BOD测定中微生物传感器法与稀释接种法的比较

HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法文档模板1. 引言主要描述了如何使用稀释与接种法来测定水质中的五日生化需氧量（BOD5）。

BOD5是评价废水中有机污染物浓度的重要指标之一，对于环境保护和水质监测非常重要。

2. 适用范围适用于对水样进行五日生化需氧量的测定，使用稀释与接种法。

3. 简介稀释与接种法是一种常用的测定BOD5的方法。

它通过将水样进行稀释，然后接种细菌种子来获得可控制的生化需氧量的反应。

详细描述了测定前的准备工作、实验步骤、计算方法等。

4. 测定前的准备工作4.1 样品采集及处理- 采集水样时要注意避免污染，使用干净的容器进行采集。

- 样品采集后，应尽快将其送至实验室进行处理。

4.2 实验室设备与试剂准备- 根据实验需求，准备适量的培养基、稀释液、标定溶液等试剂。

- 检查实验室设备的完好性，确保无损坏或污染。

5. 实验步骤5.1 样品的稀释- 根据实际需求，将水样按照一定比例稀释，以便得到可测定范围内的BOD5值。

5.2 接种菌液- 在适量的培养基中接种细菌种子，培育细菌液。

5.3 反应瓶的制备- 将已经稀释和接种好的水样倒入BOD5反应瓶中。

- 定量加入已标定过的溶液。

5.4 反应过程的控制- 设置好反应瓶的应有条件：适当的温度、通气等。

- 确保反应瓶中的溶液始终保持适当的pH值，并进行适当的搅拌。

5.5 BOD5值的测定- 在反应过程结束后，使用溶解氧电极等设备测定溶解氧的含量，得到BOD5值。

6. 数据处理与计算方法- 根据实际测定结果，使用相应的公式计算出BOD5值。

- 根据实验需要，进行数据分析及结果报告。

7. 附件所涉及的附件如下：- 附件1：实验记录表格样本- 附件2：标定溶液制备方法8. 法律名词及注释所涉及的法律名词及其注释如下：- 法律名词1：注释1- 法律名词2：注释29. 困难及解决办法在实际执行过程中，可能会遇到以下困难：- 困难1：描述困难1及其解决办法。

浅谈稀释与接种法快速有效测定BOD5的方法作者：曾玉梅来源：《科学与信息化》2020年第03期摘要该文详细分析了某种稀释倍数下采用理论方法所能准确测定的BOD5实验值的有效范围，在此基础上，根据工作实践经验，从快速、有效两个不同方面对BOD5分析操作过程方法做了微小的设计改进，可以降低劳动强度，减少了在实验中的误差，提高实验工作效率。

关键词环境监测;废水;BOD5;稀释倍数;稀释与接种法引言我国目前水质BOD5的标准测定方式普遍采用《水质五日生化需氧量的测定稀释与接种法》（HJ 505-2009）。

由于水中溶解氧的测定浓度有限，如果样品稀释耗氧倍数的选取决定值不当，会使五日消耗氧的量不完全符合要求（最低五日耗氧2mg/l，五日后剩余不低于2mg/l），导致样品分析失败，因此样品稀释倍数的正确选择一直是决定样品进行分析过程成败的关键。

工业废水BOD5稀释倍数的实际计算测得方法一般是：由采用重铬酸钾计算测得值分别乘以系数0.075、0.15、0.225求得[1]。

采集后的BOD5样品一般应在0～5℃的低温暗处冷藏，保存时间不超过12h[2]，我们从进行样品首次采集到进入实验室这个采集过程，一般就需要有五六个小时，如果再需要等到CODcr结果分析出来再分析BOD5，在样品保存有效期限等方面就会存在着不妥，特别是在有大批量的样品时更加不合理，这是通过CODcr来确定BOD5的稀释倍数不可行的主要原因之一。

其次，监测工作人员的工作量不同且比较杂，所以在CODcr实验后，不可能都马上进行计算并得出实验结果，这些也是通过CODcr来确定BOD5的稀释倍数不可行的原因之二。

为了使大量的样品采集后能尽快完成实验室分析，一般都与其他项目同步进行实验，因此如何快速有效地确定样品稀释倍数也就成了实验中的关键所在。

1 具体操作方法的改进按照事先设计选定的各种稀释比在培养瓶采用直接稀释法测定。

溶氧仪在测定时要求对水样有足够的流速，即要进行搅拌的同时读取已稳定的数值（需配备带有搅拌器的实验室溶氧仪），这样附着在瓶壁上的气泡就会由于动力作用而脱离，从而浮出水面，当观察瓶壁上无气泡时再测定DO值，就不会产生DO误差了。

HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接
种法
HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法
1. 引言
2. 实验仪器和试剂
2.1 仪器
BOD5测定仪：用于测定水样的BOD5值。

