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甲型流感病毒感染病毒检测的方法有哪些？甲型流感是一种由甲型流感病毒引起的呼吸道传染病。
与其他呼吸道感染相比，甲型流感的病毒传播能力较强，而且症状也比较严重。
在预防、治疗和后期恢复中，正确的检测方法是非常重要的。
本文将介绍甲型流感病毒感染的检测方法以及预防、治疗和后期恢复的注意事项。
甲型流感病毒感染的检测方法1.核酸检测（RT-PCR）：核酸检测是目前甲型流感病毒感染的主要检测方法。
这种方法通过采集患者的呼吸道标本，如咽拭子、鼻咽拭子或痰液，提取其中的病毒核酸，然后利用反转录聚合酶链反应（RT-PCR）技术进行检测。
核酸检测的优点是准确度高，能够检测出病毒的存在，但需要在实验室条件下进行，耗时较长。
2.快速抗原检测（Rapid Antigen Test）：快速抗原检测是一种简便、迅速的甲型流感病毒感染检测方法。
该方法通过检测标本中的特定病毒抗原，可以在数分钟内快速筛查出感染情况。
然而，与核酸检测相比，快速抗原检测的准确性略低，有时会出现假阴性结果。
因此，如果快速抗原检测结果为阴性，但临床症状明显，仍然需要进行核酸检测以排除感染。
3.血清学检测（Serologic Test）：血清学检测通过检测患者血液中的特定抗体来判断是否感染甲型流感病毒。
这种检测方法主要用于疫情调查和流行病学研究，对于早期感染的诊断准确性较低。
以上三种检测方法各有优劣，医生会根据病情和实际需要选择合适的方法进行检测。
预防甲型流感病毒感染的注意事项预防甲型流感病毒感染是非常重要的，可以采取以下措施：1.接种疫苗：甲型流感病毒感染的最有效预防方法是接种相关的流感疫苗。
每年秋季接种疫苗可以有效提高免疫力，减少感染的风险。
接种疫苗还可以降低患者的病情严重程度，减少并发症的发生。
2.保持良好的个人卫生：勤洗手、使用洗手液消毒、避免接触口鼻眼等黏膜部位，是预防病毒传播的简单有效措施。
此外，尽量避免与感染者密切接触，特别是在流感高发季节。
3.注意健康状况：保持良好的生活习惯，均衡饮食，增强体质，提高免疫力，可以降低感染甲型流感病毒的风险。
甲型流感的分子诊断技术与实验室检测方法甲型流感是一种由甲型流感病毒引起的急性呼吸道传染病，其传播迅速且易感染大量人群。
为了准确诊断和及时干预，科学家们开发出了多种分子诊断技术和实验室检测方法。
本文将介绍几种常用的技术与方法，以提高对甲型流感的检测效率和诊断准确性。
一、聚合酶链式反应（PCR）技术PCR技术是一种灵敏度高、特异性强的分子诊断技术，已被广泛应用于甲型流感的检测中。
该技术通过放大甲型流感病毒基因组中特定的DNA片段，从而使其能够被检测到。
PCR技术可在短时间内，从患者的样本中检测到甲型流感病毒的存在，并确定其亚型。
此外，PCR 技术还能够对病毒的基因组进行序列分析，从而确定其突变情况和传播途径。
二、实时荧光定量PCR（qPCR）技术实时荧光定量PCR技术是PCR技术的一种改进版本，其主要优势在于可实现对病毒数量的精确测量和即时定量。
该技术结合了PCR和荧光探针技术，使得可以在PCR反应过程中实时监测目标序列的扩增情况。
实时荧光定量PCR技术能够快速检测出甲型流感病毒的数量，并对病毒载量进行准确测量，帮助医生判断病情的严重程度，指导治疗决策。
三、免疫荧光技术免疫荧光技术是一种通过特定的抗体和荧光探针对病毒进行检测的技术。
在甲型流感的实验室检测中，科学家们通常采用免疫荧光技术检测病毒的抗原。
该技术的原理是将含有甲型流感病毒的标本与特异性荧光标记的抗体结合，然后通过荧光显微镜观察是否有荧光信号出现。
