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保健食品中槲皮素山柰素异鼠李素的高效液相色谱测定Determineation of quercetin、keampferol、isorhamnetin by high - performance liquid chromatogramphy in healthfood1．适应范围本方法规定了以银杏叶或银杏叶提取物为主要原料生产的保健食品中槲皮素、山柰素、异鼠李素含量的HPLC测定方法。
本方法适用于以银杏叶或银杏叶提取物为主要原料生产的保健食品中槲皮素、山柰素、异鼠李素含量的HPLC测定方法。
本方法的检测限分别为：槲皮素0.002μg、山柰素0.003μg、异鼠李素0.005μg。
本方法的最佳线性范围为0.1－1.0μg。
2. 方法原理试样经提取、水解等前处理后，使用等度洗脱反相高效液相色谱进行分离，紫外检测器（UV）检测，根据色谱峰的保留时间定性，外标法定量，测定试样中甙元槲皮素、山柰素、异鼠李素含量。
3. 试剂实验用水为去离子水。
3.1 甲醇：色谱纯。
3.2 高效液相色谱流动相：甲醇＋水(50＋50)（以磷酸调节pH＝2.5）。
3.3 槲皮素、山柰素、异鼠李素标准品：含量大于98％（HPLC）。
3.4 槲皮素、山柰素、异鼠李素标准溶液的配制分别准确称取100mg槲皮素、山柰素、异鼠李素标准品于100mL容量瓶中，加入甲醇溶解后，定容至刻度，此溶液浓度为1.0mg/mL，将该液稀释成10 ~ 100mg/L的标准系列溶液.4. 仪器设备4.1 高效液相色谱仪：附紫外检测器。
4.2 水浴锅。
4.3 超声波清洗器。
4.4 离心机。
5. 分析步骤5.1 试样处理：取试样适量，用20mL甲醇于超声波浴中提取30分钟，过滤后滤液加入20mL 1.5mol/L盐酸于水浴上回流水解3小时，冷却后用甲醇定容至50mL，该样液过0.5μm 膜，滤液进HPLC分析。
5.2 测定：5.2.1 液相色谱参考条件5.2.1.1 色谱柱：反相C18柱，5µm, 100Å, 3.9mm ID × 150mm 5.2.1.2 紫外检测器：检测波长360nm5.2.1.3 流速：1.0mL/min5.2.1.4 柱温：室温5.3.1 色谱分析取10μL标准溶液及试样提取液进高效液相色谱分析，以保留时间定性，用峰面积以外标法定量计算试样中槲皮素、山柰素、异鼠李素的含量。
HPLC法测定地肤子中芦丁和槲皮素的含量肖作奇;文晓柯;欧阳波;黄懿;田霞;潘涛【摘要】目的建立测定地肤子药材中芦丁和槲皮素含量的方法.方法采用高效液相色谱法结合二极管阵列检测器,选用Agilent TC-C18色谱柱,流动相为乙腈-0.2％磷酸(梯度洗脱),检测地肤子中芦丁和槲皮素的含量.结果芦丁和槲皮素的线性范围分别为0.0017～0.0532 mg/mL和0.0011 ～0.0340 mg/mL,平均加样回收率分别为98.5％、97.88％(RSD=1.57％、1.87％).芦丁和槲皮素的平均含量分别为0.0592、0.0215mg/g.结论该方法简单易行,稳定性和重复性好,可用于地肤子中芦丁和槲皮素的含量测定.【期刊名称】《中国医药导报》【年(卷),期】2016(013)021【总页数】4页(P146-148,152)【关键词】地肤子;高效液相色谱;含量测定;芦丁;槲皮素【作者】肖作奇;文晓柯;欧阳波;黄懿;田霞;潘涛【作者单位】湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008;湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008;湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008;湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008;湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008;湖南省妇幼保健院药学部,湖南长沙410008【正文语种】中文【中图分类】R914.1地肤子具有清热利湿、祛风止痒等功效，用于小便涩痛、皮肤瘙痒等症［1］，还具有抗炎、抗病原微生物、抗虫等作用［2-7］，多用于湿疹等皮肤病的治疗。
化学成分研究结果表明，其主要有效成分为皂苷和黄酮［8-11］。
现阶段，对地肤子的质量控制主要是地肤子皂苷Ⅰc的含量测定［1］，但对黄酮含量的测定方法无报道。
本研究采用HPLC对不同产地的地肤子中的芦丁和槲皮素的含量进行测定，为进一步控制地肤子质量提供参考。
1.1 仪器电子分析天平（Mett1er To1edo，d=0.01 mg），超声清洗器（上海科导），高效液相色谱仪（岛津，LC-20A型），色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，Agi1ent TC-C18）。
