溶血性贫血检验

溶⾎性贫⾎的诊断溶⾎性贫⾎的诊断可分成两步：①⾸先明确有⽆溶⾎，应寻找红细胞破坏增加的证据；②查明溶⾎的原因，则须经过病史、症状、体征以及实验室等资料的综合分析来作判断。

⼀、病史除询问发病缓急，主要症状以及病情进程外还应着重询问以下各项：（⼀）地区性强调家庭籍贯，如地中海贫⾎多见于⼴东、⼴西及浙江等沿海地区。

（⼆）家族史近亲中如有贫⾎、黄疸、脾肿⼤者，则有先天性溶⾎性贫⾎可能。

（三）药物接触史药物可诱发免疫性溶⾎性贫⾎，氧化性药物可使不稳定⾎红蛋⽩病及G6PD缺乏症发⽣溶⾎。

（四）引起溶⾎性贫⾎的原发病史如淋巴瘤可伴有免疫性溶⾎性贫⾎。

（五）诱发因素如过劳、寒冷刺激及服蚕⾖等。

⼆、体征应注意贫⾎、黄疽、肝脾肿⼤等。

三、实验室检查检查⽬的和步骤有：（⼀）确定是否为溶⾎性贫⾎可根据红细胞破坏增加和⾻髓代偿功能增强⽽确定。

1.红细胞破坏增加的证据（1）红细胞计数下降，⼀般呈正细胞正⾊素性贫⾎。

（2）⾎清间接胆红素增多。

⾎清胆红素浓度不仅决定于溶⾎的程度，还决定于肝脏清除间接胆红素的能⼒，故黄疸为轻度或中度，⾎清胆红素⼀般在17.1-51.3ukmol/L（1-3mg/dl）左右，很少超过136.8umol/L（8mg/dl），当黄疸不显时，并不能排除溶⾎性贫⾎。

（3）尿内尿胆原的排泄量增多。

尿内尿胆原和尿胆素常增加。

在肝功能减退时，肝脏⽆能重复处理从肠内吸收来的尿胆原，尿中尿胆原也会增加，故对溶⾎性贫⾎的诊断，价值不是很⼤。

粪内尿胆原是增加的，但粪内尿胆原的定量测定现在已不在⽤作诊断⽅法之⼀。

尿内胆红素阴性，除⾮同时有阻塞性黄疸。

（4）⾎浆结合珠蛋⽩明显减少或消失。

结合珠蛋⽩是在肝脏产⽣能与⾎红蛋⽩结合的清糖蛋⽩，正常值为0.7-1.5g/L（70-150mg/dl）。

⾎管内和⾎管外溶⾎结合珠蛋⽩含量均降低。

在感染、炎症、恶性肿瘤或⽪质类固醇治疗时可以增多。

因此，在解释结果时须考虑其他因素的影响。

（5）⾎浆游离⾎红蛋⽩浓度增⾼。

第十二章自身免疫性溶血性贫血及其实验诊断一、自身免疫性溶血的检验及其应用二、自身免疫性溶血性贫血的实验诊断一、自身免疫性溶血的检验及其应用1.免疫性溶血性贫血的定义和分类免疫性溶血性贫血是由抗体参与的溶血反应所致的贫血。

这类免疫反应是由于红细胞表面抗原，或与外来的抗原（如药物等）相结合，在相应抗体（IgG或IgM）作用下，或激活补体的参与，导致红细胞凝集或破坏而发生溶血；或在脾或肝脏内的单核-巨噬细胞的吞噬作用下被破坏。

免疫性溶血性贫血的分类见下表。

免疫性溶血性贫血的分类2.抗人球蛋白试验包括直接（DATG）法和间接（IATG）法。

（1）原理：用于检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG）。

分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（IAGT），以前者最常用。

直接试验应用抗人球蛋白试剂[抗IgG和（或）抗C3d]与红细胞表面的IgG分子结合，如红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。

抗人球蛋白直接试验原理示意图及结果观察（玻片法）间接试验应用Rh（D）阳性O型正常人红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。