免疫荧光技术能够准确、快速地检测出甲型流感病毒的存在，并且可以对其亚型进行鉴定。
四、核酸测序技术核酸测序技术是一种可以解析病毒基因组序列的方法，可以帮助科学家们了解甲型流感病毒的基因组结构和功能。
通过高通量测序技术，科学家们可以在较短的时间内获取大量的病毒基因组序列信息。
这些信息有助于了解甲型流感病毒的变异情况，筛选药物治疗靶点，并指导疫苗的设计与开发。
五、免疫学检测方法除了分子诊断技术，免疫学检测方法也发挥着重要作用。
流感病毒的核酸检测技术操作规范（一）流感病毒Conventional one step RT-PCR 检测应用核酸检测技术为疑似流感病毒感染病例诊断提供依据，为流感病毒的型别和亚型的鉴定提供技术方法。
按照规定方法对标本和病毒进行处理和检测，保证检测结果的快速性和可靠性，同时确保样本不被污染和污染环境。
1.生物安全要求实验室操作应当遵守生物安全实验室的有关生物安全的规定。
季节性流感病毒生物安全二级，疑似高致病禽流感病例标本需在BSL-2级实验室操作，采取BSL-3级防护；核酸提取及加RNA模板可在BSL-2级实验室生物安全柜内操作；PCR反应体系配制在体系配制区；PCR产物检测在电泳区操作。
2.主要试剂（所列厂家仅用作举例，实验室可自行选择）注：*引物序列详见表1.3.设备（1）BSL-2生物安全柜；（2）可调转速最大至140rmp的离心机；（3）涡旋混合器；（4）10p L，1pL，2pL，10^L量程移液器；（5）PCR 仪；（6）电泳槽和电泳仪；（7）凝胶成像系统。
4.质量控制（1）实验检测所需核酸提取试剂和一步法RT-PCR检测试剂不同批号之间需进行灵敏度的检测。
同一试剂不同批次的灵敏度的检测至少半年一次。
（2）实验检测除待检标本外还需设置阳性对照及阴性对照，阳性对照核酸事先应稀释分装，经Real-time PCR检测Ct值在30以内；阴性对照为DEPC处理水Real-time PCR检测Ct值为0.5.实验步骤（1）实验注意事项由于PCR检测灵敏度高，因此必须采取一些预防污染的措施，以避免假阳性结果的出现，建议采取如下方法：a）核酸提取、反应液配制及检测反应进行应在独立的房间中进行。
b）不同的房间配制相应的专用耗材和设备，不可交叉使用。
c）配制反应液时，应穿着干净的实验服，带无粉手套进行操作。
d）实验操作期间，如怀疑有污染，请更换手套。
e）试剂及反应管的盖子应尽可能盖上。
（2）设备准备操作台的表面、枪头和离心机应保持洁净，可用5%漂白剂或其它清洁剂，如可以去除DNA酶的试剂擦拭台面，以减少核酸污染的风险。
甲型（H1N1）流感病毒实验室检测技术方案(试行)广州健仑生物科技有限公司整理本方案旨在为全国流感监测网络实验室提供甲型H1N1流感病毒实验室检测技术方案，不用作商业活动或赢利目的。
一、标本的采集种类和要求1、推荐采集的呼吸道标本种类疾病发病后应尽快采集如下标本：鼻拭子、咽拭子、鼻腔吸取物、鼻腔冲洗液。
气管插管的病人也应收集气管吸取物。
标本应置于无菌病毒采样液，并立即用冰块或冰排保存或置于4 ℃（冰箱），并马上送至实验室。
（临床样品采集人员及实验室检测人员的感染控制指导请见相关文件。
）采样同时填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本采样单。
（附表1）2、拭子的选择标本应使用头部为合成纤维的拭子（例如，聚酯纤维），用铝或塑料做柄。
不推荐棉拭子和木柄。
标本采集管应包含3毫升病毒采样液（含有蛋白质稳定剂，阻止细菌和真菌生长的抗生素，缓冲液）3、临床标本储存要求保存在4℃（不能超过4天）或者-70℃或-70℃以下。
有条件的实验室均应保存在-70℃或-70℃以下。