RP-HPLC法测定新疆不同产地药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量阿合买提江·吐尔逊;赵文惠;孙莲;王岩;张煊;古丽江·马合苏提汗【摘要】目的考察新疆不同产地、不同采摘时间药桑叶中芦丁、异槲皮苷的含量变化.方法采用反相高效液相色谱法(RP-HPLC),以大连依利特 Hypersil ODS(150 mm×4.6 mm,5 μm)为色谱柱,进样量20 μl,流动相为乙腈(A)-水(B)-0.2%磷酸溶液(pH=4.8)(C),梯度洗脱[0 min,A-C(18:82);4 min,A-C(21:79);10 min,A-C(8:92)],流速1.0 ml/min,检测波长为358 nm,柱温为25℃.结果不同产地、不同采摘时间的药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量均有一定的差异,喀什地区、5～6月份二者含量较高.结论药桑叶中芦丁和异槲皮苷的含量与产地和采摘季节等有关,尤其以季节的影响大.【期刊名称】《新疆医科大学学报》【年(卷),期】2010(033)010【总页数】4页(P1194-1197)【关键词】药桑叶;芦丁;异槲皮苷;反相高相液相色谱法【作者】阿合买提江·吐尔逊;赵文惠;孙莲;王岩;张煊;古丽江·马合苏提汗【作者单位】新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析测试中心,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院化学教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院分析/药分教研室,新疆,乌鲁木齐,830011;新疆医科大学药学院药学2006-2班,新疆,乌鲁木齐,830011【正文语种】中文【中图分类】R917桑叶为桑科(Moraceae)桑属(Morus L.)植物的叶，中国大部分地区均有栽培生产。
桑叶入药首见于《神农本草经》，列为中品。
HPLC法同时测定蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量ZHANG Kuan;ZENG Maogui;LUO Lan;LI Ying;YE Hua;ZHANG Wenqing【摘要】目的:采用HPLC法同时测定蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量,为该药材的深入研究及资源开发提供参考依据.方法:采用HPLC-DAD法测定芦丁、橙皮苷及槲皮素含量,检测波长268 nm,乙腈(A)-0.5％乙酸水(B)溶液为流动相进行梯度洗脱.结果:芦丁:y=0.128x+0.279(r=0.9970),线性范围为3.848～48.10μg/mL;橙皮苷:y=0.101x+0.401(r=0.9965),线性范围为4.144～82.88μg/mL;槲皮素:y=0.097x+0.007(r=0.9990),线性范围为1.02～6.12μg/mL.结论:该法精密度、准确性良好,方法简便快捷,可用于蓝花参中芦丁、橙皮苷及槲皮素的含量测定.【期刊名称】《中国民族民间医药》【年(卷),期】2019(028)012【总页数】4页(P42-45)【关键词】蓝花参;HPLC;芦丁;橙皮苷;槲皮素【作者】ZHANG Kuan;ZENG Maogui;LUO Lan;LI Ying;YE Hua;ZHANG Wenqing【作者单位】【正文语种】中文【中图分类】R284.1蓝花参[Wahlenbergia marginata (Thunb.) A. DC.]为桔梗科蓝花参属的植物，以根或全草入药，具有益气健脾，祛痰止咳等功效，临床上常用于治疗感冒、气管炎、痢疾、百日咳[1]等疾病。
药理学研究显示：蓝花参具有止咳化痰、消炎镇痛、保肝护胃及其改善胰岛素抵抗的药理作用[2-8]。
目前已知蓝花参中化学成分包括甾体类、多炔类、挥发油、苯丙素类、黄酮类及萜类化合物[4,9-16]。
其中周向文[4]从蓝花参醇提取物中分离出单体化合物，后经过波谱学分析并鉴定单体化合物8个，其中五个化合物为黄酮类，包括farobin B、异牡荆素、芦丁、3′-甲氧基-5,7-二羟基黄酮-6-C-波伊文糖-4′-O-葡糖糖苷和异牡荆素2′′-O-鼠李糖苷。
