GGT 文档,γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒标准操作规程

γ-谷氨酰基转移酶测定的操作规程1、用途：测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。

2、检验原理：其在GGT的作用下，生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸，后者在405nm波长处有最大吸收，其生成量与血浆中GGT活性成正比。

根据测定405nm波长下吸光度增加的速率，即可测出血清中GGT活性。

3、适用仪器：AU480奥林巴斯全自动生化分析仪。

4、样本要求：4.1、样本种类：新鲜无溶血血清。

4.2、样本采集：常规静脉采血约3ml，不抗凝。

置普通管中，或采用含有分离胶的真空采血管。

4.3、样本干扰：对反映吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。

4.4、样本保存：血清样本2℃—8℃可稳定7天，-20℃可保存一个月，忌反复冻融。

5、检测方法：5.1、试剂的准备：试剂开瓶即可使用。

5.2、检测步骤：1cm）2、全自动生化分析仪操作步骤：参数设置→试剂装载→校准→质控→样品加载→测定→结果审核→报告。

5.3、校准：用K因素进行试剂空白校准，也可使用Roche公司校准品进行校准操作，当试剂更换批号、出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。

5.4、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。

6、参考范围：（各医院应该根据本地区实际情况建立自己的参考范围）7、注意事项：7.1、试剂具有一定的酸碱性，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。

7.2、使用后的器具应按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处乱扔，防止环境污染和二次使用。

7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品，或在运输贮存中没有按照说明书要求进行维护的试剂，不可使用。

7.4、试剂只用于体外诊断。

8、参考文献：陆永绥、李清华、张伟民主编，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江大学出版社，2006.王惠萱、李雪梅、王冈，临床检验操作手册，云南科技出版社，2008.中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程（第三版），东南大学出版社，2006。

谷氨酰转移酶测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。

2 实验原理L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐在上述反应中， 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比，通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。

3 标本：3.1 病人准备：无特殊。

3.2 类型：血清或EDTA血浆。

3.3 标本存放：室温可保存8小时；2～8℃可保存3天；-20℃保存至少可稳定1周。

3.4 标本运输：常温条件下保存运输。

3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。

4 实验材料4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：Tris缓冲液100mmol/L甘氨酰甘氨酸 125mmol/L试剂2（R2）：Tris缓冲液100mmol/LL-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺14.5mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。

4.1.3 试剂稳定性与贮存:2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。

4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。

4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠为防腐剂。

不可入口！避免接触皮肤及粘膜。

应采取必要的预防措施使用试剂。

4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。

4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。

5 仪器AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪6 操作步骤6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。

γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）测定试剂盒（GCANA底物法）适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。

1.1 产品规格试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5；试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1；试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2；试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1；试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4；试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1；试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2；试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1；试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3；试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1；试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1；试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2；试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1；试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1；试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1；试剂1:40mL×1，试剂2:；8mL×1；试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1；试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1；1.2 组成成分该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。

1.2.1试剂组成试剂1: Tris缓冲溶液≥50.0mmol/L 双甘肽≥100.0mmol/L 试剂2：L-g-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺≥3.0mmol/L2.1 外观a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。

b) R2应为淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。

γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号:UPLC-MS-4494规格:50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体50mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶4℃保存试剂二液体12.5mL×1瓶4℃保存试剂三液体44.5mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、工作液（在试剂一瓶中配制）：临用前配制，把试剂二倒入试剂一瓶中，充分溶解（室温过低时可以40℃水浴促进溶解）；然后把试剂三倒入试剂一瓶中，混匀后室温保存。

产品说明：γ-GT是γ-谷氨酰循环中的关键酶，催化GSH降解。

γ-GT催化GSH或者其他γ-谷氨酰基化合物上的γ-谷氨酰基转移到受体。

也可以催化GSH和其他γ-谷氨酰基化合物的水解，产生谷氨酸盐，在细胞外谷胱甘肽新陈代谢中起了重要的作用。

γ-GT催化谷氨酰对硝基苯胺中γ-谷氨酰基转移给N-甘氨酰甘氨酸，生成对硝基苯胺，在405nm有特征光吸收；通过测定405nm光吸收增加速率，来计算γ-GT酶活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；10000rpm4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

