GB7488-87水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法
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固体培养基稀释涂抹接种法页数:12
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稀释接种法测BOD5考核样品的一些注意点页数:3
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BOD5的测定(稀释接种法)
BOD5的测定（稀释接种法）BOD5，即5天生化需氧量（也称为生化需氧量-5天），是自然水体和生活废水的有机质污染指标之一。
BOD5测定是指在5天内，在一定的温度和pH值下，微生物在无氧条件下将有机物氧化成为二氧化碳和水的化学量测定方法。
其结果反映了水中有机物的含量。
BOD5测定的原理是：通过将水样稀释后与特定的微生物进行接种，并在一定的条件下培养，使微生物对有机物进行氧化分解，用电化学分析仪器测定分解过程中氧的消耗量，计算出单位体积水样中有机物的含量。
BOD5测定中的稀释接种法是一种常见的测定方法，其主要步骤如下：1. 制备好试样和质量达标的无菌生理盐水，生理盐水中含有必需的微量元素和氮源，可以提供微生物的生长所需的营养物质。
2. 将水样进行必要的预处理，即去除悬浮物、沉淀物等大颗粒物质，并用筛网过滤掉较小的颗粒物质，得到清洁、透明的水样，以便稀释和接种。
3. 根据水样的不同特性和预期的BOD5值，选择适当的稀释倍数，将水样用无菌生理盐水稀释到不同浓度的试样中。
试样的总体积通常为300~350ml，并且每个稀释倍数至少需要重复3个。
4. 取少量的无菌水，将试管中的试样进行接种。
生物接种可以选择一些常见的微生物，比如肠杆菌和亚硝酸盐还原菌。
为了更好地模拟水体中的自然情况，可以采用在野外水域中分离出的有机物降解菌进行接种。
5. 分别将接种后的试样置于5天内，36 ± 1℃恒温搅拌培养，以促进微生物的快速生长和有机物的氧化分解。
6. 在5天后，再次测定水样中溶解氧的浓度，通过差值计算出BOD5值。
计算公式如下：BOD5= (T1-T2)×df/V其中，T1为初始溶解氧浓度，mg/L；T2为5天后的溶解氧浓度，mg/L；df为稀释倍数；V为试样体积，ml。
通过稀释接种法进行BOD5测定，可以掌握水体中有机物的污染情况，评估水质和水环境的健康状态。
在实际应用中，为了保证测定结果的准确性和可靠性，还需要进行控制实验（比如负对照实验和阳性对照实验）和重复测定。
生化需氧量试题
生化需氧量测定复习试题一、填空题1.国家颁布的五日生化需氧量（BOD5）的测定标准分析方法为，方法的国标号码是。
答：稀释与接种法；GB7488—87。
2.在测定BOD5的同时，需用__________和__________标准溶液完成验证试验，得到的BOD5应在__________之间，否则应检查接种水。
答：葡萄糖；谷氨酸；180—230mg/L。
3.生化需氧量的定义是：在规定条件下，__________分解水中的__________物质的__________过程中所需溶解氧量。
目前国内外普遍采用__________℃培养______天，分别测定培养前后_______二者之______，即为其BOD5。
答：微生物；可氧化；生物化学；20；5；溶解氧；差。
4.为检查稀释水、接种液或分析质量，可用相同浓度的__________和__________溶液，__________量混合，作为控制样品。
答：谷氨酸；葡萄糖；等。
5.测定水样的BOD5时，如其含量<4mg/L，可以__________测定，经五天培养后消耗溶解氧__________mg/L，剩余溶解氧__________mg/L为宜。
答：直接培养；>2；>1。
6.生化需氧量主要是含_________有机物被氧化的过程，对含有大量硝化细菌的水样，应加入_________________抑制__________过程。
对含有难降解有机物的废水，测定生化需氧量时，需进行微生物的_________处理。
答：碳；硝化抑制剂；硝化；驯化。
二、选择、判断题1.稀释水的BOD5不应超过 mg/L。
A、1；B、2；C、；D、；E、；答：D2.稀释水的溶解氧要达到 mg/L。
A、4；B、6；C、8；D、10；E、20。
答：C3.在测定BOD5时下列哪种废水应进行接种_____。
A.有机物含量较多的废水；B.较清洁的河水；C.不含或少含微生物的工业废水；D.生活污水答：C4.判断下列各论述是否正确（正√，误×）。
污水BOD5测定知识详解
