05章土壤中磷的测定(精)
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第五章 土壤中磷的测定PPT
中性、微酸 性、石灰性 土壤
酸性、强酸 性土壤
双酸法
HCl-H2SO4
1:5；25℃
钼锑抗比色法
酸性土，森 林，土壤
30 min
Mehlich 3 法
HOAcNH4NO3-
1:10；25℃ 钼锑抗比色法
NH4F-HNO3-
EDTA
各种类型土 壤
防止消化过程中溶液蒸干，以利消化作用的顺利进 行。 本法用于一般土壤样品分解率达97%～98%，但对红 壤性土壤样品分解率只有95%左右。
二、待测液中磷的测定
（一）重量法
（1） 磷酸铵镁法：先使P生成NH4MgPO4·10H2O↓， 再灼烧成Mg2P2O7（焦磷酸镁），称至恒重。此法 曾作过标准方法，但繁琐、费时，现很少采用。 （2） 磷钼酸喹啉法：为黄色沉淀。精密度和准确 度都高，多用于肥料中P的测定。
它可以相对地说明土壤的供磷水平，可以作为一个 指标判断施用磷肥是否必要，亦可作为施肥（磷） 推荐的一个方法。
三、土壤有效磷的测定方法评述
简单地说，土壤有效磷的测定就是选用适宜的浸提 剂将土壤中存在的磷的有效形态提取出来，然后加 以定量。其关键在于将固相中容易转入液相中的磷 提取出来。因此，对于酸性土壤和石灰性土壤来说， 由于磷酸盐的存在形态不同，因而在浸提剂的选择 上就应该有所区别。
二、待测液中磷的测定
（二）比色法
磷的比色测定有两个比色体系，即钼兰比色法和 钒钼黄比色法。
钼兰比色法：一般测定微量元素的磷，常用于土壤 磷的测定，该法灵敏度较高。
钒钼黄比色法：一般测定含磷量较高的样品，如肥 料、种子等
1、钼兰比色法的原理
在含磷的溶液中加入钼酸铵试剂，在一定的 酸度条件下，待测液中的正磷酸与钼酸根络合形 成磷钼杂多酸。
酸性、强酸 性土壤
双酸法
HCl-H2SO4
1:5；25℃
钼锑抗比色法
酸性土，森 林，土壤
30 min
Mehlich 3 法
HOAcNH4NO3-
1:10；25℃ 钼锑抗比色法
NH4F-HNO3-
EDTA
各种类型土 壤
防止消化过程中溶液蒸干，以利消化作用的顺利进 行。 本法用于一般土壤样品分解率达97%～98%，但对红 壤性土壤样品分解率只有95%左右。
二、待测液中磷的测定
（一）重量法
（1） 磷酸铵镁法：先使P生成NH4MgPO4·10H2O↓， 再灼烧成Mg2P2O7（焦磷酸镁），称至恒重。此法 曾作过标准方法，但繁琐、费时，现很少采用。 （2） 磷钼酸喹啉法：为黄色沉淀。精密度和准确 度都高，多用于肥料中P的测定。
它可以相对地说明土壤的供磷水平，可以作为一个 指标判断施用磷肥是否必要，亦可作为施肥（磷） 推荐的一个方法。
三、土壤有效磷的测定方法评述
简单地说，土壤有效磷的测定就是选用适宜的浸提 剂将土壤中存在的磷的有效形态提取出来，然后加 以定量。其关键在于将固相中容易转入液相中的磷 提取出来。因此，对于酸性土壤和石灰性土壤来说， 由于磷酸盐的存在形态不同，因而在浸提剂的选择 上就应该有所区别。
二、待测液中磷的测定
（二）比色法
磷的比色测定有两个比色体系，即钼兰比色法和 钒钼黄比色法。
钼兰比色法：一般测定微量元素的磷，常用于土壤 磷的测定，该法灵敏度较高。
钒钼黄比色法：一般测定含磷量较高的样品，如肥 料、种子等
1、钼兰比色法的原理
在含磷的溶液中加入钼酸铵试剂，在一定的 酸度条件下，待测液中的正磷酸与钼酸根络合形 成磷钼杂多酸。
土壤中磷的测定
土壤中磷的测定5.1概述土壤全磷（P）量是指土壤中各种形态磷素的总和。
我国土壤全磷的含量（以P，g·kg－1表示）从第二次国各地土壤普查资料来看，大致在0.44～0.85 g·kg －1范围内,最高可达1.8 g·kg－1, 低的只有0.17 g·kg－1。
南方酸性土壤全磷含量一般低于0.56g·kg－1；北方石灰性土壤全磷含量则较高。
土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响很大。
一般而言，基性火成岩的风化母质含磷多于酸性火成岩的风化母质。
我国黄土母质全磷含量比较高，一般在0.57g·kg－1～0.70g·kg－1之间。
另外土壤中磷的含量与土壤质地和有机质含量也有关系。
粘土含磷多于砂性土，有机质丰富的土壤含磷亦较多。
磷在土壤剖面中的分布，耕作层含磷量一般高于底土层。
大量资料的统计结果表明，我国不同地带的气候区的土壤其速效磷含量与全磷含量呈正相关的趋势。
在全磷含量很低的情况下（P0.17～0.44g·kg－1以下），土壤中有效磷的供应也常感不足，但是全磷含量较高的土壤，却不一定说明它已有足够的有效磷供应当季作物生长的需要，因为土壤中磷大部分成难溶性化合物存在。
例如我国大面积发育于黄土性母质的石灰性土壤，全磷含量均在0.57～0.79g·kg－1之间，高的在0.87g·kg－1以上。
但由于土壤中大量游离碳酸钙的存在，大部分磷成为难溶性的磷酸钙盐，能被作物吸收利用的有并效磷含量很低，施用磷肥有明显的增产效果。
因此，从作物营养和施肥的角度看，除全磷分析外，特别要测定土壤中有效磷含量，这样才能比较全面地说明土壤磷素肥力的供应状况。
土壤中磷可以分为有机磷和无机磷两大类。
矿质土壤以无机磷为主，有机磷约占全磷的20%～50%。
土壤有机磷是一个很复杂的问题，许多组成和结构还不清楚，大部分有机磷，以高分子形态存在，有效性不高，这一直是土壤学中一个重要的研究课题。
土壤中有效磷的测定(精)
四、实验步骤
1、土壤样品预处理 称 取 风 干 土 壤 样 品 1g （ 精 确 至 0.01g ） , 放 入 50~100mL小塑料瓶（或50mL带塞比色管）中， 加 入 0.03mol·L-1NH4F-0.25mol·L-1HCl 溶 液 20mL，稍摇匀，立即放在振荡机上，振荡30 分钟。用无磷干滤纸过滤，滤纸承接于盛有 100g·L-1H3BO3溶液15滴的50mL 三角瓶中，摇 动瓶内溶液（加H3BO3防止F-1对显色的干扰和 腐蚀玻璃仪器）。
NH4F-0.025mol/L HCl溶液。
（4） H3BO3溶液（100g/L）