高效液相色谱法测定地锦喷雾剂中芦丁、槲皮素和山柰酚的含量巩伟;赵庆华;李兴东;王莉;张琨;李鹏【摘要】目的:建立高效液相色谱法(HPLC)测定地锦喷雾剂中芦丁、槲皮素和山柰酚的含量.方法:色谱柱为Inertsil ODS-3色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为甲醇-0.3％磷酸溶液(50:50),体积流量为1.0 ml/min,检测波长为360 nm,柱温为30℃;自动进样器进样,进样量为10μl.结果:芦丁质量浓度在1.953～39.060μg/ml范围内线性关系良好(R2=1,n=6),平均回收率为98.53％(RSD=1.12％,n=9);槲皮素质量浓度在1.976 ～39.526 μg/ml范围内线性关系良好(R2=1,n=6),平均回收率为98.66％(RSD=1.09％,n=9);山柰酚质量浓度在1.822 ～36.442 μg/ml范围内线性关系良好(R2=1,n=6),平均回收率为98.91％(RSD=1.53％,n=9).结论:本法操作简便,结果准确稳定,专属性强,可用于地锦啧雾剂的质量控制.【期刊名称】《中国医院用药评价与分析》【年(卷),期】2014(014)001【总页数】3页(P58-60)【关键词】高效液相色谱法;地锦喷雾剂;芦丁;槲皮素;山柰酚【作者】巩伟;赵庆华;李兴东;王莉;张琨;李鹏【作者单位】济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022;济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022;济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022;济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022;济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022;济南军区联勤部药品仪器检验所,济南250022【正文语种】中文【中图分类】R965地锦喷雾剂为济南军区医疗机构制剂［济制字(2011)F10675］，具有清湿热、解毒、止痛、止痒之功效，常用于治疗皮肤、黏膜、腔道炎症、疱疹等，临床效果较好。
HPLC测定不同时期款冬花中芦丁、槲皮素的含量冯亭亭;罗飞;王晓远;张永鹏;李永民【摘要】目的：建立HPLC法同时测定不同时期河北蔚县野生款冬花中芦丁和槲皮素含量方法。
方法：Krosmosil C18柱（4.6mm×200mm，5μm）；流动相：A（乙腈）∶B（0.1%磷酸水）（80∶20）；检测波长：254nm。
结果：款冬花花蕾芦丁与槲皮素的含量在0.31%、0.12%左右，已开放的款冬花芦丁与槲皮素的含量在0.18%、0.65%左右。
【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2015(000)008【总页数】1页(P3-3)【关键词】款冬花;HPLC;芦丁;槲皮素;超临界流体萃取【作者】冯亭亭;罗飞;王晓远;张永鹏;李永民【作者单位】河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口 075000;河北北方学院张家口075000【正文语种】中文【中图分类】R927.2本课题通过款冬花花蕾、开放花液相图谱的比较为款冬花未开放花苞入药提供一个有效依据。
1 材料与方法1.1 材料：野生款冬花（蔚县），芦丁对照品、槲皮素对照品购自中国药品生物制品检定所；乙腈为色谱纯，甲醇、冰醋酸等试剂均为分析纯，双蒸水（自制）。
1.2 实验仪器：日本岛津2010A高效液相色谱仪，Sartorius分析天平。
Spe-ed SFE超临界流体萃取仪（美国Applied2Separations公司）。
2 方法与结果2.1 溶液配制2.1.1 对照品溶液的配制：分别精密称取芦丁、槲皮素对照品适量，加70%甲醇溶解，制成浓度分别为0.2312mg/mL、0.1872mg/mL的对照品贮备液，备用。
精密吸取芦丁对照品贮备液2mL、槲皮素对照品贮备液2mL，加70%甲醇稀释至刻度，摇匀，制得混合对照品溶液。
2.1.2 供试液的配制：款冬花60℃减压真空干燥4h，粉碎过40目筛得款冬花粉末备用。
高效液相色谱法测定贯叶连翘提取物中4种成分的含量【摘要】目的建立高效液相色谱法（HPLC）测定贯叶连翘提取物中金丝桃素、金丝桃苷、芦丁和槲皮素含量的方法。
方法色谱柱为C18柱( 250 mm×4.6 mm，5 μm)；测定金丝桃苷、芦丁和槲皮素时，流动相为甲醇-乙睛-0.3%磷酸溶液，梯度洗脱，检测波长360 nm；测定金丝桃素时，流动相为甲醇-0.02 mol/L磷酸二氢钾缓冲液，检测波长580 nm。
结果金丝桃苷，槲皮素，芦丁、金丝桃素线性范围分别为1.97～20.3 μg・ml-1 (r=0.999 2)，2.47～24.7 μg・ml-1(r=0.999 1)，2.25～22.5 μg・ml-1(r=0.999 1) ， 0. 08～0.4 μg・ml-1(r=0.999 5)，方法回收率均不低于98%。
结论该方法简便、准确、重复性好，可用作贯叶连翘提取物中此4种成分的含量测定。
