稀释接种法

BOD5的测定（稀释接种法）BOD5，即5天生化需氧量（也称为生化需氧量-5天），是自然水体和生活废水的有机质污染指标之一。

BOD5测定是指在5天内，在一定的温度和pH值下，微生物在无氧条件下将有机物氧化成为二氧化碳和水的化学量测定方法。

其结果反映了水中有机物的含量。

BOD5测定的原理是：通过将水样稀释后与特定的微生物进行接种，并在一定的条件下培养，使微生物对有机物进行氧化分解，用电化学分析仪器测定分解过程中氧的消耗量，计算出单位体积水样中有机物的含量。

BOD5测定中的稀释接种法是一种常见的测定方法，其主要步骤如下：1. 制备好试样和质量达标的无菌生理盐水，生理盐水中含有必需的微量元素和氮源，可以提供微生物的生长所需的营养物质。

2. 将水样进行必要的预处理，即去除悬浮物、沉淀物等大颗粒物质，并用筛网过滤掉较小的颗粒物质，得到清洁、透明的水样，以便稀释和接种。

3. 根据水样的不同特性和预期的BOD5值，选择适当的稀释倍数，将水样用无菌生理盐水稀释到不同浓度的试样中。

试样的总体积通常为300~350ml，并且每个稀释倍数至少需要重复3个。

4. 取少量的无菌水，将试管中的试样进行接种。

生物接种可以选择一些常见的微生物，比如肠杆菌和亚硝酸盐还原菌。

为了更好地模拟水体中的自然情况，可以采用在野外水域中分离出的有机物降解菌进行接种。

5. 分别将接种后的试样置于5天内，36 ± 1℃恒温搅拌培养，以促进微生物的快速生长和有机物的氧化分解。

6. 在5天后，再次测定水样中溶解氧的浓度，通过差值计算出BOD5值。

计算公式如下：BOD5= (T1-T2)×df/V其中，T1为初始溶解氧浓度，mg/L；T2为5天后的溶解氧浓度，mg/L；df为稀释倍数；V为试样体积，ml。

通过稀释接种法进行BOD5测定，可以掌握水体中有机物的污染情况，评估水质和水环境的健康状态。

在实际应用中，为了保证测定结果的准确性和可靠性，还需要进行控制实验（比如负对照实验和阳性对照实验）和重复测定。

bod5测定方法国标稀释与接种法国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，广泛应用于环境监测、水处理和水质评价等领域。