抗人球蛋白间接试验原理示意图及结果观察（试管法）结果：健康人直接和间接抗人球蛋白试验均为阴性。

（2）临床意义：阳性见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、药物致免疫性溶血性贫血、输血引起溶血性贫血和新生儿同种免疫性溶血性贫血。

阴性不能排除免疫性溶血性贫血。

3.冷凝集素试验（1）原理：冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。

凝集反应的高峰在0～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。

参考值：正常人血清抗红细胞抗原的IgM冷凝集素效价＜1:32（4℃）。

（2）临床意义：阳性见于冷凝集素综合征（＞1:1000），支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、疟疾、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤者亦可增高，但不超过1:1000。

实验诊断-临床血液学检测：溶血性贫血的实验室检测溶血性贫血的实验室检测溶血性贫血的实验室检测一、溶血性贫血的筛查检测（一）血浆游离血红蛋白测定1.参考值<50mg/L（1～5mg/dl）2.临床意义（1）血管内溶血时血浆游离血红蛋白明显增高；（2）血管外溶血时血浆游离血红蛋白不增高；（3）自身免疫性溶血性贫血、珠蛋白生成障碍性贫血可轻度增高。

（二）血清结合珠蛋白测定1.参考值0.7～1.5g/L（70～150mg/dl）2.临床意义（1）各种溶血时血清结合珠蛋白均有减低，血管内溶血时减低显著；（2）肝脏病、传染性单个核细胞增多症、先天性无血清结合珠蛋白血症等可减低或消失；（3）感染、创伤、恶性肿瘤、系统性红斑狼疮、糖皮质激素治疗等可有结合珠蛋白增高。

（三）血浆高铁血红素清蛋白测定 1.检测方法生化法、电泳法 2.正常值阴性 3.临床意义阳性表示为严重血管内溶血（四）含铁血黄素尿试验（Rous试验）1.原理铁离子在酸化的亚铁氰化钾溶液中生成蓝色的亚铁氰化铁，即普鲁士蓝反应。

2.正常值阴性3.临床意义（1）慢性血管内溶血可呈现阳性，并持续数周；（2）常见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症，在溶血初期可阴性。

（五）红细胞寿命测定1.原理用51Cr标记红细胞检测红细胞半衰期。

2.正常值正常红细胞半衰期为25～32天。

3.临床意义溶血性贫血时常小于15天，这是确定溶血性贫血的可靠方法。

二、红细胞膜缺陷的检测（一）红细胞渗透脆性试验1.原理红细胞在低渗氯化钠溶液中细胞逐渐膨胀甚至破裂而溶血。

2.参考值Ø开始溶血：0.42%～0.46%（4.2～4.6g/L）NaCl溶液Ø完全溶血：0.28%～0.34%（2.8～3.4g/L）NaCl溶液3.临床意义（1）脆性增高：遗传性球形细胞增多症、温抗体型自身免疫性溶血性贫血、遗传性椭圆形细胞增多症等；（2）脆性减低：海洋性贫血、缺铁性贫血、某些肝硬化及阻塞性黄疸等。

临床医学检验技术(士)：溶血性贫血的检验考试题1、单选患者，女性，30岁，3年前无明显诱因出现巩膜发黄，全身乏力，常感头昏，皮肤瘙痒，并多次出现酱油色尿。

近3个月来，乏力加重，无法正常工作而入院。

体格检查发（江南博哥）现重度贫血，巩膜黄染，肝肋下2cm，脾平脐，其余未见异常。

血常规显示WBC9.0×109/L，Hb40g/L，RBC1.06×1012/L，PLT110×109/L。

外周血可见晚幼粒细胞，成熟红细胞明显大小不等和形态异常，可见较多的小球形红细胞和嗜多色形红细胞，网织红细胞30%。

拟诊"溶血性贫血"入院。

为了进一步明确溶血的存在，应首选哪一方面的实验室检查（）A.肾功能测定B.肝功能测定C.LDH、总胆红素、间接胆红素、血红蛋白尿等测定D.补体测定E.红细胞沉降率测定正确答案：C2、单选红细胞渗透脆性增加见于（）A.球形红细胞增多症B.靶形红细胞增多症C.口形红细胞增多症D.镰状红细胞增多症E.珠蛋白生成障碍性贫血正确答案：A参考解析：红细胞渗透脆性增加见于遗传性球形细胞增多症、椭圆形细胞增多症等；降低见于阻塞性黄疸、珠蛋白生成障碍性贫血、缺铁性贫血等。

