SOPSC049-04冻干人用狂犬病疫苗(Vero细胞)维持液及培养液配制标准操作规程

冻干狂犬病人免疫球蛋白Donggan Kuangquanbing Ren MianyiqiudanbaiHuman Rabies Immunoglobulin，Freeze-dried 本品系用人用狂犬病疫苗免疫供血浆者,采集含高效价狂犬病抗体的血浆，经低温乙醇蛋白分离法，或经批准的其他分离法分离纯化，并经病毒灭活处理制成。

含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。

1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2 制造2.1 原料血浆2.1.1 血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。

采用批准的人用狂犬病疫苗和免疫程序进行免疫。

免疫后血样用酶联免疫法或蚀斑法或小鼠脑内中和试验测定抗体效价，原料血浆混合后抗体效价应不低于10 IU/ml。

2.1.2 低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。

2.1.2 每批应由100名以上免疫供血浆者的血浆混合而成。

2.1.3 组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。

2.2 原液2.2.1 采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。

原液生产过程中不得加入抗生素或防腐剂。

2.2.2 经纯化、超滤、除菌过滤后即为狂犬病人免疫球蛋白原液。

2.2.3 原液检定按3.1项进行。

2.3 半成品2.3.1 配制制品中可加适宜的稳定剂。

按成品规格以注射用水或人免疫球蛋白原液稀释狂犬病抗体效价不低于100IU/ml，并适当调整pH值及钠离子浓度。

2.3.2半成品检定按3.2项进行。

2.4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2 分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。

分装后应及时冰冻，冻干过程制品温度不得超过35℃，真空封口。

2.4.3 规格每瓶含狂犬病抗体100IU、200IU、500IU。

狂犬病抗体效价不低于100IU/ml。

应为经批准的规格。

2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。

人用狂犬病疫苗(Vero细胞)说明书【药品名称】通用名称：人用狂犬病疫苗(Vero细胞)英文名称：Rabies Vaccine (Vero Cell) for Human Use汉语拼音：Renyong Kuangquanbing Yimiao (Vero xibao)【成分和性状】本品系用狂犬病病毒L巴斯德固定病毒PV2061毒株接种Vero细胞培养后，经培养、收获、浓缩、灭活病毒、纯化后，加入适量的人血白蛋白制成。

本品为无佐剂疫苗，呈无色澄明液体，含硫柳汞防腐剂。

主要成分：灭活的狂犬病病毒固定毒。

辅料：人血白蛋白、磷酸氢二钠，磷酸二氢钠、氯化钠、硫柳汞。

【接种对象】凡被狂犬或其他疯动物咬伤、抓伤时，不分年龄、性别均应立即处理局部伤口（用清水或肥皂水反复冲洗后再用碘酊或酒精消毒数次），并及时按暴露后程序注射本疫苗；凡有接触狂犬病毒危险的人员（如兽医、动物饲养员、林业从业人员、屠宰场人员、狂犬病实验人员等），按暴露前免疫程序预防接种。

【作用和用途】本疫苗免疫接种后，可刺激机体产生抗狂犬病毒免疫力，用于预防狂犬病。

【规格】本品每安瓿为0.5ml。

每1次人用剂量0.5ml，狂犬病疫苗效价应不低于2.5IU。

【免疫程序和剂量】（1）于上臂三角肌肌内注射幼儿可在大腿前外侧区肌内注射。

（2）暴露后免疫程序本品免疫程序分为2-1-1免疫程序和五针免疫程序，两种免疫程序均具有相同的免疫效果2-1-1免疫程序：一般咬伤者于天(第天当天)，在左右臂三角肌肌内各注射一剂（共两剂），幼儿可在左右大腿前外侧区肌内各注射一剂（共两剂）。

7天(第8天以下类推)、21天各注射本疫苗剂，全程免疫共注射4剂，儿童用量相同;五针免疫程序：一般咬伤者于0天（第l天，当天）、3天（第4天，以下类推）、7天、14天，28天各注射本疫苗1剂，全程免疫共注射5剂，儿童用量相同。

