亚甲蓝分光光度法测阴离子合成洗涤剂方法确认报告

阴离子合成洗涤剂亚甲蓝分光光度法方法验证摘要：通过能力验证，确认实验室达到标准方法要求，实验室具备有测试水质阴离子合成洗涤剂的分析能力。

亚甲蓝染料与阴离子合成洗涤剂在水溶液中能够形成蓝色化合物，产生的蓝色化合物易被有机溶剂萃取，水溶液中仍有未反应的亚甲蓝，有机相中蓝色的强度可测得阴离子合成洗涤剂的含量。

关键词：生活饮用水；阴离子合成洗涤剂；亚甲蓝1.方法验收情况1.1试样分析及标准曲线的绘制量取50.0mL水样，置于125ml分液漏斗中，另取7个分液漏斗,分别加入十二院基苯磺酸钠标准使用溶液0.00ml、0.50ml、1.00ml、2.00ml、3.00ml、4.00ml、5.00ml,加水至至50mL。

酚酞溶液作指示剂,用氢氧化钠溶液和硫酸溶液调解每一个分液漏斗PH＜8.2，即红色刚刚褪去，再加入5mLHCl3及10mL亚甲蓝溶液，剧烈振摇30s，静置分层，如果水相中的蓝色消失，应该减少水样的取样量，重新测定。

将分液漏斗下层的HCl3放入第二套分液漏斗中，加入25m1洗涤液，剧烈振摇30s，静置分层，将HCl3缓慢放入25mL比色管中。

再各加5mL HCl3，重复前面步骤，合并HCl3于比色管中，同样再操作一次，最后用HCl3定容。

在650nm波长处，用3cm比色皿，以HCl3作参比，测定吸光度。

表1 标准溶液系列1.2检出限的验证每次取50ml加标量为0.25mg/L的空白水样，重复测定7次后计算平均值、标准偏差、相对标准偏差、检出限等各项参数。

检出限按试（1）计算（1）式中：MDL—方法检出限；n—样品的平行测定次数；T—自由度为n-1，置信度为99%时t分布；S—n次平行测定的标准偏差其中当自由度为n-1，置信度为99%时的t可参考表2表21.3精密度的验证每次取5ml加标量为2.00mg/L和4.00mg/L的空白水样，重复测定六次重复测试，计算平均值、标准偏差。

表3 方法检出限、测定下限测试数据表1.4准确度的验证每次取5ml加标量为2.00mg/L、4.00mg/L和6.00mg/L的空白水样，重复测定六次重复测试，计算平均值、加标回收率。

FHZDZDXS0101 地下水阴离子合成洗涤剂的测定亚甲蓝分光光度法F-HZ-DZ-DXS-0101地下水—阴离子合成洗涤剂的测定—亚甲蓝分光光度法1 范围本方法适用于地下水中阴离子合成洗涤剂的测定。

最低检测量为5μg，若取100mL水样进行测定，最低检测浓度为0.05mg/L。

2 原理阴离子洗涤剂的种类较多，常用的洗涤剂是烷基苯磺酸钠，当其在水中浓度过大时，易使水产生泡沫，影响感官性状，同时由于烷基苯磺酸盐不易被氧化和生物分解，往往随着生活污水或工业废水进入地表水、地下水中，是水质污染评价的一项指标。

阴离子洗涤剂（烷基苯磺酸钠以及烷基磺酸钠）和亚甲蓝作用生成蓝色化合物，易溶于有机溶剂中，当用氯仿萃取后，此蓝色化合物进入氯仿层中，而未作用的亚甲蓝则仍留在水相中，根据氯仿层蓝色的强度，以标准比较法计算水中阴离子洗涤剂的浓度。

能与亚甲蓝反应的物质对本法均有干扰。

酚、有机硫酸盐、磺酸盐及大量氯化物、硝酸盐、硫氰化物等均可使结果偏高。

试验证明水中常见的Cl-允许含量为600 mg/L、NO3-为40mg/L。

二者同时存在时，允许含量为Cl- 300mg/L，NO3- 20mg/L。

3 试剂除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，二次去离子水或等效纯水。

3.1 三氯甲烷（氯仿，CHCl3）。

3.2 亚甲蓝溶液：称取30mg亚甲蓝（C6H18ClN3S·3H2O）溶于500mL纯水中，加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），加50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），溶解后用纯水稀释至1000mL。

3.3 洗涤液：取6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL）及50g磷酸二氢钠溶于纯水中，并稀释至1000mL。

3.4 十二烷基苯磺酸钠标准溶液3.4.1 十二烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取0.5000g十二烷基苯磺酸钠（C12H25·C6H4·SO3Na）溶于纯水中，移入500mL容量瓶中并稀释至刻度，摇匀。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法GB7494-37方法确认1.目的通过分光光度法测定水中阴离子表面活性剂的浓度，分析方法检出限、回收率及精密度，判断本实验室的检测方法是否合格。