3、单选不符合铁粒幼细胞性贫血的是（）A.血清总铁结合力增高B.血清铁增高C.转铁蛋白饱和度增高D.血浆铁转换率增高E.铁蛋白增高正确答案：A参考解析：铁粒幼细胞性贫血铁代谢的各项指标与缺铁性贫血明显不同，血清总铁结合力正常或减低。

4、单选下列疾病在蔗糖溶血试验时可以出现假阳性的是（）A.巨幼细胞性贫血B.多发性骨髓瘤C.白血病D.自身免疫性溶贫E.巨球蛋白血症正确答案：C参考解析：自身免疫性溶血性贫血有的可为阳性，白血病、骨髓硬化时可出现假阳性。

5、单选不符合溶血性贫血骨髓象特征的是（）A.小细胞低色素性贫血B.粒/红比值减低C.红细胞系统增生显著D.可见H-J小体和卡-波环等红细胞E.骨髓增生明显活跃正确答案：A参考解析：溶血性贫血骨髓象特征是：骨髓增生明显活跃，红细胞系统增生显著，粒/红比值减低，可见H-J小体和卡-波环等红细胞。

临床医学检验临床血液技术：溶血性贫血的实验诊断考试资料五1、单选在血管内溶血的实验室指标中，最敏感的是（）A.高铁血红蛋白还原试验阳性B.血浆血红素结合蛋白减低C.血浆结合珠蛋白减低D.尿隐血试（江南博哥）验阳性，镜检未见红细胞E.血清胆红素增高正确答案：C2、单选男性，30岁，黄疸、贫血4年，偶见酱油色尿。

检验：红细胞2.15×1012/L，血红蛋白68g/L，白细胞2.3×109/L，血小板63×109/L，网织红细胞计数6.7%；总胆红素44.46μmol/L（2.6mg/dl），直接胆红素3.42μmol/L （0.2mg/dl），ALT正常；骨髓检查示增生正常偏低，粒红比为1：1.92。

要正确诊断最需要做下列哪项检查（）A.Coombs试验B.血清免疫球蛋白测定C.Ham试验D.尿隐血试验E.HbsAg正确答案：C参考解析：阵发性睡眠性血红蛋白尿症患者体内存在对补体敏感的红细胞。

Ham 试验阳性主要见于PNH，某些自身免疫性溶血性贫血发作严重时可呈阳性。

3、单选与血管外溶血不符合的是（）A.常为慢性经过B.脾不肿大C.常为先天性D.破坏的红细胞被单核－巨噬系统吞噬E.黄疸正确答案：B参考解析：血管外溶血常表现为：贫血、黄疸、肝、脾大。

4、单选溶血性贫血时外周血中常可见到，但除外（）A.点彩红细胞B.网织红细胞C.红细胞寿命缩短D.有核红细胞E.红细胞缗钱状形成正确答案：E5、单选泵岛销售的商品，订货时通常要适当（），保证最低的陈列量。

A、增加订量B、减少订量C、下调订量D、按最小配送量订货正确答案：A6、单选不符合急性溶血性贫血的是（）A.发热，酱油色尿可伴休克B.急性贫血伴黄疸C.肾衰竭D.出现左肘关节肿胀E.溶血早期Rous试验可呈阳性正确答案：D7、单选男，13岁，面色苍白半年。