其中有下列情形之一的建议首剂狂犬病疫苗剂量加倍给予①注射疫苗前一天或更早一些时间内注射过狂犬病免疫球蛋白或抗狂犬病血清的慢性病人。

中国图书分类号R186R392-33文献标识码A文章编号1004-5503（2008）12-1115-03【临床观察】国产冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）的接种反应及其免疫原性王凌云1孙美平1张雪春1徐若辉2邹艳杰3左永波4齐华5【摘要】目的观察国产冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）的接种反应及其免疫原性。

方法观察组200例和对照组50例暴露后，按照0、3、7、14、28d免疫程序，分别接种国产、进口冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）。

观察组接种疫苗后，观察全身和局部反应情况。

采用快速荧光灶抑制试验（RFFIT）检测观察组和对照组接种后的血清中和抗体水平。

结果观察组疫苗接种后，局部红肿、硬结、疼痛、瘙痒发生率分别1.4％、0.8％、17.1％和2.4％；全身反应发热、皮疹、头痛、疲劳乏力和其他反应发生率分别为1.2％、0.4％、2.4％、4.2％和0.3％，且在第7天完全消失。

观察组与对照组疫苗首剂接种后7d，抗体阳转率分别为40.3%和37.0%，14d分别为95.5%和97.7%，差异无统计学意义；且首剂接种后45d，抗体阳转率均为100%。

观察组和对照组疫苗首剂接种后7、14、45d，血清中和抗体GMT差异无统计学意义，14、45d血清中和抗体GMT均大于0.5IU／ml。

结论国产冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）接种反应轻微，并具有良好的免疫原性。

【关键词】冻干人用狂犬病疫苗；Vero细胞；接种反应；免疫原性Adverse Reaction and Immunogenicity of Domestic Freeze-dried Rabies Vac－cine（Vero Cells）for Human UseWANG Ling-yun△,SUN Mei-ping,ZHANG Xue-chun,et al（△Beijing Center for Prevention and Control of Dis－eases,Beijing100013,China）【Abstract】O bjective To observe the adverse reaction and immunogenicity of domestic freeze-dried rabies vaccine（Vero cells）for human use.Methods A total of200victims were inoculated with domestic freeze-dried rabies vaccine（Vero cells）,accord－ing to a schedule of0,3,7,14and28d,using50victims inoculated with imported freeze-dried rabies vaccine（Vero cells）as con－trol.The local and systemic adverse reactions were observed,and the serum neutralizing antibody level after inoculation was deter－mined by RFFIT.Results The incidences of local redness and swelling,scleroma,pain and itching after inoculation with domestic vaccine were1.4%,0.8%,17.1%and2.4%,and those of fever,rash,headache,fatigue and other reactions were1.2%,0.4%,2.4%, 4.2%and0.3%,respectively.All the reactions disappeared within7d after inoculation.The positive conversion rates of serum neutralizing antibody7d after inoculation with the1st dose of domestic and imported vaccines were40.3%and37.0%,and those14d after inoculation were95.5%and97.7%respectively,which showed no significant difference.Both the antibody positive conversion rates45d after the1st dose of domestic and imported vaccines were given were100%.No significant differences were observed in the GMTs of serum neutralizing antibody7,14and45d after inoculation with the1st dose of domestic and imported vaccines,and all the GMTs14and45d after inoculation were more than0.5IU／ml.Conclusion Domestic freeze-dried rabies vaccine（Vero cells）for human use induced mild adverse reactions and showed good immunogenicity.【Key words】Freeze-dried rabies vaccine for human use;Vero cells;Adverse reaction;Immunogenicity预防狂犬病发生的有效措施是及时正确地处理伤口，并接种人用狂犬病疫苗和抗狂犬病血清或狂犬病免疫球蛋白［1］。

冻干狂犬病人免疫球蛋白Donggan Kuangquanbing Ren MianyiqiudanbaiHuman Rabies Immunoglobulin，Freeze-dried 本品系用人用狂犬病疫苗免疫供血浆者,采集含高效价狂犬病抗体的血浆，经低温乙醇蛋白分离法，或经批准的其他分离法分离纯化，并经病毒灭活处理制成。