2、组织：称取约0.1g样本，加提取液1.0mL充分研磨，于4℃，10000rpm离心15min，取上清液待测。

血清γ-谷氨酰转移酶(GGT)测定1.实验原理GGTGlupa-C+gly-gly ——→Glu-gly-gly+5-氨基-2-硝基苯甲酸在波长405nm处测定5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率，计算出GGT活力。

2. 标本：2.1 病人准备：新鲜血清，采血后应及时分离，避免溶血。

2.2 类型：血清、肝素或EDTA血浆，应避光保存。

3. 标本存放：15～25℃保存可稳定2天；2～8℃保存可稳定7天；-20℃保存可稳定3个月，如冰冻保存，不可反复冻融！。

4. 标本运输：冰冻条件下保存运输。

5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染、脂血等存运输的标本。

6. 实验材料6.1 试剂：中生谷氨酰转移酶试剂盒（试剂1＋试剂2）6.1.1 试剂组成6.1.3 试剂稳定性与贮存试剂避光保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。

试剂有效期为12个月。

试剂必需避光保存。

试剂不可冰冻。

6.1.4 变质指示：当试剂空白吸光率A405nm(1.0cm)>0.8，或有混浊和可见颗粒时，请不要再使用。

6.1.5 注意事项：试剂请勿直接接触皮肤、眼睛，如有接触，请用大量清水清洗。

请勿吞服。

6.2 校准品：使用Cfas提供的专用校准品对自动分析仪进行校准，参见生化检验校准品和质控品.SOP文件6.3 质控品：参见生化检验校准品和质控品.SOP文件7. 仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪8. 操作步骤8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪项目测定参数.SOP文件。

8.2仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU640生化分析仪操作规程.SOP 文件。

9. 检验结果的判断与分析10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。

质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。

11. 计算方法：以OLYMPUS多项校准品校准仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果无需手工计算，以U/L报告。

γ-谷氨酰基转移酶（GGT）测定试剂盒(GCANA底物法)适用范围：本试剂盒用于体外定量测定人血清中的γ-谷氨酰基转移酶（GGT）的活性。

1.1包装规格1.2主要组成成分试剂1主要组分：双甘肽125mmol/L 试剂2主要组分：L-γ-谷氨酰-3-羧基-对硝基苯胺14mmol/L2.1外观2.1.1试剂1应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。

2.1.2试剂2应为无色或淡黄色透明溶液，无混浊，无未溶解物。

2.2装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3试剂空白2.3.1试剂空白吸光度：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度值，应不大于0.7。

2.3.2试剂空白吸光度变化率：GGT试剂盒在波长395～415nm处测定试剂的空白吸光度变化率，每分钟的变化值应不大于0.005。

2.4分析灵敏度测试50U/L的γ-谷氨酰基转移酶时，吸光度变化率应不小于0.01。

2.5准确度测定国家标准物质GBW（E）090283，相对偏差应不超过15%。

2.6精密度2.6.1重复性重复测试（50±5）U/L的样本，所得结果的变异系数CV应不大于5%；2.6.2批间差测试（50±5）U/L的样本，所得结果的批间相对极差应不大于10%。

2.7线性范围GGT试剂盒在（10，450）U/L范围内，线性相关系数（r）应不小于0.990；在(10，50］U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±5U/L；在(50，450)U/L区间内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原包装的试剂盒在2℃～8℃避光保存，有效期为12个月。

在GGT试剂盒有效期满后2个月内，分别检测2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7项，结果应符合各项目的要求。

SOP标准操作程序GGT γ-谷氨酰转移酶（货号：OSR6119，OSR6219）实验原理：γ-谷氨酰转移酶的测量用于诊断和治疗肝脏疾病，如，酒精性肝硬变和初级和次级肝肿瘤。

升高的血清γ-谷氨酰转移酶（GGT），有时称作GGTP（EC2.3.2.2）可出现在所有的肝脏疾病中。

在检测阻塞性黄疸，胆管炎和胆囊炎时，它比碱性磷酸酶，转氨酶和亮氨酸氨肽酶（LAP）更灵敏。

GGT水平在肝病中升高较快，比LAP或5’-核苷酸酶水平有较高的值1。

中等程度的升高在传染性肝炎中可看到。

但是，升高的GGT水平也可以在慢性酒精中毒，糖尿病和某些神经系统疾病中注意到。

GGT的正常水平可出现在骨骼疾病中，因此，血清GGT可用于确定疾病是骨骼的，还是肝胆的。

方法奥林巴斯AU640 GGT程序是基于Szasz程序的修改方法2，3。

GGT催化水溶性底物，γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺中的γ-谷氨酰到甘氨酰甘氨酸中，生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。