（5） 15g/L钼酸铵-3.5mol/L盐酸溶液：溶解15g 钼酸铵于300mL蒸馏水中，加热至60℃左右，如有 沉淀，将溶液过滤，待溶液冷却之后，慢慢加入 350mL 10mol/L HCl溶液，并用玻璃棒迅速搅动， 待溶液冷却至室温，用蒸馏水稀释至1L，充分摇 匀，储存于棕色瓶中。放置时间不得超过两个月。
参考文献
武汉大学化学与分子科学学院实验中心 主编.《分析化学实验》.武汉：武汉大学 出版社 ，2002 任仁主编.《化学与环境》.北京：化学工 业出版社，2001
三、主要仪器和试剂
1、 仪器：721分光光度计，25mL容量瓶， 吸量管，振荡机，漏斗，滤纸。
2、 试剂：
（1） HCl溶液（0.5mol/L）
（2） NH4F溶液（1mol/L）
（ 3 ） 提 取 剂 ： 分 别 移 取 15mL
1假m如ol/4L6N0Hm4LF蒸溶液馏和水2中5m，L
0.5mol/LHCl溶液， 配 制 成 0.03mol/L
2、土壤中有效磷的测定
准确移取上述土壤滤液5~10mL容量 瓶中，用吸量管加入15g·L-1钼酸铵-盐酸 溶液5mL，摇匀，加入蒸馏水至瓶颈刻 度，滴加25g·L-1.氯化亚锡3滴后，再用水 稀释至刻度，充分摇匀。显色15min后， 再分光光度计上，以试剂为空白，用 1cm比色皿在680nm处测其吸光度值。
实验五土壤速效磷的测定(精)
实验五土壤速效磷的测定一、目的和要求掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。
掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。
二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H+的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。
三、主要仪器及试剂配制仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂：(1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。
(2)钼锑抗试剂称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。
另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。
临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。
此即钼锑抗试剂。
(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。
)(3)磷标准溶液称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg-1磷标准液，可较长时间保存。
取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液，此液不宜久存。
四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01克)于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F——0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。
土壤中有效磷的测定(精)
NH4F-0.025mol/L HCl溶液。
（4） H3BO3溶液（100g/L）
（5） 15g/L钼酸铵-3.5mol/L盐酸溶液：溶解15g 钼酸铵于300mL蒸馏水中，加热至60℃左右，如有 沉淀，将溶液过滤，待溶液冷却之后，慢慢加入 350mL 10mol/L HCl溶液，并用玻璃棒迅速搅动， 待溶液冷却至室温，用蒸馏水稀释至1L，充分摇 匀，储存于棕色瓶中。放置时间不得超过两个月。
（6）氯化亚锡溶液（25g/L）：称取氯化亚锡2.5 g溶于10mL浓盐酸中，溶解后加入90mL蒸馏水， 混合均匀置于棕色瓶中，此溶液现配现用。
（7）磷标准溶液（50μ g/mL）：准确称取 105℃烘干的KH2PO4（A.R）0.2195g，溶解于 400mL水中加浓H2SO45mL(防止溶液长霉菌)，转 入1L容量瓶中，加水稀释至刻度，要匀。准确移 取上述磷标准溶液25.00mL于250mL容量瓶中，稀 释至刻度，摇匀，即为5μ g·/m L-1（此溶液不宜久
实验目的 实验原理 主要仪器和试剂 实验步骤 注意事项
一、实验目的
1、了解光度法测定土壤中有 效磷的原理及方法
2、熟悉分光光度计的使用
二、实验原理
在含磷的溶液中，加入钼酸铵，在一定酸度条 件下，溶液中的磷酸与钼酸络合形成黄色的磷钼 杂合酸——磷钼黄。
H3PO4+12H2MoO4==H3[PMo12O40]+12H2O 在适宜的试剂浓度下，加入适当的还原剂（SnCl2 或抗坏血酸），使磷钼酸中的一部分Mo（Ⅳ）还 原 为 Mo （ Ⅴ 生 成 磷 钼 蓝 （ 磷 钼 杂 多 蓝 ） —— H3PO4·10MoO3·Mo2O5 或 H3PO4·8MoO3·2Mo2O5 。 在 一 定 的范围内，蓝色的深度与磷含量成正比，这是钼 蓝比色法的基础。
土壤中有效磷的测定(精)
土壤中有效磷的测定D e te r m i na ti o n o f Ava il a b l e P ho sp ho ru s i n So il王芹 1徐清波 2姚振琴 1 (1、淮安市环境监测中心站江苏淮安223001; 2、淮安市环境监察局江苏淮安 223001[摘要 ]叙述了土壤中有效磷测定的原理 , 绘制了校准曲线 , 相关系数、斜率、截距满足分光光度法的要求 ; 实际土壤样品测定 RS D 为 1. 07﹪ ~2. 68﹪ , 加标回收率为 93. 4﹪ ~100﹪ , 精密度和准确度均符合要求。
[关键词 ]有效磷 ; 分光光度法 ; 土壤[中图分类号 ] X 132 [文献标志码 ] B地壳中磷元素 (以 P2O 5计的平均含量大约为 0. 28%, 可分为有机磷和无机磷两大类。