2.2 试剂
磷酸盐缓冲溶液：用于维持水样的pH值，使其在适宜范围内。

水样：待测水样。

3. 实验步骤
3.1 样品准备
将待测水样收集到容器中，以确保采样的代表性。

3.2 稀释
将样品从容器中取出一定量，与磷酸盐缓冲溶液按照一定比例混合，使得水样的浓度适宜。

3.3 接种
将稀释后的样品接种到预先准备好的BOD5测定仪中，保持适宜的温度和湿度条件。

3.4 测定
在接种后的一段时间内（一般为五天），记录BOD5测定仪中的溶氧量变化情况。

3.5 计算BOD5值
根据测定期间溶氧的变化情况，利用适当的计算公式计算BOD5值。

4. 结果与讨论
根据测定得到的BOD5值，可以评价水样的耗氧能力和有机物的含量。

通过与相关标准进行对比，可以判断水质是否符合要求。

5.
稀释与接种法是测定水质BOD5值的常用方法之一。

通过该方法可以准确测定水样的有机物耗氧能力，评价水质的好坏，为水体的管理和保护提供依据。

HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法1、引言概述了HJ505-2009标准中的水质五日生化需氧量（BOD5）的测定方法，采用稀释与接种法进行测定。

旨在提供详细的指导和步骤，以确保准确测定水体中的BOD5值。

2、适用范围适用于对各类水体（包括但不限于自然水体、废水和工业水体）中的BOD5值进行测定的实验室。

3、术语和定义中使用的术语和定义请参考HJ505-2009标准。

4、设备和材料4.1 稀释液：X4.2 接种液：X4.3 样品：X4.4 试剂：X4.5 仪器：X4.6 设备：X5、实验操作步骤5.1 准备工作5.1.1 检查设备和仪器的完好程度。

5.1.2 准备稀释液、接种液和试剂。

5.1.3 采集样品并进行标识。

5.2 稀释与接种5.2.1 将样品稀释至合适的浓度。

5.2.2 加入适量的接种液。

5.2.3 按标准稀释比例进行接种。

5.3 反应和测定5.3.1 将接种后的样品置于恒温槽中进行反应。

5.3.2 在反应结束后，进行溶液的测定。

5.3.3 根据HJ505-2009标准中的计算公式计算BOD5值。

6、数据处理6.1 记录实验过程中的所有数据。

6.2 根据测定结果计算BOD5值。

6.3 进行数据统计和分析。

注：仅提供了主要的实验操作步骤，详细的操作细节和计算方法请参考HJ505-2009标准。

附件：1. 相关标准文件：HJ505-20092. 实验数据记录表3. 计算结果表法律名词及注释：1. HJ505-2009：环保部发布的《水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法》标准。

在实际执行过程中可能遇到的困难及解决办法：1. 样品污染：在样品采集和处理过程中，可能会出现其他物质的污染，影响BOD5的测定结果。

解决办法是在采集和处理过程中严格控制样品的接触和污染。

2. 实验条件不稳定：恒温槽温度的波动、接种液的浓度变化等因素可能导致实验条件不稳定。

浅谈微生物膜传感器快速测定BOD摘要：BOD是反映水体中有机物含量的重要指标之一，其表示水中污染物经微生物分解时所需要消耗的分子氧的数量（mg/L），BOD的数值越高，表明水中可降解的有机物越多。

BOD能较正确地反映水中有机物生物氧化分解时消耗的氧量，从而反映出水体污染的程度。

关键词：BOD；水质；微生物膜；传感器生化需氧量的国家标准检测方法是稀释接种法，是将水样在20℃±1℃条件下水封培养5天，分别测定培养前后的溶解氧，两者之差即为BOD5。

该方法操作复杂、耗时长，不能及时反映水质状况，特别是遇到突发性水污染事故，不能及时有效的为水环境管理提供科学依据。

通过国内外科研工作者的不懈努力，相继研究出不同种类的微生物膜传感器BOD快速测定仪。

我国则研制出以微生物电极为核心的BOD快速测定仪，该方法已经通过多家实验室验证，与传统的稀释接种法相比，具有如下优点：（1）测量准确，操作简便；（2）能在短时间内测得BOD值，检测一个样品的周期只有20分钟左右；（3）经济可行；（4）适用范围广，适用于各类地表水、工业废水、生活污水。

1 微生物膜传感器快速测定仪工作原理将紧固了微生物膜的传感器置于恒温罐内，磷酸盐缓冲溶液通过蠕动泵的作用缓缓流经螺旋恒温棒，加热后在三通管处与气泵鼓进的气体混合后最终流入流通池内。