在410/480nm时吸光度的改变是由于5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的形成，它的形成与标本中GGT的活性成正比。

GGTL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+ 甘氨酰甘氨酸-------------﹥L-γ-谷氨酰-甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐标本：病人准备：无特殊要求。

类型：标本最好是无溶血的血清。

如果必须使用血浆，推荐的抗凝剂是EDTA。

肝素化血清可能会在反应混合物中变得浑浊；柠檬酸盐，草酸盐和氟化物可使活性降低10%到15%。

标本稳定性：GGT测定应在标本收集后尽快进行。

血清中的GGT在4℃下可稳定一月，在-20℃稳定一年4。

仪器与材料:仪器：奥林巴斯AU640生化分析仪材料：奥林巴斯AU640 γ-谷氨酰转移酶（GGT）参与反应成份的最终浓度：Tris缓冲液（pH7.95）100mmol/L甘氨酰甘氨酸100 mmol/LL-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 4.0 mmol/L其中含有保护剂。

γ- 谷氨酰基转移酶检测试剂盒（速率法）说明书[产品名称] 通用名称：γ- 谷氨酰基转移酶检测试剂盒（速率法）英文名称：γ-Glutamyl Transpeptidase Assay Kit(γ-GGT)[包装规格]2×200Tests；2×400Tests；R1:4×60ml、R2:4×15ml；R1:4×80ml、R2:4×20ml；R1:4×120ml、R2:2×60ml；R1:8×40ml、R2:2×40ml；R1:4×50ml、R2:2×25ml；R1:2×40ml、R2:2×10ml；R1:4×50ml、R2:4×50ml。

[预期用途] 用于体外定量检测人血清中的γ- 谷氨酰基转移酶的活力。

[检验原理]γ-GGTγ-L-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺+ 甘氨酰甘氨酸γ-L-谷氨酰甘氨酰甘氨酸+ 2-硝基-5-氨基苯甲酸[主要组成成份]由试剂R1和试剂R2组成。

试剂R1：三羟甲基氨基甲烷(Tris)缓冲液、甘氨酰甘氨酸；试剂R2：γ-L-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺。

[储存条件及有效期] 试剂在2℃～8℃无腐蚀性气体中避光储存，若无污染，可稳定至失效期。

有效期12个月。

开瓶后2℃～8℃可稳定30天。

备注：生产日期及失效日期见外盒或瓶标签。

[适用仪器]日立7170、奥林巴斯AU640、贝克曼LX-20全自动生化分析仪。

[样本要求]使用新鲜的血清。

不可使用已被污染的样本。

[检验方法]（1）双试剂无需配制，直接使用。

（2）试验条件：样本（S）：10 µl试剂1(R1) ：160 µl 试剂2（R2）：40 µl温度：37 ℃测定类型：速率法主波长：405 nm 副波长：505 nm 反应方向：上升方法：先将样本与R1混合，37 ℃5分钟后加入R2试剂，然后测定加入R2后1分钟至3分钟之△A/min 。