无机磷主要以钙、镁、铁、铝等形态结合为磷酸盐 , 有机磷以卵磷脂、核酸、磷脂为主。
土壤中的磷素大部分以迟效性状态存在 , 了解土壤有效磷的状况 , 对于施用磷肥有着直接的指导意义。
1方法原理用 0. 50mol/L。
在石灰性土壤中碳酸氢钠可以抑制溶液中 Ca 2+的活度 , 使某些活性较大的磷酸钙盐被浸提出来 ; 在酸性土壤中因 pH 提高可使活性磷酸铁、铝盐水解而被浸出。
在浸出液中由于 Ca 、 Fe 、 A l 浓度较低 , 不会产生磷的再沉淀 ; 可用钼锑抗比色法定量测定。
2试剂和材料分析时均使用符合国家标准或专业标准的分析纯试剂和蒸馏水或去离子水。
碳酸氢钠 (分析纯 ;氢氧化钠 (分析纯 :50%(m /V 溶液 ;活性炭 (化学纯 ;盐酸 (化学纯 :1+1溶液 ;钼酸铵 (分析纯 ;硫酸 (分析纯 :1+1溶液 ;酒石酸氧锑钾〔 K (Sb O C4H 4O 6・ 1/2H2O, 分析纯〕 ;抗坏血酸 (C6H 8O 6, 左旋 , 比旋光度 +21°~+ 22°, 分析纯 ;磷酸二氢钾 (分析纯 ;浸提剂 (0. 50mol/LNaHCO3, pH =815 。
土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
1土壤全磷的测定(硫酸一高氯酸消煮法)方法原理在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化合物与高沸点的硫酸和强氧化剂高氯酸作用，使之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液，然后用钼锑抗比色法测定。
操作步骤1.在分析天平上准确称取通过100目筛(孔径为0.25mm)的土壤样品1g(精确到0.0001)置于50ml三角瓶中，以少量水湿润，并加入浓H2SO48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。
轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。
同时做空白试验。
4.吸取滤液2—10ml于50ml容量瓶中，用水稀释至30ml，加二硝基酚指示剂2滴，用稀氢氧化钠(NaOH)溶液和稀硫酸(H2SO4)溶液调节pH至溶液刚呈微黄色。
5.加入钼锑抗显色剂5ml，摇匀，用水定容至刻度。
6.在室温高于15℃的条件下放置30分钟后，在分光光度计上以700nm的波长比色，以空白试验溶液为参比液调零点，读取吸收值，在工作曲线上查出显色液的P—mg/L数。
7.工作曲线的绘制。
分别吸取5mg/L标准溶液0，1，2，3，4，5，6ml于50ml 容量瓶中，加水稀释至约30ml，加入钼锑抗显色剂5ml,摇匀定容。
即得0，,,,,,,mg/LP标准系列溶液，与待测溶液同时比色，读取吸收值。
在方格坐标纸上以吸收值为纵坐标，Pmg/L数为横坐标，绘制成工作曲线。
结果计算全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106)×100式中：显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；显色液体积—本操作中为50ml；分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；106—将ug换算成gW—土样重(g)。
第五章：土壤磷素的测定(05)
10
第五章
土 壤 植 物 营 养 分 析
土壤磷素的测定
5.2 土壤全磷的测定 5.2.1 磷的测定方法 三、钼蓝法
酸度： 4、酸度：
不同的酸度及酸的体系，其终溶液的酸度也不同，如： 不同的酸度及酸的体系，其终溶液的酸度也不同， 三种钼兰法的工作范围和各试剂的终浓度 SnCl2-H2SO4体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.39-0.40mol/L(1/2 H2SO4) SnCl2-HCl体系 体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.60-0.70mol/L(HCl) 钼锑抗-H 钼锑抗 2SO4体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.45-0.65mol/L(1/2 H2SO4)
应用“Excel”中的数据分析工具绘制出浓 2. 应用“Excel 中的数据分析工具绘制出浓 度与吸光度的关系曲线，并求出相关方程 度与吸光度的关系曲线，并求出相关方程 3. 把样品显色液测定的吸光度值代入相关方 程即可求出样品显色液的P浓度。 程即可求出样品显色液的P浓度。 如A样=0.167 ρ=3.3133×0.167＋0.0085=0.562 ＋
3
第五章
土 壤 植 物 营 养 分 析
土壤磷素的测定
5.2 土壤全磷的测定
5.2.1 磷的测定方法
一、提取方法 二、定量测定方法
重量法：⑴磷钼酸铵镁沉淀法 重量法： ⑴碳酸钠熔融法 ⑵磷钼酸喹啉重量法
⑵氢氧化钠熔融法。 容量法 ⑴磷钼酸喹啉容量法
⑵钼酸铵容量法 ⑶高氯酸—硫酸消解法 钼蓝法； 比色法 ⑴钼蓝法；
第五章 土壤磷素的测定 5.1土壤磷含量和形态
土 壤 植 物 营 养 分 析
5.1.1土壤磷含量
土壤全磷的概念 我国土壤全磷含量 表示方法： 表示方法：以Pg.kg-1, 含量：大致为0.44 0.85范围 0.44—0.85范围， 含量：大致为0.44 0.85范围，最高可 1.8，低的只有0.17 0.17。 达1.8，低的只有0.17。 南方酸性土壤含量较低，一般低于0.56 0.56。 南方酸性土壤含量较低，一般低于0.56。 北方石灰性土壤全磷含量则较高。 北方石灰性土壤全磷含量则较高。
第五章
土 壤 植 物 营 养 分 析
土壤磷素的测定
5.2 土壤全磷的测定 5.2.1 磷的测定方法 三、钼蓝法
酸度： 4、酸度：