本文将介绍国标稀释与接种法的原理、步骤和操作注意事项。

国标稀释与接种法是一种基于微生物生长原理的检测方法。

其原理是将待测水样进行稀释，然后接种特定的微生物菌种，通过观察菌落的生长情况来判断水质的好坏。

具体操作步骤如下：1. 准备试剂和设备：包括培养基、蒸馏水、标准菌种、无菌培养皿、移液器、吸管等。

2. 取一定体积的待测水样，按照一定比例稀释。

稀释的目的是使水样中的微生物浓度降低到适合观察的范围，一般为10^-1到10^-6倍稀释。

3. 取稀释液，加入培养基中，制备接种液。

4. 取一定体积的接种液，均匀涂布在无菌培养皿上。

5. 将培养皿倒置，放在恒温培养箱中进行培养。

培养温度一般为35℃，培养时间根据不同的菌种和要求而定，一般为24小时到48小时。

6. 培养结束后，观察培养皿上菌落的形态、数量和颜色等特征。

根据国家标准或相关规定，判断水样的微生物浓度和水质等级。

在进行国标稀释与接种法时，需要注意以下几点：1. 所有使用的器皿、培养基和试剂必须经过高温高压灭菌处理，保证实验的无菌性。

2. 操作过程中要注意个人防护，避免接触待测水样和接种液。

3. 接种液的制备要严格按照国家标准和相关规定进行，避免人为误差。

4. 培养过程中要保持恒温恒湿的环境，避免外界环境对实验结果的影响。

5. 观察菌落时要仔细，根据国家标准或相关规定进行判断，避免主观误差。

国标稀释与接种法是一种简单、快速、经济的水质检测方法。

通过这种方法可以对水样中微生物的浓度和种类进行初步判断，为后续的水质评价和处理提供依据。

然而，需要注意的是，该方法只能对水质中的某些特定微生物进行检测，不能全面评价水质。

因此，在实际应用中，还需要结合其他水质检测方法和指标进行综合分析。

国标稀释与接种法是一种常用的水质检测方法，具有操作简单、结果可靠的特点。

HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法1.引言1.1 目的旨在规定水质中五日生化需氧量(BOD5)的测定方法，采用稀释与接种法进行测定。

1.2 术语定义1.2.1 五日生化需氧量(BOD5)指在规定的条件下，细菌生物对有机物所需的氧量。

1.2.2 稀释与接种法一种测定水质中BOD5的方法，通过将待测水样稀释后与BOD5基准溶液接种，测定不同时间间隔下的溶液中溶解氧的消耗量。

2.范围2.1 适用范围本方法适用于表征水质中有机物的生化需氧量。

2.2 不适用范围本方法不适用于含有高浓度或难以接种的水样。

3.装备与试剂3.1 装备所需装备，包括但不限于：溶氧仪、稀释器、恒温培养箱等。

3.2 试剂所需试剂，包括但不限于：BOD5基准溶液、氨氮缓冲溶液等。

4.操作步骤4.1 样品采集与处理详细描述样品采集的步骤，包括样品的选择、采集容器的准备等。

4.2 稀释与接种详细描述稀释与接种法的步骤，包括待测水样的稀释比例、接种基准溶液的准备等。

4.3 培养与测定详细描述培养与测定的步骤，包括培养温度、培养时间、测定溶解氧的方法等。

5.结果计算与报告详细描述结果计算与报告的方法，包括BOD5值的计算公式、结果的单位表示等。

6.质量控制详细描述质量控制的方法，包括质控样的使用、质控结果的判定等。

7.附件所涉及的附件如下：- 附件1：某水样BOD5测定数据记录表- 附件2：BOD5基准溶液配制方法8.法律名词及注释所涉及的法律名词及注释如下：- 法律名词1：注释1- 法律名词2：注释29.遇到的困难及解决办法在实际执行过程中，可能遇到的困难及解决办法如下：- 困难1：描述困难1的情况，并提供相应的解决办法。

- 困难2：描述困难2的情况，并提供相应的解决办法。

参考文献：[1] 相关文献1的引用[2] 相关文献2的引用附录：- 附录A：常用实验室设备清单- 附录B：常用试剂列表以上为HJ505-2009 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法的详细文档模板范本。

稀释与接种法生化需氧量（BOD5）指标的检测规程1 定义、原理1.1 定义生化需氧量（BOD5）：在规定条件下，水中有机物和无机物在生物氧化作用下所消耗的溶解氧（以质量浓度表示）。

1.2 方法原理将水样注满培养瓶，塞好瓶塞不通气，将培养瓶放入20±1℃的培养箱进行培养5天；培养前后分别测定水样的溶解氧浓度，由两者的差值可算出每升水消耗掉氧的质量，即BOD5值。

由于多数水样中含有较多的需氧物质，其需氧量往往超过水中可利用的溶解氧（DO）量，因此在培养前应对水样进行稀释，使培养后剩余的溶解氧（DO）符合规定。

一般水质监测所测BOD5只包括含碳物质的耗氧量和无机还原性物质的耗氧量。

有时需要分别测定含碳物质耗氧量和硝化作用的耗氧量。

常用区别含碳和氮的硝化耗氧的方法是：向培养瓶中投加硝化抑制剂，加入适量硝化抑制剂后，所测出的耗氧量即为含碳物质的耗氧量。

在5天培养时间内，硝化作用的耗氧量取决于是否存在足够数量的能进行此种氧化作用的微生物，原污水或初级处理的出水中这种微生物的数量不足，不能氧化显著量的还原性氮，而许多二级生化处理的出水和受污染较久的水体中，往往含有大量硝化微生物，因此测定这种水样时应抑制其硝化反应。

