稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项

BOD5测定时要注意些什么BOD5的测定通常采纳标准稀释接种法（HJ5052023）。

其操作为，经中和及除去毒性物质并经稀释后的水样（必要时加入适量含好氧微生物的接种液）置入培育瓶中，20℃避光培育5天，通过测定培育前后水样中溶解氧的含量，计算出5天内的耗氧量，再依据稀释倍数得到BOD5。

BOD5的测定是生物和化学作用的共同结果，必需严格依照操作规范进行。

更改任何一个条件都会影响测定结果的精准性和可比性。

影响BOD5测定的条件包括pH值、温度、微生物种类和数量、无机盐含量、溶解氧和稀释倍数等。

用于检测BOD5的水样必需装满并密封在取样瓶中，并储存在2至5°C的冰箱中直至分析。

一般应在取样后6小时内进行检验。

在任何情况下，水样的保存时间都不应超过24小时。

在测量工业废水的BOD5时，由于工业废水通常含有较少的溶解氧，且大部分成分是可生物降解的有机物质，为了保持培育瓶中的好氧状态，必需对水样进行稀释（或接种稀释），这个操作是标准稀释法的比较大的特点。

为保证测量结果的牢靠性，稀释水样培育5天后耗氧量必需大于2mg/L，残留溶解氧必需大于1mg/L。

放入接种液的目的是保证肯定量的微生物降解水中的有机物，接种液的量以使5天耗氧0.1mg/L以下为佳。

使用金属蒸馏器制备的蒸馏水作为稀释水时，应注意检查其中金属离子的含量，以免抑制微生物的繁殖和新陈代谢。

为保证稀释水中的溶解氧接近饱和，必要时可通入净化空气或纯氧，然后置于20℃培育箱中肯定时间，以使与空气中氧分压达到平衡。

稀释倍数的确定以培育第5天耗氧量大于2mg/L，剩余溶解氧大于1mg/L为原则。

稀释系数太大或太小都会导致测试失败。

而且由于BOD5的分析周期较长，一旦显现仿佛情况，也无法原封不动地补充。

测量某工业废水的BOD5时，可先测量其CODCr，然后参考现有水质相近废水的相关监测数据，初步确定待测水样的BOD5/CODCr值，然后计算BOD5的大致范围，并确定稀释系数。

bod5测定方法国标稀释与接种法国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，广泛应用于环境监测、水处理和水质评价等领域。

本文将介绍国标稀释与接种法的原理、步骤和操作注意事项。

国标稀释与接种法是一种基于微生物生长原理的检测方法。

其原理是将待测水样进行稀释，然后接种特定的微生物菌种，通过观察菌落的生长情况来判断水质的好坏。

具体操作步骤如下：1. 准备试剂和设备：包括培养基、蒸馏水、标准菌种、无菌培养皿、移液器、吸管等。

2. 取一定体积的待测水样，按照一定比例稀释。

稀释的目的是使水样中的微生物浓度降低到适合观察的范围，一般为10^-1到10^-6倍稀释。

3. 取稀释液，加入培养基中，制备接种液。

4. 取一定体积的接种液，均匀涂布在无菌培养皿上。

5. 将培养皿倒置，放在恒温培养箱中进行培养。

培养温度一般为35℃，培养时间根据不同的菌种和要求而定，一般为24小时到48小时。

6. 培养结束后，观察培养皿上菌落的形态、数量和颜色等特征。

根据国家标准或相关规定，判断水样的微生物浓度和水质等级。

在进行国标稀释与接种法时，需要注意以下几点：1. 所有使用的器皿、培养基和试剂必须经过高温高压灭菌处理，保证实验的无菌性。

2. 操作过程中要注意个人防护，避免接触待测水样和接种液。

3. 接种液的制备要严格按照国家标准和相关规定进行，避免人为误差。

4. 培养过程中要保持恒温恒湿的环境，避免外界环境对实验结果的影响。

5. 观察菌落时要仔细，根据国家标准或相关规定进行判断，避免主观误差。

国标稀释与接种法是一种简单、快速、经济的水质检测方法。

通过这种方法可以对水样中微生物的浓度和种类进行初步判断，为后续的水质评价和处理提供依据。

然而，需要注意的是，该方法只能对水质中的某些特定微生物进行检测，不能全面评价水质。

因此，在实际应用中，还需要结合其他水质检测方法和指标进行综合分析。

国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，具有操作简单、结果可靠的特点。

稀释与接种法生化需氧量（BOD5）指标的检测规程1 定义、原理1.1 定义生化需氧量（BOD5）：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。

1.2 方法原理将水样注满培养瓶，塞好瓶塞不通气，将培养瓶放入20±1℃的培养箱进行培养5天；培养前后分别测定水样的溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。