不应保存在-20℃。
4、标本的分装处理标本送至实验室后，立即进行处理，避免反复冻融。
将原始标本分为三份，一份用于核酸检测，一份用于病毒分离，一份保存待复核。
5、标本的运输疑似人感染甲型H1N1感染病例列为 A类，用UN2814包装运输。
填写疑似人感染甲型H1N1感染病例标本送检单（附表2）。
二、核酸检测基于PCR原理的核酸检测方法是一种快速有效的诊断方法，在突发传染病应急工作中发挥了巨大作用。
1、基于real-time RT-PCR的方法检测新的甲型H1N1流感病毒（引物和探针序列为美国CDC设计）：4月29日WHO网站上公布了美国CDC设计的针对此次甲型H1N1流感病毒的real-time RT-PCR引物和探针，此实验用于检测疑似甲型H1N1流感病例的呼吸道样本, 因此，用此real-time RT-PCR的方法，建议首先筛选甲型流感病毒并排除季节性流感病毒和H5N1禽流感病毒。
流感诊断标准流感，又称为流行性感冒，是由流感病毒引起的急性呼吸道传染病。
流感病毒主要分为甲型和乙型两种，其中甲型流感病毒又分为H1N1、H3N2等亚型。
流感的传播速度快，易引起大范围的流行，给人们的生活和工作带来了不小的困扰。
因此，及时准确地诊断流感对于控制疫情的蔓延至关重要。
本文将介绍流感的诊断标准，希望能对大家有所帮助。
首先，流感的临床表现是诊断的重要依据之一。
流感患者常表现为突然发热、头痛、肌肉疼痛、乏力、咽痛、干咳等症状。
与普通感冒相比，流感症状较为剧烈，且病程较短。
在流感高发季节，出现上述症状的患者，应高度怀疑患有流感。
其次，实验室检查是流感诊断的重要手段之一。
目前，常用的实验室检查方法包括病毒培养、免疫荧光抗体检测、快速抗原检测和核酸检测等。
这些检查方法可以帮助医生明确患者是否感染了流感病毒，对于流感的早期诊断和治疗具有重要意义。
此外，流感的流行病学调查也是诊断的重要依据之一。
当某一地区出现流感疫情时，医生可以通过流行病学调查，了解患者的病史、接触史和病毒的传播途径，从而及时采取控制措施，遏制疫情的蔓延。
最后，临床医生的临床经验和专业知识也是流感诊断的重要依据之一。
临床医生应结合患者的临床表现、实验室检查结果和流行病学调查，进行综合分析，做出准确的诊断。
同时，医生还应根据患者的病情，选择合适的治疗方案，提高治疗效果，减少并发症的发生。
综上所述，流感的诊断标准主要包括临床表现、实验室检查、流行病学调查和临床医生的临床经验和专业知识。
只有全面准确地掌握了这些诊断标准，我们才能及时发现和诊断流感，采取有效的控制措施，遏制疫情的蔓延，保障人民的身体健康。
希望本文对大家有所帮助，谢谢阅读。
流感病毒RNA荧光RT-PCR检测技术实时荧光定量PCR是在常规PCR基础上发展起来的定量PCR技术，通过在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号累积，实时监测整个PCR进程，最后根据ct值和标准曲线，对未知模版进行定量分析。
常用的实时荧光定量PCR又分为非特异性荧光标记的SYBR Green 法和特异性荧光标记的TaqMan法和分子信标法。
一、实时荧光定量PCR原理：1、SYBR Green法：SYBR Green是一种双链DNA结合染料，游离状态下不发光，非特意地掺入到双链DNA中后发出荧光信号，其强度与双链DNA的数量相关，随着扩增产物量的增加，检测到的荧光信号增强。