血清γ-谷氨酰转移酶测定标准操作规程1 检验申请单独检验项目申请：血清γ-谷氨酰转移酶测定(缩写GGT)；组合项目申请：血生化中肝功能测定。

临床医生根据需要提出检验申请。

2 标本采集与处理2.1标本采集2.1.1常规静脉采血约2 ml，不抗凝，置普通试管中。

或采用含分离胶的真空采血管。

2.1.2检验申请单和血标本试管标上统一且唯一的标识符。

2.1.3急诊标本应记录采集时间、送检时间、接收时间。

2.1.4 标本采集后与检验申请单一起及时运送至检验科。

专人负责标本的接收并记录标本的状态，对不合格标本予以拒收。

2.1.5下列标本为不合格标本2.1.5.1标本量不足：少于0.3ml的全血标本，或少于0.1ml的血清或血浆。

2.1.5.2对反应吸光度有干扰的标本，包括严重溶血、严重浑浊的标本。

2.1.5.3无法确认标本与申请单对应关系的。

2.1.5.4其他如标识涂改、标本试管破裂等。

2.2 标本保存2.2.1接收标本后在30min内将标本离心分离出血清。

2.2.2标本保存时间：室温（15～25℃）下可稳定48h，普通冰箱中（2～8℃）稳定7天。

-20℃保存稳定60天。

为避免标本中水分挥发使血清浓缩，对保存时间超过1天的标本均加塞密闭或覆盖湿巾。

2.2.3已完成测试的标本保持完整的识别号，置4～8℃冰箱内保存7天。

2.3 标本采集的注意事项2.3.1采血前使受检者保持平静、松弛、避免剧烈活动，和12h以上禁食空腹状态。

2.3.2可以使用EDTA、枸橼酸盐、草酸盐抗凝的血液标本，但肝素抗凝剂可引起反应液混浊。

3 方法原理谷氨酰-3羧基-对硝基苯胺+双甘肽……对-硝基苯胺+ 谷氨酰双甘肽，反应中生成的对-硝基胺的颜色深浅与谷氨酰转肽酶的含量成正比，在405nm测定反应前后吸光度的变化，可以计算出谷氨酰转肽酶的活力。

4 试剂及其他用品4.1试剂：γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒，北京利德曼公司出品。

4.2试剂盒保存：未启封试剂盒在2～8℃保存，可储存至失效期。

γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GCANA底物法）适用范围：本试剂用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。

1.1产品规格试剂1：3×80ml，试剂2：3×20ml；试剂1：4×60ml，试剂2：4×15ml；试剂1：6×40ml，试剂2：3×20ml；试剂1：2×80ml，试剂2：2×20ml 1.2产品组成成分试剂1：Tris缓冲液100mmol/L，甘氨酰甘氨酸150mmol/L。

试剂2：γ-谷氨酰-3-羧基-4硝基苯胺 5.0mmol/L。

2.1 外观试剂1为无色透明溶液，试剂2为略带黄色透明溶液。

2.2 装量液体试剂的净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白2.3.1试剂空白吸光度A≤0.70（光径1.0cm，405nm波长）。

2.3.2 试剂空白吸光度变化率ΔA/5min≤0.01。

2.4分析灵敏度测定93.8U/L被测物，吸光度变化率在0.0278/min～0.057/min范围内。

2.5 准确度相对偏差在±13%范围内。

2.6 精密度2.6.1 重复性变异系数CV≤5%。

2.6.2 批间差批间相对极差≤6%。

2.7 线性区间a）(0，500]U/L(37℃)。

在规定的线性区间内，测定值与样本浓度值的相关系数（r）应不低于0.990。

b）(0，80]U/L区间内，线性绝对偏差应不超过±8U/L；（80，500]U/L 区间内，线性相对偏差应不超过±10%。

2.8稳定性原装试剂2～8℃避光保存，有效期12个月，有效期满后两个月内测定结果应符合2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7的要求。

（本试剂盒仅供体外研究使用，不用于临床诊断！）Elabscience®γ-谷氨酰转肽酶（GGT/γ-GT）比色法测试盒γ-Glutamyl Transferase (GGT/γ-GT)Activity Assay Kit产品货号：E-BC-K126-M产品规格：48T(32 samples)/96T(80 samples)检测仪器：酶标仪(405 nm)使用前请仔细阅读说明书。

如果有任何问题，请通过以下方式联系我们：销售部电话************，************技术部电话131****6790具体保质期请见试剂盒外包装标签。

请在保质期内使用试剂盒。

联系时请提供产品批号(见试剂盒标签)，以便我们更高效地为您服务。

用途本试剂盒适用于检测血清、血浆等液体样本及动物组织样本中的γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）的活性。

检测原理γ-谷氨酰转肽酶（γ-GT）催化γ-谷氨酰对硝基苯胺中γ-谷氨酰基转移给N-甘氨酰甘氨酸，生成对硝基苯胺，在405 nm有特征光吸收，通过测定405 nm波长处吸光度的增加速率，来计算γ-GT酶活性。

本试剂盒检测组织样本时，需测定总蛋白浓度，推荐使用本公司BCA试剂盒（货号E-BC-K318-M）进行测定。

提供试剂和物品说明：试剂严格按上表中的保存条件保存，不同测试盒中的试剂不能混用。

对于体积较少的试剂，使用前请先离心，以免量取不到足够量的试剂。

所需自备物品仪器：酶标仪(405 nm)试剂准备①所有试剂平衡至室温后方可使用，试剂四和试剂五可提前放至37℃恒温箱中预热20 min，以保证其完全融化；②试剂二应用液的配制：取一支试剂二粉剂，用3 mL的试剂五溶解，临用前配制，2-8℃条件下可分装保存7天。