由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前应对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。

一般水质监测所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。

有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。

常用区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是：向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。

在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。

在测定BOD5的同时，需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证监测。

2 试剂除非另有说明，监测时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，监测用水均为蒸馏水或同等纯度的水。

水中含铜不应高于0.01mg/l，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。

2.1 接种水如监测样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水①城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。

（这种水在使用前应倾出上清液备用）。

②在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。

取上清液备用。

③含有城市污水的河水或湖水。

④污水处理厂出水。

⑤当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3～8km的水或所含微生物适宜于待分析并经化验室培养过的水。

稀释接种法测定水质BOD实验过程的若干注意事项摘要本文主要阐述了如何运用稀释接种法准确地测定水质BOD，介绍了采样、样品保存、试剂配制、方法选择、实验分析、数据报告及废液处理整个过程需要注意的若干方面。

关键词水质监测；释接种法；测定；BOD；注意事项0 引言所谓的BOD是生化需氧量（也称生化耗氧量）的英文单词（biochemical oxygen demand）的缩写，是指在一定条件下，微生物氧化分解水中的有机物所进行的生物化学过程中所消耗的氧的量，以氧的mg/L表示。

它是反映水体需氧污染物质含量的一个综合指标，也是评价水质好坏的一项重要参数，其值越高，说明水中耗氧性有机污染物质越多，污染程度也就越严重。

制糖、食品、造纸、皮革、纤维等工业废水及生活污水中存在的大量碳氢化合物、蛋白质、油脂、木质素等均为有机污染物，可经好氧菌的生物化学作用而分解。

若这类污染物质未经妥善处理大量排入水体，将造成水体严重贫氧，同时，有机物又可通过水中厌氧菌的分解引起腐败现象，产生甲烷、硫化氢、硫醇和氨等恶臭气体，使水体发臭变质，导致严重污染。

污水中各种有机物得到完会氧化分解的时间，总共约需一百天，为了缩短监测时间，一般将待测水样在20℃左右恒温培养，五天内的耗氧量为代表，称其为五日生化需氧量。

测定水质BOD的经典方法是稀释接种法，该法准确度高，但对测试条件的要求较高，实验时间长，实验步骤也较多，需要分析人员具备一定的操作经验。

1 内容1）采样：（1）取样之前应按规范将采样器和采样瓶等玻璃器皿彻底清洗，先用洗涤剂浸泡清洗，再用稀盐酸浸泡，最后用自来水、蒸馏水多次冲洗；（2）准备几套专用容器，分别用于一般污染物和特定污染物的监测，以减少交叉污染；（3）水样必须采用溶解氧瓶盛装，盛装时应沿瓶壁注入，装满瓶内空间，不得带入空气也不得留有气泡，并用水封口；（4）采样量不得少于500mL，且不可用同一瓶水样监测不同的污染项目；（5）取样的同时要做好记录，贴好标签；运输过程还要注意避免玻璃瓶之间互相碰撞，要尽量减少样品减少对光、热的暴露时间。

BOD5的检测方法一、实验目的1、了解生化需氧量（BOD5）。

2、掌握五日培养法测定生化需氧量的基本原理。

3、熟练掌握碘量法测定DO的操作技术。

4、明确化学需氧量和生化需氧量的相关性。

二、验原理1、五日培养法也称标准稀释法或稀释接种法。

2、其测定原理是：水样经稀释后，在20℃±1℃条件下培养5天，求出培养前后水样中溶解氧含量，二者的差值为BOD5。

如果水样五日生化需氧量未超过7mg/L，则不必进行稀释，可直接测定，多较清洁的河水就属于这一类水。

溶解氧测定方法一般用碘量法。

三、验仪器、设备1、20℃±1℃恒温培养箱；2、5～20L细口玻璃瓶；3、250mL溶解氧瓶：带有磨口玻璃塞；4、1000mL量筒；5、玻璃搅拌棒：棒长应比所用量筒高度长20cm，棒的底端固定一个直径比量筒直径略小，并有几个小孔的硬橡胶板；6、虹吸管：分取水样和添加稀释水。

四、实验试剂1、磷酸盐缓冲溶液：0.85g磷酸二氢钾（KH2PO4）、2.175g磷酸氢二钾（K 2HPO 4）、3.34g 磷酸氢二钠（Na 2HPO 4·7H 2O ）和0.17g 氯化铵（NH 4Cl ）溶于水中，稀释至100mL 。