不同的酸度及酸的体系，其终溶液的酸度也不同，如： 不同的酸度及酸的体系，其终溶液的酸度也不同， 三种钼兰法的工作范围和各试剂的终浓度 SnCl2-H2SO4体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.39-0.40mol/L(1/2 H2SO4) SnCl2-HCl体系 体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.60-0.70mol/L(HCl) 钼锑抗-H 钼锑抗 2SO4体系 终溶液酸度范围: 终溶液酸度范围 0.45-0.65mol/L(1/2 H2SO4)
应用“Excel”中的数据分析工具绘制出浓 2. 应用“Excel 中的数据分析工具绘制出浓 度与吸光度的关系曲线，并求出相关方程 度与吸光度的关系曲线，并求出相关方程 3. 把样品显色液测定的吸光度值代入相关方 程即可求出样品显色液的P浓度。 程即可求出样品显色液的P浓度。 如A样=0.167 ρ=3.3133×0.167＋0.0085=0.562 ＋
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第五章
土 壤 植 物 营 养 分 析
土壤磷素的测定
5.2 土壤全磷的测定
5.2.1 磷的测定方法
一、提取方法 二、定量测定方法
重量法：⑴磷钼酸铵镁沉淀法 重量法： ⑴碳酸钠熔融法 ⑵磷钼酸喹啉重量法
⑵氢氧化钠熔融法。 容量法 ⑴磷钼酸喹啉容量法
⑵钼酸铵容量法 ⑶高氯酸—硫酸消解法 钼蓝法； 比色法 ⑴钼蓝法；
第五章 土壤磷素的测定 5.1土壤磷含量和形态
土 壤 植 物 营 养 分 析
5.1.1土壤磷含量
土壤全磷的概念 我国土壤全磷含量 表示方法： 表示方法：以Pg.kg-1, 含量：大致为0.44 0.85范围 0.44—0.85范围， 含量：大致为0.44 0.85范围，最高可 1.8，低的只有0.17 0.17。 达1.8，低的只有0.17。 南方酸性土壤含量较低，一般低于0.56 0.56。 南方酸性土壤含量较低，一般低于0.56。 北方石灰性土壤全磷含量则较高。 北方石灰性土壤全磷含量则较高。
土壤全磷的测定(精)
（2） 固相中的磷： 液相中磷少，由固相磷补充，所以重要。 液相中磷（有效性高），只有0.05~0.03 kg/亩(少)， 植物（小麦）吸收1~1.5 kg/亩（高出50~300倍），所 以植物吸收的磷主要来自土壤固相。
3. 土壤有效磷供应状况 指在一个生长季节内，能够被植物吸收利 用的土壤磷素。包括 （1）液相磷 （2）土壤胶体弱吸附或交换态磷
Fe3+形成配合物而掩蔽之。在钼锑抗比色法中， 允许Fe3+含量达400mg/L，因为Fe3+可与抗坏血 酸形成配合物；在H2SO4-HClO4消煮时，HClO4 又能与Fe3+成配合物，所有这些都减少了Fe3+的
干扰。
Si4+：在酸度较低时（0.25mol/L以下）可生成SiMo 杂多酸，但在P的测定中，PMo杂多酸形成的酸度 较高（在0.45mol/L以上），此酸度抑制了SiMo杂 多酸的形成。另外，用H2SO4-HClO4消煮时，由于 HClO4的脱水作用很强，使胶状Si脱水成SiO2析出， 所以少量的Si可用控制酸度的方法消除。
的碱。与重量法相比无大优点，且多了手续，如标
准酸、碱，现少用。
总之，重量法、滴定法均需沉淀重量大，即含量高
时用，而土壤中的P一般较少，所以现在普遍采用 比色法。
3、比色法：
（1） 钒钼黄法（又叫钼黄法）：抗干扰离子的范
围大，灵敏度较低，适于测定含P量高的样品。 （2） 钼兰法：最早在1887年提出，后经不断研究、 改进，直到1962年Murphy等提出用抗坏血酸作为 测P的还原剂，才形成了现在的钼锑抗比色法。
稀释倍数大，结果的误差也大。
注意：比色分析要求工作曲线与样品的测定条件一
致，所以要求严格按照操作手续进行。
05章 土壤中磷的测定.
第五章土壤中磷的测定主要内容：◎概述◎土壤全磷的测定◎土壤速效磷的测定◎土壤无机磷形态的分级测定◎土壤有机磷的分离测定要求：✧了解土壤全磷测定的国家标准方法。
✧了解钼兰比色法和钼黄比色法测定土壤有效磷两种方法各自的优缺点。
✧掌握用0.5mol.L-1NaHCO3法测定土壤速效磷的测定条件、原理、操作步骤及注意事项。
✧了解土壤无机磷的分级测定方法§ 5-1 概述磷在植物大量营养元素中占有重要地位，然而，与其它大量营养元素相比，土壤磷的含量相对较低，分布变异也比较大。
土壤中的含磷化合物有许多种，其中大部分磷的组分和确切形态还不十分清楚，而且，各种形态磷之间的转化过程错综复杂，因此，尽管磷的研究工作很多，但仍有许多问题需要解决。
一、土壤中磷的含量、形态1. 土壤中磷的含量我国土壤中全磷含量一般为：0.2 ~ 1.1 g ∙ kg-1（以P，g ∙ kg-1表示）。
0.10 ~ 0.15 % （以P2O5，%表示）土壤全磷含量受土壤母质、成土作用、耕作施肥等的影响很大。
我国南方酸性土全磷的含量较低，一般< 0.56 g ∙ kg-1；北方石灰性土壤的全磷含量较高。
黄土母质全磷含量较高。
粘土中磷的含量高与砂土。
有机质丰富的土壤含磷较多。
磷在土壤剖面上的分布，耕作层含磷量高于底土层。
2. 土壤中磷的形态土壤磷分为有机和无机磷两种形态。
（1）有机磷有机形态的磷含量较低，约占全磷的20~50 %，而且变幅比较大。
土壤有机磷的组成和结构很复杂，大部分有机磷以高分子的形态存在，有效性不高。
有机磷在土壤中的存在方式包括吸附态和以磷脂键结合态两种，分布于各有机质组分中。
包括与土壤腐殖质部分结合的、动植物残体中的、以及活的土壤生物体内存在的磷（又称：生物磷或生物量磷）。
其中，新鲜有机质中的磷和生物磷是易分解态磷，其它含磷有机化合物的生物有效性主要取决于其空间分布。
（2）无机磷在大多数土壤中，磷以无机形态为主，主要以正磷酸盐的形式存在，焦磷酸盐的数量很少。
05章土壤中磷的测定精
Si 硅酸(H4SiO4) 能与钼酸结合生成杂多酸。 干扰的避免：调节溶液的酸度。因为磷钼酸在较高的酸度(0.4~0.6 mol∙L-1, H+)下形成，而硅钼酸在 较低的酸度(0.1~0.24 mol∙L-1, H+)下形成。
As 砷酸(H3AsO4) 能与钼酸结合生成杂多酸。 干扰的避免：在加钼酸铵试剂之前先将砷还原成亚砷酸。（虽然砷的干扰比较难克服，但一般不会 影响土壤磷的测定结果。）
