实验教学教案首页
本次实验项目：
肝脏谷丙转氨酶活力测定
本次实验课时：验证性 4学时
教学要求：
1．掌握实验原理，了解转氨酶的性质及临床意义
2. 掌握谷丙转氨酶活力的测定方法
重 点：实验原理、转氨酶的转氨基作用。
教学手段及教具：课堂讲授，学生实验操作。
肝脏谷丙转氨酶活力测定（验证性）
相关知识
１．酶的提纯基本操作程序及基本原则
２．酶的活力单位（IU）的定义及酶活力的测定（酶的定量测定）
３．测定酶活力一般经如下几个步骤
①选择适宜的一定浓度的底物。
②确定酶促反应的条件。优化条件
③将一定量的酶液和底物溶液混合，确定反应时间（因要测定酶促反应初速度） 。
④反应到一定时间后取出反应液终止反应。
⑤测定产物的生成量。
⑥计算酶活力、酶的比活力。
４．酶的比活力－－表示酶纯度的指标
每单位酶蛋白所含的活力单位数。
➢ 对固体酶：比活力＝活力单位/mg酶蛋白
➢ 对液体酶：比活力＝活力单位/ml酶液
比活力越大，酶的活力越大，含酶量或有活性的酶量越多。
５．总活力、纯化倍数和回收率
讲授内容及时间分配：
课堂讲授
1．相关知识…………………………………………………………… …… 0.1 学时
2．实验目的………………………………………………………………… … 0.1 学时
3．实验原理…………………………………………………………………… 0.3 学时
4．实验操作 …………………………………………………… … 0.2 学时
实验教学
肝脏谷丙转氨酶活力测定实验的操作技术…………………………… …… 3 学时
参考资料
《生物化学实验》
６．酶活力测定方法—不同酶选用不同的方法
７．氨基酸转氨基作用、联合脱氨基作用
８．谷丙转氨酶及临床意义: 查肝功为什么要抽血化验转氨酶指数呢？
谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST，GOT）是人体内糖和蛋白质互相转变所需的酶，人再生体内分布广泛。ALT的分布以肝中最高，主要存在于肝细胞浆中，AST存在于肝细胞浆和线粒体内。其次是肾、心、骨骼肌、脾等。AST的分布则以心肌最高，其次为肝、骨骼肌、肾脏等。
实验教学教案首页
肝脏谷丙转氨酶活力测定（验证性）
相关知识
１．酶的提纯基本操作程序及基本原则
２．酶的活力单位（IU）的定义及酶活力的测定（酶的定量测定）
３．测定酶活力一般经如下几个步骤
①选择适宜的一定浓度的底物。
②确定酶促反应的条件。优化条件
③将一定量的酶液和底物溶液混合，确定反应时间（因要测定酶促反应初速度） 。
④反应到一定时间后取出反应液终止反应。
⑤测定产物的生成量。
⑥计算酶活力、酶的比活力。
４．酶的比活力－－表示酶纯度的指标
每单位酶蛋白所含的活力单位数。
对固体酶：比活力＝活力单位/mg酶蛋白
对液体酶：比活力＝活力单位/ml酶液 本次实验项目：
肝脏谷丙转氨酶活力测定
本次实验课时：验证性 4学时
教学要求：
1．掌握实验原理，了解转氨酶的性质及临床意义
2. 掌握谷丙转氨酶活力的测定方法
重 点：实验原理、转氨酶的转氨基作用。
教学手段及教具：课堂讲授，学生实验操作。
讲授内容及时间分配：
课堂讲授
1．相关知识…………………………………………………………… …… 0.1 学时
2．实验目的………………………………………………………………… … 0.1 学时
3．实验原理…………………………………………………………………… 0.3 学时
4．实验操作 …………………………………………………… … 0.2 学时
实验教学
肝脏谷丙转氨酶活力测定实验的操作技术…………………………… …… 3 学时
参考资料
《生物化学实验》
比活力越大，酶的活力越大，含酶量或有活性的酶量越多。
５．总活力、纯化倍数和回收率
６．酶活力测定方法—不同酶选用不同的方法
７．氨基酸转氨基作用、联合脱氨基作用
８．谷丙转氨酶及临床意义: 查肝功为什么要抽血化验转氨酶指数呢？