污水BOD5测定知识详解1、BOD5测定的注意事项有哪些？BOD5测定通常采用标准稀释与接种法（GB 7488--87），其操作为，经中和及除去毒性物质并经稀释后的水样（必要时加入适量含好氧微生物的接种液）置入培养瓶中，于在20oC暗处培养5d，通过分别测定培养前后水样中溶解氧的含量，来计算出5d内的耗氧量，再根据稀释倍数求得其BOD5。
BOD5的测定是生物作用和化学作用的共同结果，必须严格按照操作规范进行，变更任何一个条件，都将影响测定结果的准确性和可比性。
影响BOD5测定的条件包括pH值、温度、微生物种类和数量、无机盐含量、溶解氧和稀释倍数等。
化验BOD5的水样必须充满并密封于取样瓶中，在2～5℃的冷藏箱内保存到分析时。
一般应在采样后6h内进行检验，在任何情况下，水样的贮存时间不能超过24h。
测定工业废水的BOD5时，由于工业废水通常溶解氧含量较少而且成分多为可生化降解的有机物，为保持培养瓶内的好氧状态，必须将水样稀释（或接种稀释），这一操作是标准稀释法的最大特征。
为确保测得结果的可靠性，对于稀释后的水样培养5d的耗氧量必须大于2mg/L，残留溶解氧必须大于1mg/L。
投入接种液是为了保证有一定量的微生物降解水中的有机物，接种液的量以使5日耗氧0.1mg/L以下为佳。
使用由金属蒸馏器制备的蒸馏水作为稀释水时，应注意检查其中的金属离子含量，以避免因此抑制微生物繁殖和代谢。
为确保稀释水中溶解氧接近饱和，必要时可通入净化空气或纯氧，然后于在20℃培养箱中放置一定时间，使之与空气中氧分压达到平衡。
稀释倍数的确定是以培养5日耗氧大于2mg/L，剩余溶解氧大于1mg/L为原则。
稀释倍数过大或过小，都会导致检验失败。
而且由于BOD5分析周期较长，一旦出现类似情况，就无法以原样补测。
初测某一工业废水的BOD5时，可以首先测定其COD Cr，然后查阅参考已有的水质类似的废水的有关监测数据，初步确定待测水样BOD5/COD C r值，据此推算出BOD5的大致范围和确定稀释倍数。
GB7488-87水质五日生化需氧量BOD5
中华人民共和国国家标准水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法(GB7488-87)本标准参照采用国际标准ISO5815-1983，本国家标准规定采用稀释与接种法作为测定水中生化需氧量的标准方法。
这是一种经验的常规方法。
1适用范围本方法适用于BOD5大于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。
BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。
本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。
本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。
水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。
2定义生物化学需氧量(BOD)：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧(以质量深度表示)3原理将水样注满培养瓶，塞好后应不透气，将瓶置于恒温条件下培养5天。
培养前后分别测定溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗氧的质量，即BOD5值。
由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧(DO)量，因此在培养前需对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧(DO)符合规定。
一般水质检验所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。
有进需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。
常用的区别含碳和氮的硝化耗氧量的方法是向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入矢量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。
在5天培养时间内，硝化作用的耗氧取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。
生化需氧量(BOD)的测定
国际标准 ISO 5815-1、ISO 5815-2 是 2003 年制定的，是对 ISO 5815：1989 的修订。国际标准 ISO 5815-1 规定了稀释接种法并加入丙烯基硫脲 BOD5 的测定 方法；ISO 5815-2 规定了非稀释 BOD5 的测定方法。