抗坏血酸 生成的颜色稳定，干扰离子的影响小， 适用范围广，但显色慢，需要加温。 是目前应用最广泛的一种还原剂。
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
目前使用最普遍的是钼锑抗混合指示剂。
其中含有：
钼酸铵 [(NH4)6Mo7O24∙4H2O] — 与磷酸反应 酒石酸氧锑钾 [K(SbO)C4H4O6] —加快显色反应 抗坏血酸 [C6H8O5，Vc] — 还原剂 硫酸[ H2SO4 ] — 提供所需的酸度
Fe3+ 影响溶液的氧化还原势，抑制蓝色生成。 干扰的避免：选用抗坏血酸作为还原剂，因为抗坏血酸能与Fe3+络合，保持溶液的氧化还原势。 （用SnCl2作还原剂时，溶液中Fe3+≤20mg∙kg-1）
二、HClO4-H2SO4消煮 –钼锑抗比色法
§ 5-2 全磷的测定 二、 HClO4-H2SO4消煮– 钼锑抗比色法
比色法测磷时，酸度的控制非常重要。 不同方法所要求的适宜试剂浓度不同。参照教材PP.73表5-1中三种钼蓝法的各种试剂在比色
液中的最终浓度。
特别关注一下钼锑抗体系中各试剂在比色液中的最终浓度：显色酸度 0.35 ~ 0.55 mol∙L-1，H+； 钼酸铵 1.0 g∙L-1；
抗坏血酸 0.8~1.5 g∙L-1； 酒石酸氧锑钾 0.024~0.05 g∙L-1。
土壤磷的测定(精)
缺点：对某些矿物的分解能力较差，某 些元素可能挥发损失。
1. 盐酸
浓盐酸的沸点为108℃，故溶解温度最好低于80℃，否则因 盐酸蒸发人快，试样分解不完全。
(1)易溶于盐酸的元素或化合物是：Fe，Co，Ni，Cr，Zn； 普通钢铁、高铬铁，多数金属氧化物(如MnO2、PbO、FeO， 等)，过氧化物，氢氧化物，硫化物、碳酸盐、磷酸盐、硼 酸盐
磷测定的酸溶法——硫酸-高氯酸消煮法
方法原理
①强氧化剂高氯酸氧化有机质，使胶状硅脱水，螯 合Fe3+，并抑制比色时的硅铁干扰。 ②硫酸提高消化液温度，防止消化过程中溶液蒸干， 高温时是强氧化剂。 使含磷矿物（氟磷磷石、羟基磷磷石等）分解。
方法评述
简便、快速。
一般土壤分解率97~98%，红壤只有95%。为什么？ 能否用其它酸溶法制备待测液？
磷测定的碱熔法（I）——NaOH熔融法
方法原理
高温（650~750℃）下，土壤与6~10倍的氢氧化钠 于镍坩埚中熔融，使土壤矿物的可溶性碱土金属的 成分增加。土壤与NaOH的熔融物可彻底溶于稀酸溶 液中，供分析测定用。
方法评述
为GB8937-88方法，土壤样品分解彻底。 待测液可供磷或其它元素的测定。
(2)不溶于盐酸的物质包括灼烧过的Al，Be，Cr，Fe，下， Zr和Th的氧化物SnO2，Sb2O5，Nb2O5、Ta205，磷酸锆，独 居石，磷钇矿，锶、钡和铅的硫酸盐，尖晶石，黄铁矿， 汞和某些金属的硫化物，铬铁矿，铌和钽矿石和仟种针和 铀的矿石。
(3)As3+，Sb3+，Ge4+和Se4+，Hg2+，Sn4+，Re8+容易从盐酸溶 液中(特别是加热时)挥发失去。在加热溶液时，试样中的 其他挥发性酸，诸如HBr，HI，HNO3，H3BO3和SO3当然也会 失去。
1. 盐酸
浓盐酸的沸点为108℃，故溶解温度最好低于80℃，否则因 盐酸蒸发人快，试样分解不完全。
(1)易溶于盐酸的元素或化合物是：Fe，Co，Ni，Cr，Zn； 普通钢铁、高铬铁，多数金属氧化物(如MnO2、PbO、FeO， 等)，过氧化物，氢氧化物，硫化物、碳酸盐、磷酸盐、硼 酸盐
磷测定的酸溶法——硫酸-高氯酸消煮法
方法原理
①强氧化剂高氯酸氧化有机质，使胶状硅脱水，螯 合Fe3+，并抑制比色时的硅铁干扰。 ②硫酸提高消化液温度，防止消化过程中溶液蒸干， 高温时是强氧化剂。 使含磷矿物（氟磷磷石、羟基磷磷石等）分解。
方法评述
简便、快速。
一般土壤分解率97~98%，红壤只有95%。为什么？ 能否用其它酸溶法制备待测液？
磷测定的碱熔法（I）——NaOH熔融法
方法原理
高温（650~750℃）下，土壤与6~10倍的氢氧化钠 于镍坩埚中熔融，使土壤矿物的可溶性碱土金属的 成分增加。土壤与NaOH的熔融物可彻底溶于稀酸溶 液中，供分析测定用。
方法评述
为GB8937-88方法，土壤样品分解彻底。 待测液可供磷或其它元素的测定。
(2)不溶于盐酸的物质包括灼烧过的Al，Be，Cr，Fe，下， Zr和Th的氧化物SnO2，Sb2O5，Nb2O5、Ta205，磷酸锆，独 居石，磷钇矿，锶、钡和铅的硫酸盐，尖晶石，黄铁矿， 汞和某些金属的硫化物，铬铁矿，铌和钽矿石和仟种针和 铀的矿石。
(3)As3+，Sb3+，Ge4+和Se4+，Hg2+，Sn4+，Re8+容易从盐酸溶 液中(特别是加热时)挥发失去。在加热溶液时，试样中的 其他挥发性酸，诸如HBr，HI，HNO3，H3BO3和SO3当然也会 失去。
实验五土壤速效磷的测定(精)
实验五土壤速效磷的测定一、目的和要求掌握比色法测定土壤速效磷的方法，了解土壤中磷素形态及其土壤供磷能力与土壤速效磷的关系。
掌握土壤速效磷的浸提，浸提液的处理，标准曲线制作，显色，比色，计算。
二、内容与原理酸性土壤中的磷主要是以Fe—P，A1—P的形态存在，利用氟离子在酸性溶液中络合Fe3+和Al3+的能力，可使这类土壤中比较活性的磷酸铁铝盐被陆续活化释放，同时由于H+的作用，也能溶解出部分活性较大的Ca—P，然后用钼锑抗比色法进行测定。
三、主要仪器及试剂配制仪器：塑料杯，往复式振荡机，分光光度计或光电比色计试剂：(1)0.03molL-1NH4F—0.025 molL-1HCl浸提剂称取1.11克NH4F溶于800毫升水中，加1.0molL-1HCl25毫升，然后稀释至1升，贮于塑料瓶中，其它试剂同前法。
(2)钼锑抗试剂称取酒石酸锑钾(KSbOC4H4O6)0.5克，溶于100毫升水中，制成5％的溶液。
另称取钼酸铵20克溶于450毫升水中徐徐加入208.3毫升浓硫酸，边加边搅动，再将0.5％的酒石酸锑钾溶液100毫升加入到钼酸铵液中，最后加至1升，充分摇匀，贮于棕色瓶中，此为钼锑混合液。
临用前(当天)称取1.5克左旋抗坏血酸溶液于100毫升钼锑混合液中，混匀。