【关键词】贯叶连翘提取物金丝桃素金丝桃苷高效液相色谱法Abstract：ObjectiveTo develop a rapid high-performance liquid chromatography method for determination of hypericin， hyperoside，rutin and quercetin in Hypericum perforatum L. extracts.MethodsHPLC method was employed on C18 column (250 mm×4.6 mm， 5 μm). The hyperoside， rutin and quercetin were detected at 360 nm， eluted with gradient three mobile phase (methanol-acetonitrile-0.3% phosophoric acid). The Hypericin was detected at 580 nm and the mobile phase consisted of methanol and 0.02 mol·L-1 KH2PO4.Results The HPLC method showed a good linear relationship in the range of 1.97～20.3 μg/ml(r=0.999 2) for hyperoside， 2.47～24.7 μg/ml (r=0.999 1) for quercetin， 2.25～22.5 μg・ml-1 (r=0.999 1) for rutin and 0.08～0.4μg/ml(r=0.999 5) for hyperin. Recoveries for the four components were all above 98%.CondusionThis HPLC method is simple， accurate and repeatable and can be used for determination of the four components in Hypericum perforatum L. exatracts.Key words：Hypericum perforatum L. extracts; Hyperin; Hyperoside; HPLC贯叶连翘Hypericum performatum L.为藤黄科金丝桃属多年生草本植物，其味苦、辛，性平，可清心明目、调经活血、止血生肌、解毒消炎［1］，国外在抗抑郁症方面也有广泛应用［2］。
HPLC 同时测定桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量邸学，谷丽艳，王海波，许亮，包琳琳( 辽宁中医药大学，辽宁大连11660)［摘要］目的: 建立桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素含量的方法，对不同来源的桑叶药材质量进行评价。
方法: HPLC 同时测定Therm o OD S色谱柱( 4. 6 mm × 250 mm，5 μm)，柱温35 ℃，流动相为磷酸乙腈溶液( 0. 1% ，A)和磷酸( 0. 16% )-三乙胺( 0. 18% )水溶液( B)梯度洗脱，流速1. 0 mL·min －1，检测波长360 nm。
结果: 桑叶中绿原酸、芦丁、异槲皮苷、紫云英苷、槲皮素5 种活性成分在60 min 内分离效果理想，线性范围分别为0. 32 ～13. 73 μg ( r = 0. 999 6) ，0.05 ～3. 13 μg ( r = 0. 999 8) ，0.03 ～9. 50 μg( r = 0. 999 4) ，0.03 ～5. 60 μg ( r = 0. 999 5) ，0.001 ～0. 05 μg ( r = 0. 999 7) ; 帄均加样回收率在99. 61%～106. 09%，ＲSD≤2. 8%。
结论: 该方法操作简单，结果准确，专属性强，可为桑叶药材的质量控制标准提高提供参考。
［关键词］桑叶; 绿原酸; 芦丁; 异槲皮苷; 紫云英苷; 槲皮素［中图分类号］Ｒ284. 1［文献标识码］ A［文章编号］ 1005-9903( 2014) 15-0092-04［d oi］ 10〃 13422 / j〃 cnki〃 s yf j x〃 2014150092Simultaneous Determination of Chlorogenic Acid，Ｒutin，Isoquercetin，Astragalin and Quercetin in Mori Folium by HPLCDI X ue，GU Li-yan，WANG H ai-bo，XU Liang，BAO Lin-lin( School of Pharmaceutical Sciences，Liaoning University of Traditional Chinese Medicine，Dalian 116600)［A b s t