2、TaqMan法：在扩增反应液中，加入一特异性探针，该探针5‘端和3’端分别标记一个荧光报告基团和一个荧光淬灭基团，探针完整时，两基团位置靠近，5‘端报告基团的荧光能量被3’端淬灭基团吸收，此时检测不到荧光信号，在扩增过程中，探针与模板结合形成Taq 酶的5‘→3’外切活性底物，当Taq酶沿模板向前延伸到探针结合处时，发生链的置换，Taq酶的5’→3’外切活切将探针5‘端连接的报告基团从探针上切割下来，5’端报告基团的荧光能量脱离3’端荧光淬灭基团的吸收，可检测到荧光信号，每经过一个PCR循环，荧光信号也和扩增产物一样，有一个同步增长的过程。
3、分子信标法：探针设计成茎环结构的发夹状，环部核苷酸序列与扩增产物序列互补，两端核苷酸序列互补形成茎部，且一端标记有报告基团，另一端标记有淬灭基团，探针未与模板结合时，报告基团和淬灭基团空间位置靠近，报告基团的荧光能量被淬灭基团吸收，此时，检测不到荧光信号，与模板结合后，探针的构象由发夹状改变为链状，报告基团和淬灭基团分离，可检测到荧光信号。
核酸检测是一种鉴定流感病毒基因组的有力方法，即使基因组含量很低或死病毒也可以检测到。
本章将介绍检测流感病毒的聚合酶链式反应（PCR）。
流感病毒的基因组是负链RNA，在进行PCR扩增前必须合成与病毒RNA 互补的DNA，即为cDNA。
甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品技术要求随着流感病毒的不断变异和扩散，流感病毒的监测和检测工作越来越受到重视。
甲型乙型流感抗原检测胶体金法作为一种快速、灵敏的检测方法，被广泛应用于临床诊断和疫情监测中。
然而，由于其技术要求较高，质量参差不齐的产品可能会影响检测结果的准确性和可靠性。
对甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品的技术要求有着非常严格的规定和标准。
具体来说，甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品的技术要求主要包括以下几个方面：1、抗原提取和制备技术要求：乙型流感病毒的抗原提取是甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品制备的第一步，提取的抗原质量和纯度直接影响检测结果。
抗原提取和制备技术要求相当严格，需要严格控制实验条件和操作流程，确保提取的抗原具有足够的纯度和活性。
2、胶体金试剂的制备和保存技术要求：胶体金试剂是甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品的核心材料之一，其制备和保存技术要求十分严格。
在制备过程中，需要控制好试剂的浓度和粒径分布，以保证试剂的稳定性和敏感性；在保存过程中，需要避免光照和高温，防止试剂发生凝聚和变质。
3、检测试剂盒的组装和包装技术要求：甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品在市场上以检测试剂盒的形式销售，而检测试剂盒的组装和包装技术也是关键的一环。
检测试剂盒的组装要求操作规范，避免污染和交叉感染；包装要求牢固耐用，保护试剂免受外界环境的影响。
4、操作流程和结果解读的标准化要求：甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品对操作流程和结果解读有着严格的标准化要求。
操作流程要求简单清晰，便于操作者掌握和操作；结果解读要求规范明确，避免主管者对结果的误解和错误判断。
甲型乙型流感抗原检测胶体金法产品的技术要求非常严格，涉及到抗原提取和制备、胶体金试剂的制备和保存、检测试剂盒的组装和包装以及操作流程和结果解读等多个方面。
只有严格遵守这些技术要求，生产出质量稳定、准确可靠的产品，才能更好地为临床诊断和疫情监测提供支持。
