛应用于生物研究中。

Transwell原理的原理是，在双层孔板中放入低浓度滤膜，使得细胞筛选更加有效，实现细胞的选择性传输。

这些滤膜可以分为三种类型：固态滤膜、液态滤膜和气态滤膜。

固态滤膜是一种高精度的低孔径滤膜，其精度可达0.4微米，可用于细胞培养及细胞分离；液态滤膜是指利用比液体较低的表面张力将细胞悬浮在液体中，液态滤膜是比较常用的滤膜，可以过滤比较粗的细胞；气态滤膜则是通过利用气体或空气促进细胞分离，可以过滤出比较粗的细胞。

Transwell原理是一种分子半透膜离技术，它利用孔径小于细胞直径的限制来阻止细胞的穿透，从而实现细胞的分离和微管的转运。

Transwell原理的关键要素包括：大分子半透膜、双层孔板、细胞悬液和细胞沉淀液。

双层孔板主要由过滤滤膜和细胞悬液的容器组成，大分子半透膜限制细胞的穿透，细胞悬液较大的渗透压使细胞穿过滤膜，而细胞沉淀液则在滤膜下方缓冲，最终形成两个悬液层，实现细胞和物质的分离。

Transwell原理的应用很广泛，可用于细胞凋亡、癌变、药物毒性、肿瘤清除、血液滤过等实验。

它可以让研究人员以更精确的方式处理生物样本，提高实验的准确性和效率。

Transwell原理可以使实验研究更准确、更有效，在细胞分离、研究和细胞凋亡等领域具有重要的应用价值。

综上所述，Transwell原理是一种先进的分离技术，它可以提高生物研究的准确性和效率，广泛应用于细胞分离、研究和细胞凋亡等领域，具有重要的应用价值。

Transwell原理是实验室常用的分离技术，未来它将受到更多的关注，为生物研究的发展发挥重要作用。

transwell小体原理-回复transwell，也称为转移百分率孔板（Transwell Permeable Supports），是一种常用于研究细胞迁移、侵袭和转移的实验方法。

它通过模拟生理条件下的细胞迁移情况，提供了一种方便、可靠的实验平台。

本文将详细介绍transwell小体的工作原理和使用方法。

第一步：理解transwell小体的基本原理transwell小体由上下两个隔离的室组成，上室为细胞培养室，下室为培养液室。

两者之间分隔着一块孔径合适的膜片。

通常，膜片选择多孔性聚碳酸酯或胶原膜，其孔径大小可根据具体实验需求进行选择。

细胞可以通过膜孔迁移到下室中，从而模拟细胞在体内穿越生理屏障的过程。

第二步：制备transwell小体实验装置1. 准备上下室：选择适当容量的上下室，通常上室较小，下室较大，确保两个室都可以容纳足够的培养液和细胞。

2. 安装膜片：将膜片放入上室中，确保膜片放置平整，没有明显的气泡或污染物。

3. 连接上下室：使用连接管将上室与下室连接起来，并确保连接部分密封良好，以防止液体泄漏。

第三步：培养细胞1. 处理膜片：在实验前，先对膜片进行处理。

对于多孔性膜片，可以先进行预涂或预培养，以增加细胞附着和生长的效率。

2. 细胞培养：将需要进行迁移实验的细胞悬浮液加入上室中，并注意控制细胞密度，避免过高或过低的细胞数目。

3. 培养液添加：在上室中添加适当的培养液，以满足细胞的生长和迁移需求。

同时，在下室中加入相应的培养液，以提供适当的环境和条件。

第四步：进行实验1. 实验前处理：在进行实验前，可以对细胞进行预处理，例如添加化学物质或进行基因操作，以模拟特定的生理或病理状态。

2. 实验操作：将设备放置在恒温培养箱中，以保证适宜的温度和环境条件。

根据实验需要，可以对不同的上下室中的条件进行调控，例如填充不同的培养液、添加特定的化学物质等。

3. 实验时间：根据具体实验要求和细胞特性，确定合适的实验时间。

Transwell小室实验是一种常用于细胞学研究中的实验方法，主要用于研究细胞迁移、侵袭、成血管和细胞-细胞相互作用等细胞生物学现象。

本文将详细介绍Transwell小室实验的原理及其在细胞学研究中的应用。

一、Transwell小室实验原理Transwell小室实验是通过一种特殊的小室装置进行的，该装置由两个分隔的小室组成，上下两个小室之间通过一片具有微孔的多孔膜相连。

这片多孔膜的孔径可以根据实验需要进行选择，常见的孔径有3um、8um等。

在实验过程中，我们将需要观察的细胞或细胞外基质放置在上小室中，而下小室中则向其添加一定浓度的化学物质或药物。

待实验进行一定时间后，我们可以通过上下小室之间的多孔膜来观察细胞的迁移、侵袭或是其他相关现象。

在Transwell小室实验中，我们可以根据实验需要对多孔膜进行功能修饰，比如涂覆胶原蛋白、基质蛋白等物质，或是加入不同浓度的化学刺激物质，以模拟细胞在不同生理环境下的行为。