谷丙转氨酶（ALT）和谷草转氨酶（AST，GOT）是人体内糖和蛋白质互相转变所需的酶，人再生体内分布广泛。ALT的分布以肝中最高，主要存在于肝细胞浆中，AST存在于肝细胞浆和线粒体内。其次是肾、心、骨骼肌、脾等。AST的分布则以心肌最高，其次为肝、骨骼肌、肾脏等。
肝脏谷丙转氨酶活力测定
进入实验室要注意的问题
安全第一，在实验室中使用挥发性试剂时应在通风橱中进行，以免发生中毒事件；不得在实验室中随意使用明火，因为实验室中有许多易燃易爆药品，使用明火可能引起火灾或引发爆炸事件；不得在实验室吃东西，实验结束后也应将手洗净再吃东西 。在实验室中不得嬉戏打闹，更不得用实验药品互相开玩笑。实验中使用药品应尽量节约，不得浪费药品，未使用完的药品因倒人废液缸或指定的容器中，切不可倒入原试剂瓶以免污染试剂。实验完成之前不能离开实验室，如有特殊原因要离开需经实验室负责人批准才能离开。每个实验台内的各种仪器的摆放顺序要牢记，离开实验室前要将仪器按顺序摆放好。养成一个好的习惯。
一．实验目的
了解转氨酶的性质及临床意义，并掌握谷丙转氨酶活力的测定方法
二．实验原理
在氨基酸的分解代谢过程中，联合脱氨基为大多数氨基酸的主要代谢方式，通过转氨基作用与氧化脱氨基的作用偶联而完成。 本实验以丙氨酸和ā-酮戊二酸作为谷丙转氨酶的作用的底物，利用内源性磷酸吡哆醛作为辅酶，在一定条件及时间作用后来测定所生成的丙酮酸的含量来确定其酶的活力。丙酮酸能与2，4二硝基苯肼结合，生成丙酮酸-2，4二硝基苯腙，后者在碱性条件溶液中呈棕色，基吸收光谱的峰为439-530nm，可用于测定丙酮酸的含量。ā--酮戊二酸与能与2，4二硝基苯肼结合，生成相应的苯腙，但后者在碱性溶液中的吸收光谱与丙酮酸二硝基苯肼稍有差别，在520nm波长处ā--酮戊二酸二硝基苯腙的吸光度远比丙酮酸2，4二硝基苯腙为低，因此在520nm处吸光度增加的程度与反应体系中的丙酮酸和ā--酮戊二酸的摩尔比基本上呈线性关系。故可籍此可测定谷丙转氨酶的活力。
三、实验器材
容量瓶100ml 4个 500ml 2个；电子天平；玻璃棒；研钵；试管 5支；试管架；移液管 0.5ml
2支；1ml 2支；5ml 1支；滴管1支；分光光度计，比色皿4个；
第 1 页 谷丙转氨酶高有什么危害，对肝脏损害大
能够引起谷丙转氨酶高的因素有很多，常见的有服用了一些对肝脏损伤的药物、急性的肝炎、经常酗酒等，谷丙转氨酶高对肝脏的损害很大，严重的会引起肝硬化的现象。
★ 一、谷丙转氨酶高有什么危害
(1)、酒精肝引起的谷丙转氨酶升高:大量饮酒的酒精肝患者可以导致转氨酶一过性升高，对已受损的肝脏带的的损害是十分严重的，肝脏的不断受损有可能导致肝硬化的发生，出现肝腹水、上消化道出血、肝昏迷等严重并发症，危及生命。
(2)、如果是肝硬化、肝癌患者谷丙转氨酶高的话，常提示病情正在恶化，如果不及时治疗，可以危及患者的生命。
(3)、如果是病毒性肝炎引起谷丙转氨酶高时常提示肝脏有 第 2 页 炎症活动，并伴有肝损伤，需要进行相应的治疗，否则会导致其代谢和解毒能力也在逐步降低，进而使得药物代谢和身体毒素得不到及时的排出，导致受伤的肝细胞进一步加速受损。
★ 二、病因
谷丙转氨酶主要存在于肝脏、心脏和骨骼肌中。肝细胞或某些组织损伤或坏死，都会使血液中的谷丙转氨酶升高，临床上有很多疾病可引起转氨酶异常，必须加以鉴别——
1、病毒性肝炎这是引起谷丙转氨酶ALT升高最常见的疾病，各类急、慢性病毒性肝炎均可导致谷丙转氨酶ALT偏高。
2、中毒性肝炎多种药物和化学制剂都能引起谷丙转氨酶ALT升高，但停药后，谷丙转氨酶ALT升高可恢复正常。
第 3 页 3、大量或长期饮酒者谷丙转氨酶ALT升高。
4、肝硬化与肝癌肝硬化活动时，一般都会出现谷丙转氨酶ALT升高，应该积极治疗。
5、胆道疾病胆囊炎、胆石症急性发作时，常有发热、腹痛、恶心、呕吐、黄疸、血胆红素及谷丙转氨酶ALT升高。
6、心脏疾病急性心肌梗塞、心肌炎、心力衰竭时，可使谷丙转氨酶和谷草转氨酶升高，患者常有胸痛、心悸、气短、浮肿。心脏检查有阳性体征及心电图异常。