流感病毒的快速检测方法一、RT-PCR快速诊断方法（一）生物安全要求（二）病毒核酸提取（三）RT-PCR（四）PCR 产物纯化（五）流感病毒RT-PCR检测引物二、免疫荧光方法检测流感病毒（一）原理（二）标本处理（三）间接免疫荧光法（四）结果判断三、实时荧光定量PCR（Real-Time PCR）快速诊断检测（一）基本原理（二）实验试剂（三）实验步骤四、快速诊断试剂盒流感的快速检测方法，与传统的病毒分离鉴定相比具有快速、简便的特点。
因此常用于流感暴发时早期病原学检测用。
流感的快速诊断包括直接和间接免疫荧光法、ELISA、RT-PCR、Real-Time PCR快速诊断速方法、流感快速诊断试剂盒等。
这里介绍RT-PCR、Real-Time PCR、免疫荧光快速诊断速诊断方法和几种流感快速诊断试剂盒优缺点。
无论那种快速诊断都无法代替传统的病毒分离鉴定方法。
一、RT-PCR快速诊断方法核酸检测是一种鉴定流感病毒基因组的有力方法，即使基因组含量很低或死病毒也可以检测到。
本章将介绍检测流感病毒的聚合酶链式反应（PCR）。
流感病毒的基因组是负链RNA，在进行PCR扩增前必须合成与病毒RNA 互补的DNA，即为cDNA。
逆转录酶（RT）就是用于合成cDNA的多聚酶，因此，扩增流感病毒基因组的过程称为RT-PCR。
RT-PCR需要一对型别特异引物，四种脱氧核苷酸（dNTPs），RNA模板，逆转录酶及Taq DNA 多聚酶；首先由逆转录酶将病毒的RNA逆转录合成cDNA，然后再进行聚合酶链反应经25～30个循环，使DNA产物达到倍增的效果。
（一）生物安全要求生物安全级别与个人防护要求：生物安全二级实验室，防护要求与二级实验室的要求相同。
并应遵守相应的生物安全规定。
进行高致病性禽H5 RT-PCR快速检测时可以在生物安全二级实验室里进行，核酸提取在生物安全三级实验室的生物安全柜里完成。
（二）病毒核酸提取1. 实验材料及仪器(1) QIAGEN公司的Rneasy Mini Kit（Catalog# 74104）(2) β-巯基乙醇（β-mercaptoethanol）(3) 70% 乙醇(4) 无菌1.5ml 离心管(5) 10μl、20μl、200μl、1000μl加样器和枪头(6) 可调14K微型离心机(7) 旋转混合器2. 操作步骤(1) 取1支无菌、无RNA酶的1.5ml Eppendorf管，加入500μl RLT。
(2) 取采样液（鼻拭子、咽拭子、胸水等）或病毒培养物（鸡胚尿囊液或细胞培养液）100μl，加入上述Eppendorf管中。
(3) 加5μl β-巯基乙醇，充分混匀。
(4) 加600μl 70%乙醇，于旋转混合器混匀。
(5) 从试剂盒中取出带滤膜的离心柱，并标上标本号。
(6) 将第4步的混合液体分两次（每次600μl）吸入于滤柱中，12000rpm离心15秒，弃收集管中的离心液。
(7) 滤柱仍放回收集管上，将第4步的混合液全部吸入滤柱中，12000rpm离心15秒，弃收集管中液体。
(8) 于滤柱中加入700μl RW1，12000rpm 离心15秒。
(9) 从试剂盒中取出一支新的2ml收集管，将离心后的滤柱转到新的收集管上，于柱子中加入500μl RPE，12000rpm 离心15秒弃收集管中液体。
(10) 滤柱放回收集管上，于滤柱中加入500μl RPE，13000～14000rpm 离心2分钟。
(11) 从试剂盒中取出一支1.5ml Eppendorf管，将滤柱转到新的1.5ml管上，于滤柱中加入30～50μl 无RNA酶的水，室温静置1～3分钟。
(12) 12000rpm 离心1分钟，弃滤柱。
收集的离心液即为提取病毒的RNA，可以直接用于逆转录实验，或在-20℃以下保存，-30℃可保存3～4个月。