体检：中度贫血貌，巩膜轻度黄染，脾肋下3cm；检验结果：血红蛋白81g／L，白细胞及血小板正常，网织红细胞13%；Coombs试验（－）；红细胞渗透脆性试验，初溶为58%氯化钠溶液，全溶为46%氯化钠溶液本例溶血性贫血发病机制为（）A.获得性红细胞膜缺陷B.遗传性红细胞膜缺陷C.红细胞磷酸己糖旁路中的酶缺陷D.珠蛋白肽链合成减少E.红细胞自身抗体产生正确答案：B8、单选血浆游离Hb测定哪项错误（）A.在pH7.6左右B.在pH5.6左右C.于530nm处测吸光度D.正常参考值<50mg／LE.颜色变化是绿－蓝－紫红正确答案：A9、单选提示慢性血管内溶血的实验室检查是（）A.Rous试验B.铁染色C.MCHCD.HCBE.HCT 正确答案：A参考解析：Rous试验即尿含铁血黄素试验。

自身免疫性溶血性贫血及其实验诊断一、自身免疫性溶血的检验及其应用1.免疫性溶血性贫血的定义和分类：免疫性溶血性贫血是由抗体参与的溶血反应所致的贫血。

这类免疫反应是由于红细胞表面抗原，或与外来的抗原（如药物等）相结合，在相应抗体（IgG或IgM）作用下，或激活补体的参与，导致红细胞凝集或破坏而发生溶血；或在脾或肝脏内的单核-巨噬细胞的吞噬作用下被破坏。

免疫性溶血性贫血的分类见下表。

免疫性溶血性贫血的分类2.抗人球蛋白试验：包括直接（DATG）和间接（IATG）法（1）原理：抗人球蛋白试验（Coombs试验）检测自身免疫性溶血性贫血的自身抗体（IgG）。

分为检测红细胞表面有无不完全抗体的直接抗人球蛋白试验（DAGT）和检测血清中有无不完全抗体的间接抗人球蛋白试验（IAGT），以前者最常用。

直接试验应用抗人球蛋白试剂【抗IgG和（或）抗C3d】与红细胞表面的IgG分子结合，如红细胞表面存在自身抗体，出现凝集反应。

间接试验应用Rh（D）阳性O型正常人红细胞与受检血清混合孵育，如血清中存在不完全抗体，红细胞致敏，再加入抗人球蛋白血清，可出现凝集。

结果：均为阴性。

（2）临床意义：阳性见于自身免疫性溶血性贫血、冷凝集素综合征、阵发性寒冷性血红蛋白尿、药物致免疫性溶贫、输血引起溶贫和新生儿同种免疫性溶贫。

阴性不能排除免疫性溶贫。

3.冷凝集素试验（1）原理冷凝集素为IgM类完全抗体，在低温时可使自身红细胞、O型红细胞或与受检者血型相同的红细胞发生凝集。

凝集反应的高峰在0℃～4℃，当温度回升到37℃时凝集消失。

参考值：正常人血清抗红细胞抗原的lgM冷凝集素效价小于1：32（4℃）。

（2）临床意义：阳性见于冷凝集素综合征（＞1：1000），支原体肺炎、传染性单核细胞增多症、疟疾、肝硬化、淋巴瘤及多发性骨髓瘤者亦可增高，但不超过1：1000。

4.冷热溶血试验（1）原理：阵发性寒冷性血红蛋白尿症患者血清中有一种特殊的冷反应抗体（Donath-Landsteiner抗体），在20℃以下（常为0℃～4℃）时与红细胞结合，同时吸附补体，但不溶血。