2.适用范围本标准适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS）。

亦即阴离子表面活性物质。

3.职责3.1检测人员负责按操作规程操作，确保测量过程正常进行，消除各种可能影响试验结果的意外因素，掌握检出限、方法回收率与精密度的计算方法。

3.2复核人员负责检查原始记录、检出限、方法回收率及精密度的计算方法。

3.3技术负责人负责审核检测结果及检出限、方法回收率、精密度分析结果。

4.分析方法4.1测量方法简述4.1.1空白试验:按同试样完全相同的处理步骤进行空白实验，仅用100ml蒸馏水代替试样。

4.1.2测定4.1.2.1将所取试份移至分液漏斗，以酚酞为指示剂，逐滴加入1mol/L氢氧化钠溶液至水溶液呈桃红色，再滴加0.5mol/L硫酸到桃红色刚好消失。

4.1.2.2加入25ml亚甲蓝溶液，摇匀后再移入10ml氯仿，激烈振摇30s，注意放气。

过分的摇动会发生乳化，加入少量异丙醇（小于10ml）可消除乳化现象。

加相同体积的异丙醇至所有标准中，再慢慢旋转分液漏斗，使滞留在内壁上的氯仿液珠降落，静置分层。

4.1.2.3将氯仿层放入预先盛有50ml洗涤液的第二个分液漏斗，用数滴氯仿淋洗第一个分液漏斗的放液管，重复萃取三次，每次用10ml氯仿。

合并所有氯仿至第二个分液漏斗中，激烈振摇30s，静置分层。

将氯仿层通过玻璃棉或脱脂棉，放入50ml容量瓶中。

再用氯仿萃取洗涤液两次（每次用5ml），此氯仿层也并入容量瓶中，加氯仿到标线。

4.1.2.4每一批样品要做一次空白试验及一种校准溶液的完全萃取。

4.1.2.5每次测定前，震荡容量瓶内的氯仿萃取液，并以此液洗三次比色皿，然后将比色皿充满。

在652nm处，以氯仿清洗比色皿。

关于水中阴离子合成洗涤剂（LAS）的检测和研究摘要：水的质量对于保障人民身心健康、提高生活水平，有着基础性的重要作用。

本文针对日常水质检测环节中，合成洗涤剂的主要活性成分阴离子表面活性剂的测定，作为论述载体；讨论分析了常见的几种测定方法（例如亚甲蓝分光光度法、高效液相色谱法等等），以及各自的思路、流程、控制要点、以及存在的优点和缺点。

关键词：表面活性剂测定方法比较阴离子合成洗涤剂（或称洗涤剂）是社会生产生活中，得到广泛应用的一种精细化工产品，和我们的生产生活密不可分；其中主要成份阴离子表面活性剂（简称LAS），随着社会经济的发展和科技的进步，应用领域更是几乎达到无所不及的程度；但是这种迅猛发展、广泛应用的趋势下，随之而来的环境问题，也愈加凸现出来。

一、关于阴离子合成洗涤剂（LAS）的现状与危害我国目前普遍使用的表面活性剂为直链型烷基苯磺酸钠（LAS）物质。

长久以来，这种表面活性剂的大量应用导致污染水域愈来愈大，生态环境呈显著恶化、沿海生物资源进一步衰竭、生物多样性发生锐减，由此引发的环境灾害屡见不鲜。

虽然经过努力，国内当前已经淘汰了大部份生物降解性能较差的表面活性剂，而广泛采用可生物降解的表面活性剂，但即使是这些浓度较低的表面活性剂也会有大量泡沫产生，这不但破坏了自然界水体景观的美感，且广大水生动植物的生存还是受到了该物质所具有的生物毒性的威胁。

它于水中的有氧生物降解使得大量氧气白白消耗，水体中溶氧量明显降低、水质依旧在恶化。

众多调查和实验数据表明，现行的表面活性剂污染水环境，危害水生生物，影响海洋经济，危及人类健康。

因此，除了要从根本上对表面活性剂的排放进行控制和处理外，对相关水体中表面活性剂的监测也显得尤为重要。

二、关于表面活性剂的检测技术1.滴定法1.1埃普顿两相滴定法长久以来应用最为广泛的是经典的Epton（（埃普顿）两相滴定技术。

目前该方法仍然是被ASTM，DIN，BSI等机构认可的标准方法。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法本方法规定了测定水溶液中的阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法.阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分,使用最广泛的阴离子表面活性剂是直链烷基苯磺酸钠(LAS)。

本方法采用 LAS 作为标准物，其烷基碳链在 C10~C13之间，平均碳数为 12，平均分子量为 344.4。

1范围本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质 (MBAS)，亦即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物是 LAS、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠，但可能存在一些正的和负的干扰(见第 8 条)。

当采用 10mm 光程的比色皿，试份体积为 100mL 时，本方法的最低检出浓度为 0.05mg/L LAS，检测上限为 2.0mg/L LAS。

2原理阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质 (MBAS)。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长 652nm 处测量氯仿层的吸光度。

3试剂在测定过程中，仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或具有同等纯度的水。

3.1氢氧化钠(NaOH)：1mol/L。

3.2硫酸(H2SO4)：0.5mol/L。

3.3氯仿(CHCl3)。

3.4直链烷基苯磺酸钠贮备溶液称取 0.100g 标准物 LAS(平均分子量 344.4)，准确至 0.001g，溶于 50mL 水中，转移到 100mL 容量瓶中，稀释至标线并混匀。

每毫升含 1.00mgLAS。

保存于 4℃冰箱中。

如需要，每周配制一次。

3.5直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取 10.00mL 直链烷基苯磺酸钠贮备溶液(3.4)，用水稀释至 1000mL，每毫升含 10.0μgLAS。

