不同流感病毒检验方法比较研究

不同流感病毒检验方法比较研究陈志雄（浙江省瑞安市疾病预防控制中心，浙江温州 325200）【摘要】目的 探究和比较不同的流感病毒检验方法的应用效果。

方法 此次研究选择了2016年11月～2017年2月流感疫情中156例急性呼吸道感染的患者作为研究对象，对其分别实施了胶体金免疫层析技术（GICA）和实时荧光RT-PCR两种方法进行相关流感病毒检测，并对比分析两种方法的检验结果。

结果 运用RT-PCR法对患者进行检测，结果是阳性的患者有76例，阳性率为48.72%；运用GICA法对患者进行检测，结果是阳性的患者有70例，阳性率为44.87%。

特异性为88.75%，阳性预测值PPV为87.14%，阴性预测值为82.56%，总符合率为75.8%，一致性KAPPA检验，P＜0.01。

通过比较分析两种方法的检测结果发现结果一致的患者数为61例，检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）。

结论 GICA检测方法操作便捷，检验快速且具有较高的准确率，是流感病毒疫情及临床检验中有价值的筛选方法。

【关键词】流感病毒；检验方法；比较研究【中图分类号】R446.6 【文献标识码】B 【文章编号】ISSN.2095-8242.2017.07.1308.02流感是因流感病毒造成的一种急性呼吸道的传染疾病，极易对儿童、老年人及免疫力低下的人群造成不可估量的危害，是目前仅有的全球性监测的疾病[1]。

对流感病毒进行诊断的方法有免疫荧光检测、血清学检测、抗原快速检测、核酸检测及病毒培养等。

在对突发的以流感病毒感染为主要疾病的公共卫生事件进行早期、快速检测时，常进行GICA检测与RT-PCR检测[2]。

此次研究对2016年2月我市发生的一次流感疫情中的156例急性呼吸道感染患者分别实施GICA检测与RT-PCR检测，比较分析两种方法在突发的公共卫生事件及临床检验中的应用价值，现报道如下。

1 资料与方法1.1 一般资料此次研究选取了2016年11月～2017年2月我市发生的一次流感疫情中的156例急性呼吸道感染患者作为研究对象，其中男性患者86例，女性患者70例。

患者的主要临床表现有发热（温度均在38℃以上），并根据患者自身病情差异伴有不同程度的咳嗽及咽喉痛痒等症状。

给予156例急性呼吸道感染患者患者GICA检测与RT-PCR检测[3]，并对检测结果进行对比分析。

1.2 实验材料RNA提取试剂、甲型流感病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法）、甲型流感病毒抗原检测试剂（胶体金法）、美国ABI 7500型实时荧光定量PCR扩增仪。

1.3 样本提取方法将压舌板抵于患者的舌根部，将两根咽拭子同时探入患者的咽部，将扁桃体隐窝处上皮细胞组织取下。

把一根咽拭子放入pH值在7.4～7.6的Hank's溶液中，而将另一根咽拭子放入胶体金快速检测的裂解液中。

1.4 实验检测方法1.4.1 GICA检测方法对装有样本的细胞裂解液进行充分搅拌，用吸管取3～4滴裂解液于检测卡的加样孔中，待15 min后观察分析检测结果。

若检测区和对照区分别出现一条红色带，则表示检测结果为阳性；若仅对照区出现一条红色带而检测区未出现红色带，则表示检测结果为阴性。

1.4.2 RT-PCR检测方法提取方法为kingfisher duo自动核酸提取仪及其配套试剂提取病毒核酸，检测试剂为上海之江的甲型流感病毒核酸检测试剂盒（荧光PCR法），PCR仪器为美国ABI 7500型实时荧光定量PCR扩增仪。

1.5 统计学方法采用SPSS 24.0软件分析，计数资料用率表示，采用x2检验，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结 果2.1 GICA法检测结果对采集的156份样品实施现场快速检测，结果显示流感甲型抗原阳性标本70份，阳性检出率为44.87%。

2.2 RT-PCR法检测结果对采集的98份样品采取RT-PCR检测，结果显示季节性流感甲型通用引物阳性标本81份，阳性检出率82.65%。

2.3 两种方法的检测结果比较分析98例患者中，经两种检测方法结果一致的患者有67例。

两种方法检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）。

详细结果见表1。

表1 两种方法检测结果的比较（例）GICA检测方法RT-PCR检测方法合计阳性阴性阳性61970阴性157186合计76801563 讨 论因为流感样病例进行鉴别诊断的依据十分简单，造成流感病毒的感染极易与普通感冒相混淆，为临床诊断、治疗与隔离带来了极大的困难，极易在学校、工厂及建筑工地等人群密集的场所形成爆发式疫情，并且引发了抗生素滥用等无数问题[4]。

目前，流感病毒感染进行实验室诊断的方法有病毒培养、RT-PCR及GICA等。

流感病毒培养纵然是检测的金标方法，可分别进行病毒分型及抗原变异分析的检测，但由于其检测周期过长，而操作十分繁琐，进而对检验人员的自身素质有着极高的要求，不适合爆发式疫情进行病原学的快速诊断。

RT-PCR检测法也有许多优点，但RT-PCR的实验室需大型专用设备仪器，且实验室分区严格而要求洁净程度高，造成了极高的检验成本。

GICA检测法是用胶体金作示踪物用于抗原抗体间反应的新型的标记技术，该技术有着快捷、简便、准确、操作误差小、稳定性好及检验成本低廉等优点，因此在免疫学检测中得到了广泛的重视及应用。