这种设置能够更真实地反映细胞在体内的生理活动，进一步帮助我们理解细胞的生理与病理过程。

二、Transwell小室实验在细胞学研究中的应用1.细胞迁移和侵袭研究Transwell小室实验广泛应用于细胞迁移和侵袭研究中。

我们可以将需要研究的细胞悬浮在上小室中，然后在下小室中添加诱导因子，比如趋化因子、血浆成分等，通过多孔膜对细胞进行筛选，并观察细胞在多孔膜上迁移扩散的情况。

这种实验能够模拟体内细胞在不同环境中的迁移和侵袭过程，帮助我们更好地理解细胞在肿瘤转移、炎症反应等生理和病理过程中的行为。

2.成血管研究Transwell小室实验也常用于细胞成血管相关的研究。

我们可以在上小室中培养内皮细胞或其他与血管生成相关的细胞，然后在下小室中添加适当的生长因子或细胞因子，观察细胞在多孔膜上形成管状结构。

这种实验方法有助于我们深入了解血管生成的分子机制，并为相关疾病的治疗提供新的思路。

3.细胞-细胞相互作用研究在细胞-细胞相互作用研究中，Transwell小室实验也具有重要的应用价值。

1. Transwell关于Transwell这个词该如何解释，查了很多资料也未见准确的注解，我觉得可以这么理解吧，trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（perme able supports）。

更准确地说，Transwell应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。

但无论是何种外形，其关键部分都是一致的，那就是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。

这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。

下图是一个Transwell装置的纵切面将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。

我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

（1）共培养体系：小于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3.0µm以下孔径。

常用0.4、3.0µm。

transwell方法Transwell方法是一种常用的细胞迁移和侵袭性研究技术，也称为Boyden室或Boyden腔。

该技术利用了细胞在特定条件下通过孔隙的能力，可以模拟细胞在体内穿越基底膜的过程。

本文将从Transwell 方法的原理、应用、优缺点等方面进行介绍。

一、Transwell方法的原理Transwell方法是利用Transwell腔的特殊结构，将上下两个室隔离开来，上室放置细胞悬液，下室放置培养基和化合物，通过孔隙模拟细胞穿越基底膜的过程。

Transwell腔通常由两个部分组成，上部为细胞培养室，下部为底部过滤膜室。

过滤膜通常为聚碳酸酯或聚酰胺材料，可以选择不同的孔径大小和孔隙度，以适应不同类型的细胞。

Transwell方法的操作流程如下：1. 准备Transwell腔和底部过滤膜。

2. 在上室中加入细胞悬液。

3. 在下室中加入培养基和化合物。

4. 将Transwell腔放入细胞培养箱中培养。

5. 取出Transwell腔，将上室中的细胞悬液倒掉，用PBS或其他缓冲液洗涤。

6. 取出底部过滤膜，用甲醇或其他固定液固定细胞。

7. 进行免疫染色或其他检测。

二、Transwell方法的应用Transwell方法主要用于细胞迁移和侵袭性研究，可以模拟细胞穿越基底膜的过程，评估细胞侵袭性、迁移能力和转移能力，同时也可以研究细胞与化合物之间的相互作用。

具体应用包括：1. 细胞迁移和侵袭性研究。

可以用于研究肿瘤细胞的侵袭和转移能力，评估药物对细胞迁移和侵袭性的影响。

2. 细胞与化合物相互作用研究。

可以用于筛选化合物的抑制作用，评估化合物对细胞迁移和侵袭性的影响。

3. 细胞-细胞相互作用研究。

可以用于研究细胞-细胞相互作用对细胞迁移和侵袭性的影响，评估细胞间信号转导通路。

4. 细胞与基质相互作用研究。

可以用于研究细胞与基质之间相互作用的过程，评估细胞与基质之间的黏附和迁移能力。

三、Transwell方法的优缺点Transwell方法具有一定的优点和缺点：1. 优点：Transwell方法操作简单，可以模拟细胞穿越基底膜的过程，评估细胞侵袭性、迁移能力和转移能力，同时也可以研究细胞与化合物之间的相互作用。

Transwelltrans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。

更准确地说，Transwell应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。

但无论是何种外形，其关键部分都是一致的，那就是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。

这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。

将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。

我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

当然不同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。

这里主要谈几种大家常用的实验：（1）共培养体系：小于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3.0µm以下孔径。

常用0.4、3.0µm。

我们实验室用的是0.4µm。

将细胞A种于上室，细胞B种于下室，可以研究细胞B分泌或代谢产生的物质对细胞A的影响。

Transwell实验原理与操作步骤Trans-这个词根有转移、转运、穿过等意思，well有小室的意思，可以从字面上理解，这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。

更准确地说，Transwell应该是一种实验技术，这项技术的主要材料是Transwell小室（Transwell chamber，Transwell insert），其外形为一个可放置在孔板里的小杯子，不同厂家对Transwell会有不同的命名，而不同型号也可有不同形状，不同大小，根据实验需要，可有不同选择。

但无论是何种外形，其关键部分都是一致的，那就是杯子底层的一张有通透性的膜，而杯子其余部分的材料与普通的孔板是一样。

这层膜带有微孔，孔径大小有0.1－12.0µm，根据不同需要可用不同材料，一般常用的是聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane）。

将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以聚碳酸酯膜相隔。

我们将细胞种在上室内，由于聚碳酸酯膜有通透性，下层培养液中的成分可以影响到上室内的细胞，从而可以研究下层培养液中的成分对细胞生长、运动等的影响。

应用不同孔径和经过不同处理的聚碳酸酯膜，就可以进行共培养、细胞趋化、细胞迁移、细胞侵袭等多种方面的研究。

当然不同细胞其体积不同，具体选择时要考虑到细胞大小。

这里主要谈几种大家常用的实验：（1）共培养体系：小于3.0um孔径条件下，细胞不会迁徙通过，因此，若研究不涉及细胞运动能力，不需要细胞穿过聚碳酸酯膜，则应选择3.0µm以下孔径。

常用0.4、3.0µm。

我们实验室用的是0.4µm。