植物磷含量的测定钼锑抗比色法
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女人创业励志语推荐1. 一个有信念者所开发出的力量,大于99个只有兴趣者。
碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定土壤有效磷的注意事项摘要介绍了碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法测定石灰性和中性土壤有效磷的注意事项,以供参考。
关键词Olsen法;测定;土壤有效磷;注意事项国家农业标准中,采用碳酸氢钠浸提-钼锑抗比色法(Olsen法)测定石灰性土壤中(中性及酸性土可参照使用)的有效磷含量(其中操作规程以下简称规程),其中校准曲线或回归方程较易做出或求出,因此也较容易测定。
但是,要提高其测定准确性,减轻劳动量还需要注意以下几点。
(1)所用的试剂要按规程要求准确配制。
一是选用质量合格的仪器、药品、试剂、纯水,要求测定者首先对要使用的仪器进行校准,在试剂的配制中注意观察药品、试剂、纯水的颜色,发现异常要查找原因;二是精确称取或量取;三是按规程要求的步骤顺序配制,调节酸碱度。
但需要说明的是:①该规程要求的钼锑抗显色剂,称取的抗坏血酸(C6H8O6左旋,旋光度+21°-22°)0.5g溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果,土壤有效磷含量要低于称取1.5g抗坏血酸溶于100mL钼锑贮备液中测定的结果。
②配制磷标准贮备液的KH2PO4 要选用优级纯的,而且要经过105℃烘干2h,并冷却后再称取配制。
(2)所需试剂要按规程要求保存与使用。
钼锑贮备液要盛放于棕色瓶中,避光存放;钼锑抗显色剂要现用现配。
(3)所用的器械要反复冲洗干净,有的还要干燥。
测定中所用的(刻度、胖肚)吸管、塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶、容量瓶、瓶塞、比色皿要反复冲洗干净,塑料瓶、瓶盖、漏斗、三角瓶需烘干后再用。
(4)要严格土液比、温度、振荡频率及振荡时间。
由于这4个方面对浸提出的磷含量有至关重要影响,因此一定要严格控制。
①要严格土液比。
即风干土样准确称取2.50g (电子天平先预热30min,再校准后使用),加入的碳酸氢钠浸提剂准确量取50.00mL。
②要严格浸提温度。
植株全磷含量测定钼锑抗比色法
植株全磷含量测定是一种常用的分析方法,钼锑抗比色法是其中一种常用的测定方法。
该方法基于钼酸钠在酸性条件下与磷酸盐形成复合物,被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物,通过比色法测定其吸光度来计算样品中磷的含量。
该方法的具体步骤如下:
1. 样品制备:将植株样品取适量,经过研磨、筛选等处理后,按照规定的方法进行矿酸或硝酸-过氧化氢消化。
2. 样品处理:取消化后的样品,加入硝酸、氯化钾等试剂,使磷酸盐转化为磷酸根离子。
3. 钼锑试剂的制备:将钼酸钠、醋酸和硫酸混合,加入氯化锑钠,制备钼锑试剂。
4. 反应:将处理后的样品加入钼锑试剂中,经过适当时间的反应后,被还原的钼酸钠被锑砷汞反应还原为蓝色化合物。
5. 吸光度测定:将反应产物在特定波长下进行比色测定,根据标准
曲线计算样品中磷的含量。
该方法的优点是简单、快速、精确,适用于大面积的植物磷素含量测定。
但是该方法也存在一些限制,例如样品中的其他化合物可能会影响测定结果,需要进行干扰消除等处理。
总磷的测定(钼锑抗分光光度法)【新】一、实验原理总磷是指水样中的无机磷和有机磷的总和。
钼锑抗分光光度法根据磷酸根离子与钼酸根离子和锑酸根离子在酸性环境下生成黄色复合物且特征吸收峰在690nm左右,利用分光光度计在此波长处进行吸光度的测定,从而测定水样中的总磷含量。
二、实验步骤1.试样准备:取一定量的水样,如饮用水、自来水、河水等,用过滤纸过滤掉悬浮颗粒直至澄清;2.取样:取所需的水样进行测定,并记录测定的样品编号、样品名称及取样时间等信息,并标明测定条件;3.样品预处理:(1)①如果水样中有余氯,加入少量的亚硫酸钠或碘化钾溶液去除余氯;②加入1ml 的稀硝酸,防止存在的磷酸根受还原而使结果偏低。