ISO 5815-1、ISO5815-2：2003 比我国 GB 7488-87 在很多方面有改进，如 在样品的保存方法、方法的适用范围、检出限的测定方法、样品的前处理方法、 接种液的选择、稀释接种法稀释倍数的确定方法、溶解氧的测定方法等方面都有 所改进。 3.标准修订原则和依据
生化需氧量（BOD5）是水中有机物质在微生物的作用下，进行氧化分解所消 耗的溶解氧量，以氧的 mg／L 表示。是间接表示水中有机物污染程度的一个综合 性指标。
目前,我国 BOD5 的测定方法为稀释接种法（GB 7488-87），该标准是 1987 年 制定的，20 多年一直没有修订。原理为：样品在 20±1℃培养 5 天，用碘量法分 别测定培养前后的溶解氧浓度，二者之差为 BOD5 。因此，每个样品需要分两瓶， 一瓶测定培养前的溶解氧，另一瓶测定培养后的溶解氧。
每组培养多瓶样品，分别测定不同培养时间的 BOD5。对比加与不加丙烯基硫脲硝 化抑制剂二组的测定结果。仙女河样品测定结果见表 4，标样测定结果见表 5。
培养时间(天)
BODn (mg/L)
不加 加
平均 BODn (mg/L)
不加 加
不加 BODn /加 BODn
差异
表 4 仙女河样品测定结果
5
9
63.2 68.0 73.6 81.2 83.6 86.0
定 BOD5 值。然后对测得的四组数据在 95%的置信概率条件下，用 Cochrane 和 Grubbs 检验法进行检验，判断这四天的 BOD5 分析结果是否存在显著性差异，结
ISO 5815-1、ISO5815-2：2003 比我国 GB 7488-87 在很多方面有改进，如 在样品的保存方法、方法的适用范围、检出限的测定方法、样品的前处理方法、 接种液的选择、稀释接种法稀释倍数的确定方法、溶解氧的测定方法等方面都有 所改进。 3.标准修订原则和依据
生化需氧量（BOD5）是水中有机物质在微生物的作用下，进行氧化分解所消 耗的溶解氧量，以氧的 mg／L 表示。是间接表示水中有机物污染程度的一个综合 性指标。
目前,我国 BOD5 的测定方法为稀释接种法（GB 7488-87），该标准是 1987 年 制定的，20 多年一直没有修订。原理为：样品在 20±1℃培养 5 天，用碘量法分 别测定培养前后的溶解氧浓度，二者之差为 BOD5 。因此，每个样品需要分两瓶， 一瓶测定培养前的溶解氧，另一瓶测定培养后的溶解氧。
每组培养多瓶样品，分别测定不同培养时间的 BOD5。对比加与不加丙烯基硫脲硝 化抑制剂二组的测定结果。仙女河样品测定结果见表 4，标样测定结果见表 5。
培养时间(天)
BODn (mg/L)
不加 加
平均 BODn (mg/L)
不加 加
不加 BODn /加 BODn
差异
表 4 仙女河样品测定结果
5
9
63.2 68.0 73.6 81.2 83.6 86.0
定 BOD5 值。然后对测得的四组数据在 95%的置信概率条件下，用 Cochrane 和 Grubbs 检验法进行检验，判断这四天的 BOD5 分析结果是否存在显著性差异，结
五日生化需氧量（BOD）的测定稀释与接种法
HJ中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505 -2009代替 GB/T 7488?1987水质五日生化需氧量(BOD )的测定5稀释与接种法Water quality ?Determination of biochemical oxygen demand after 5 days(BOD )for dilution and seeding method52009 -10 -20 发布 2009 -12 -01 实施环境保护部发布HJ 505 ?2009中华人民共和国环境保护部公告2009 年第 54 号为贯彻《中华人民共和国环境保护法》 ,保护环境,保障人体健康,现批准《水质总有机碳的测定燃烧氧化- 非分散红外吸收法》等六项标准为国家环境保护标准,并予发布。
标准名称、编号如下:一、《水质总有机碳的测定燃烧氧化- 非分散红外吸收法》 (HJ二、《水质挥发酚的测定溴化容量法》 (HJ 502 ?2009 ) ;三、《水质挥发酚的测定4- 氨基安替比林分光光度法》(HJ 503 ?2009 ) ;四、《环境空气臭氧的测定靛蓝二磺酸钠分光光度法》 (HJ 504 ?2009 ) ;)的测定稀释与接种法》 (HJ 505 ?2009 ) ;五、《水质五日生化需氧量(BOD5六、《水质溶解氧的测定电化学探头法》 (HJ 506 ?2009 ) 。