因为磷酸盐缓冲液不含有机物，只含氧，此时微生物仅进行内源呼吸，极少消耗缓冲溶液中的溶解氧，因而透过微生物膜的溶解氧几乎没减少。

BOD标样或水样与气体混合后进入流通池，由于标样和水样都含一定浓度的有机物，微生物的同化作用变得非常活跃，消耗大量溶解氧，因此透过微生物膜的溶解氧减少。

输出电流的变化值与溶解氧的变化成正比例关系，与样品中的有机物也成正比例关系，由此计算出BOD的值。

2 微生物膜传感器测量BOD的影响因素2.1 pH值对测量的影响在用微生物膜传感器测量BOD时，不同的pH值将导致感应器的响应不同，而pH值在7左右时响应最佳。

BOD的定义及BOD的检测方法介绍一、BOD的简介BOD（BiochemicalOxygenDemand的简写）：生化需氧量或生化耗氧量（五日化学需氧量），表示水中有机物等需氧污染物质含量的一个综合指示。

说明水中有机物由于微生物的生化作用进行氧化分解，使之无机化或气体化时所消耗水中溶解氧的总数量。

其单位ppm或毫克/升表示。

其值越高说明水中有机污染物质越多，污染也就越严重。

为了使检测资料有可比性，一般规定一个时间周期，在这段时间内，在肯定温度下用水样培育微生物，并测定水中溶解氧消耗情况，一般采纳五天时间，称为五日生化需氧量，记做BOD5。

数值越大证明水中含有的有机物越多，因此污染也越严重。

BOD，生化需氧量（BOD）是一种环境监测指标，重要用于监测水体中有机物的污染情形。

一般有机物都可以被微生物所分解，但微生物分解水中的有机化合物时需要消耗氧，假如水中的溶解氧不足以供应微生物的需要，水体就处于污染状态。

BOD才是有关环保的指标。

二、BOD的检测方法经典的“稀释接种法”：通过一个溶氧探头测试样品在5天恒温培育前后的溶氧数值差值，即BOD5值；这是公认的EPA方法。

“压差法”：利用呼吸法测试BOD，氧的削减会产生肯定的压力差，而这个压力差可以通过一个压力探头感测出来。

这是一种特别应用且简单操作的方法。

两种方法截然不同，但是在市政污水处理上通常都会用到这两种测试方法。

这两种方法都要求将水样在20℃条件下培育5天。

三、BOD的计算生化需氧量的计算方式如下：BOD（mg/L）=（D1D2）/PD1：稀释后水样之初始溶氧（mg/L）D2：稀释后水样经20℃恒温培育箱培育5天之溶氧（mg/L）P=【水样体积（mL）】/【稀释后水样之最后体积（mL）】生化需氧量和化学需氧量的比值能说明水中的有机污染物有多少是微生物所难以分解的。

微生物难以分解的有机污染物对环境造成的危害更大。

四、BOD与COD区分与COD（化学需氧量，ChemicalOxygenDemand）区分：COD，化学需氧量是以化学方法测量水样中需要被氧化的还原性物质的量。

BOD测定方法汇总生化需氧量（BOD）是指在常规条件下，微生物分解存在于水中的某些可氧化物质（主要是有机物质）所进行的生物化学过程中消耗溶解氧的量。

显然，微生物作用的持续时间不同，所测得的BOD值也会不同。

目前，国际上通用的测定方法是在20℃±1的条件下测定5日的生化需氧量，即BOD5。

目前BOD5的测定方法有：标准稀释法、有汞压差法、无汞压差法、微生物电极法、活性污泥法、库仑计法。

一、BOD国标方法——标准稀释法该方法是现行的国标方法，称为标准稀释法，又叫5日培养法。

是被测水样由接种水接种稀释培养5天后，再用传统的化学方法—碘量法进行滴定计算进行测定的方法。

二、其他方法目前测定BOD值常采用BOD测定仪，仪器的方法普遍具有操作简单，重现性好，并可直接读取BOD值。

（1）库仑计法BOD测定仪在密闭系统中微生物分解有机物消耗的氧气量用电解产生的氧气补给，从电解所需的氧气量来求得氧的消耗量，仪器自动显示测定结果，记录生化需氧量曲线。

（2）测压法——分为有功压差法和无汞压差法在密闭环境中微生物分解有机物消耗溶解氧会引起气压的变化，通过测定气压的变化，即可得到BOD的值。

（3）微生物电极法用微生物电极求得微生物分解有机物消耗溶解氧的量，仪器经标准BOD物质溶液校正后，可直接显示被测溶液的BOD值，并在20min 内完成一个水样的测定。