(2)氢氧化钠溶液(6mol/L)和氟化钠(70g/L)的混合溶液:取一定量的氢氧化钠和氟化钠混合溶液(比例约为1:10),加入到已预处理的水样中,使其呈现明显的碱性反应,即pH值控制在10.5-11.0之间。
4.配制钼锑试剂:取5g的钼酸铵和0.5g的锑酸钠加入到2L的硫酸中(浓度为0.3mol/L),摇匀,得到浓度为0.005mol/L的钼锑试剂。
5.光度测定:将经过预处理的水样分别加入分析室的比色皿中,加入相应的钼锑试剂,然后加入适量的硫酸稀释,充分混匀后孵育5min左右,利用分光光度计在690nm处读取吸光度值。
6.计算试样中总磷的含量:利用预先绘制的标准曲线,查找吸光度值对应的总磷含量。
三、实验注意事项1.水样应取中间部位,避免表面污染、底部沉积物或悬浮物对结果产生干扰。
2.水样需要预处理,如去除余氯、加入稀硝酸等,以确保结果的准确性。
3.钼锑试剂的配制要求精确,避免出现含杂质或浓度过高过低等情况,影响结果准确性。
4.光度测定时要注意避免外界光线的干扰,同时保持试剂反应时间、温度、pH等因素的一致。
5.标准曲线的绘制要进行多次实验和重复测定,以获得较准确的测定结果。
6.实验过程中需遵守实验室安全规范,注意实验室对应的安全措施,如佩戴防护眼镜、手套等。
土壤有效磷钼锑抗比色法
这种分析方法的优点之一是具有较高的灵敏度和准确性,能够
准确测定土壤中微量的有效磷含量,对于科研和土壤肥力评价具有
重要意义。
另外,这种方法操作简便,成本较低,适用于大批量土
壤样品的分析,因此在土壤肥力评价和农业生产中得到了广泛应用。
然而,钼锑抗比色法也存在一些局限性,比如在高盐度土壤或
含有有机物较多的土壤中可能会出现干扰,影响测定结果的准确性。
因此,在实际应用中需要综合考虑土壤样品的特性,选择合适的分
析方法。
总的来说,土壤有效磷钼锑抗比色法是一种常用的测定土壤有
效磷含量的分析方法,具有高灵敏度和准确性,但在实际应用中需
要注意方法的局限性并综合考虑土壤样品的特性。
离心替代过滤,酶标仪替代分光光度计的土壤全磷测试方法1.用万分之一天平,称取1g左右的风干土,记录下重量。
2.加入8ml浓硫酸,放置过夜后加入10滴高氯酸,消煮至白色。
3.在50ml消煮管中定容,可以先加水1/3,混匀后再加水至刻度线附近,放置过夜后再加水至刻度线,摇匀。
4.吸取1ml消煮液到1.5ml离心管中,10000rpm,离心1分钟。
5.吸取50ul上清液+750ul H2O+100ul NaOH(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中。
6.摇匀后,14000rcf离心一分钟,室温高于15℃情况下,30min后,吸取300ul至酶标板比色备注:5.中吸取的上清液的量可根据显色状况调整,相应地NaOH的量也要做出调整,保证比色体系体积为1ml,氢离子浓度为0.55mol/L左右,每个样品做三个重复,重复间允许误差<0.005%即50mg/kg。
磷酸二氢钾工作曲线制做方法1.先将100mg/L(0.4394g KH2PO4(烘干2小时)先加水300ml,再加5ml浓硫酸,再定容到1L)的磷标贮液(磷酸二氢钾溶液)稀释20倍,比如吸取5ml定容到100ml2.配制3.摇匀后,10000rpm离心一分钟,室温高于15℃情况下,30min后,吸取300ul至酶标板比色备注:利用散点图绘制曲线,添加趋势线和r值,r^2要大于0.999。