3. 注意事项(1) 试剂盒中的RPE液用前需加44ml无水乙醇，使终体积达到55ml。
(2) 所有用过的枪头、收集管放入2%次氯酸钠消毒缸中过夜。
（三）R T-PCR1. 一步法RT-PCR(1) 实验材料1) QIAGEN One Step RT-PCR Kit Cat No 2102122) RNase inhibitor 40u/μl（Promega）3) 上游引物200ng/μl4) 下游引物200ng/μl5) 模板RNA（Templet RNA）(2) 实验步骤1) PCR反应配置（在清洁区缓冲间，加RNA模板应在核酸室）无RNA酶水（Rnase Free Water）28.75μl5×Buffer 10μl10mM dNTP 2μlEnzyme Mix 2μlRnase inhibitor 0.25μl上游引物1μl下游引物1μlRNA 模板5μl总量：50μl2) 将PCR 反应管放入PCR扩增仪3) RT-PCR 反应条件：此循环的反应条件仅共参考，如果引物更换，相应的反应条件需要做适当调整。
→60℃ 1 min→42℃10 min→50℃30 min→95℃15 min→94℃30 sec→52℃30 sec→72℃ 1 min→返回第5部，循环34次→72℃10 min→4℃保存4) PCR产物检测琼脂糖凝胶配置：用1×TBE 将琼脂糖配成1.2%～1.5%溶液，加热使之完全溶解。
冷却到50～60℃时加入溴化乙锭（Ethidium Bromide EB，10ug/μl），终浓度为0.5μg/ml。
PCR产物检测：将凝胶放入电泳槽,加入1×TBE Buffer ，使它淹没过胶面。
每份标本取4μl PCR产物，与1μl 5×Loading Buffer 充分混匀后全加入凝胶孔中。
于同一凝胶的第一孔加入5μl分子量标准样品。
加完样后，盖上电泳槽盖子，接通电源，稳压100v，电泳时间约30～40min。
结果分析：用UV～254暗箱式紫外透射仪观察电泳结果，在透射波长254nm 下观察结果效果较好。
或者用凝胶成像系统观察电泳结果。
5) 注意事项：含EB的琼脂糖经处理后放入科研垃圾袋内统一处理。
含有EB的凝胶处理方法：→加1倍体积的0.5mol/L KMnO4,小心混匀。
→加入1倍体积的2.5 mol/L HCl,小心混匀。
于室温放置数小时。
→加入1倍体积的2.5 mol/L NaOH,小心混匀后即可丢弃。
2. 二步法RT-PCR(1) 实验材料1) 逆转录酶：AMV Reverse Transcriptase，Catalog# M5101 Paromeg2) 5×RT Buffer3) 2.5mM dNTP4) Rnase inhibitor 40u/μl（Promega）5) 上游引物200ng/μl6) 下游引物200ng/μl7) 无RNA酶的水（Rnase Free Water）8) Ex-Taq 酶5u/μl DRR 001A 250u （Takara）9) 10×PCR Buffer(2) 实验步骤1) 逆转录反应（在清洁区缓冲间，加RNA模板在核酸提取室）无RNA酶的水 6.8μl5×RT Buffer 4μl2.5mM dNTP 2μl上游引物1μlRnase inhibitor 0.2μl逆转录酶1μlRNA 模板5μl总量：20μl将上述反应液混匀，42℃水浴作用1小时。