以上标准自 2009 年 12 月 1 日起实施, 由中国环境科学出版社出版, 标准内容可在环境保护部网站(//0>. )查询。
自以上标准实施之日起, 由原国家环境保护局或原国家环境保护总局批准、发布的下述七项国家环境保护标准废止,标准名称、编号如下:一、《水质总有机碳(TOC )的测定非色散红外线吸收法》 (GB 13193 ?91 ) ;二、《水质总有机碳的测定燃烧氧化- 非分散红外吸收法》 (HJ/T71 ?2001 ) ;三、《水质挥发酚的测定蒸馏后溴化容量法》 (GB 7491 ?87 ) ;四、《水质挥发酚的测定蒸馏后 4- 氨基安替比林分光光度法》 (GB五、《环境空气臭氧的测定靛蓝二磺酸钠分光光度法》 (GB/T 15437 ?1995 ) ;六、《水质五日生化需氧量(BOD )的测定稀释与接种法》(GB 7488 ?87 ) ;5七、《水质溶解氧的测定电化学探头法》 (GB 11913 ?89 ) 。
水质五日生化需氧量(bod5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD）的测定。
方法的检出限为L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
五日生化需氧量的测定稀释接种法
用同样方法配置另两份稀释比水样。
3、对照样的配置 另取两个有编号的碘量瓶加入稀释水或接种稀释
水作为空白。
4、培养 将各稀释比的水样，稀释水（或接种稀释水）空
白各取一瓶放入20+1℃的培养箱内培养5d，培养 过程中需每天添加封口水。
5、溶解氧的测定 参考“水中溶解氧的测定”。
用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白 水样中的剩余溶解氧。
硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶 于水中，稀释至1000mL。
磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、 21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠
（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约 500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶 液的pH应为7.2。
本操作最好在20℃左右室温下进行，实验用稀释水和 水样应保持在20℃左右。
所用试剂和稀释水如发现浑浊有细菌生长时，应弃去重 新配制，或用葡萄糖—谷氨酸标准溶液校核。当测定2% 稀释度的葡萄糖—谷氨酸标准溶液时，若BOD5超过 （200±37）mg/L范围，则说明试剂或稀释水有问题或操 作技术有问题。
测定一般水样的BOD5时，硝化作用很不明显或根本不发 生，但对于生物处理池出水，则含有大量的硝化细菌。因 此，在测定BOD5时也包括了部分含氮化合物的需氧量。对 于这种水样，如果只需测定有机物的需氧量，应加入硝化 抑制剂，如丙稀基硫脲（ATU，C4H8N2S）等。
2、水样的稀释
根据确定的稀释倍数，用虹吸法把一定量的污水引入 1000mL量筒中，再沿壁慢慢加入所需稀释水（接种 稀释水），用特制搅拌棒在水面以下慢慢搅匀（不应 产生气泡），然后沿瓶壁慢慢倾入两个预先编号、体 积相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充满后溢出少许 为止。盖严并水封，注意瓶内不有气泡。
3、对照样的配置 另取两个有编号的碘量瓶加入稀释水或接种稀释
水作为空白。
4、培养 将各稀释比的水样，稀释水（或接种稀释水）空
白各取一瓶放入20+1℃的培养箱内培养5d，培养 过程中需每天添加封口水。
5、溶解氧的测定 参考“水中溶解氧的测定”。
用碘量法测定未经培养的各份稀释比的水样和空白 水样中的剩余溶解氧。
硫酸镁溶液。称取22.5g硫酸镁（MgSO4·7H2O）,溶 于水中，稀释至1000mL。
磷酸盐溶液。称取8.5g磷酸二氢钾（KH2PO4）、 21.75g磷酸氢二钾（K2HPO4）、33.4g磷酸氢二钠
（NaHPO4·7H2O）和1.7g氯化氨（NH4Cl），溶于约 500mL水中，稀释至1000mL并混合均匀，此缓冲溶 液的pH应为7.2。
本操作最好在20℃左右室温下进行，实验用稀释水和 水样应保持在20℃左右。
所用试剂和稀释水如发现浑浊有细菌生长时，应弃去重 新配制，或用葡萄糖—谷氨酸标准溶液校核。当测定2% 稀释度的葡萄糖—谷氨酸标准溶液时，若BOD5超过 （200±37）mg/L范围，则说明试剂或稀释水有问题或操 作技术有问题。