含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。

1 基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。

2 制造2.1 原料血浆2.1.1 血浆的采集和质量应符合“血液制品生产用人血浆”的规定。

采用批准的人用狂犬病疫苗和免疫程序进行免疫。

免疫后血样用酶联免疫法或蚀斑法或小鼠脑内中和试验测定抗体效价，原料血浆混合后抗体效价应不低于10 IU/ml。

2.1.2 低温冰冻的血浆保存期应不超过3年。

2.1.2 每批应由100名以上免疫供血浆者的血浆混合而成。

2.1.3 组分Ⅱ、组分Ⅱ+Ⅲ沉淀或组分Ⅰ+Ⅱ+Ⅲ沉淀应冻存于-30℃以下，并规定其有效期。

2.2 原液2.2.1 采用低温乙醇蛋白分离法或经批准的其他分离法制备。

原液生产过程中不得加入抗生素或防腐剂。

2.2.2 经纯化、超滤、除菌过滤后即为狂犬病人免疫球蛋白原液。

2.2.3 原液检定按3.1项进行。

2.3 半成品2.3.1 配制制品中可加适宜的稳定剂。

按成品规格以注射用水或人免疫球蛋白原液稀释狂犬病抗体效价不低于100IU/ml，并适当调整pH值及钠离子浓度。

2.3.2半成品检定按3.2项进行。

2.4 成品2.4.1 分批应符合“生物制品分批规程”规定。

2.4.2 分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。

分装后应及时冰冻，冻干过程制品温度不得超过35℃，真空封口。

2.4.3 规格每瓶含狂犬病抗体100IU、200IU、500IU。

狂犬病抗体效价不低于100IU/ml。

应为经批准的规格。

2.4.4 包装应符合“生物制品包装规程”规定。

冻干人用狂犬病疫苗(Ve r o-细胞)冻干人用狂犬病疫苗（Vero 细胞）Donggan Renyong Kuangquanbing Yimiao(Vero Xibao)Rabies Vaccine for Human Use（Vero cell）， Freeze-dried本品系用狂犬病病毒固定毒接种于Vero细胞，经培养、收获、浓缩、灭活病毒、纯化后，加入适宜稳定剂冻干后制成，用于预防狂犬病。

1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。

2 制造2.1 生产用细胞生产用细胞为Vero细胞。

2.1.1细胞管理及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。

各种子批代次应不超过批准的限定代次。

取自同批工作细胞库的1支或多支细胞管，经复苏扩增后的细胞仅用于一批疫苗的生产。

2.1.2 细胞制备取工作细胞库中的1支或几支细胞管，细胞复苏、扩增至接种病毒的细胞为一批。

将复苏后的单层细胞用胰蛋白酶或其他适宜的消化液进行消化，分散成均匀的细胞，加入适宜的培养液混合均匀，置37℃培养成均匀单层细胞。

2.2毒种2.2.1名称及来源生产用毒种为狂犬病病毒固定毒CTN-1V、aGV株或其他经Vero细胞适应的狂犬病病毒固定毒株。

2.2.2种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。

各种子批传代应不超过批准的限定代次。

狂犬病病毒固定毒CTN-1V株在Vero细胞上传代，至工作种子批传代次数应不超过35代，aGV株在Vero细胞上传代，至工作种子批传代次数应不超过15代。

2.2.3种子批的检定主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行 2.2.3.1-2.2.3.4项检定。

2.2.3.1鉴别试验用小鼠脑内中和试验鉴定毒种的特异性。

将毒种作10倍系列稀释，取适宜稀释度病毒液与等量抗狂犬病病毒特异性免疫血清混合，同时设立正常血清对照组，试验组与对照组的每个稀释度分别接种11-13g小鼠6只，每只脑内接种0.03ml，观察14天，中和指数应不低于500。

冻干人用狂犬病疫苗（Vero 细胞）Donggan Renyong Kuangquanbing Yimiao(Vero Xibao) Rabies Vaccine for Human Use（Vero cell）， Freeze-dried本品系用狂犬病病毒固定毒接种于Vero细胞，经培养、收获、浓缩、灭活病毒、纯化后，加入适宜稳定剂冻干后制成，用于预防狂犬病。