利用forecast.line函数计算比色液磷含量钼锑抗配制方法1.浓硫酸153ml加入500ml左右H2O(用1L的烧杯),用磁力搅拌器搅匀2. 1L烧杯中加入10g 钼酸铵,用磁力搅拌器融化3. 0.5g酒石酸锑钾加入100ml左右H2O(用100ml的烧杯),用磁力搅拌器溶化4. 步骤3所得溶液倒入1L烧杯,在磁力搅拌器上混合均匀,定容到1L备注:避光储存,使用时每10ml 加入0.15g抗坏血酸二硝基酚溶液:0.2g 二硝基酚溶于100ml水中离心替代过滤,酶标仪替代分光光度计的土壤有效磷(碳酸氢钠浸提)测定方法1. 42g碳酸氢钠定容到1L,用4mol/L NaOH溶液(4mol/L,16g NaOH定容到100ml)调节pH至8.5,得到浸提剂2. 1.00g风干土加入50ml塑料管中,再加入0.1g活性炭粉,再加入20ml碳酸氢钠溶液,20~25℃,180rpm,震荡30min3.吸取1ml浸提液到1.5ml离心管中,10000rpm,离心1分钟4.吸取200ul上清液+700ul H2O+100ul钼锑抗试剂到1.5ml离心管中5.摇匀后,14000rcf,离心一分钟,室温高于15℃情况下,30min后,吸取300ul至酶标板比色备注:吸取的上清液体积可以根据显色情况调整,保证比色体系1ml,每个样品做三个重复植物组织全磷含量快速测定1.将烘干后的植物组织样品磨碎,再将样品粉末继续烘干至恒重。
植物磷含量的测定(钼锑抗比色法)
一、实验目的
1.掌握钼锑抗比色法测定磷的方法。
2.练习实际测量以及定容的操作。
3.练习分光光度计的使用。
二、实验原理
植物样品经消煮使各种形态的磷转变成磷酸盐。
在一定酸度下,待测液中的正磷酸与钼酸铵和酒石酸锑钾生成一种三元杂多酸,后者在室温下能迅速被抗坏血酸还原为蓝色络合物,可用吸光光度法测定。
三、实验试剂
(1)2mol/L NaOH溶液
(2)0.2%二硝基酚指示剂
(3)0.5mol/L H2SO4硫酸溶液:28mL浓H2SO4加水稀释至1L。
(4)钼锑贮存溶液:量取153ml浓硫酸(分析纯,密度1.84g/ml),缓缓加入到400ml蒸馏水中,不断搅拌,冷却。
另称取经磨细的钼酸铵[(NH4)6Mo7O24·H2O,分析纯]10g溶于温度约60℃300ml水中,冷却。
然后将硫酸溶液缓缓倒入钼酸铵溶液中。
再加入0.5%酒石酸锑钾[KSbOC4H4O6·1/2H2O,分析纯]溶液100ml,冷却后,加水稀释至1000ml,摇匀,贮于棕色试剂瓶中,此贮备液含钼酸铵1%,硫酸2.75mol/L。
(5)钼锑抗显色剂:称取1.50g抗坏血酸溶于100ml钼锑贮存溶液中,此溶液有效期不长,宜随配随用。
(6)5mg/L磷标准溶液:0.4394g在50℃烘干的磷酸二氢钾(KH2PO4。
分析纯),100ml水,加5ml浓硫酸(防腐),用水定容到1L,浓度为100mg/L磷(P),此溶液可以长期保存。
吸取上述溶液10ml于200ml容量瓶中,加水至标度,浓度为5mg/L磷(P)标准溶液,此溶液不宜久存。
四、实验步骤
1、吸取定容过滤或澄清后的消煮液2.00~5.00ml(V2,含P5~30ug)于50ml 容量瓶中, 用水稀释至约20ml,加1~2滴二硝基酚指示剂,滴加2mol/L NaOH溶液中和至刚呈黄色,再加入1滴0.5mol/L H2SO4溶液,使溶液的黄色刚刚褪去呈
淡黄色,然后加入钼锑抗显色剂5.00ml,摇匀,用水定容(V3)。
在室温高于15℃的条件下放置30min 后,用1cm 光径比色槽在波长700nm 处测定吸光度,以空白溶液为参比调节仪器零点。
2、校准曲线或直线回归方程: 准确吸取ρ(P)= 5mg/L 标准工作溶液
0, 1, 2, 4, 6, 8 ml,分别放入50mL 容量瓶中,加水至20ml,同上步骤显色并定容, 即得0,0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 mg/L P 标准系列溶液, 与待测液同时测定,读取吸光度,然后绘制校准曲线或直线回归方程。
五、结果计算
W p =6
10m (V1/V2)V3c ⨯⨯⨯×1000 式中: W p ——植物磷的质量分数,g/kg;
c ——从校准曲线或回归方程求得的显色液中磷的质量浓度, mg/L; V1——消煮液定容体积, ml;
V2——吸取测定的消煮液体积, ml;
V3——显色液体积, ml;
m ——称样量,g;
六、注意事项
1、室温低于15℃时,可在30~40℃水浴中,显色30min 。
2、植物磷含量0.5g/kg 为低量,1.0~2.0g/kg 为中量,大于2.0g/kg 为高量。