目前，已有相关报道表示用胶体金免疫（下转1310页）螺钉与椎体的接触面、椎管结构及骨折碎片显示欠佳，矢状面重组图像植入物周围出现条带状信息空白区（图3，4）。

（x2=5.926，P=0.026），两种图像优秀率比较差异有统计学意义（P＜0.05）。

在脊柱侧位采用DTS检查技术测量螺钉长轴方向的金属伪影长度平均为（5.91±1.20）mm，短轴方向伪影长度平均为（1.9±0.79）mm。

MSCT扫描重建脊柱矢状面测量螺钉长、短轴方向伪影长度分别平均为（73.72±2.30）mm、（4.30±1.45）mm，两种方法分别对比差异有统计学意义（P＜0.05）。

另经统计DTS组的吸收剂量平均值为（22.89±0.881）mGy，MSCT组DLP的吸收剂量平均值为（478.79±15.537）mGy.cm。

两者亦有明显差异。

图1 2 DTS断层清晰显示内固定螺钉与椎体的接触面，椎体骨质、椎管结构及骨折碎片显示清晰，金属伪影极少，图像质量为优秀。

图3 MSCT大量的硬化伪影掩盖置入物临近结构，螺钉与椎体的接触面、椎体骨质、椎管结构及骨折碎片显示欠佳，图4矢状面重组图像植入物长轴方向出现明显条带状信息空白区，图像质量为差。

3 讨 论DTS的成像原理是以传统体层摄影的几何原理为基础，结合现代数字探测器尤其计算机图像后处理技术而开发的一种新型成像方法，其特点：是一锥形X线束以直线轨迹移动的同时连续摄影，探测器保持静止。

采集74帧图像，然后通过工作站重建，可以回顾性重建检查床上方30 cm范围内任意高度层面的断层图像，它是借助平板探测器技术在X检查方面的一项重大突破。

根据Harris假体X线松动分类标准，若假体出现移位、假体周围出现骨水泥断裂为肯定松动；若假体周围出现连续＞2 mm透亮区为很可能松动；若假体周围出现不连续透亮区为可能松动，本研究显示DTS受体内金属伪影影响较小，短轴方向伪影长度为（1.9±0.79）mm，能清晰显示内固定螺钉与椎体的接触面结构，骨质、椎管结构及骨折碎片多维清晰显示有40例，占81.6%，金属伪影极少，虽本研究49例患者中未发现早期固定物松动现象，但对提供诊断早期螺钉松动还是非常有价值。

随着椎弓根钉棒系统的广泛应用，术后内固定的松动、断裂等并发症也逐渐增多，定期随访评价非常重要，而多次的X线复查必然增加患者的累计辐射剂量，剂量率越大，生物效应俞显著[6]，所以在放射检查中科学合理的选择检查方式非常必要。

目前判断内固定复位及愈合情况主要靠X线各项检查，但金属物的存在使在CT检查中出现明显金属伪影，由于伪影的干扰，降低了CT的显示能力。

通过以上比较，DTS图像质量在内固定术后检查中较CT图像质量更优秀，更低的辐射剂量，更能满足临床诊断的需要，是值得推广的一种随访手段。

参考文献[1] 燕树林,王鸣鹏,余建明,等.全国医用设备使用人员上岗证考试指南.[M]北京-军事医学科学出版社,2009.5(6):42-43[2] 徐晶,夏秀杰,田宝方,等.数字断层融合技术在骨骼影像诊断中的临床应用价值.[J]中国医疗设备,2014.29(7):166-168.[3] 谢伟,马俊芳,王文斌,等.应用数字化断层融合技术诊断足骨骨折的价值[J].放射学实践,2015.30(4):381-384[4] 张志田,闻建民,陈瑶,等.断层融合技术在泌尿系结石诊断中的应用价值.[J]温州医学院学报,2012,3:286-287[5] 蒋宁一,戎明海,等.实用医疗辐射防护.[M]北京-人民卫生出版社,2014.1(4):10本文编辑：李豆层析法检测流感病毒具有较强的特异性、良好的稳定性与便捷的操作方法，且灵敏度能达到临床的应用要求，可以为临床的诊断、治疗及隔离提供有效的参考依据。

此次研究对156例急性呼吸道感染患者分别实施了GICA检测及RT-PCR检测，检测结果显示，GICA法的阳性检出率略低于RT-PCR法，但两种方法的检测结果差异无统计学意义（P＞0.05）。

综上所述，GICA检测法为流感病毒疫情及临床诊断中有价值的筛选方法。

参考文献[1] 刘兴安,吕金艳.内蒙古大兴安岭地区人群接种甲型H1N1流感疫苗21～93天的免疫效果分析[J].当代医学,2010,16(27):159-160.[2] 桑凤梅,刘兴国,晨辉.蒿芩清胆汤对湿热型流感病毒性肺炎患者的疗效及免疫指标与 NF-κB 水平分析[J].中华医院感染学杂志,2014,24(24):6050-6051.[3] 蔡翁义,蔡颖,魏锐.几种甲型H1N1流感病毒SYBRGreenI荧光RT—PCR检测方法的验证[J].口岸卫生控制,2013,18(6):28-33.[4] 『十五』重大科技专项『新城疫禽流感病毒快速检测技术研究』取得重大突破[J].监督与选择,2003,(1):30-30.[5] KanraG,MarchisioP,Feiterna-sperlingC等.流感病毒佐剂疫苗与裂解疫苗在儿童中的免疫原性和耐受性的比较研究[J].国外医学:预防.诊断.治疗用生物制品分册,2005,28(4):184-185.本文编辑：吴卫（上接1308页）。