1 基本要求生产和检定用设施、原材料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”有关要求。

2 制造2.1 生产用细胞生产用细胞为Vero细胞。

2.1.1细胞管理及检定应符合“生物制品生产和检定用动物细胞基质制备及检定规程”规定。

各种子批代次应不超过批准的限定代次。

取自同批工作细胞库的1支或多支细胞管，经复苏扩增后的细胞仅用于一批疫苗的生产。

2.1.2 细胞制备取工作细胞库中的1支或几支细胞管，细胞复苏、扩增至接种病毒的细胞为一批。

将复苏后的单层细胞用胰蛋白酶或其他适宜的消化液进行消化，分散成均匀的细胞，加入适宜的培养液混合均匀，置37℃培养成均匀单层细胞。

2.2毒种2.2.1名称及来源生产用毒种为狂犬病病毒固定毒CTN-1V、aGV株或其他经Vero细胞适应的狂犬病病毒固定毒株。

2.2.2种子批的建立应符合“生物制品生产和检定用菌毒种管理规程”规定。

各种子批传代应不超过批准的限定代次。

狂犬病病毒固定毒CTN-1V株在Vero细胞上传代，至工作种子批传代次数应不超过35代，aGV株在Vero细胞上传代，至工作种子批传代次数应不超过15代。

2.2.3种子批的检定主种子批应进行以下全面检定，工作种子批应至少进行2.2.3.1-2.2.3.4项检定。

2.2.3.1鉴别试验用小鼠脑内中和试验鉴定毒种的特异性。

将毒种作10倍系列稀释，取适宜稀释度病毒液与等量抗狂犬病病毒特异性免疫血清混合，同时设立正常血清对照组，试验组与对照组的每个稀释度分别接种11-13g小鼠6只，每只脑内接种0.03ml，观察14天，中和指数应不低于500。

冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）【药品名称】通用名称：冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）英文名称：Rabies Vaccine（Vero Cell）for Human Use，Freeze-dried商品名称：冻干人用狂犬病疫苗（Vero细胞）【成份】人用狂犬病疫苗(Vero细胞)本品系用狂犬病病毒固定毒株接种Vero细胞，经培养，收获、浓缩、灭活病毒、纯化后，加入适宜的稳定剂冻干制成。

为白色疏松体，复溶后为澄明液体，不含任何防腐剂。

有效成分：灭活的狂犬病病毒固定毒。

辅料：人血白蛋白、麦芽糖、明胶、氯化钠、磷酸二氢钠、磷酸氢二钠。

疫苗稀释剂：灭菌注射用水。

【适应证】接种本疫苗后，可刺激机体产生抗狂犬病病毒免疫力。

用于预防狂犬病。

【用法用量】1.按标示量加入所附灭菌注射用水，待疫苗复溶并摇匀后注射。

2.于上臂三角肌肌内注射，幼儿可在大腿前外侧区肌内注射。

3.暴露后免疫程序：一般咬伤者于0天（第1天，当天）、3天（第4天，以下类推）、7天、14天和28天各注射本疫苗1剂，全程免疫共注射5剂，儿童用量相同。

对有下列情形之一的，建议首剂狂犬病疫苗剂量加倍给予：●注射疫苗前一天或更早一些时间内注射过狂犬病人免疫球蛋白或抗狂犬病血清的慢性病人。

●先天性或获得性免疫缺陷病人。

●接受免疫抑制剂（包括抗疟疾药物）治疗的病人。

●老年人。

●于暴露后48小时或更长时间后才注射狂犬病疫苗的人员。

4.暴露后免疫程序按下述伤及程度分级处理：Ⅰ级暴露触摸动物，被动物舔及无破损皮肤，一般不需处理，不必注射狂犬病疫苗。

Ⅱ级暴露未出血的皮肤咬伤、抓伤，应按暴露后免疫程序接种狂犬病疫苗；Ⅲ级暴露一处或多处皮肤出血性咬伤或被抓伤出血，可疑或确诊的疯动物唾液污染黏膜，破损的皮肤被舔应按暴露后程序立即接种狂犬病疫苗和抗狂犬病免疫血清或狂犬病人免疫球蛋白。