当天配制。

3.6亚甲蓝溶液先称取 50g 一水磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)溶于 300mL 水中，转移到1000mL 容量瓶内，缓慢加入 6.8mL 浓硫酸(H2SO4，ñ=1.84g/mL)，摇匀。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法GB7494-87方法验证报告一、目的对实验室选用的GB7494-87方法进行确认，以证实实验室能够正确运用这些方法，并能证实该方法适用于预期的用途，在误差的允许范围之内，可在本实验室内运行。

二、技术指标本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水的低浓度亚甲蓝活性物质及阴离子表面活性物质。

当采用10nm的比色皿，试料体积为100ml时，本方法的最低检出限为0.05mg/LLAS,检测上限为2.0mg/LLAS。

三、检测设施与环境条件实验室环境条件要求：四、检测过程受控文件vis-722N型可见分光光度计作业指导书vis-722N型可见分光光度计期间核查作业指导书GB7494-87水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法分析原始记录表GB7494-87，水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法样品前处理原始记录表标准储备溶液配制记录表地表水采样原始记录表五、主要测量设备、配套设备、标准物质六、检测人员七、质量控制措施八、项目验证1、标准曲线在652nm波长下，用1cm比色皿进行比色，以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的LAS含量（μg）为横坐标，绘制标准曲线。

计算得出线性方程为：y=0.0046x+0.0041相关系数r=0.9993 。

具体数据见表1。

表1按照本标准方法测得LAS的线性方程式为：y=0.0046x+0.0041，相关系数r=0.9993。

符合方法要求。

2、方法检出限根据国际纯粹与应用化学联合会对检出限的要求，按照样品的的测定步骤，分3批以空白吸收液为样品进行21次平行测定，计算21次平行测定的标准偏差，结果如表2。

表2经验证，实验室根据标准方法测得的检出限为0.02mg/L，符合方法要求。

3、精密度用0.100mg/L、0.700mg/L、1.50mg/L三个浓度梯度的LAS标准溶液分别进行6次重复性测试，计算相对标准偏差，如表3所示：表3经验证，实验室使用本方法测定样品中LAS的相对标准偏差为1.5%-5.1%，精密度良好，符合要求。

实验一氨氮的测定报告完成人：xxx同组实验者：xxx一.实验目的1.掌握絮凝沉淀法和蒸馏法进行水样预处理的操作和技能。

2.掌握用纳氏试剂比色法（传统法）测定氨氮的原理和技术。

二.实验原理碘化汞和碘化钾的碱性溶液与氨反应，生成淡红棕色胶态化合物，其颜色深浅与氨氮含量成正比，通常可在波长410-425nm范围内测其吸光度，计算其含量。

本法最低检出浓度为0..25mg/L，测定上限为2mg/L。

水样最适当的预处理后，本法可适当用于地面水、地下水、工业废水和生活污水中氨氮的测定。

三、实验仪器和试剂(一) 实验仪器1、氨氮蒸馏装置2、分光光度计3、PH计4、50mL比色管(二)实验试剂1、无氨水：每升蒸馏水中加0.1mL硫酸，在全玻璃蒸馏器中重蒸馏，弃去50mL初馏液，接取其余馏出液于具塞磨口的玻璃瓶中，密塞保存。

2、1mol/LHCL：量取43mL浓盐酸，用水稀释至500mL.3、1mol/L NaOH：将20g氢氧化钠溶于水并稀释至500mL4、轻质MgO：将MgO在500o C下加热，以除去碳酸盐5、0.05%溴百里酚蓝指示剂：称取0.05%溴百里酚蓝置玛瑙研钵内，研细，用新煮沸放冷的水稀释至100ml6、2%硼酸吸收液：称取20g硼酸溶于无氨水，稀释至1L7、10%ZnSO4：称取10gZnSO4溶于无氨水，稀释至100mL８、２５％NaOH：称取２５g氢氧化钠溶于无氨水，稀释至100mL，储存于聚乙烯瓶中。

9. 纳氏试剂:可选择下列方法之一制备:①称取碘化钾5g,溶于10mL无氨水中,边搅拌边分次少量加入二氯化汞(HgCl2)粉末2.5g,直至出现微量朱红色沉淀不易溶解时,充分搅拌混合,并改为滴加二氯化汞饱和溶液,当出现少量朱红色沉不再溶解时,停止滴加。

将上述溶液徐徐注入氢氧化钾溶液中（15g氢氧化钾溶于50mL无氨水中，冷却至是室温），以无氨水稀释至100mLl，混匀。

于暗处静置过夜，将上清液移入聚乙烯瓶中，密塞保存。

FHZDZDXS0101 地下水阴离子合成洗涤剂的测定亚甲蓝分光光度法F-HZ-DZ-DXS-0101地下水—阴离子合成洗涤剂的测定—亚甲蓝分光光度法1 范围本方法适用于地下水中阴离子合成洗涤剂的测定。

最低检测量为5μg，若取100mL水样进行测定，最低检测浓度为0.05mg/L。

2 原理阴离子洗涤剂的种类较多，常用的洗涤剂是烷基苯磺酸钠，当其在水中浓度过大时，易使水产生泡沫，影响感官性状，同时由于烷基苯磺酸盐不易被氧化和生物分解，往往随着生活污水或工业废水进入地表水、地下水中，是水质污染评价的一项指标。