此即钼锑抗试剂。
(有效期24小时，如贮于冰箱中，则有效期较长。
)(3)磷标准溶液称取0.439克KH2PO4(105℃烘2小时)溶于200毫升水中，加入5毫升浓H2SO4，转入1升量瓶中，用水定容，此为100 mgkg-1磷标准液，可较长时间保存。
取此溶液稀释20倍即为5 mgkg-1磷标准液，此液不宜久存。
四、操作方法与实验步骤1、称取通过1毫米筛孔的风干土样品5克(精确到0.01克)于150毫升塑料杯中，加入0.03molL-1NH4F——0.025 molL-1HCl浸提剂50毫升，在20—30℃条件下振荡30分钟，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤于塑料杯中，同时作试剂空白试验。
土壤有效磷测定(精)
土壤速效磷的测定(0.5M碳酸氢钠法)（一）方法原理：用PH8.5的0.5M碳酸氢钠溶液，于温度25℃左右提取分离土壤速效磷。
取一定量的提取液,控制显色中的硫酸的浓度为0.4N，钼酸铵的浓度为0.1%，以氯化亚锡为还原剂，使形成“磷钼兰”溶液。
用比色计测定其兰色强度，然后于标准曲线上查找其相应的浓度，从而计算土壤中的速效磷的含量。
（二）试剂配制：（1）0.5MNaHCO3：称取化学纯NaHCO3 420.0克放入血清瓶中。
加8000ml水溶解后，定容10000ml，摇匀，一般情况下，这样配制的溶液可得PH8.5。
应用酚酞指示剂检查：取溶解后的溶液2ml于试管中，加入1滴酚酞应为微红色，否则用0.5N NaOH逐滴加入，边加边摇动血清瓶。
调节至PH8.5，在定容10000ml，摇匀。
（2）硫酸—钼酸铵试剂：a.贮存液：称化学纯钼酸铵50.0克于800ml水中，微热溶解。
另取化学纯浓硫酸（比重1.84）903ml，分次徐徐加入盛有2000ml水的3000ml三角瓶，并不断用玻棒搅拌，冷却后备用。
将钼酸铵溶液徐徐加入硫酸溶液中，并不断搅拌，稀至5000ml（用容量瓶稀释多次定容），摇匀，此溶液贮于紧塞的细口瓶中，放在暗处保存，其钼酸铵浓度为1%，硫酸浓度为6.5N。
b.使用液：使用时视其用量，将贮存液准确稀释5倍（即1份体积贮存液加4份体积水），摇匀，即可使用。
（3）10%HCL溶液：取分析纯浓盐酸（比重1.19）239ml，加入500ml水中，以水稀释定容至1000ml，摇勺。
（4）氯化亚锡溶液：称取1.00克氯化亚锡（二级）溶于40ml10%HCL中。
此试剂每天新鲜配制。
（5）标准磷溶液：准确称取经45℃烘干6小时分析纯KH2PO4 4.3936克于小烧杯中，用少量水溶解后，将溶液毫无损失地溶解洗入1000ml量瓶中，加入2ml 浓硫酸，稀释至刻度，摇匀，即为1000PPm/ml标准磷溶液。
再准确吸取此液25.00ml于500ml量瓶中，用0.5M NaHCO3稀释至刻度，摇匀，即为50PPm磷的标准溶液。
土壤中磷的测定
土壤中磷的测定5.1概述土壤全磷（P）量是指土壤中各种形态磷素的总和。
我国土壤全磷的含量（以P，g·kg－1表示）从第二次国各地土壤普查资料来看，大致在0.44～0.85 g·kg－1范围内,最高可达1.8 g·kg－1, 低的只有0.17 g·kg－1。
南方酸性土壤全磷含量一般低于0.56g·kg－1；北方石灰性土壤全磷含量则较高。
土壤全磷含量的高低，受土壤母质、成土作用和耕作施肥的影响很大。
一般而言，基性火成岩的风化母质含磷多于酸性火成岩的风化母质。
我国黄土母质全磷含量比较高，一般在0.57g·kg－1～0.70g·kg－1之间。
另外土壤中磷的含量与土壤质地和有机质含量也有关系。
粘土含磷多于砂性土，有机质丰富的土壤含磷亦较多。
磷在土壤剖面中的分布，耕作层含磷量一般高于底土层。
大量资料的统计结果表明，我国不同地带的气候区的土壤其速效磷含量与全磷含量呈正相关的趋势。
在全磷含量很低的情况下（P0.17～0.44g·kg－1以下），土壤中有效磷的供应也常感不足，但是全磷含量较高的土壤，却不一定说明它已有足够的有效磷供应当季作物生长的需要，因为土壤中磷大部分成难溶性化合物存在。
例如我国大面积发育于黄土性母质的石灰性土壤，全磷含量均在0.57～0.79g·kg－1之间，高的在0.87g·kg－1以上。
但由于土壤中大量游离碳酸钙的存在，大部分磷成为难溶性的磷酸钙盐，能被作物吸收利用的有并效磷含量很低，施用磷肥有明显的增产效果。
因此，从作物营养和施肥的角度看，除全磷分析外，特别要测定土壤中有效磷含量，这样才能比较全面地说明土壤磷素肥力的供应状况。
土壤中磷可以分为有机磷和无机磷两大类。
矿质土壤以无机磷为主，有机磷约占全磷的20%～50%。
土壤有机磷是一个很复杂的问题，许多组成和结构还不清楚，大部分有机磷，以高分子形态存在，有效性不高，这一直是土壤学中一个重要的研究课题。
土壤中磷的测定(全磷、速效磷)
结果计算
全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106
)×100
式中：
显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；
显色液体积—本操作中为50ml；
分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；
106
—将ug换算成g
W—土样重(g)。
两次平行测定结果允许误差为0.005%。
仪器、试剂
2SO
48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO
4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。
比色液mg/L—从工作曲线上查得的比色液磷的mg/L数；
W—称取土样重量(g)。
分取倍数—
土壤速效磷(P)mg/kg等级
＜5低
5—10中
＞10高
注意事项
1.活性碳一定要洗至无磷无氯反应。
2.钼锑抗混合剂的加入量要十分准确，特别是钼酸量的大小，直接影响着显色的深浅和稳定性。标准溶液和待测液的比色酸度应保持基本一致，它的加入量应随比色时定容体积的大小按比例增减。