抗狂犬病血清按40IU/kg给予，或狂犬病人免疫球蛋白按20IU/kg给予，将尽可能多的抗狂犬病血清或狂犬病人免疫球蛋白做咬伤局部浸润注射，剩余部分肌内注射，抗狂犬病血清或狂犬病人免疫球蛋白仅为单次应用。

目的：制定和规范Vero细胞制备的程序，范围：人用狂犬病疫苗生产用细胞的制备。

保证生产用细胞质量。

责任：细胞组全体人员对本规程实施负责程序：1材料名称规格1.1MEM 6L/ 瓶400ml/瓶1.2精制小牛血清400ml/瓶1.33%谷氨酰胺100ml/瓶50ml/瓶1.4庆大霉素溶液（1万单位/ml）1.57.5%碳酸氢钠溶液200ml/瓶50ml/瓶400ml/瓶50ml/瓶1.60.02%EDTA 溶液1.775%乙醇溶液400ml/瓶1.83%甲酚皂溶液1.90.1%新洁尔灭溶液1.100.85%生理盐水溶液1.11注射用水（本室自制）1.12二甲基亚砜以上液体配制方法各自液体配制标准操作程序编号:2•设备2.1转瓶机45瓶/台2.24 °C冰箱1台2.3-20C组合式冰库1个2.437C孵箱2.537C恒温室2.6不锈钢止血钳子2.7液氮罐2.8不锈钢工作台2.9不锈钢边台2.10不锈钢双层车2.11喷灯及管道2.12不锈钢盒子2.13倒置显微镜2.14乙醇罐2.15大不锈钢盒2.16小不锈钢盒2.17栓盒2.18安瓶封口器2.19不锈钢单层车3•器具3.1吸管3.2吸耳球3.3250ml 瓶3.4500ml 瓶3.5100ml 瓶3.6方瓶、大方瓶3.73L 瓶3.810L 瓶1台规格：20cm 16cm1 ml 2ml 5ml 10ml1ml 10ml3.9安瓶3.10分液管道3.11中试管架3.12 青瓶10ml 3.13废液缸3.16方瓶不锈钢盒4•辅助材料4.1灭菌纱布4.2硫酸纸4.3绳4.6无毛布4.7胶布4.8剪刀4.9裁纸刀4.10封口膜4.11砂锯片4.12二连管（球）4.13记号笔4.14方瓶架4.15咼压火菌指示卡4.16镊子5.1.1细胞的复苏4.17脱脂棉4.18细胞计数板5.操作步骤5.1生物反应器用细胞的制备（以制备 900ml细胞悬液为例）5.1.1细胞的复苏5.1.1.6操作步骤 5.1.1.1物品准备5.1.1.1.14号栓、翻帽栓的准备从干燥室取出20个4号栓，装入铺好无毛布的饭盒内，从干燥室取出20个翻帽栓,装入铺好无毛布的饭盒内放入高压灭菌指示卡， 盖好无毛布及盒盖，绑好。

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201710041302.7(22)申请日 2017.01.20(71)申请人 江苏中慧元通生物科技有限公司地址 225312 江苏省泰州市医药城杏林路28号(72)发明人 付作申　安有才　张玉辉　于海龙　刘鹏　徐奇　刘冰冰　陈辉黎　陈晓芬　冷文娜　张慧萍　安蕊　(74)专利代理机构 北京国帆知识产权代理事务所(普通合伙) 11334代理人 李增朝(51)Int.Cl.C12N 7/00(2006.01)A61K 39/205(2006.01)A61P 31/14(2006.01)C12R 1/93(2006.01)(54)发明名称一种无血清Vero细胞制备狂犬病疫苗原液的方法以及无血清狂犬病疫苗制品(57)摘要提供一种无血清Vero细胞制备狂犬病疫苗原液的方法。