然后94℃ 3min ，放置冰上（下步PCR反应或-20℃待用）2) PCR反应配置（在清洁区缓冲间，加cDNA模板应在PCR扩增室）无RNA酶的水35.5μl10×PCR Buffer 5μl2.5mM dNTP 2μl上游引物1μl下游引物1μlEx-Taq 酶0.5μlcDNA 模板5μl总量：50μl3) 将PCR 反应管放入PCR扩增仪4) PCR 反应条件：此循环的反应条件仅共参考，如果引物更换，相应的反应条件需要做适当调整。
→94℃ 3 min→94℃40 sec→52℃40 sec→72℃ 2 min→返回第2部，循环30 次→72℃7 min→4℃保存PCR 产物检测：同一步法（四）P CR 产物纯化1. 实验材料QIAquick Gel Extraction Kit Cat No 287042. 操作步骤(1) PCR 产物进行琼脂糖凝胶电泳；(2) 用干净的手术刀切割目的DNA片段，将切下的DNA胶放入1.5ml离心管（切胶在暗箱或紫外透射仪下操作）；(3) 加3倍胶体积的Buffer QG（即100mg DNA胶加300μl Buffer QG）；(4) 水浴50℃孵育10min，直到DNA胶完全溶解（每隔2～3min 用旋转混合器混匀）；(5) 加一个胶体积的异丙醇（100mg DNA胶加100μl异丙醇）；(6) 从试剂盒中取出带滤膜的离心柱收集管，并标上标本号；(7) 将上述DNA液吸入带滤膜的离心柱，13000rpm离心1min，弃收集管中废液，再将带滤膜的离心柱放回收集管；(8) 于带滤膜的离心柱中加0.5ml Buffer QG，13000rpm离心1min，弃收集管中废液；(9) 带滤膜的离心柱中加入0.75ml Buffer PE，放置2～5min，13000rpm离心1min，弃收集管中废液，再将带滤膜的离心柱放回收集管上，13000rpm离心1min；(10) 将带滤膜的离心柱转移到一新的1.5ml离心管上；(11) 于带滤膜的离心柱中加20～30μl TE（或Rnase Free Water），室温3～5min，12000rpm离心1min，弃小柱，收集的离心液即为纯化的PCR产物，可直接用于测序。
（五）流感病毒RT-PCR检测引物A型检测引物：5’ CCG,AGA,TCG,CAC,AGA,GAC,TTG,AAG,AT5’ GGC,AAG,TGC,ACC,AGC,AGA,ATA,ACT B型检测引物5’ GGG,ACA,TGA,ACA,ACA,AAG,ATG5’ TGT,CAG,CTA,TTA,TGG,AGC,TGH1亚型鉴定引物5’ ACT,ACT,GGA,CTC,TGC,TGG,AAC5’ CAA,TGA,AAC,CGG,CAA,TGG,CTC,C H3亚型鉴定引物5’ ATC,AGG,GAG,AGT,CAC,AGT,CTC5’ ATG,CTT,CCA,TTT,GGA,GTG,ATG,C H5亚型鉴定引物5’ GAG,TGA,AGC,CTC,TCA,TTT,TG5’ GTA,CTT,CTT,GGT,TGG,TAT,TAT,TGT,ACG,TCC H5亚型鉴定引物5’ GGG,TGA,GCT,CAT,GTA,CA5’ YTG,AGT,CCC,CTT,TCT,TGAH5亚型鉴定引物5’ GCC,ATT,CCA,CAA,ACA,CCC5’ CTC,CCC,TGC,TCA,TTG,CTA,TGN1鉴定引物5’ AAG,G GG,TTT,TCA,TAC,AGG,TAT,GGT5’ TCT,GTC,CAT,CCA,TTA,GGA,TCCN2鉴定引物5’ GGA,AAT,CGT,TCA,TAT,TAG,CCC,ATT,G5’ AGC,ACA,CAT,AAC,TGG,AAA,CAA,TGC二、免疫荧光方法检测流感病毒（一）原理流感病毒主要感染呼吸道上皮细胞，因此在病人呼吸道标本的脱落细胞中含有流感病毒抗原，通过直接检查上皮细胞内病毒特异性抗原即可诊断。