目前BOD的仪器测定方法中，与国标法最为相近的就是测压法，测压法中无汞压差法的仪器测定BOD达到了环保、准确、高效的目标。

在国外的一些比较大的仪器厂家就是应用无汞压差法来研发生产BOD测定仪器的，比如WTW、哈希水务。

国内市场可以与之相睥睨的仪器厂家是兰州连华生产的LH-BOD601。

具体如图所示：。

BOD5测定方法1.标准稀释法这种方法是最经典的也是最常用的方法。

简单的说，就是测定在20±1℃温度下培养五天前后溶液中的溶氧量的差值。

求出来的BOD 值称为“五日生化需氧量（BOD5）”。

2.生物传感器法其原理是以一定的流量使水样及空气进入流通量池中与微生物传感器接触，水样中溶解性可升华降解的有机物受菌膜的扩散速度达到恒定时，扩散到氧电极表面上的氧质量也达到恒定并且产生一恒定电流，由于该电流与水样中可生化降解的有机物的差值与氧的减少量有定量关系，据此可算出水样的生化需氧量。

通常用BOD5标准样品对比，以换算出水样的BOD5的值。

3.活性污泥曝气降解法控制温度为30℃-35℃，利用活性污泥强制曝气降解样品2小时，经重铬酸钾消解生物降解后的样品，测定生物降解前后的化学计量需氧量，其差值即为BOD。

根据与标准方法的对比实验结果，可换算成为BOD5值。

4.测压法在密闭的培养瓶中，水样中溶解氧被微生物消耗，微生物因呼吸作用产生与耗氧量相当的CO2,当CO2被吸收后使密闭系统的压力降低，根据压力测得的压降可求出水样的BOD值。

适用范围:本方法适用于BOD5或等于2mg/L并且不超过6000mg/L的水样。

BOD5大于6000mg/L的水样仍可用本方法，但由于稀释会造成误差，有必要要求对测定结果做慎重的说明。

本试验得到的结果是生物化学和化学作用共同产生的结果，它们不象单一的、有明确定义的化学过程那样具有严格和明确的特性，但是它能提供用于评价各种水样质量的指标。

本试验的结果可能会被水中存在的某些物质所干扰，那些对微生物有毒的物质，如杀菌剂、有毒金属或游离氯等，会抑制生化作用。

水中的藻类或硝化微生物也可能造成虚假的偏高结果。

为什么取BOD一般取5天时间的BOD5？因为5天的BOD消耗值基本达到75%，时间再长效果也不显著，而且没有时效性测压法和稀释接种法测定BOD5的比较测压法与稀释接种法测量BOD5的准确度和精密度无显著差异，且都在国家标准质控允许的范围内，测压法克服了稀释接种法操作繁琐、工作量大、所需试剂多、稀释倍数较难确定等缺点，有一定可用性。

28江西化工2017年第6期浅谈生化需氧量（BOD)的测定邱桂香(宜春市环境监测站，江西宜春336000)摘要:生化需氧量(BOD)，是化学需氧量的一种，是在规定的条件下，微生物分解水 中的某些可氧化的物质所消耗的溶解氧(DO)。

化学需氧量（COD),是在强酸及加热条件下，用重铬酸钾作为氧化剂所消耗氧化剂的量,以氧的m^L来表示。

B0D的分析方法包括稀释接种法与微生物传感器快速测定法。

关键词:生化需氧量监测引言水质生化需氧量过高会直接影响水质溶解氧的含 量，间接影响水生生物，甚至引起水质发黑发臭。

废水 依据BOD与COD的比值不同，可分为可生好与可生化 性差的废水，可生化性不同的废水其处理方法亦不同。

一般B/C比大于0.3的为可生化性好的废水，为了准 确判断废水的可生化性及判断水质是否达标排放及环 境水质是否达标，须对生化需氧量进行测定。

1生化需氧量的测定1.1采样水样应充满并密封于瓶中，于〇- 4$保存。

1.2分析1.2.1稀释接种法(1) 适用范围本方法适用于B0D大于或等于2m^L,并且不超 过6000m g/L的水样。

B0D大于6000m g/L的水样仍可 用本方法，但由于稀释会造成误差，必需要求对测定结 果做慎重的说明。

(2) 分析过程将水样注满培养瓶，塞好后应不透气将瓶置于恒 温(20T：)条件下培养5天。

培养前后分别测定溶解氧 浓度，由两者的差值及稀释倍数可算出每升水消耗掉 氧的质量，即B0D5值。

(3) 注意事项由于多数水样中含有较多的有机物，因此在培养 前需对水样进行稀释，以降低其浓度和保证有充足的 溶解氧。

稀释的程度应使培养中所消耗的溶解氧大于 2m^L,而剩余的溶解氧在lm g/L以上。

为了保证水样 稀释后有足够的溶解氧，稀释水通常要通人空气进行 曝气，使稀释水中溶解氧接近饱和。

稀释水中还应加 人一定量的无机营养盐和缓冲物质（磷酸盐类、钙、镁 和铁盐等），以保证微生物生长的需要。