阴离子洗涤剂（烷基苯磺酸钠以及烷基磺酸钠）和亚甲蓝作用生成蓝色化合物，易溶于有机溶剂中，当用氯仿萃取后，此蓝色化合物进入氯仿层中，而未作用的亚甲蓝则仍留在水相中，根据氯仿层蓝色的强度，以标准比较法计算水中阴离子洗涤剂的浓度。

能与亚甲蓝反应的物质对本法均有干扰。

酚、有机硫酸盐、磺酸盐及大量氯化物、硝酸盐、硫氰化物等均可使结果偏高。

试验证明水中常见的Cl-允许含量为600 mg/L、NO3-为40mg/L。

二者同时存在时，允许含量为Cl- 300mg/L，NO3- 20mg/L。

3 试剂除非另有说明，本法所用试剂均为分析纯，水为蒸馏水，二次去离子水或等效纯水。

3.1 三氯甲烷（氯仿，CHCl3）。

3.2 亚甲蓝溶液：称取30mg亚甲蓝（C6H18ClN3S·3H2O）溶于500mL纯水中，加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），加50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），溶解后用纯水稀释至1000mL。

3.3 洗涤液：取6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL）及50g磷酸二氢钠溶于纯水中，并稀释至1000mL。

3.4 十二烷基苯磺酸钠标准溶液3.4.1 十二烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取0.5000g十二烷基苯磺酸钠（C12H25·C6H4·SO3Na）溶于纯水中，移入500mL容量瓶中并稀释至刻度，摇匀。

水质阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法本方法规定了测定水溶液中的阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法.阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分,使用最广泛的阴离子表面活性剂是直链烷基苯磺酸钠(LAS)。

本方法采用 LAS 作为标准物，其烷基碳链在 C10~C13之间，平均碳数为 12，平均分子量为 344.4。

1范围本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质 (MBAS)，亦即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物是 LAS、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠，但可能存在一些正的和负的干扰(见第 8 条)。

当采用 10mm 光程的比色皿，试份体积为 100mL 时，本方法的最低检出浓度为 0.05mg/L LAS，检测上限为 2.0mg/L LAS。

2原理阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质 (MBAS)。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长 652nm 处测量氯仿层的吸光度。

3试剂在测定过程中，仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或具有同等纯度的水。

3.1氢氧化钠(NaOH)：1mol/L。

3.2硫酸(H2SO4)：0.5mol/L。

3.3氯仿(CHCl3)。

3.4直链烷基苯磺酸钠贮备溶液称取 0.100g 标准物 LAS(平均分子量 344.4)，准确至 0.001g，溶于 50mL 水中，转移到 100mL 容量瓶中，稀释至标线并混匀。

每毫升含 1.00mgLAS。

保存于 4℃冰箱中。

如需要，每周配制一次。

3.5直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取 10.00mL 直链烷基苯磺酸钠贮备溶液(3.4)，用水稀释至 1000mL，每毫升含 10.0μgLAS。

当天配制。

3.6亚甲蓝溶液先称取 50g 一水磷酸二氢钠(NaH2PO4·H2O)溶于 300mL 水中，转移到1000mL 容量瓶内，缓慢加入 6.8mL 浓硫酸(H2SO4，ñ=1.84g/mL)，摇匀。

doi：12・3969/j・issn・1022-7396.2222.24.224-论著-亚甲蓝法测定生活饮用水中阴离子合成洗涤剂及干扰因素分析吴艳玲王占辉刁丹红封邁杨慧卉李依霖【摘要】目的建立一种生活饮用水中阴离子合成洗涤剂的快速检测方法,实现其快速准确测定。

方法取20ml待测水样于25ml比色管中,加入4ml亚甲蓝溶液，混匀后加入4ml三氯甲烷。

连续振摇120次(45s)，分液漏斗中静置分层,分出有机相于650u m波长,以三氯甲烷为参比测量吸光度。

结果本方法测定生活饮用水中阴离子合成洗涤剂在0.05-8.00m/L范围內线性关系良好,相关系数a=0.5998:检测限0.08m/L o样品低、中、高3个浓度水平的加标实验，回收率为75.0%-146.1%,精密度为0.53%~2.34%(n=6)。