在测定BOD5的同时，需用葡萄糖和谷氨酸标准溶液完成验证监测。

2 试剂除非另有说明，监测时所用试剂均为符合国家标准的分析纯试剂，监测用水均为蒸馏水或同等纯度的水。

水中含铜不应高于0.01mg/l，并不应有氯、氯胺、苛性碱、有机物和酸类。

2.1 接种水如监测样品本身不含有足够的合适性微生物，应采用下述方法之一，以获得接种水①城市废水，取自污水管或取自没有明显工业污染的住宅区污水管。

（这种水在使用前应倾出上清液备用）。

②在1L水中加入100g花园土壤，混合并静置10min。

取上清液备用。

③含有城市污水的河水或湖水。

④污水处理厂出水。

⑤当待分析水样为含难降解物质的工业废水时，取自待分析水排放口下游约3～8km的水或所含微生物适宜于待分析并经化验室培养过的水。

对稀释接种法测定BOD5影响因素的剖析稀释接种法是测定水体中生物化学需氧量（BOD5）的一种常用方法，该方法通过将水样稀释到一定浓度后，接种适量的细菌进行培养，然后测定培养液中溶解氧的变化，以此来反映水体中的有机污染物的含量及其对水体生态系统的影响程度。

影响BOD5测定结果的主要因素可以分为水质因素、细菌因素以及实验条件因素等。

首先，水质因素是影响BOD5测定结果的主要因素之一、水样中的有机物质种类和浓度将直接影响到BOD5测定的结果。

不同种类、浓度的有机物质对细菌的生长代谢能力有不同的影响程度，从而导致测定结果的差异。

此外，水样中的微量金属、溶解氧、氨氮等物质也会干扰BOD5测定结果。

其次，细菌因素是影响BOD5测定结果的关键因素之一、细菌的种类和数量将直接影响到BOD5测定的准确性和可靠性。

适合用于BOD5测定的细菌应具有较高的生长速度和较宽的适应范围，即能适应不同水质和有机物质的细菌。

同时，细菌的存活情况也会对BOD5测定结果产生影响，因此，细菌的培养条件和存活情况需要严格控制。

最后，实验条件因素也是影响BOD5测定结果的重要因素之一、实验条件包括培养温度、培养基营养成分和培养时间等。

培养温度应合适，通常为20℃，可以使细菌的生长速率达到较高水平。

培养基的选择和营养成分的添加应根据水样的特性进行调整，以保证细菌能够正常生长。

此外，培养时间也需要准确控制，通常为5天，过短的培养时间会导致测定结果偏低，过长的培养时间则会导致测定结果过高。

除了上述因素外，还有一些其他因素也会对BOD5测定结果产生一定的影响。

例如，搅拌的速度和时间、溶解氧的测定方法和水样的pH值等。

这些因素的影响与具体的实验设计和操作有关，需要在具体实验中根据实际情况加以考虑和控制。

综上所述，稀释接种法测定BOD5受到多种因素的影响，包括水质因素、细菌因素以及实验条件因素。

只有全面认识和有效控制这些因素，才能得到准确和可靠的BOD5测定结果，从而更好地评估水体中的有机污染物程度及其对水环境的影响。

HJ505-2022 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法文档模板：HJ505-2022 水质五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法1. 引言旨在描述水质五日生化需氧量(BOD5)的测定方法，采用稀释与接种法。