(4)硫酸钼锑贮存液。取蒸馏水约400ml，放入1000ml烧杯中，将烧杯浸在冷水中，然后缓缓注入分析纯浓硫酸208.3ml,并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于约60℃的200ml蒸馏水中，冷却。然后将硫酸溶液徐徐倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加入100ml0.5%酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000ml，摇匀贮于试剂瓶中。
全P %=显色液mg/L×显色液体积×分取倍数／(W×106
)×100
式中：
显色液Pmg/L—从工作曲线上查得的Pmg/L；
显色液体积—本操作中为50ml；
分取倍数—消煮溶液定容体积/吸取消煮溶液体积；
106
—将ug换算成g
W—土样重(g)。
两次平行测定结果允许误差为0.005%。
仪器、试剂
2SO
48ml，摇动后(最好放置过夜)再加入70—72%的高氯酸(HClO
4)10滴摇匀。
2.于瓶口上放一小漏斗，置于电炉上加热消煮至瓶内溶液开始转白后，继续消煮20分钟，全部消煮时间约为45—60分钟。
3.将冷却后的消煮液用水小心地洗入100ml容量瓶中，冲冼时用水应少量多次。轻轻摇动容量瓶，待完全冷却后，用水定容，用干燥漏斗和无磷滤纸将溶液滤入干燥的100ml三角瓶中。同时做空白试验。
比色液mg/L—从工作曲线上查得的比色液磷的mg/L数；
W—称取土样重量(g)。
分取倍数—
土壤速效磷(P)mg/kg等级
＜5低
5—10中
＞10高
注意事项
1.活性碳一定要洗至无磷无氯反应。
2.钼锑抗混合剂的加入量要十分准确，特别是钼酸量的大小，直接影响着显色的深浅和稳定性。标准溶液和待测液的比色酸度应保持基本一致，它的加入量应随比色时定容体积的大小按比例增减。
(4)硫酸钼锑贮存液。取蒸馏水约400ml，放入1000ml烧杯中，将烧杯浸在冷水中，然后缓缓注入分析纯浓硫酸208.3ml,并不断搅拌，冷却至室温。另称取分析纯钼酸铵20g溶于约60℃的200ml蒸馏水中，冷却。然后将硫酸溶液徐徐倒入钼酸铵溶液中，不断搅拌，再加入100ml0.5%酒石酸锑钾溶液，用蒸馏水稀释至1000ml，摇匀贮于试剂瓶中。
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2. 样品溶液中磷的测定
正磷酸 钼酸 磷钼杂多酸 偏钒酸铵 磷钒钼杂多酸 （黄色） 钼黄比色法
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
钼酸铵 磷钼酸铵 (黄色沉淀)
还原剂 ―钼蓝” （蓝色） 钼蓝比色法
容量法 重量法
（含磷量高时） （含磷量中等时） （含磷量低时）
钼蓝比色法
（1）原理：
PO430.4~0.6mol(H+)/L
§ ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ-1 概述 一、含量和形态
我国几种土壤的无机磷形态构成
（引自《中国土壤》P.379）
土 壤 pH 无 机 磷 形 态 构 成 比 例 （%） Al—P Fe—P Ca—P O—P
褐 土 黄潮土 黄棕壤 红 壤 砖红壤
8.0～8.5 7.5～8.5 6.0～7.0 4.5～5.5 4.5～5.5
§ 5-1 概述 一、含量和形态
②Fe-P（磷酸铁盐） 以粉红磷铁矿FePO4· 2H2O为代表 ③Al-P（磷酸铝盐） 以磷铝石AlPO4· 2H2O为代表 ④O-P（闭蓄态磷） 氧化铁胶膜包被的磷酸盐。 存在形态受土壤pH的影响很大： 酸性土壤以Fe-P和Al-P为主； 石灰性土壤以Ca-P为主，且随Ca/P比的增加， 磷的溶解度和有效性降低； 中性土壤Fe-P、Al-P、Ca-P比例相当(1:1:1)。
全国各地区表层土壤速效磷各含量级的面积
§5-2
方法概述
土壤全磷的测定
HClO4—H2SO4消煮–钼锑抗比色法
NaOH熔融—钼锑抗比色法
一、方法概述
1. 土壤样品的分解
(1) 目的： 使有机磷氧化成无机磷 使矿物质分解，释放出难溶性磷 使无机磷全部溶解
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
二、土壤磷的主要分析项目 1. 土壤全磷量 2. 土壤有效磷含量 3. 土壤无机磷的分级测定 4. 土壤有机磷含量及分组
土壤有效磷
——土壤中对植物有效的那部分磷。
§ 5-1 概述 二、主要分析项目
包括水溶态磷、部分或全部吸附态磷和易矿化有效态有 机磷以及某些易溶解的沉淀态磷酸盐。 土壤有效磷在化学分析上的意义 —— 能与32P进行同位素交换或被某些化学试剂提取的磷。 （模拟植物吸收，以定量估计化学形态上对植物有效的 磷。） 其实，“有效磷”的化学涵义并不确定，因为同一 土壤用不同化学试剂提取的“有效磷”含量差异很大， 由此提出的土壤有效磷的丰缺指标也不相同。
Chapter 5
土壤中磷的测定
本章主要内容
概述 土壤全磷的测定 土壤速效磷的测定 土壤无机磷形态的分级测定 土壤有机磷的分离测定
学习要求
了解土壤全磷测定的国家标准方法 了解钼兰比色法和钼黄比色法测定土壤 有效磷两种方法各自的优缺点。 掌握用0.5mol.L-1NaHCO3法测定土壤速 效磷的测定条件、原理、操作步骤及注 意事项。
§5-1
概述
土壤磷的含量、形态 土壤磷的主要分析项目
一、土壤磷的含量和形态
§ 5-1 概述 一、含量和形态
我国土壤全磷（P）含量在0.2～1.1g/kg范围内， 并有从南到北渐增的地域变化趋势。
土壤含磷量主要取决于母质类型。
耕地土壤受耕作施肥等人为因素的影响，全磷量 的局部变异很大。
土壤磷的形态可分为无机态磷和有机态磷两大类。
1. 土壤有机态磷
§ 5-1 概述 一、含量和形态
含量变化大，占土壤表层全磷的20～80%。 须矿化为无机磷后才能被植物吸收利用。 化学组成 目前大部分未知，已知者主要有3种。 植素类 —— 植酸与钙、镁等离子结合而成。占 土壤有机磷总量的20～30%。 核酸类 —— 含磷、氮的复杂有机化合物。占土 壤有机磷总量的1～10%。 磷脂类 —— 醇、醚溶性的有机磷化合物，容易 分解矿化为磷酸。约占土壤有机磷总量的1%。