对水样pH值缓冲范围为7.5-18.5,水样中游离氯含量超过0.25m/L时对本方法具有明显的负干扰。

结论本方法操作简单快速，测定准确，抗干扰能力强。

水中游离氯的含量对本方法及国标亚甲蓝方法均具有负干扰，在实际水样检测过程中应予以关注。

【关键词】阴离子合成洗涤剂；饮用水；干扰因素；游离氯【中图分类号】R73.8【文献标识码】A【文章编号】1002-7386(2020)24-3786-04The anionic synthetic deteryenh in drinking water detecteC by snbmetUylepe blue method and R s RauencRg factovWU Yanling,WANG Zhanhut,DI A O D anhong,P at Chengie Centea S ot Diseass Control ani Preventiop,Hebet,Chengae067200,China【Abstract】Objective To estaPPsh a rapid detecduon methob to detect the auionic$丫21660detergeut iu drinkingwater,iu order to detect it fsaUy and accurately.Methodt The20ml of the water sample to bo tested was pWced X a25mlstoupered ccloBmetho tudo,6x24ml of methyleue blue soludon and4ml of chloroform were anded after mixing.The mixturewas sPakeu condnuoxsW Un72dmos(45s),aud smuding layering iu tap funuel.The chloroform phase was seyarated at a waveleugth of650nm,aud the adsoPauce was measured with chloroform as a refereuco.Resnltt The auionic87/216X0detergeut X drinding water detected by the methob had a goob PueaBtp iu the raugo of0.05to8.00m/L,the correWdoncoefficieut(r)was0.9998,and the lowest detecdon conceutraUon was0.01m/L.The samples were spibed at Ww,mediumaud high levels.The coefficieut of recevep ranged from97.0%to146.1%,6x2the precision rauged from0.53%to7.34%(n=6).The method had a pH buffer raugo of7.5to18.5for water samples.Wheu the free chloBuo context iu the watersample exceeded0.25m/L,which han obvious uepative interfereuce with the methob.Conclusion The methob is simple,fast,6ccumte,which has sBong aud-interfereuce adiPty.The free chloBuo context iu water has a certaiu deprec of uepadve interfereuce with the methob aud with the uaUonai standaP methyleuo blue methob,which sPoxlb bo paid much atteudon toXuring actual water sample detection.【Key wordst auionic87/106X0detergeuts；drinding water;interfereuce factors；free chloBuo阴离子合成洗涤剂是指在水中电离后起表面活性作用的部分带负电荷的一类表面活性剂,通常其广泛分布在各类水环境当中，属于生物难降解类物质7-6o 阴离子合成洗涤剂对人体具有轻微的毒性,在人体内不易降解，人体将其摄入后可导致血液总胆固醇增高、体重增加，也容易造成红细胞、血红蛋白和白细胞水平和数量变化，是《生活饮用水卫生标准》（GB5749-项目来源：承德市科学技术研究与发展计划项目（编号：262662A008/作者单位：057600河北省承德市疾病预防控制中心（吴艳玲、王占辉、刁丹红、杨慧卉、李依霖/;河北省承德市市场监督管理局3封邁）通讯作者:王占辉,257600河北省承德市疾病预防控制中心；E-mail：zUandukO14@ 2600）中的常规检测指标之一A5〕o对阴离子合成洗涤剂的检测方法主要采用的是国标（GB/T5772.6-2006）中亚甲蓝分光光度法和二氮杂菲萃取分光光度法,其中亚甲蓝分光光度法作为第一法被各类水质检测机构广泛应用,也是当前研究的热点方法。

生活饮用水阴离子表面活性剂的测定GB/T 5750.4-2006亚甲蓝分光光度法方法验证报告1、目的通过对实验人员、设备、物料、方法、环境的能力确认，验证实验室均已达到各种要求，具备开展此实验的能力。

2、方法简介亚甲蓝染料在水溶液中与阴离子合成洗涤剂形成易被有机溶剂萃取的蓝色化合物。

未反应的亚甲蓝则应仍留在水溶液中。

根据有机相蓝色强度，测定阴离子合成洗涤剂的含量。

3、仪器设备及药品验证情况3.1使用仪器设备：·SP-722分光光度计·分液漏斗250ml·移液管5ml/10ml·电子天平3.2设备验证情况设备验收合格。

4、环境条件验证情况4.1本方法对环境无特殊要求。

4.2目前对环境的设施和监控情况天平室环境指标：温度:22℃;湿度48%。

4.3环境验证条件符合要要求5、人员能力验证5.1该项目人员配备情况有二名以上符合条件的实验人员。

5.2人员培训及考核情况通过培训，考核合格，相关记录见人员技术档案。

6、标准物质及试剂验证情况6.1方法所需标准（物质）溶液及试剂情况6.1表6.2配备情况6.2表7、方法验证情况7.1方法要求7.11检出限：方法检出限为最低检出质量5μg，最低检出限浓度为0.100mg/L。

精密度：相对标准偏差分别为1.6％，0.6％，0.8％，0.7％。

准确度：测定有证标准物质阴离子含量为5.48±5％mg/L。

7.2测定本方法的检出限、精密度、准确度7.21检出限7.21空白测定结果表得出检测限为0.009mg/L,小于0.100mg/L,符合国家标准要求。

7.22精密度7.22精密度测定测得实验室内相对标准偏差0.5%。

7.23准确度有证标准溶液测定。

质控样编号为BW0533-********，浓度为5.48±5﹪mg/L。

7.22有证标物的测定结果表测得标准样品浓度为5.59mg/L，在质控样5.48±5﹪mg/L的范围内，合格8、结论仪器设备验证合格、环境条件验证合格、人员能力验证合格、试剂验证合格、方法验证合格，即设备、环境、人员、物料均符合实验方法要求，实验室具备开展此项目的条件。

阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法GB7497-37阴离子表面活性剂是普通合成洗涤剂的主要活性成分，使用最广泛的阴离子表面活性剂是直链烷基苯磺酸钠（LAS）。

本方法采用LAS 作为标准物，其烷基碳链在C10～C13之间，平均碳数为12，平均分子量为344.4。

1 适用范围本标准规定了测定水溶液中的阴离子表面活性剂的亚甲蓝分光光度法。

本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS），亦即阴离子表面活性物质。

在实验条件下，主要被测物质是LAS、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠，但可能存在一些正的和负的干扰。