该方法合用于对水体中的有机污染物进行定量分析，用于水质监测、环境评估以及污染排放指标的测定。

2. 合用范围本方法合用于各类水体样品，包括但不限于河流、湖泊、水库、地下水、海水等。

3. 原理首先，将待测样品进行适当稀释，以保证对待测有机物的浓度进行合理测定。

然后，通过接种适量的活动污泥，将样品中的有机物利用微生物进行降解，产生的需氧量则可用于测定。

4. 试剂与仪器设备4.1 试剂所需的试剂及其规格。

4.2 仪器设备所需的仪器设备及其规格。

5. 样品处理5.1 样品的采集描述样品采集的注意事项，包括采样点的选择、采样容器的准备等。

5.2 样品的保存与保存时间描述样品的保存条件和保存时间要求。

5.3 样品的稀释描述样品稀释的方法和比例。

6. 实验步骤6.1 样品预处理描述样品预处理的步骤，包括过滤、背景测定等。

6.2 接种活性污泥描述接种活性污泥的步骤和接种量的确定。

6.3 孵育条件及时间描述孵育条件和孵育时间的确定。

6.4 样品的BOD5测定描述样品的BOD5测定步骤，包括样品的取样、添加试剂、反应条件控制等。

7. 结果计算与分析7.1 数据处理描述BOD5测定结果的计算方法和数据处理的步骤。

7.2 结果表达描述结果的表达方式，如单位、精度等。

8. 质量控制描述质量控制的要求，包括质控样品的使用和分析结果评价等。

9. 安全注意事项描述实验过程中的安全注意事项，包括使用试剂的注意事项、操作仪器的注意事项等。

10. 附件所涉及的附件如下：1. 附件1: 实验记录表格2. 附件2: 数据处理表格11. 相关法律名词及注释如下所涉及的法律名词及注释：1. 法律名词1：注释12. 法律名词2：注释212. 实际执行中可能遇到的艰难及解决办法如下在实际执行过程中可能遇到的艰难及解决办法：1. 艰难1：解决办法12. 艰难2：解决办法2注：仅供参考，具体实施过程中应根据实际情况进行调整和修改。

稀释接种法测BOD1方法与原理生化需氧量是指在规定条件下，微生物分解存在水中的某些可氧化物质，特别是有机物所进行化学过程中消耗溶解氧的量。

BOD5是指在20 +1 ℃培养5 d分别测定样品培养前后的溶解氧，二者之差即为BOD5值，以氧的mg/L表示，测试范围2 mg/L～6000 mg/L。

2仪器2.1恒温培养箱（20±1 ℃）2.2 300 mL细口玻璃瓶2.3 1000 mL量筒2.4玻璃搅棒棒的长度长于普通玻璃棒，在棒的底端固定一个直径比量筒底小，并带有几个小孔的硬橡胶板。

2.5溶解氧瓶：300 mL，带有磨口玻璃塞并且有供水封用的钟形口。

2.6 1、2、5、10、20 mL吸量管：供分取水样和添加稀释水用。

3 试剂3.1磷酸盐缓冲溶液将8.5 g磷酸二氢钾，21.75 g磷酸氢二钾，33.4 g七水合磷酸氢二钠和1.7 g氯化铵溶于水中，稀释至1000 mL，此溶液的pH值应为7.2。

3.2硫酸镁溶液将22.5 g七水合硫酸镁溶于水中，稀释至1000 mL。

3.3氯化钙溶液将27.5 g无水氯化钙溶于水，稀释1000 mL。

3.4氯化铁溶液将0.25 g六水合氯化铁（FeCl3•6H2O）溶于水中，稀释至1000 mL。

3.5盐酸溶液将40 mL（=1.18 mg/L）盐酸溶于水，稀释至1000 mL。

3.6氢氧化钠溶液（0.5 mol/L）将20 g氢氧化钠溶于水中，稀释至1000 mL。

3.7亚硫酸钠溶液( =0.025 mol/L)将1.575 g亚硫酸钠溶于水中，稀释至1000 mL。

（此溶液不稳定，需每天配制。

）3.8葡萄糖-谷氨酸标准溶液将葡萄糖和谷氨酸在103 ℃干燥1 h后，各称取150 mg溶于水中，移入1000 mL容量瓶内稀释至标线，混合均匀。

此标准溶液临用前配制。

3.9稀释水在5-20 L玻璃瓶内装入一定量水。

控制水温在20 ℃左右，然后用无油空气压缩机，将吸入的空气经活性碳吸附管及洗涤管后，导入稀释水内曝气2-8 h。

水质-五日生化需氧量(BOD5)的测定稀释与接种法
什么是BOD5？
BOD5，也就是五日生化需氧量（Biochemical Oxygen Demand），是一种用来衡量水中有机物质分解速度的指标。