用无血清培养基培养Vero细胞，获得无血清培养基适应细胞株；利用无血清培养基适应细胞株，建立无血清Vero细胞种子库；利用无血清培养基适应细胞株，建立无血清人用狂犬病疫苗毒株工作种子库；使用无血清培养基复苏、培养、传代、扩增Vero细胞工作种子库细胞，作为生物反应器培养的基础细胞，细胞扩增后，应用生物反应器和微载体，使用无血清培养基，连续灌流培养高密度Vero细胞；接种狂犬病疫苗毒株工作种子库毒种后，进行生物反应器微载体无血清培养，在病毒扩增至高峰时，开始连续灌流收获病毒液，收获液病毒滴度，经澄清、超滤浓缩、灭活和纯化处理，得到无血清人用狂犬病疫苗原液。

权利要求书2页 说明书11页 附图3页CN 106834239 A 2017.06.13C N 106834239A1.一种无血清Vero细胞制备狂犬病疫苗原液的方法，其特征在于，包含以下步骤，步骤1.用无血清培养基培养Vero细胞，获得无血清培养基适应细胞株；步骤2.利用获得的所述无血清培养基适应细胞株，建立无血清Vero细胞种子库；步骤3.利用获得的所述无血清培养基适应细胞株，建立无血清人用狂犬病疫苗毒株工作种子库；步骤4.使用无血清培养基复苏、培养、传代、扩增Vero细胞工作种子库细胞，作为生物反应器培养的基础细胞，细胞扩增后，应用生物反应器和微载体，使用无血清培养基，连续灌流培养高密度Vero细胞；步骤5.接种狂犬病疫苗毒株工作种子库毒种后，进行生物反应器微载体无血清培养，在病毒扩增至高峰时，开始连续灌流收获病毒液，收获液病毒滴度，经澄清、超滤浓缩、灭活和纯化处理，得到无血清人用狂犬病疫苗原液。

(10)申请公布号 (43)申请公布日 2014.04.02C N 103690943A (21)申请号 201310690235.3(22)申请日 2013.12.12A61K 39/205(2006.01)A61K 9/19(2006.01)A61P 31/14(2006.01)(71)申请人大连汉信生物制药有限公司地址116600 辽宁省大连市开发区湾达路35号大连汉信生物制药有限公司(72)发明人赵平 徐德启 蒋世鹏 于化鹏董晓丽 辛晓伟 王文雯 封雪(74)专利代理机构大连智高专利事务所(特殊普通合伙) 21235代理人胡景波(54)发明名称冻干人用狂犬病疫苗及其制备方法(57)摘要冻干人用狂犬病疫苗及其制备方法，将蔗糖及右旋糖酐40各自加入到注射用水中，搅拌至完全溶解，115℃0.09-0.10MPa 下蒸汽灭菌45min ；将甘氨酸加入到15～30℃注射用水中，搅拌使其完全溶解，使用0.22μm 的微孔滤膜除菌过滤；根据测定的前期疫苗原液的蛋白质含量或抗原含量，按总蛋白质含量不高于80μg/剂进行配制，加入终浓度为4～10wt%蔗糖、1～4wt%右旋糖酐40、0.5～2wt%甘氨酸，即为半成品；将半成品分装并半压塞后入冻干机箱体内、设定冻干参数，进行冷冻干燥；预冻、抽真空、升华、解析干燥，真空压塞，冻干结束，制得冻干人用狂犬病疫苗。