当采用10mm光程的比色皿，试份体积为100ml时，本方法的最低检出浓度为0.05mg/LLAS,检测上限为2.0mg/LLAS。

2 原理阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS）。

该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量氯仿层的吸光度。

3 试剂3.1 氢氧化钠（NaOH）：1mol/L3.2 硫酸（H2SO4）：0.5mol/L3.3 氯仿（CHCl3）3.4 直链烷基苯磺酸钠贮备溶液秤取0.100g标准物质LAS（平均分子量344.4），准确至0.001g，溶于50ml水中，转移到100ml容量瓶中，稀释至标线并混匀。

每毫升含1.00mgLAS。

保存于4°C冰箱中。

如需要，每周配置一次。

3.5 直链烷基苯磺酸钠标准溶液准确吸取10.00ml直链烷基苯磺酸钠贮备溶液（3.4），用水稀释至1000ml，每毫升含10.0?gLAS。

当天配置。

3.6 亚甲蓝溶液先秤取50g一水磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）溶于300ml水中，转移到1000ml容量瓶内，缓慢加入 6.8ml浓硫酸（H2SO4,ρ=1.84g/ml），摇匀。

另秤取30mg亚甲蓝（指示剂级），用50ml水溶解后也移入容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。

实验二十八亚甲蓝分光光度法测定阴离子洗涤剂一﹑实验目的1.学习萃取和索氏提取的基本操作。

2.学习测定水样中阴离子洗涤剂的方法。

二﹑实验原理阴离子洗涤剂主要指直链烷基苯磺酸钠和烷基磺酸钠类物质。

洗涤剂的污染会造成水面产生不易消失的泡沫，并消耗水中的溶解样。

水中阴离子洗涤剂测定方法，常用的有亚甲蓝分光光度法和液相色谱法，前者操作简便，但选择性较差，后者需要有专用设备。

阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂(包括直链烷基苯磺酸钠﹑烷基磺酸纳和脂肪醇硫酸钠)作用，生成蓝色的离子对化合物，这类能与亚甲蓝作用的物质统称亚甲蓝活性物质（MBAS）。

生成的显色物可被三氯甲烷萃取，其色度与浓度成正比，并可用分光光度计在波长652nm 处测量三氯甲烷层的吸光度。

由于测定对象是水中溶解态的阴离子表面活性剂，样品在测定前需经中速定性滤纸过滤以除去悬浮物。

因此，吸附在悬浮物上的表面活性剂不计在内。

三﹑实验仪器1．分光光度计2．250mL分液漏斗3．索氏抽提器（150mL平底烧瓶，φ35×160 mm抽提桶，蛇型冷凝管）。

四﹑试剂1．4%氢氧化钠溶液2．3%硫酸3．三氯甲烷4．直链烷基苯磺酸钠标准储备溶液：称取0.100g标准物LAS(平均分子量344.4，称准至0.001g)，溶于50mL水中，转移到100mL容量瓶中，稀释至标线，混匀，每毫升含1.00mgLAS。

保存于4℃冰箱中。

如需要，每周配制一次。

5．直链烷基苯磺酸钠标准溶液：准确吸取10.00mL直链烷基苯磺酸钠标准储备溶液，用水稀释至1000mL，每毫升含10.0μgLAS。

当天配制。

6．亚甲蓝溶液：称取50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）置于烧杯中，溶于水，缓慢加入6.8mL浓硫酸，混匀，转移入1000mL容量瓶中。

另称取30mg亚甲蓝（指示剂级），用50mL水溶解后也移入容量瓶中，用水稀释至标线，摇云。

此溶液储于棕色试剂瓶中。

7．洗涤液：称取50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）置于烧杯中，溶于水，缓慢加入6.8mL浓硫酸，用水稀释至1000mL。

阴离子表面活性剂测定方法确认实验报告1.方法依据阴离子表面活性剂的测定亚甲蓝分光光度法 GB/T 7494-19872.方法原理阴离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS），该生成物可被三氯甲烷萃取其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量三氯甲烷层的吸光度。

3.仪器3.1 可见分光光度计3.2 分液漏斗，250 mL3.3 比色管，25 mL4.试剂详见亚甲蓝分光光度法 GB/T 7494-19875分析5.1 吸取50.0 mL水样，置于125 mL分液漏斗中，此时标准系列的体积也应一致。

5.2 另取125 mL分液漏斗7个，分别加入十二烷基苯磺酸钠标准使用溶液0 mL，0.50 ml, 1.00 mL,2.00 ml，3.00 ml，4.00 mL和5.00 mL，用纯水稀释至50 mL。