③反应工作液的配制：将试剂一和试剂二应用液按照4：1的比例混匀，现配现用。

标准品工作液的配制：标准品按稀释表稀释后，再将试剂一与不同浓度的标准品溶液按4：1的比例混匀，现配现用。

γ-谷氨酰基转移酶测定标准操作规程1.检验原理：（L-r-谷氨酰-3-羟基-对硝基苯胺底物法）以L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺为底物，双甘氨肽为谷氨酰基的受体。

在谷氨酰基转移酶（GGT）的催化下，谷氨酰转移到双氨肽上。

同时释放出黄色的2-硝基-5-氨基苯甲酸，后者可使405nm-410nm处吸光度增高。

在底物过剩的情况下，5-氨基-2-硝基苯甲酸的生成速率与血清中GGT浓度成正比，因而可监测5-氨基-2-硝基苯甲酸生产速率测定血清GGT活性浓度。

GGT活性测定的反应式如下：L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+双甘氨肽−←GGT L-r-谷氨酰-双甘氨肽−→+2-硝基-5-氨基苯甲酸L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺+L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺−←GGT−→2-硝基-5-氨基苯甲酸+L-r-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺2.试剂主要组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清。

在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！样本中抗坏血酸含量≤0.3g/L、胆红素含量≤0.4g/L、血红蛋白含量≤5.0g/L、乳糜含量≤5.0g/L对检测结果基本无影响。

4.检验方法；仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本。

建议最大稀释不超过10倍10-6.2.单位换算：ukat/L=U/L×16.67×37.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。

7.2若试剂浑浊，或以水空白在405nm处吸光度大于0.800时不能使用。

7.3检验结果仅供参考，不作为临床诊断唯一依据。

8.试剂性能指标8.1试剂外观：R1：无色透明液体，无悬浮物及沉淀。

R2：无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。

8.2装量：不低于标识值。

人γ谷氨酰转移酶(GGT)酶联免疫分析（ELISA）试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中人γ谷氨酰转移酶(GGT)含量。

实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人γ谷氨酰转移酶(GGT)水平。

用纯化的人γ谷氨酰转移酶(GGT)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入γ谷氨酰转移酶(GGT)，再与HRP 标记的γ谷氨酰转移酶(GGT)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。

TMB 在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。

颜色的深浅和样品中的γ谷氨酰转移酶(GGT)呈正相关。

用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中人γ谷氨酰转移酶(GGT)浓度。

样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20 分钟，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。

2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20 分钟后，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。

3.尿液：用无菌管收集，离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

胸腹水、脑脊液参照实行。

4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。

离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清。

检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100 万/ml 左右。

通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。

离心20 分钟左右（2000-3000 转/分）。

仔细收集上清。

保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5.组织标本：切割标本后，称取重量。

加入一定量的PBS，PH7.4。

γ-谷氨酰转移酶测定试剂盒（GCANA底物法）标准化操作规程1 目的规范实验室操作，保证检验工作顺利有效进行特制定此规程。

2 授权操作人经培训且考核通过的临床检验人员。

3 适用范围本试剂适用于体外定量检测人血清或血浆中γ­谷氨酰转移酶的活力。

4 检验方法本试剂采用IFCC推荐法测定γ­谷氨酰转移酶的活力。

5 检验原理试剂中的L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺和甘氨酰甘氨酸在样品中γ-谷氨酰转移酶（GGT）的催化作用下，生成呈色产物5-氨基-2-硝基苯甲酸盐，引起405nm处的光吸收值升高，通过监测405nm处光吸收值上升的速率，可以测定γ-谷氨酰转移酶的活力。

L­γ­谷氨酰­3­羧基­4­硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸γ­GGTL­γ­谷氨酰甘氨酰甘氨酸+ 5­氨基­2­硝基苯甲酸盐6 标本要求6.1 样本为血清或血浆。

6.2 血浆应选用肝素或EDTA抗凝剂，不得使用溶血或被污染的样本。

6.3 样本在2℃~8℃条件下可保存7天、室温条件下可保存1天。

7 试剂及配套品7.1试剂来源长春迪瑞医疗科技股份有限公司γ-谷氨酰转移酶试剂盒（IFCC推荐法）7.2试剂组成含非反应性填充物及稳定剂7.3试剂的稳定性与贮存：7.3.1 试剂在2℃~8℃条件下，干燥、避光、密封贮存，有效期为12个月。