3.4～6.9 0.0～0.5 61～71 1.6～4.1 0.0～0.7 63～65 3.7～10 25～27 13～20 0.3～5.7 15～26 1.5～16 0.0～1.5 2.5～14 0.9～5.3
12～20 31～35 45～57 52～83 84～94
§ 5-1 概述 二、主要分析项目
HClO4 – H2SO4消煮法
① 原理：
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
高氯酸：氧化有机质，分解矿物质； 抑制硅和铁对磷的比色测定的干扰 浓硫酸：提高消化温度；防止溶液蒸干
② 特点：
操作简便，是目前应用最普遍的方法。 分解率(97~98%)不及熔融法，但已达分析要求。 对高度分化的土壤（红壤、砖红壤）或有包裹态磷灰 石存在时，可能提取不完全，使测定结果偏低。 对有机质含量高的土壤，需注意有机质去除完全。
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
目前使用最普遍的是钼锑抗混合指示剂。 其中含有： 钼酸铵 [(NH4)6Mo7O24∙4H2O] — 与磷酸反应 酒石酸氧锑钾 [K(SbO)C4H4O6] —加快显色反应 抗坏血酸 [C6H8O5，Vc] — 还原剂 硫酸[ H2SO4 ] — 提供所需的酸度
（5）钼锑贮存溶液： （6）钼锑抗显色剂：
§ 5-2 全磷的测定 二、 HClO4-H2SO4 消煮–钼锑抗比色法
先配制钼锑混合液（贮存液），临用前再加入抗 坏血酸。现配现用，有效期24小时； 贮存于棕色试剂瓶中，最好放在冰箱中保存。 含有：10g∙L-1钼酸铵 [(NH4)6Mo7O24∙4H2O] 0.5g∙L-1酒石酸氧锑钾 [K(SbO)C4H4O6] 15g∙L-1抗坏血酸 [C6H8O5，Vc] 硫酸 5.5mol∙L-1, H+
(2) 方法： 碱熔法：Na2CO3、NaOH 强酸消煮法：HClO4–H2SO4、HF–HClO4 干灰化法：高温灼烧后再用酸浸提
碱熔融法
① 原理：
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
土壤硅酸盐的溶解度决定于硅和金属元素的比例以及金 属元素的碱度。硅和金属元素的比例愈小，金属元素的碱 性愈强，则硅酸盐的溶解度愈大。用Na2CO3 或NaOH熔化土 样，即增加样品中碱金属的比例，促进硅酸盐的分解，以 利于各种元素的溶解。
二、HClO4-H2SO4消煮 –钼锑抗比色法
§ 5-2 全磷的测定 二、 HClO4-H2SO4 消煮–钼锑抗比色法
1. 原理
在高温条件下，土壤中含磷矿物及有机磷化 合物与高沸点的H2SO4和强氧化剂HClO4作用，使 之完全分解，全部转化为正磷酸盐而进入溶液。 在一定酸度下，正磷酸根与钼酸铵作用生成磷 钼杂多酸，以适当的还原剂将其还原成“钼蓝”， 使溶液呈蓝色。 磷的含量与溶液蓝色的深浅成正比，可用分光 光光度法于700nm处测定。
2. 土壤无机态磷
§ 5-1 概述 一、含量和形态
（1）水溶态磷 —— 土壤溶液中的磷
包括：磷酸根离子（H2PO4-、HPO42-、PO43-）、 部分聚合态磷酸盐和某些有机磷化合物。
土壤溶液pH=7.2时，H2PO4-和HPO42-各占一半； pH＜7.2时，以H2PO4-为主； pH＞7.2时，以HPO42-为主。
特别关注一下钼锑抗体系中各试剂在比色液中的 最终浓度：显色酸度 0.35 ~ 0.55 mol∙L-1，H+； 钼酸铵 1.0 g∙L-1； 抗坏血酸 0.8~1.5 g∙L-1； 酒石酸氧锑钾 0.024~0.05 g∙L-1。 钼锑抗体系是目前使用最普遍的，原因是： 灵敏度较高，接近SnCl2–H2SO4体系； 显色最稳定，显色的温度范围最宽； 受干扰离子的影响小； 还原剂与钼酸铵配成了一种钼锑抗混合溶液，也就 是：钼酸铵—酒石酸氧锑钾—抗坏血酸—硫酸混合 溶液，一次加入，简单方便。
③ 干扰离子的影响：
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
Si 硅酸(H4SiO4) 能与钼酸结合生成杂多酸。 干扰的避免：调节溶液的酸度。因为磷钼酸在较 高的酸度(0.4~0.6 mol∙L-1, H+)下形成，而硅钼酸在较 低的酸度(0.1~0.24 mol∙L-1, H+)下形成。 As 砷酸(H3AsO4) 能与钼酸结合生成杂多酸。 干扰的避免：在加钼酸铵试剂之前先将砷还原成 亚砷酸。（虽然砷的干扰比较难克服，但一般不 会影响土壤磷的测定结果。） 3+ 影响溶液的氧化还原势，抑制蓝色生成。 Fe 干扰的避免：选用抗坏血酸作为还原剂，因为抗 坏血酸能与Fe3+络合，保持溶液的氧化还原势。 （用SnCl2作还原剂时，溶液中Fe3+≤20mg∙kg-1）
§ 5-1 概述 二、主要分析项目
不同方法（提取剂）测定的土壤有效磷丰 缺指标比较（P，mg/kg）
有效磷分级 低 中等 较高 高 碳酸氢钠法 盐酸-氟化铵法 施磷肥反应 ＜5 5～10 10～18 18～25 ＜15 15～24 24～30 ＞30 显 著 较显著 不显著 无 效
注意：1. 土壤磷含量的表示方法（P2O5/2P＝2.29） 2. 有效磷含量须说明测定方法
水溶性磷离子是植物根系可直接吸收利用的磷。 由于根际微域土壤多呈酸性，主要吸收H2PO4-。
（2）吸附态磷
§ 5-1 概述 一、含量和形态
——土壤固相表面吸附的磷酸根离子。
以专性吸附（配位吸附）为主，还有非专性吸附 （阴离子交换吸附）。
酸性土中磷的专性吸附剂主要是铁、铝氧化物及其 水合物。石灰性土壤的方解石（CaCO3）对磷的配位 交换吸附亦为常见。
(NH4)2MoO4
§ 5-2 全磷的测定 一、方法概述
一定酸度下，溶液中的 正磷酸根与钼酸铵络合 生成磷钼杂多酸。
在还原剂的作用下， 磷钼杂多酸中的一部 分Mo6+被还原为Mo5+， 生成 “钼蓝” 。
分光光度法
H3[PMo12O40] 还原剂
H3PO4· 10MoO3· Mo2O5 或H3PO4· 8MoO3· 2Mo2O5