本发明提供的疫苗可以很好地保护其有效成分、热稳定性强、有效期至少可以达到24个月。

(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书4页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书1页 说明书4页(10)申请公布号CN 103690943 A1/1页1.冻干人用狂犬病疫苗的制备方法，包括以下步骤：a.冻干保护剂的配制将蔗糖及右旋糖酐40各自加入到注射用水中，搅拌至完全溶解，115℃0.09-0.10MPa 下蒸汽灭菌45min ；将甘氨酸加入到15～30℃注射用水中，搅拌使其完全溶解，使用0.22μm 的微孔滤膜除菌过滤；b.半成品配制根据测定的前期疫苗原液的蛋白质含量或抗原含量，按总蛋白质含量不高于80μg/剂进行配制，加入终浓度为4～10wt%蔗糖、1～4wt%右旋糖酐40、0.5～2wt%甘氨酸，即为半成品；c.成品的制备3.1将半成品分装并半压塞后入冻干机箱体内、设定冻干参数，进行冷冻干燥；3.2预冻阶段：降温至样品温度达-45℃以下，保温2～4小时；3.3抽真空阶段：冷凝器温度降至-45℃以下时，启动真空泵，冻干箱压力控制在30Pa 以内；3.4升华阶段：搁板温度控制在-50～-10℃、样品温度控制在-45～-25℃，干燥12～18小时；3.5解析干燥阶段：升华结束后，将样品温度上升至20～30℃，升温时间约4～6小时，保温时间8～12h ，真空状态下压塞，冻干结束，制得冻干人用狂犬病疫苗。

人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗中硫酸鱼精蛋白残留量的测定鲁宏;窦志勇【期刊名称】《中国人兽共患病学报》【年(卷),期】2000(016)004【摘要】用硫酸鱼精蛋白可去除vero细胞狂犬病疫苗中残存的细胞基质DNA，使其残余量小于100pg／剂量，但经一系列处理后的疫苗中硫酸鱼精蛋白应无残留，方认为安全可靠。

我们采用毛细管电泳法，检测该种疫苗中硫酸鱼精蛋白残留量，在待检样品中硫酸鱼精蛋白未检出，该方法最小检出量为3ppm。

%Aim We can use protamine sulfate to remove residual plasmic DNA in Vero-cell rabies vaccines, at the end, the residue can be less than 100pg/dose. Only when there is no photamine sulfate in final vaccine, can we consider it be safe and reliable.rnWe detect the residue of protamin sulfate in the vaccine with capillary electrophoresis. We can't find any protamine sul fate in test sample, the minimal concentration we can detect with this method is3ppm.【总页数】2页(P59-60)【作者】鲁宏;窦志勇【作者单位】辽宁省卫生防疫站沈阳，110005;辽宁省卫生防疫站沈阳，110005【正文语种】中文【中图分类】R373.9【相关文献】1.正常人群对纯化VERO细胞狂犬病疫苗的体液免疫应答 [J], 邵荣标;王海燕;吴巨飞;荀鹏程;刘秀兰;王瑶2.人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗临床观察研究 [J], 史秀山3.人用Vero细胞狂犬病疫苗纯化工艺的建立 [J], 张磊;黄林;周兰斌;叶琳;陈宣洪4.VERO细胞狂犬病疫苗纯化工艺中样品浓度对纯化效果的影响 [J], 李福安;杨平学;王宏伟5.纯化鸡胚细胞狂犬病疫苗和纯化Vero细胞疫苗皮内接种后的抗体应答 [J], 严有望因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

冻干人用Vero细胞狂犬病疫苗与地鼠肾细胞狂犬病疫苗免疫
效果观察
周志强;李文红
【期刊名称】《中国误诊学杂志》
【年(卷),期】2007(7)7
【总页数】1页(P1516-1516)
【关键词】狂犬病/预防和控制;狂犬病疫苗/治疗应用;狂犬病疫苗/免疫学
【作者】周志强;李文红
【作者单位】河南省新乡市疾病预防控制中心门诊部
【正文语种】中文
【中图分类】R512.201
【相关文献】
1.对70例使用冻干vero细胞狂犬病疫苗的动态观察 [J], 张希军;刘志华;南怀忠;范广忠;高文杰
2.国产冻干无佐剂Vero细胞狂犬病疫苗对暴露后人群接种反应及免疫原性观察[J], 渠慎稳;杨聪伶;杨位芳;梁玉民;杨琳琳;陈明霞;徐晶;赵福河;张黎明;司侠
3.应用生物反应器建立人用冻干狂犬病疫苗(Vero细胞)生产工艺的研究 [J], 李志强;袁延宝;郑淑媛;代长海;张夫坤;顾丹阳;戚凤春
4.地鼠肾细胞狂犬病疫苗和Vero细胞狂犬病疫苗免疫效果分析 [J], 梁润珍; 劳敏儿; 胡卫红
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冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗临床效果观察
张俊杰;马西平;段晓玲
【期刊名称】《中国热带医学》
【年(卷),期】2006(6)10
【摘要】目的观察国产冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗临床应用的免疫效果和安全性。