5.3 向水样和标准系列中各加3滴酚酞溶液，逐滴加入氢氧化钠溶液，使水样呈碱性。

然后再逐滴加入硫酸溶液，使红色刚褪去。

加入5 mL三氯甲烷及10 mL亚甲蓝溶液，猛烈振摇0.5 min，放置分层。

若水相中蓝色耗尽，则应另取少量水样重新测定。

5.4 将三氯甲烷相放入第二套分液漏斗中。

5.5 向第二套分液漏斗中加入25 mL洗涤液，猛烈振摇0.5 min，静置分层。

5.6 在分液漏斗颈管内，塞入少许洁净的玻璃棉滤除水珠，将三氯甲烷缓缓放人25 mL比色管中。

5.7 各加5 mL三氯甲烷于分液漏斗中，振荡并放置分层后，合并三氯甲烷相于25 mL比色管中，同样再操作一次。

最后用三氯甲烷稀释到刻度。

5.8 于652 nm波长，用3 cm比色皿，以三氯甲烷作参比，测量吸光度。

5.9 绘制工作曲线，从曲线上查出样品中十二烷基苯磺酸钠的质量。

6.1 适用范围：本法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中低浓度的阴离子表面活性物质。

6.2 测定范围：当采用10mm光程的比色皿，试份体积为100mL时，本方法的最低检出浓度为0.05mg/L LAS，检测上限为2.0mg/L LAS。

阴离子合成洗涤剂测定方法确认实验报告1.方法依据阴离子合成洗涤剂的测定亚甲蓝分光光度法 GB/T 5750.4-20062.方法原理亚甲蓝染料在水溶液中与阴离子合成洗涤剂形成易被有机溶剂萃取的蓝色化合物。

未反应的亚甲蓝则仍留在水溶液中。

根据有机相蓝色的强度，测定阴离子合成洗涤剂的含量。

3.仪器3.1 可见分光光度计3.2 分液漏斗，250 mL3.3 比色管，25 mL4.试剂详见亚甲蓝分光光度法 GB/T 5750.4-20065分析5.1 吸取50.0 mL水样，置于125 mL分液漏斗中(若水样中阴离子合成洗涤剂小于5μg，应增加水样体积。

此时标准系列的体积也应一致；若大于100 μg时，取适量水样，稀释至50 mL)。

5.2 另取125 mL分液漏斗7个，分别加入十二烷基苯磺酸钠标准使用溶液0 mL，0.50 ml, 1.00 mL,2.00 ml，3.00 ml，4.00 mL和5.00 mL，用纯水稀释至50 mL。

5.3 向水样和标准系列中各加3滴酚酞溶液，逐滴加入氢氧化钠溶液，使水样呈碱性。

然后再逐滴加入硫酸溶液，使红色刚褪去。

加入5 mL三氯甲烷及10 mL亚甲蓝溶液，猛烈振摇0.5 min，放置分层。

若水相中蓝色耗尽，则应另取少量水样重新测定。

5.4 将三氯甲烷相放入第二套分液漏斗中。

5.5 向第二套分液漏斗中加入25 mL洗涤液，猛烈振摇0.5 min，静置分层。

5.6 在分液漏斗颈管内，塞入少许洁净的玻璃棉滤除水珠，将三氯甲烷缓缓放人25 mL比色管中。

5.7 各加5 mL三氯甲烷于分液漏斗中，振荡并放置分层后，合并三氯甲烷相于25 mL比色管中，同样再操作一次。

最后用三氯甲烷稀释到刻度。

5.8 于650 nm波长，用3 cm比色皿，以三氯甲烷作参比，测量吸光度。

5.9 绘制工作曲线，从曲线上查出样品中十二烷基苯磺酸钠的质量。

工作曲线绘制结果如下表：6讨论6.1 适用范围：本法适用于生活饮用水及其水源水中阴离子合成洗涤剂的测定。

简化法测定阴离子合成洗涤剂的含量摘要：对亚甲蓝分光光度法测定水中阴离子合成洗涤剂的方法进行了简化。

对亚甲蓝进行一次性萃取，十二烷基苯磺酸钠含量在0.10 ~ 1.0 mg/L 时线性关系良好，检出限为 1.57 µg/L，该方法精密度较好，加标回收率在92.2 % ～96.7 % , 符合水质样品加标回收要求。

实验结果表明，该方法操作简单快速，减少了工作时间，而且精密度和准确度都能满足实验要求。

关键词：阴离子合成洗涤剂；分光光度法；亚甲蓝十二烷基苯磺酸钠是一种阴离子表面活性剂，用作生产各种洗涤剂和乳化剂等原料，如日化工业中和洗衣粉，餐具洗涤剂，纺织工业的清洗剂，染色助剂，电镀工业，制革工业的脱脂剂，造纸工业的脱墨剂。

随着表面活性剂的广泛应用，排入水中的量大大增加,形成泡沫覆于河面，改变水质感官性状,同时还具有不良的臭和味，消耗水中溶解氧，对水中的水生生物及环境造成一定污染和危害，对人体健康造成危害,所以，阴离子洗涤剂已成为当前水污染重要的指标之一[1]。

生活饮用水中测定水中阴离子洗涤剂的方法有亚甲蓝分光光度法，但是实验操作中需要反复多次萃取，繁琐耗时，试剂用量大[2]。

本文根据饮用水及其水源水中阴离子合成洗涤剂含量较低的实际情况，对国家标准中的分析方法进行了简化，将多次萃取改为一次萃取，直接一次性准确加入25.00 mL氯仿进行萃取，缩短了分析时间，减少了有机试剂对工作人员的危害。

改进后的亚甲蓝分光光度法测定饮用水中阴离子合成洗涤剂方法简单、结果准确、快速，能够满足实验要求。

1实验部分1.1试剂1.1.1十二烷基苯磺酸钠标准溶液（购于国家标准物质研究中心 1 000 µg/mL ，使用时稀释成10 µg/mL的标准溶夜）。

1.1.2亚甲蓝溶液：称取30 mg 亚甲蓝（C16H18ClN3S•3H2O），溶于500 mL纯水中，加入 6.8 mL 浓硫酸（ρ= 1.84 g/ mL）及50 g 磷酸二氢钠（NaH2PO4•H2O），溶解后用纯水稀释至1000 mL。