测定一般水样的BOD5时，硝化作用很不明显或根本不发 生，但对于生物处理池出水，则含有大量的硝化细菌。因 此，在测定BOD5时也包括了部分含氮化合物的需氧量。对 于这种水样，如果只需测定有机物的需氧量，应加入硝化 抑制剂，如丙稀基硫脲（ATU，C4H8N2S）等。
2、水样的稀释
根据确定的稀释倍数，用虹吸法把一定量的污水引入 1000mL量筒中，再沿壁慢慢加入所需稀释水（接种 稀释水），用特制搅拌棒在水面以下慢慢搅匀（不应 产生气泡），然后沿瓶壁慢慢倾入两个预先编号、体 积相同的(250mL)的碘量瓶中，直到充满后溢出少许 为止。盖严并水封，注意瓶内不有气泡。
水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定
中华人民共和国国家环境保护标准HJ 505—2009代替GB/T 7488-1987水质五日生化需氧量（BOD5）的测定稀释与接种法警告：丙烯基硫脲属于有毒化合物，操作时应按规定要求佩带防护器具，避免接触皮肤和衣服；标准溶液的配制应在通风柜内进行操作；检测后的残渣残液应做妥善的安全处理。
1 适用范围本标准规定了测定水中五日生化需氧量（BOD5）的稀释与接种的方法。
本标准适用于地表水、工业废水和生活污水中五日生化需氧量（BOD5）的测定。
方法的检出限为0.5mg/L，方法的测定下限为2mg/L，非稀释法和非稀释接种法的测定上限为6mg/L，稀释与稀释接种法的测定上限为6000mg/L。
2 规范性引用文件本标准内容引用了下列文件中的条款。
凡是不注日期的引用文件，其有效版本适用于本标准。
GB/T 6682 分析实验室用水规格和试验方法GB/T 7489 水质溶解氧的测定碘量法GB/T 11913 水质溶解氧的测定电化学探头法HJ/T 91 地表水和污水监测技术规范3 方法原理生化需氧量是指在规定的条件下，微生物分解水中的某些可氧化的物质，特别是分解有机物的生物化学过程消耗的溶解氧。
通常情况下是指水样充满完全密闭的溶解氧瓶中，在（20±1）℃的暗处培养5d±4h 或(2+5)d±4h(先在0～4℃的暗处培养2d，接着在(20±1)℃的暗处培养5d，即培养(2+5)d)，分别测定培养前后水样中溶解氧的质量浓度，由培养前后溶解氧的质量浓度之差，计算每升样品消耗的溶解氧量，以BOD5 形式表示。
若样品中的有机物含量较多，BOD5 的质量浓度大于6mg/L，样品需适当稀释后测定；对不含或含微生物少的工业废水，如酸性废水、碱性废水、高温废水、冷冻保存的废水或经过氯化处理等的废水，在测定BOD5 时应进行接种，以引进能分解废水中有机物的微生物。
当废水中存在难以被一般生活污水中的微生物以正常的速度降解的有机物或含有剧毒物质时，应将驯化后的微1生物引入水样中进行接种。
五日生化需氧量
生化需氧量(BOD5)稀释与接种法GB7488--87 生活污水与工业废水中含有大量各类有机物。
当其污染水域后,这些有机物在水体中分解时要消耗大量溶解氧,从而破坏水体中氧得平衡,使水质恶化。
水体因缺氧造成鱼类及其它水生生物得死亡。
水体中含有得有机物成分复杂,难以一一测定其成分。
人们常常利用水中有机物在一定条件下所消耗得氧,来间接表示水体中有机物得含量,生化需氧量即属于这类得一个重要指标。
生化需氧量得经典测定方法,就是稀释接种法。
测定生化需氧量得水样,采集时应充满并密封于瓶中。
在0—4℃下进行保存。
一般应在6小时内进行分析。
若需要远距离转运,在任何情况下,贮存时间不应超过24小时。
概述1．方法原理生化需氧量就是指在规定条件下,微生物分解存在水中得某些可氧化物质、特别就是有机物所进行得生物化学过程中消耗溶解氧得量。
此生物氧化全过程进行得时间很长,如在20℃培养时,完成此过程需100多天。
目前国内外普遍规定于20±1℃培养5d,分别测定样品培养前后得溶解氧,二者之差即为BOD5值,以氧得毫克/升(mg/L)表示。
对某些地面水及大多数工业废水,因含较多得有机物,需要稀释后再培养测定,以降低其浓度与保证有充足得溶解氧。
稀释得程度应使培养中所消耗得溶解氧大于2mg/L,而剩余溶解氧在1 mg/L以上。
为了保证水样稀释后有足够得溶解氧,稀释水通常要通入空气进行曝气(或通入氧气),以便稀释水中溶解氧接近饱与。
稀释水中还应加入一定量得无机营养盐与缓冲物质(磷酸盐、钙、镁与铁盐等),以保证微生物生长得需要。
对于不含或少含微生物得工业废水,其中包括酸性废水、碱性废水、高温废水或经过氯化处理得废水,在测定BOD5时应进行接种,以引入能分解废水中有机物得微生物。
当废水中存在着难于被一般生活污水中得微生物以正常速度降解得有机物或含有剧毒物质时,应将驯化后得微生物引入水样中进行接种。
本方法适用于测定BOD5大于或等于2mg/L,最大不超过6000 mg/L得水样。