方法选择犬致伤者240例,随机分为试验组和对照组。

实验组接种冻干Vero细胞狂犬病纯化疫苗,对照组接种地鼠肾狂犬病纯化疫苗。

两组人群均按照狂犬病疫苗暴露后常规免疫程序进行接种,于全程接种后15d检测中和抗体,并观察副反应。

结果实验组抗体阳性率为96.7%,明显高于对照组的90.0%(P<0.05);副反应发生率为10.8%,明显低于对照组的21.7%(P<0.05)。

结论冻干Vero细胞纯化疫苗抗体阳转率高、副反应发生率低,临床应用优于地鼠肾纯化疫苗,适宜推广使用。

【总页数】2页(P1914-1915)
【关键词】狂犬病疫苗;临床观察;免疫学效果
【作者】张俊杰;马西平;段晓玲
【作者单位】平顶山市卫生防疫站
【正文语种】中文
【中图分类】R512.99
【相关文献】
1.人用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞)临床观察及免疫学效果研究 [J], 乐威;何春辉;夏智;詹晓梅;卢颖;桑爱军;曾繁珍
2.500例应用冻干人用狂犬病纯化疫苗（Vero细胞）及加用人狂犬病免疫球蛋白注射预防狂犬病临床观察 [J], 邹浩;周斌;卢振田;王安才;李卫教
3.冻干人用Vero细胞狂犬病疫苗与地鼠肾细胞狂犬病疫苗免疫效果观察 [J], 周志强;李文红
4.冻干狂犬病纯化疫苗(VERO细胞)免疫效果分析 [J], 舒红萍;周翠娥;刘艳冰;熊玲因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

人用狂犬病纯化疫苗(Vero细胞)临床观察及免疫学效果研究乐威;何春辉;夏智;詹晓梅;卢颖;桑爱军;曾繁珍
【期刊名称】《中国人兽共患病学报》
【年(卷),期】2002(018)001
【摘要】目的研究人用狂犬病纯化疫苗的安全性和保护性.方法采用狂犬病疫苗暴露后免疫程序接种受试人群,I期临床接种20人,II、III期临床接种304人,观察注射后反应,采用小鼠脑内中和试验法测定其中62人中和抗体水平.结果全部受试者有13.27%出现轻度副反应,无中强度副反应,中和抗体阳转率为100%,中和抗体GMT 为11.89IU/ml.结论该疫苗对人体安全且具有较好的免疫原性.
【总页数】3页(P62-64)
【作者】乐威;何春辉;夏智;詹晓梅;卢颖;桑爱军;曾繁珍
【作者单位】武汉生物制品研究所,武汉,430060;武汉生物制品研究所,武
汉,430060;武汉生物制品研究所,武汉,430060;武汉生物制品研究所,武汉,430060;武汉生物制品研究所,武汉,430060;武汉生物制品研究所,武汉,430060;武汉生物制品研究所,武汉,430060
【正文语种】中文
【中图分类】R392
【相关文献】
1.不同分子量超滤浓缩Vero细胞狂犬病疫苗的效果研究 [J], 王宏伟;李华;于伟;李春英
2.人用纯化Vero细胞狂犬病疫苗临床观察研究 [J], 史秀山
3.冻干人用Vero细胞狂犬病疫苗与地鼠肾细胞狂犬病疫苗免疫效果观察 [J], 周志强;李文红
4.孕妇接种国产Vero细胞人用狂犬病纯化疫苗的安全性 [J], 李大伟;郝丽佳;王德贤
5.人用狂犬病纯化疫苗Ⅱ期临床观察的研究总结 [J], 鲁宏;李惠君;吴敬民;梁晓云;张红权;刘宾
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