通俗地说，就是测量水中的有机物质被微生物分解所消耗的氧气量。

这个指标可以评估污水、废水以及天然水体的水质。

BOD5的测定
BOD5的测定需要进行水样稀释和接种操作。

下面分别介绍这两个步骤。

水样稀释
为了保证BOD5的测定准确性，需要将水样进行稀释，通常是以1:5或1:10
的比例稀释。

具体的步骤如下：
1.取一定量的水样，根据实际情况选择合适的量，通常是10 mL或20
mL；
2.分别加入已经在恒温条件下预先接种好的含有适当微生物的生物培养
液；
3.用去离子水或蒸馏水进行稀释，使稀释比例达到1:5或1:10；
4.用漩涡振荡器将混合液充分混匀，然后装入BOD5需氧瓶中。

接种
接种是指在水样中向其中添加某些特定微生物，常用的有镰刀菌和链球菌等。

作用是加速水中的有机物质分解，提高BOD5的测定准确性。

接种的具体步骤如下：
1.在稀释过的水样中加入0.5 ml左右的包含有大量微生物的生物培养
液，然后用漩涡振荡器均匀混合，放入BOD5需氧瓶中；
2.氧化还原指示液（常用的指示液为甲基橙）滴入需氧瓶中，然后将其
密封，放入常温下放置5天。

BOD5的测量是一种水质评价的标准方法，可以作为污水、废水处理以及水环境保护的重要依据。

通过对稀释和接种方法的认真实施，可以保证测定结果的准确性和可靠性。

五日生化需氧量稀释和接种法质量控制评价五日生化需氧量（BOD5）是一个重要的水质指标，用于评估水体中有机物污染的程度。

BOD5是指在规定的条件下，微生物在五天内分解水中某些可氧化物质，特别是有机物，所消耗的溶解氧的量。

这个指标对于了解水体的健康状态，预测水体中生物的生存情况，以及评估水体的自净能力等方面都具有重要意义。

在BOD5的测定中，稀释与接种法是一种常用的方法。

这种方法适用于含有较多有机物的地面水、工业废水和生活污水的测定。

通过稀释，可以将样品中的有机物浓度降低到适宜的程度，保证降解过程在有足够溶解氧的条件下进行。

接种则是为了引入能够分解废水中有机物的微生物，特别是在不含或少含微生物的工业废水中。

对于使用稀释与接种法测定BOD5的质量控制，以下几点是重要的：1. 准确控制稀释倍数：根据水样的具体情况，选择合适的稀释倍数。

如果BOD5未超过6mg/L，则不必稀释，可直接测定。

对于高浓度的废水，需要进行适当的稀释，以使BOD5在适宜的范围内。

2. 保证接种液的质量：接种液的质量对于测定结果的准确性至关重要。

应按照国家标准制备接种液，并保证其菌种丰富、活性良好。

如果使用购买的接种液，应选择质量可靠的产品，并对其性能进行验证。

3. 严格控制实验条件：BOD5的测定需要在恒温条件下进行，温度波动不应超过±1℃。

同时，要保证充足的溶解氧供应，以支持微生物的活性。

4. 实验操作的规范性：在实验过程中，应按照标准的操作程序进行样品处理、接种、培养和测定等步骤。

操作人员应经过培训，熟悉实验流程和注意事项，避免操作失误对结果的影响。

5. 实验室内的质量控制：定期进行实验室内的质量控制，包括空白实验、平行样测定、加标回收实验等。

这些质量控制措施有助于发现实验中的异常情况，及时纠正误差，保证测定结果的准确性。

6. 定期校准仪器和设备：用于BOD5测定的仪器和设备应定期进行校准，确保其准确性和稳定性。

校准过程中发现的问题应及时处理，以保证测定结果的可靠性。