此溶液的pH 应为7.2。

2、硫酸镁溶液：将2.25g 硫酸镁（MgSO 4·7H 2O ）溶于水中，稀释至100mL 。

3、氯化钙溶液：将2.75g 无水氯化钙溶于水中，稀释至100mL 。

4、氯化铁溶液：将0.025g 氯化铁（FeCl 3·6H 2O ）溶于水中，稀释至100mL 。

5、盐酸溶液（0.5mol/L ）：将4mL （）盐酸溶于水，稀释至100mL 。

6、氢氧化钠溶液（0.5mol/L ）：将2g 氢氧化钠溶于水，稀释至100mL 。

7、亚硫酸钠溶液（）：将0.1575g 亚硫酸钠溶于水，稀释至100mL 。

此溶液不稳定，需当天配制。

8.萄糖—酸标准溶液：萄糖（）和谷氨酸（HOOC -CH 2-CH 2-CHNH 2-COOH ）在103℃干燥1h 后，各称取15mg 溶于水中，移入100mL 容量瓶内并稀释至标线，混合均匀。

BOD测定仪的操作及注意事项bod测定仪如何使用是一些刚使用仪器时候会有的疑问，随着科技的进展BOD测定仪的显现带给我们环境检测带来极大的便利，这一个仪器能快速的测定出水样BOD，下面给大家带来BOD测定仪的操作及注意事项。

一、BOD测定仪电解池的准备1、用2mL左右饱和K2SO4注入洗净备用的电解池钨棒（指示负极）内充液腔内。

（内充液面离电极石英砂芯底部约70mm处）2、用2mL左右3mol/L硫酸溶液注入单铂丝（电解阳极）内充液腔内。

3、将电解池静置10min，察看内充液是否有明显漏失现象，如有应在试验前适时补充。

4、将电解池置于主机右侧搅拌器上。

5、用电解线红夹子接单铂丝引线端子（电解阳极）；6、用电解线黑夹子接双铂片引线端子（电解阴极）；7、用信号线红夹子接单铂片引线端子（指示正极）；8、用信号线黑夹子接钨棒引线端子（指示负极）。

9、将电解线和信号线插头分别插入主机后座对应插座内。

二、BOD测定仪开始操作：1、在干净消解杯内加入45mL蒸馏水和17mL浓硫酸，冷却后，加入7mL的硫酸铁溶液，加入1.0mLK2Cr2O7溶液，并放入搅拌子。

2、将消解杯置于搅拌器凹板上，按仪器操作步骤中“电解池的准备”；连接好电极。

3、打开电源，调整搅拌器调整电位器，选择适当的搅拌速度（电解液起旋，但无气泡）。

4、按“空白/样品”；使仪器处于空白档，选择电解电流为“20mA”；。

5、按“启动”；键，仪器自动电位补偿后，电解指示灯亮，仪器开始电解并作信号时间图，到尽头后，蜂鸣器报警，电解电流自动切断，显示COD值。

6、舍去第一次数据后在同一消解杯中再加入1mLK2Cr2O7标准溶液进行测定，重复3～4次，重现性误差在±2%以内，平均数据在“40”左右，说明仪器工作正常，且仪器精度及重现性均能达到要求。

BOD测定仪的注意事项1、玻璃器皿应彻底洗净。

先用洗涤剂浸泡清洗，然后用稀盐酸浸泡，最后依次用自来水、蒸馏水洗净。

HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法一、引言二、仪器与试剂2.1 仪器：常见的实验室分析仪器如培养箱、恒温槽、平衡瓶等。