7.3.2 试剂开封后在2℃~8℃条件下可稳定30天。

7.4试剂的变质指示：若试剂混浊，或以水为空白在405 nm处吸光度值大于0.800A时，则不能使用。

8 实验仪器及性能指标8.1 实验仪器迪瑞CS系列全自动生化分析仪8.2试剂性能指标8.2.1 试剂空白：试剂空白吸光度：A≤0.800。

试剂空白吸光度变化率：△A/min≤0.005。

8.2.2 分析灵敏度：测试50U/Lγ-谷氨酰转移酶时，吸光度变化率（△A/min）＞0.01。

检验原理试剂以国际临床化学联合会（IFCC）推荐方法为基础。

反应原理如下：L-γ-谷氨酰-3羧基-4-硝基苯胺+甘氨酰甘氨酸↓γ-谷氨酰基转移酶L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸+5-氨基-2-硝基苯甲酸盐反应中，5-氨基-2-硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ-谷氨酰基转移酶得活力成正比，通过在405nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ-谷氨酰基转移酶的活力。

临床意义γ-谷氨酰基转移酶存在于人体不同组织中，血清中γ-谷氨酰基转移酶主要来源于肝胆系统。

因此肝脏疾病或肝脏受损时，均可引起γ-谷氨酰基转移酶升高，临床上常用于阻塞性黄疸、肝管炎和胆囊炎等疾病的诊断。

某些药物如酒精、镇静药、抗癫痫药等亦可引起γ-谷氨酰基转移酶水平升高。

储存条件及有效期在2-8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起有效期为26个月。

样本要求1血清或血浆均不应溶血，血浆只能用肝素或EDTA抗凝，其它抗凝剂干扰测定，应避免使用。

2样本在2~8℃可稳定7天。

检验方法1试剂配制：在室温中，按照瓶签上标定的体积定量加入新鲜去离子水或蒸馏水，轻轻混匀至试剂完全溶解。

2测定条件：温度37°C 波长405nm 测定模式：速率法反应方向：吸光度上升的反应校准模式：两点定标注：两点定标：其中一点为实验用水，另一点为校准品3校准程序①校准品：复星长征临床化学校准血清为本试剂配套使用的校准品。

复星长征临床化学校准血清是以人与人源性物质为基础的含有26个不同组分、29个不同方法学定标值（校准浓度）的冻干校准血清。

临床化学校准血清中γ-谷氨酰基转移酶活性的计量学溯源性与校准浓度见相应批号临床化学校准血清的说明书。

②校准及校准频次的要求：正常情况下，应每周至少对测定进行一次校准。

当发生下列情况（试剂批号改变时、配套使用的仪器进行维修、保养或关键部件进行更换后、质控品的测定结果发生偏移或超出规定的范围等）应重新对测定进行校准后，再对患者样本进行检测。

2.性能指标
2.1外观
试剂应为清澈透明的液体，无沉淀、悬浮物和絮状物。

2.2装量
试剂装量的装量应按表1，液体装量的最大允许负偏差应为5%。

2.3试剂空白
2.3.1试剂空白吸光度
用试剂（盒）测试空白样本，在37 ℃±0.1 ℃ 、405 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度应≤0.400 Abs。

2.3.2试剂空白吸光度变化率
用试剂（盒）测试空白样本，在37℃ 0.1℃，405 nm 波长、1 cm 光径条件下，试剂空白吸光度变化率≤0.005 Abs/min。

2.4分析灵敏度
试剂（盒）测试63 U/L 的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应在0.030 Abs/min ~0.045 Abs/min 的范围内。

2.5线性区间
试剂（盒）线性在(0.00，600.00] U/L区间内：
a) 线性相关系数r≥0.990；
b) (0.00，50.00] U/L 区间内，线性绝对偏差应在±5.00 U/L 范围内；(50.00，600.00] U/L
区间内，线性相对偏差应在±10%范围内。

2.6精密度
2.6.1重复性
试剂（盒）测试活性在（50±5）U/L 范围内的样本时，变异系数CV≤4.0%。

2.6.2批间差
试剂（盒）测试活性在（50±5）U/L 范围内的样本时，相对极差R≤6.0%。

2.7准确度
测可溯源至有证参考物质的校准品，相对偏差 B 在±10%范围内。