亚甲蓝分光光度法测阴离子合成洗涤剂方法确认报告二氮杂菲萃取分光光度法测阴离子测阴离子合成洗涤剂方法确认报告一．依据标准：本方法参照采用GB/T5750—2006《生活饮用水标准检验法》。

二．适用范围本标准适用于二氮杂菲萃取分光光度法测定生活饮用水及水源水中阴离子合成洗涤剂的测定。

本规范最低检测质量为2.5µg。

若取100ml水样测定，最低检测质量浓度为0.025mg/L十二烷基苯磺酸钠。

三，原理水中阴离子合成洗涤剂与Ferroin（Fe2+与二氮杂菲形成的配合物）形成离子缔合物，可被氯仿萃取，与510nm波长下测定吸光度。

四．仪器4.1分液漏斗，250ml4.2分光光度计五．试剂5.1氯仿5.2二氮杂菲溶液5.3乙酸铵缓冲液5.4盐酸羟胺-亚铁溶液5.5十二烷基苯磺酸钠标准储备液（DBS）5.6十二烷基苯磺酸钠标准使用液六．分析步骤6.1吸取100ml水样于250ml分液漏斗中。

6.2 另取250ml分液漏斗5个，分别加入50ml纯水，再分别加入十二烷基苯磺酸钠标准使用液0ml ,1ml, 2ml, 3ml, 和5ml，纯水稀释到100ml。

6.3 向水样和标准系列中各加2ml二氮杂菲溶液、10ml乙酸铵缓冲液、1.0ml盐酸羟胺-亚铁溶液及10ml氯仿，萃取振摇2min，静置分层，于分液漏斗颈部塞入一小团脱脂棉，分出氯仿相于干燥的10ml 比色管中，供测定。

6.4于510nm波长，用3cm比色皿，以氯仿作参比，测量吸光度。

6.5 绘制工作曲线，从曲线上查出样品管中十二烷基苯磺酸钠的质量。

6.6计算mρ（DBS）=-----Vρ（DBS）----水样中阴离子合成洗涤剂（以十二烷基苯磺酸钠计）的质量溶度，单位为毫克每升（㎎/L）m----从工作曲线上查得十二烷基苯磺酸钠的质量，单位为微克（µg）V----水样体积，单位为为毫升（ml）。

七、精密度的测定配置0.4mg/l浓度的标准溶液10批，每批2个样品进行测定，计算其标准偏差分别为，相对标准偏差为，见表次数（n）浓度，mg/L 均值mg/L X1X21 0.39 0.40 0.402 0.40 0.40 0.403 0.36 0.38 0.374 0.40 0.42 0.415 0.39 0.37 0.386 0.41 0.39 0.407 0.40 0.41 0.418 0.38 0.39 0.399 0.36 0.37 0.3710 0.39 0.39 0.39X= 0.39 S= RSD=八、回收率的确认在样品中加浓度为0.60 mg/L 的总磷标准浓液，平行测7次，进行回收实验，其回收率为次数n 加标量mg/L测定值mg/L回收率%1 0.60 0.60 1002 0.60 0.61 1023 0.60 0.62 1034 0.60 0.59 985 0.60 0.60 1006 0.60 0.57 957 0.60 0.59 98平均回收率99%九、检出限的计算与验证配置浓度0.01mg/L 标准溶液，重复测定七次， 计算其标准偏差。

FHZDZHS0044 海水阴离子洗涤剂的测定亚甲基蓝分光光度法F-HZ-DZ-HS-0044海水—阴离子洗涤剂的测定—亚甲基蓝分光光度法1 范围本方法适用于海水中阴离子洗涤剂的测定。

对有较深颜色的水样本法受干扰。

检出限：10.0μg/L.2 原理阴离子洗涤剂与亚甲基蓝反应，生成蓝色的离子对化合物，用氯仿萃取后，在波长650nm 处测定吸光度。

测定结果以直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12)的表观浓度表示，实际上是测定了亚甲基蓝活性物质(MBAS)。

有机的硫酸盐、磺酸盐、羟酸盐、酚类及无机的氰酸盐、硝酸盐和硫氰酸盐等引起正干扰，有机胺类则引起负干扰。

3 试剂除非另作说明，所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或等效纯水。

3.1 氯仿(CHCl3)。

3.2 硫酸C(H2SO4)=0.5mol/L。

3.3 氢氧化钠溶液C(NaOH)=1mol/L：称取10.0g氢氧化钠(NaOH)溶于水并稀至250mL，搅匀，保存于聚乙烯瓶中。

3.4 氯化钠溶液，300g/L。

3.5 亚甲基蓝溶液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），搅拌下缓缓加入6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL），加入50mg亚甲基蓝（C16H18N3 ClS·3H2O），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。

移入棕色试剂瓶保存。

3.6 洗涤液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠，搅拌下缓缓加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。

3.7 直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12，标准试剂)标准溶液3.7.1 直链烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取100.0mg LAS 溶于50mL水中，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。

此溶液1.00mL含1.00mg LAS。

在冰箱内保存，可稳定6个月。