2.2 试剂材料：主要包括硫酸、盐酸、钠硫代硫酸钠、亚硝酸钠、硝酸钠、硝酸亚铁等。

三、样品处理3.1 样品采集：按照标准要求，在适当的位置采集水样。

3.2 样品保存：采集的水样需进行冷藏保存，并在24小时内进行测定。

四、实验步骤4.1 样品稀释：将样品与适量的稀释水按比例混合，使其BOD5浓度在20～200mg/L之间。

4.2 接种液的制备：根据实际需要，准确称取合适的细菌接种液，通常为2mL左右。

4.3 接种：将接种液加入已稀释的样品中并充分混合。

4.4 容器准备：将接种后的样品倒入装有塔形或柱形瓶的容器中，注意容器的密封性。

4.5 曝气：通过定时连续通入氧气或用专用的密闭曝气系统对样品进行曝气处理，以提供微生物呼吸所需的溶解氧。

4.6 控制条件：将容器置于恒温槽中，在20±1℃条件下进行培养，培养时间为五日。

4.7 氧的测定：在培养结束后，使用溶解氧电极或其他适当的方法测定样品中剩余氧的浓度。

五、结果的记录与计算5.1 记录容器的初始和末端溶解氧浓度，并计算其差值。

5.2 根据实际情况，可以通过一定的修正计算方法，得到BOD5的浓度。

5.3 结果的单位为mg/L。

六、实验注意事项6.1 样品应在24小时内进行测定。

6.2 样品与稀释水的比例应根据实际情况调整，以保证BOD5浓度在标准范围内。

6.3 曝气过程中，需注意氧气的充分供应，并注意容器的密封性。

6.4 实验过程中应注意安全，避免操作失误导致意外事故的发生。

结论通过稀释与接种法可以准确测定水样中的BOD5浓度，从而评价水体有机污染程度。

实验中需严格按照标准要求进行操作，以保证结果的准确性和可比性。

该方法操作简单、操作时间较短，适合用于水质监测工作中。

BOD测定仪如何校准及测量注意事项1、标准溶液的制备葡萄糖谷氨酸标准溶液：将葡萄糖（C6H12O6）和谷氨酸（HOOCCH2CH2CHNH2COOH）在103℃干燥1小时后，各取150mg溶于稀释水，加510mL接种液，然后用稀释水稀释至1000mL，混匀。

2、仪器校准取葡萄糖谷氨酸标准溶液167mL，选择0～400mg/L量程，按BOD5检测步骤操作。

检测到的BOD浓度应在180mg/L至230mg/L之间。

否则需要检查接种液或试验过程是否有问题，仪器使用是否有问题。

稀释水应预先保持20℃的恒温，并曝气或搅拌使溶解氧饱和。

3、注意事项①装瓶时水样温度为20℃左右。

不要偏离太多。

②为保证水中的溶解氧含量，应将水样鼓泡曝气1小时或置于敞口烧杯中用磁力搅拌器搅拌半小时以上，使水样的溶解氧可以饱和。

影响bod测定仪测量的因素1、溶解氧由于测试温度设定在20℃，冬季采集的样品会显现溶解氧过饱和，夏季采集的样品在20℃时可能会显现溶解氧欠饱和。

因此，这些样品应在BOD5测定前进行搅拌和曝气，以便使溶解氧调整至约20℃的饱和点。

2、PH值测试水样的pH值应调整为6.7～7.5（pH7.2）。

BOD5读数的下降可能是由于被测样品的pH值超出此范围。

对于含有大量酸或碱的样品，BOD5读数可能低于实际含量。

酸性或碱性水样应用适当浓度的氢氧化钠溶液或稀盐酸中和。

所用调整溶液的体积不应超过水样体积的0.5%。

假如超过，可以加添调理液的酸碱浓度，以削减调理液的体积。

3、温度试验时将主机放置在20℃±１℃的培育箱中。

BOD的测定也能超出这一温度范围，例如，有试验证明在35℃测定BOD所需要的时间可以缩短为2.5天，其测定结果与五日20℃相像。

提高温度所获得的BOD值与五日20℃条件下测定的结果有很好的相关性。

假如在采样时样品温度超过20℃，或样品温度不足20℃，可将样品放在培育箱中恒温。

在样品测定前要求对样品进行处理。

bod稀释法
BOD（生化需氧量）是指水中可以被微生物在一定条件下降解的有机物所消耗的氧气量，是衡量水体有机物质污染程度的一种指标。

在实验室中，要测定水样的BOD，则需要使用BOD稀释法，下面我们来详细讲解BOD稀释法的步骤。

步骤一：取样
首先需要去采集要测试的水样，这里要注意取样的地点和方式，要在水体流动情况下取，可以使用专业的水样采集器或手动取样。

步骤二：制样
将取得的水样，在洁净的条件下进行制样，拿一个无菌瓶，先将瓶放入水中，填满瓶内约2/3，然后快速拧紧瓶盖，防止空气进入。

步骤三：设定消耗氧气量
使用自来水或蒸馏水，将水样进行稀释，将水样分别稀释10倍、100倍和1000倍。

步骤四：让水样进行自我消耗氧气量
将制样好的水样分别倒入3个不同的烧结瓶中，插上汞柱，封闭好瓶口，放置在20℃左右的恒温振荡器中，在5天（120小时）的时间范围内，可达到最大稳定需氧量消耗。

步骤五：测量剩余氧气量
在5天（120小时）后，通过溶氧仪测定烧结瓶内溶解氧的质量，计算出生化需氧量（BOD）的数值。

步骤六：计算BOD值
根据稀释水样的倍数，分别乘上BOD值，得到每升原水的BOD值，再根据实际水样的含量，通过计算得出每升水样中的BOD值。

总之，BOD稀释法是一种用于测定水体污染的方法，其步骤繁琐、技术要求高，但通过BOD稀释法可以得出科学客观的数据，为水环境保护提供依据。