溶血性贫血的实验室检测（二）引言：溶血性贫血是一种由于红细胞溶解增加引起的血液疾病。

实验室检测在诊断和评估溶血性贫血的病因时起着重要作用。

本文将介绍溶血性贫血的实验室检测方法，以便提供更准确的诊断和治疗指导。

正文：一、红细胞指标的测定1. 血红蛋白测定：通过测定全血或血清中的红细胞血红蛋白含量，评估溶血性贫血的程度。

2. 红细胞计数：通过计算单位体积内红细胞的数量，确定溶血性贫血患者红细胞的减少情况。

3. 红细胞体积分布宽度测定：反映红细胞体积的分布情况，帮助鉴别溶血性贫血与其他疾病。

二、血清标志物的测定1. 胆红素测定：通过测定血清中的胆红素水平来评估溶血性贫血的程度，可区分溶血性贫血的类型。

2. 血清乳酸脱氢酶测定：高乳酸脱氢酶水平提示溶血性贫血进展较严重，可协助评估疾病的严重程度。

3. 血清间接胆红素测定：通过测定血清中的间接胆红素水平，推测血红蛋白溶解释放的胆红素量。

三、血型与抗人球蛋白试验1. ABO血型与Rh(D)血型测定：确定患者血型，为输血提供参考依据。

2. 抗人球蛋白试验：通过检测患者血清对人类红细胞的球蛋白反应，判断溶血性贫血存在的机制。

四、外周血涂片与骨髓涂片检查1. 外周血涂片检查：观察红细胞形态，鉴别溶血性贫血与其他类型贫血的区别。

2. 骨髓涂片检查：观察骨髓中红细胞的生成情况和异常，评估溶血性贫血的病因。

五、其他辅助检查方法1. 血培养：筛查溶血性贫血与感染相关的细菌或寄生虫。

2. 自身抗体检测：检测患者血清中的自身抗体，帮助诊断自身免疫性溶血性贫血。

总结：溶血性贫血的实验室检测方法包括红细胞指标测定、血清标志物测定、血型与抗人球蛋白试验、外周血涂片与骨髓涂片检查以及其他辅助检查方法。

通过这些检测手段的组合使用，能够准确诊断溶血性贫血的类型和病因，为治疗方案的选择和疾病的监测提供依据。

其他主治系列-临床医学检验【代码：352】-临床血液学（二）溶血性贫血的实验诊断[单选题]1.关于尿含铁血黄素试验，下列叙述哪项不正确A.阴性结果可排除血管内溶血存在（江南博哥）B.亦称Rous试验C.阳性对慢性血管内溶血的诊断价值最大D.用普鲁士蓝反应显示含铁血黄素E.阵发性睡眠性血红蛋白尿常为阳性正确答案：A参考解析：尿含铁血黄素试验又称Rous试验。

当血红蛋白通过肾滤过时，部分铁离子以含铁血黄素的形式沉积于上皮细胞，并随尿液排出。

尿中含铁血黄素是不稳定的铁蛋白聚合体，其中的高铁离子与亚铁氰化钾作用，在酸性环境下产生普鲁氏蓝色的亚铁氰化铁沉淀。

阳性提示慢性血管内溶血，结果可持续2-3周。

但在血管内溶血初期，本试验可呈阴性反应。

[单选题]2.下列不属于先天性溶血性贫血的疾病是A.遗传性红细胞增多症B.丙酮酸激酶缺陷症C.镰状细胞贫血D.不稳定血红蛋白病E.阵发性寒冷性血红蛋白尿症正确答案：E参考解析：阵发性寒冷性血红蛋白尿症是免疫因素所致的获得性溶血性贫血。

[单选题]3.下列哪项检查是诊断溶血的最可靠证据A.血清间接胆红素升高B.网织红细胞升高＞5%（0.05）C.骨髓红系明显增生D.红细胞寿命缩短E.尿胆原强阳性正确答案：D参考解析：诊断溶血的最可靠依据是红细胞寿命缩短。

[单选题]4.下列属遗传性溶血性贫血的是()A.阵发性睡眠性血红蛋白尿B.微血管病性溶血性贫血C.自身免疫性溶血性贫血D.6-磷酸葡萄糖脱氢酶缺陷E.缺铁性贫血正确答案：D[单选题]5.关于溶血性贫血机制不包括()A.脾功能亢进B.血红蛋白浓度降低C.S/V比值减低D.珠蛋白合成障碍E.单核巨噬系统的参与正确答案：B[单选题]6.慢性溶贫时，评价尿中尿胆原下列不正确的是()A.粪中粪胆原增高比尿中尿胆原增高为早B.尿胆原增高同时隐血试验阳性C.受肝脏及消化功能影响D.受肠道菌群及使用抗生素影响E.尿胆原不增高正确答案：B参考解析：慢性溶贫时，肝脏可以充分处理再吸收入血的尿胆原，以至尿中尿胆原不增高。