rac t］Ob j ective: To establish HP LC method f or simultaneous determination of chlor ogenic acid，rutin，isoquercetin and astragalin quercetin in M ori Folium〃Method: A HP LC equipped w ith a T herm o OD S［收稿日期］ 20130715( 007)［第一作者］邸学，硕士，实验师，从事中药品种鉴定评价研究，E-mail:di x_email@ 163〃c o m檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶［5］廖玉麟〃中同动物志棘皮动物门海参纲［M］〃北京:［参考文献］［1］南京中医药大学〃中药大辞典〃下册［M］〃上海:上海科学技术出版社，2006: 2724.［2］Sév erine V D， Pasca l G， Patrick F〃 Qualitati v e and quantitati v e sap o nin c o ntents in f i v e sea cucumbers f r o mthe Indian Ocean［J］〃M arine Dru g s，2010，8( 1): 173. ［3］张淑瑜，汤海峰，刘世君，等〃海参中海参烷型皂苷的研究进展［J］〃药学实践杂志，2008，26( 5): 321.［4］ Xia o qian Hu，Y umin g W an g，J in gf en g Wan g，e t al〃D ietar y sap o nins of sea cucumber alle v iate o r o ticacid- induced f att y li v er in rats v ia PPAＲαand SＲEBP-1c si g nalin g［J］〃 Lipid s in H ealth and Disease，2010，9 ( 1): 25.科学出版社，1997: 108.［6］刁小琴，田晓菊，关海宁，等〃以齐墩果酸为标准品测定大豆皂甙的研究［J］〃中国油脂，2009( 11): 53.［7］张小鸿，吴杨峥，徐先祥〃不同显色剂对牛膝总皂苷含量测定的影响［J］〃中国实验方剂学杂志，2013，19( 21): 113.［8］董帄〃革皮氏海参皂苷化合物的分离鉴定、结构修饰及活性研究［D］〃青岛:中国海洋大学，2008.［9］董帄，薛长虹，盛文静，等〃海参中总皂苷含量测定方法的研究［J］〃中国海洋药物杂志，2008，27( 1): 28.［责任编辑顾雪竹］( 4.6mm×250mm，5μm) column and UV detection w as used〃 T he column temperature w as at35℃and the f l ow rate1.0m L·min－1 〃 T he mobile phase w as consisited of phosphoric acid in acetonitrile ( 0.1%，A) and phosphoric acid ( 0.16% ) and triethylamine ( 0.18% ) in w ater ( B ) w ith gradient elution〃T he detection w avelength w as set at360nm〃Ｒes u l t: T he good saperation of f ive f l avo noids w as achieved w ithin60min〃 L inear calibration curves w ere obtained w ith0.32-13.73μg ( r=0.9996) ，0.05-3.13μg ( r=0.9998) ，0.03-9.50μg ( r = 0. 999 4 ) ，0. 03-5. 60 μg ( r = 0. 999 5 ) ，0. 001-0. 05 μg ( r = 0. 999 7 ) ; the average recovery was 99.61%-106.09%，ＲSD≤2.8%〃Con cl u si on: T he proposed method is simple，accurate，repeatable，and can be used f or qualit y control as w ell as a pow er f ul t ool t o evaluate the processing of M ori Folium〃［K ey w ords］Mori Folium; chlorogenic acid; r utin; isoquercetin; astragalin; quercetin桑叶始载于《神农本草经》，为桑科植物桑Morus a l ba L〃的干燥叶。
